实验室常用灭菌法详细版.ppt
- 格式:ppt
- 大小:428.50 KB
- 文档页数:21
实验室的灭菌方法在实验室中,灭菌是非常重要的一个步骤,可以有效地消除实验过程中可能存在的各类微生物,确保实验结果的准确性和可靠性。
常用的灭菌方法包括物理灭菌和化学灭菌两种。
一、物理灭菌方法:1. 高温灭菌(烘箱法):将待灭菌的器具(如培养皿、试管等)放入预热至适当温度的烘箱中,通过高温作用杀灭其中的微生物。
常用的温度为160-180摄氏度,时间约为1-2小时。
此方法适用于不耐热的固体物品。
2. 压力蒸汽灭菌(高压灭菌法):将待灭菌的物品放入装有适量清水的高压灭菌锅中,加热至适当的温度(121-134摄氏度),经过一定时间的高压和高温作用,实现微生物的灭活。
常规操作时间为15-30分钟。
这种方法适用于实验器械、培养基、培养瓶等耐热器具。
3. 过滤法:通过微生物滤膜过滤器将待检测的液体或气体经过过滤,将其中的微生物截留下来,达到灭菌的效果。
该方法适用于不耐高温或无法承受高压的液体、气体样品。
4. 紫外线灭菌法:将待灭菌的物品放置在紫外线照射区域,经过一定时间的紫外线照射,使微生物的核酸发生损伤,从而达到杀灭微生物的目的。
该方法适用于表面较为平坦的培养皿、试管等小型器具。
5. 干热灭菌法:将待灭菌的物品置于常温下的烘箱中,在较高的温度(170-180摄氏度)下进行一定时间的干热处理。
该方法适用于不耐水或无法耐受湿热的物品。
二、化学灭菌方法:1. 乙醛灭菌法:将待灭菌的物品放入密闭的容器中,加入一定浓度的乙醛液并封闭容器,在一定时间内使乙醛蒸气作用于物品表面,达到杀菌的目的。
该方法易于操作,适用于对物品表面较干净的物品。
2. 酒精灭菌法:将待灭菌的物品浸泡在一定浓度的乙醇或异丙醇溶液中一段时间,使其达到杀菌的效果。
该方法适用于小型的器具或实验室台面的表面。
值得注意的是,不同的灭菌方法适用于不同类型的物品,我们在选择灭菌方法时要根据物品的性质、尺寸和特点来进行判断。
同时,灭菌操作过程要遵循一定的操作规范,确保操作的安全性和有效性。
实验室的灭菌方法
实验室常用的灭菌方法主要有以下几种:
1. 热灭菌:使用高温蒸汽或高温烘箱进行灭菌,可有效消除常见的细菌、病毒和真菌。
热灭菌常用于灭菌培养皿、培养基、试剂和玻璃器皿等。
2. 化学灭菌:使用化学消毒剂进行灭菌,常见的消毒剂包括酒精、漂白粉、过氧化氢等。
化学灭菌适用于一些敏感材料,如塑料器皿、塑料管道、橡胶塞和一次性注射器等。
3. 紫外线灭菌:利用紫外线的辐射杀死细菌和病毒,常用于空气和表面的灭菌。
然而紫外线灭菌对于有障碍物遮挡或遮蔽的区域效果有限,且需要较长时间的照射。
4. 过滤灭菌:通过微孔滤膜将细菌和病毒过滤掉。
常用的滤膜材料有聚酯、聚碳酸酯、聚醚砜等。
过滤灭菌适用于渗透性好的溶液、生物液和气体。
5. 辐射灭菌:使用离子化辐射、γ射线或X射线进行灭菌。
辐射灭菌适用于灭菌一次性物品、一次性注射器和药品等。
需要根据实验需要和具体材料的特性选择合适的灭菌方法。
同时在进行灭菌操作时,要遵守操作规范和消毒程序,确保灭菌效果和安全性。
实验室常用灭菌方法标准化管理部编码-[99968T-6889628-J68568-1689N]实验室常用灭菌方法1.高压蒸汽灭菌为湿热灭菌方法的一种。
是微生物培养中最重要的灭菌方法。
这种灭菌方法是基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去,而聚集在密封的容器中,在密闭的情况下,随着水的煮沸,蒸汽压力升高,温度也相应增高。
(PV=nRT)高压蒸汽是最有效的灭菌法,能迅速地达到完全彻底灭菌。
一般在15磅/英寸2压力下(121.6℃),15~30分钟,所有微生物包括芽孢在内都可杀死。
它适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌。
进行高压蒸汽灭菌的容器是高压蒸汽灭菌锅。
高压蒸汽灭菌锅是一个能耐压又可以密闭的金属锅,有立式与卧式两种。
可以用电热、煤气、蒸汽等。
锅上装有压力表,有的还装有温度计,能及时了解锅内压力及温度。
锅上还设有排气口,其作用是在密闭之前,利用蒸汽将锅内的冷空气排净,另外还装有安全活门,如果压力超过一定限度,活门即可自动打开,放出过多的蒸汽。
2.干热灭菌微生物培养中常用的干热灭菌是指热空气灭菌。
一般在电烘箱中进行。
干热灭菌所需温度较湿热灭菌高,时间也较湿热灭菌长。
这是因为蛋白质在干燥无水的情况下不容易凝固。
一般须在160℃左右保持恒温3~4小时,方能达到灭菌的目的。
干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌,凡带有橡胶的物品和培养基,都不能进行干热灭菌。
3.间歇灭菌各种微生物的营养体在100℃温度下半小时即可被杀死。
而其芽孢和孢子在这种条件下却不会失去生活力。
间歇灭菌就是根据这一原理进行的。
间歇灭菌的方法是用100℃、30分钟杀死培养基内杂菌的营养体,然后将这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置24小时,使芽孢和孢子萌发成为营养体。
这时再以100℃处理半小时,再放置24小时。
如此连续灭菌3次,即可达到完全灭菌的目的。
间歇灭菌通常在流动蒸汽的灭菌锅中进行,也可用普通铝锅代替。
这种灭菌方法多用于明胶、牛乳等物质的灭菌,这类物质在100℃以上的温度下处理较长时间,会被破坏,而用间歇灭菌法就既起到了杀菌作用,又使被处理的物质免遭破坏。