物体表面微生物检测记录

空气、食品接触面微生物检验方法、检验标准1、目的：检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标，生产区域环境当中病原微生物的监控，达到规定标准，以控制食品成品的质量。

2、参照标准：中华人民共和国国家标准《一次性使用卫生用品卫生标准》GB15979－1995、《HACCP原理与实施》、中华人民共和国国家标准《公共场所空气微生物检验方法细菌总数测定》GB/T 18204.1－2000、中华人民共和国进出口商品检验行业标准SN 0169-92/SN 0172-92/ SN 0170-92、出入境检验检疫局二000四年《出入食品微生物检验培训教材》中《出入食品生产厂卫生细菌检验方法》、日本东京冷冻食品检验方法。

3、采样与检测方法：3.1空气的采样与测试方法3.1.1样品采集：(1)取样频率：a)车间转换不同卫生要求的产品时，在加工前进行采样，以便了解车间卫生清扫消毒情况。

b)全厂统一放长假后，车间生产前，进行采样。

c)产品检验结果超内控标准时，应及时对车间进行采样，如有检验不合格点，整改后再进行采样检验。

d)实验性新产品，按客户规定频率采样检验。

e)正常生产状态的采样，每周一次。

（2）采样方法在动态下进行，室内面积不超过30 m2，在对角线上设里、中、外三点，里、外点位置距墙1 m；室内面积超过30 m2，设东、西、南、北、中五点，周围4点距墙1 m。

采样时，将含平板计数琼脂培养基的平板(直径9 cm)置采样点(约桌面高度)，并避开空调、门窗等空气流通处，打开平皿盖，使平板在空气中暴露5 min。

采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过6h，若样品保存于0～4℃条件时，送检时间不得超过24h。

3.1.2菌落培养：（1）在采样前将准备好的平板计数琼脂培养基平板置37℃±1℃培养24 h，取出检查有无污染，将污染培养基剔除。

（2）将已采集样品的培养基在6 h内送实验室，细菌总数于37℃±1℃培养48h观察结果，计数平板上细菌菌落数。

表面微生物监测除了用空气微生物取样来监测生产环境的微生物污染水平外，表面监测也可监测生产区域表面以及设备与产品接触表面的微生物世。

监测的方法必须考虑取样的准确性和代表性。

基本的监测方法包括接触碟法、擦拭法以及表面冲洗法。

每种提供的数据都可以用于产品质量的评价。

测试方法可以定性和定量。

而且取样的准确性受收集和处理样品的过程影响，因此必须对取样进行培训和测试。

(1)接触碟法接触碟容易操作而且可以定量。

因此被广泛使用，适用于对平整的规则性表面进行取样监测。

通常的碟子是50mm直径的，培养基充满碟子并形成圆顶，取样面积一般约为25cm2。

培养基可以根据使用添加中和剂。

取样时，确保全部琼脂表面与取样点表面充分接触。

取样后，需用蘸有70%乙醇的纱布擦拭被取样表面，以除去残留琼脂。

将取样后并做好标记的接触碟置于培养箱中培养，读数，记录。

缺点：不适用于非常规表面；若培养基太湿润，菌落会连片生长导致不易计数。

(2)擦拭法该方法通常用于对不规则表面（尤其是设备表面）进行取样。

拭子通常为一根棒状物，其顶端由吸水性材料制成，拭子头在取样前应先行浸湿（通常为无菌生理氣化钠溶液或0. 1%的蛋白胨溶液约5ml),取样时，握住拭子柄，以30°角与取样表面接触，缓慢并充分擦拭，取样面积25cm2左右（可用特定的无菌模板确定擦拭面积），然后将取样头折断放入上述溶液内，充分振荡，再用平皿涂布法或铺平板法计数。

如果拭子头的材料为藻酸钙，则要用稀的盐溶液作为稀释剂（如1%柠檬酸钠溶液），这样才能让拭子头完全溶解。

因擦拭取样的面积一般约为25cm2，故擦拭法也属于定量检测方法。

缺点：取样和转移技术可能会影响结果；样品处理后才能培养。

(3)表面冲洗法该法适用于监测大面积区域内表面的微生物含菌量，包括设备轨道、储水罐等。

用定量的无菌水冲洗表面，收集淋洗水，用膜过滤法来计算微生物数量。

缺点：适用性不广，需要额外的操作，取样和处理过程可能会影响结果。

可编辑修改精选全文完整版消毒医疗器材微生物检验原始记录样品编号：检验开始时间：年月日样品名称：检验完成时间：年月日检测项目：□菌落总数□沙门氏菌检测依据：GB 15982-2012□β型溶血性链球菌□铜绿假单胞菌□金黄色葡萄球菌可整件放入无菌试管的，用洗脱液浸没后震荡30s以上，取洗脱液1.0ml接种平皿，将冷至40℃—45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml—20ml，36℃±1℃恒温箱培养48h，计数菌落数（CFU/件），必要时分离致病性微生物。

可用破坏性方法取样的，在100级超净工作台称取1g—10g样品，放入装有10ml采样液的试管内进行洗脱，取洗脱液1.0ml接种平皿，计数菌落数（CFU/件），必要时分离致病性微生物。

对不能用破坏性方法取样的医疗器材，在100级超净工作台，用浸有无菌生理盐水采样液的棉签在被检物体表面涂抹采样，被采表面<100cm²，取全部表面，被采表面≥100cm²，取100cm²，然后将除去手接触部分的棉签进行洗脱，取洗脱液 1.0ml接种平皿，将冷至40℃—45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml—20ml，36℃±1℃恒温箱培养48h，计数菌落数（CFU/cm²），必要时分离致病性微生物。

消毒后内镜：取清洗消毒后内镜，采用无菌注射器抽取50ml含相应中和剂的洗脱液，从活检口注入冲洗内镜管路，并全量收集（可使用蠕动泵）送检。

将洗脱液充分混匀，取洗脱液1.0ml接种平皿，将冷至0℃—45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml—20ml，36℃±1℃恒温箱培养48h，计数菌落数（CFU/件）。

将剩余洗脱液在无菌条件下采用滤膜(0.45μM)过滤浓缩，将滤膜接种于凝固的营养琼脂平板上（注意不要产生气泡），置36℃±1℃恒温箱培养48h，计数菌落数.当滤膜法不可计数时：菌落总数(CFU/件)=m（CFU/平板）×50式中：m—两平行平板的平均菌落数。

医院环境微生物检测
一、监测项目：
1、空气、物体表面、医务人员手；
2、透析用水、透析液出口、入口监测；
3、使用中的灭菌剂
反渗水、入口水的细菌学监测每月一次，且每台机器在1年里至少监测到1次；内毒素监测每月1次，且每台机器在1年里至少监测到1次。

二、采样及检查原则：
采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过6h，若样品保存于0~4℃条件时，送检时间不得超24h。

A1、空气采样及检查方法：
采样时间：选择消毒处理后与进行医疗活动之间期间采样；
采样高度：与地面垂直高度80~150cm；
布点方法：室内面积<30m2，设一条对角线上取3点，即中心一点，两端各距墙1m处各取一点；室内面积>30m2，设东、西、南、北、中五点，其个点均距墙1m。

采样方法：用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检培养。

A2、物体表面采样及检查方法：
采样时间：选择消毒处理后4h进行采样；
采样面积：采样表面<100cm2，取全部表面，采样表面>100cm2，取100cm2；
采样方法：压印采样法：采样时将直径5.6cm（面积约25cm2）的消毒塑料专用平皿上的琼脂表面之间压贴在被检物体表面10~20秒后送检。

A3、使用中消毒剂
采样时间：采取更换前使用的消毒剂；
采样量及方法：在无菌条件下，用无菌吸管吸取1ml 被检样液，加入9ml稀释后中混匀后送检。