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冷冻干燥过程中保护剂对脂质体粒径影响的
实验研究
冷冻干燥是一种常用的制备脂质体的方法，但该过程中脂质体容易发生聚集和脱水等问题。
为了解决这些问题，可以向冻干液中添加保护剂。
在实验中，可以选择不同的保护剂，并对脂质体的粒径进行测定。
常用的保护剂包括蔗糖、甘露醇和羟丙基-β-环糊精等。
实验步骤如下：
1. 制备脂质体悬浮液：根据所需的脂质体组成，将所需的磷脂和胆固醇等溶解在有机溶剂中，并用旋转蒸发仪将有机溶剂蒸发干净，制得脂质体固体膜。
随后，向固体膜中加入含磷酸盐缓冲液，使其形成悬浮液。
2. 冷冻：将脂质体悬浮液分装到合适的容器中，然后将容器放入液氮中进行冷冻。
冷冻速度要尽可能快，以避免脂质体的聚集。
3. 冻干：将冷冻后的样品置于真空条件下，使用冻干机进行冻干。
通过升温并施加负压，将样品中的水分从冰晶直接转化为气态，使样品变得干燥。
4. 粒径测定：使用粒径分析仪，如动态光散射仪（DLS）或激光衍射仪等，测定冷冻干燥后脂
质体的粒径。
可以比较不同保护剂条件下的粒径差异。
通过以上实验，可以得到不同保护剂对脂质体粒径的影响。
保护剂可提供一定的保护作用，减少脂质体的聚集和脱水现象，从而得到较为均匀的粒径分布。
不同保护剂的选择可以根据所需的应用和研究目的进行优化。
冻干保护剂一、冻干损伤机理：蛋白质冷冻干燥全过程分为预冻、第一阶段升华干燥和第二阶段再干燥。
预冻过程中水结冰时体积增大，致使活性物质活性部位中一些由弱分子力键连接的键遭到破坏，从而使活性损失；另外，水结冰后引起溶质浓度上升以及由于各种溶质在不同温度条件下溶解度变化不一致而引起pH值的变化，导致活性物质所处的环境发生变化而造成失活或变性。
二、冻干保护作用机理：第一，“水替代假说”：认为由于蛋白质分子中存在大量氢键，结合水通过氢键与蛋白质分子联结。
当蛋白质在冷冻干燥过程中失去水分后，蛋白的主相变温度会升高，发生变性。
但某些糖类属于亲水性物质，形成氢键能力较强，能替代蛋白表面的水的羟基，与蛋白质中的极性基团形成氢键，使得蛋白的主相变温度变化不大，低于操作温度，从而避免了生物活性物质由于发生相变所造成的机械损伤。
能够直接测量到冻干的蛋白质与保护剂蔗糖间的氢键。
第二，“玻璃态假说”：认为在含糖溶液的干燥过程中，糖-水混合物会玻璃化，兼有固体和流体的行为，粘度极高，不容易形成结晶；且分子扩散系数很低，因而具有粘性的保护剂包围在蛋白质分子的周围，形成一种在结构上与玻璃状的冰相似的碳水化合物玻璃体，使大分子物质的链锻运动受阻，阻止蛋白质的伸展和沉淀，维持蛋白质分子三维结构的稳定，从而起到保护作用。
研究表明，单糖、双糖、多羟基化合物以及结构蛋白质、酶都能显示玻璃行为，只是玻璃化转变温度不同而已。
由于某些糖的玻璃化温度较高，在较高的保存温度下，仍能在蛋白质分子附近形成玻璃态。
（大于玻璃化温度就不形成玻璃态了）一般说来，如工作温度低于保护剂的玻璃化温度，高于被保护的活性物质的主相变温度，那么该活性物质就能有效地保持活性。
但在目前，这两种假说还不能完全解释现有的实验现象。
三、冻干保护剂的选择：冻干保护剂需要具备四个特性：玻璃化转变温度高、吸水性差、结晶率低和不含还原基。
常用的保护剂有如下几类物质：1.糖类/多元醇：蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、麦芽糖等；其中，葡萄糖、乳糖具有还原性，而蔗糖、海藻糖、葡聚糖没有还原性。
脂质体包封率测定方法_脂质体包封率测定方法及影响因素万方数据伟等”１以透析法分离利福平脂质体与游离利福平，结果显示，粒径在２．５—１０ｐａｎ范围内的占总数的８２．４％，其中５—１０ｔｔｍ的占３３．８％。
包封率３２．８％。
赵荣生等”１用薄膜．超声法制备两性霉索Ｂ脂质体，透析法分离含药脂质体和游离药物。
结果表明，试验制备的脂质体，其包封率为（７２。
９３±０．３４）％，含量为１．７０８±Ｏ．０１０ｒａｇ／ｒｉｄ。
王健松等”’采用透析－ＨＰＬＣ法测定阿齐霉素脂质体的含量和包封率，３个批号样品的包封率分别为７９．２％、７７．５％和８１．１％。
１．２超速离心法：超速离心法利用游离药物与含药脂质体的重力差异进行分离，计算包封率，该法适用于亚微米级粒子。
可用于样品浓缩。
但该方法成本较高，通常需要离心ｌｈ以上，且各批样品间重现性差，药物的包封率不高，原因可能是由于离心过程中造成一部分小脂质体丢失，或离心力导致脂质体中药物渗漏丢失。
穆筱梅等”…用超速离心机将果酸脂质体混悬液分为离心上清和沉淀两部分，分别计算包封率，最大为３５％。
当果酸质量浓度为０．３ｒ／Ｌ对，可以得到较好的包封率。
龚金红等”ＩＪ取利多卡因脂质体冷冻超速离心，计算包封率，结果利多卡因脂质体平均粒径为８８．３１ｉｌｍ，平均包封率为（６６．２１±４．８０）％。
王学清等”“经超速离心测定的包封率，结果分别为８４．４％、８５．５％和８４．８％。
脂质体的包封率均在８０％以上，且重现性良好。
Ｒｏｕｚｉ等””以离心法分离包封于脂质体的质粒ＤＮＡ，然后把脂质体分散在ＰＢＳ中，根据脂质体表面覆盖的￥３５的放射强度，估测脂质体对ＤＮＡ的包封率。
１．３凝胶柱层析法：常用的层析柱为葡聚糖凝胶（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）柱和琼脂糖凝胶（Ｓｅｐｈａｒｍｅ）柱。
利用脂质俸和游离药物相对分子质量的差异进行分离，但存在洗脱时间长、洗脱体积大、药物浓度低等问题。
徐丽君等…１在ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０柱上以ｐＨ７．０・７９０・中国生物制品学杂志２００７年１０月第２０卷第１０期ＣｈｉｎＪＢｉｏｌｏｇｌｃａｌＢＯｃｔｏｂｅｒ２００７，ＶｏＬ２０Ｎｏ，１０的磷酸盐缓冲液为流动相进行洗脱，分离盐酸小檗碱和游离的盐酸小檗碱。
用于药物制剂的冷冻干燥技术及相关影响因素1. 前言冷冻干燥技术最早出现于19世纪末期，随着真空泵和制冷机的出现，有人将冷冻和干燥两种方法结合起来，用于生物体的脱水，并逐渐提出了冷冻干燥的概念。
1909年，沙克尔用冷冻干燥的方法保存菌种、病毒和血清，取得了较好的效果，该项技术从此逐渐推广并且应用到了医药领域。
冷冻干燥技术是首先冻结湿材料到低于其结晶点的温度下，使水凝固成冰从而固态化，在低温减压条件下使水升华，从而使材料进行低温脱水来达到干燥的目的。
因通过升华来实现的水的冻结凝固，它也被称为升华干燥。
由于干燥过程的处理水的变化的物理形式，并且这种变化是发生在较低的温度和压力下，因此，真空冷冻干燥其基本原理是低温传热和传质下的干燥。
目前，冷冻干燥在药品生产和研发中是一个重要的过程和关键性技术。
随着中国医药产业的发展，冷冻干燥技术在中国也得到了越来越广泛的应用，并发挥了促进新品种药物研发和提高药物质量的重要作用。
2. 冷冻干燥技术在药物制剂中的作用冷冻干燥法是用来提高药物制剂的稳定性的最常用方法，主要应用于制剂领域的胶体载体部分，如：脂质体、纳米乳等，限制这些载体使用的最主要障碍是其物理和化学不稳定性，而这两类不稳定性极易出现在水溶液长期储存的过程中，所以为了提高这些体系的物理化学稳定性，必须将水从体系中排除。
水在制剂中以两种方式存在：一种是水的结构，即化学结合，另一种是本发明制剂中水的“骨架”形式。
冷冻干燥升华主要指其他自由水的配方。
有各种各样的干燥方法，但与其他干燥方法相比，冷冻干燥方法，其特征是突出的优点：液体可冷冻前被分配，不影响剂量的准确性；在低温下干燥，不会破坏热敏性药物的物质；在减压下干燥，缺乏氧气，不易被氧化干燥的药物，一些细菌的生长可能受到限制；进行干燥，形成冷冻干燥的基本上能保持原形的外观的药物形式；复溶性好，经过冷冻干燥处理的药品可迅速恢复的状态冻干前吸收；脱水完全，适用于长途运输和长期保存。
用于药物制剂的冷冻干燥技术及相关影响因素摘要：介绍冷冻干燥技术在药物制剂中的应用情况，并讨论冻干制剂的处方组成、冷冻干燥过程和贮存条件等影响其效果的几个最重要因素关键词：药物制剂；冷冻干燥技术；影响因素1.引言随着药物制剂的大规模生产，冷冻干燥技术也不断创新应用，冷冻干燥技术的出现主要得益于制冷机和真空泵的出现，冷冻干燥技术主要将干燥和冷冻方法进行充分结合，以此实现生物体的脱水工作［1］。
在19世纪初，国外主要采取冷冻干燥技术进行血清、病毒、菌种等的保存，且长时间内能够保持较为稳定的理化性质，继而逐渐用该技术进行医药方面的推广应用。
就冷冻干燥技术的具体应用上，其主要是将材料进行冷冻到结晶点温度以下，促使该材料出现固态化凝固，其次需要在减压低温情况下进行材料内部水分的生化处理，使得材料完成低温脱水干燥过程。
该整体过程主要对水进行凝固和升华，且水的干燥变化主要表现为低温低压下的物理形式。
当前市场上医药行业对于药物制剂的冷冻干燥是研发阶段中一个较为重要的环节，我国医药行业的进步也促使冷冻干燥技术大规模发展创新，对于优化药物制剂的质量具有重要的现实作用。
2.药物制剂中冷冻干燥技术分析作为药物制剂提升质量稳定性的重要技术，冷冻干燥技术主要适用于药制剂当中的胶体载体（纳米粒、脂质体等），载体性能发挥的最大阻碍因素则是其应用过程中的较大理化性质不稳定性，胶体载体理化性质的变异主要发生在长期水容易环境储存过程中，因此，为有效优化胶体载体的指令稳定性，需要考虑将其内部的水分进行有效消除，一般而言，药物试剂中水分存在的形式可以分为以下两类，其一是游离自由水，主要表现为渗透和吸附形式存在于药物试剂内部的孔隙当中，与药物试剂的其他化学成分以物化、机械形式进行结合；其次则是结构水，该形式的水分则主要表现为化学键的形式构成药物试剂的主体［2］。
冷冻干燥技术的应用主要是将药物试剂内部的游离自由水进行升华形式的去除。
目前市场上应用的干燥技术种类繁多，但是冷冻干燥法具有其较为明显的应用优势，具体变表在以下几个方面，首先是分装工作可以在药物试剂冻结之前进行，且能够避免造成剂量准确性丧失；干燥在低温环境下进行，能够有效避免药物试剂的热敏感物质的破坏；低温下的缺氧干燥处理，则能够减少药物试剂的氧化现象，避免造成细菌的生长环境；再者，彻底脱水工作也有助于药物试剂的长期运输储存等，在药物试剂冻结后能够保持原先药物试剂的外观形态，且后期处理能够具备良好的复水性，药物试剂在后期能够通过高效的吸水形成原先的生产状态。
药品冷冻干燥过程中的关键影响因素分析摘要：冷冻干燥全称真空冷冻干燥，药品经过冷冻干燥后，能够避免氧化，有利于药品的长期保存，还能保证药品中的成分不被破坏，保证药品中的有效成分不再变质和流失，并且冷冻干燥执行封闭操作，减少了微粒和杂菌的污染，保证药品的质量。
文章分析了药品冷冻干燥的原理和优点，探析了药品冷冻干燥过程中的关键影响因素，旨在为药品生产领域的技术人员提供一定的参考。
关键词：药品；冷冻干燥；关键影响因素随着人们生活水平的提高，生活节奏逐渐的加快，人们的更加关注药品的疗效和安全，冷冻干燥技术具有脱水彻底，保存性好的特点，能够最大限度的降低药品的失活与变性，从而有效的保存药品的活性成分，还能保证药品的气味、颜色、品质等，以此保证药品的质量，更好的为人们的健康提供良好的保障。
此外，随着冷冻干燥技术的应用，积累了大量的理论经验和实践经验，为分析药品冷冻干燥过程中的关键影响因素具有十分重要的现实意义。
1 药品冷冻干燥的原理及优点药品冷冻干燥指的是将药品溶液在较低的温度下进行冻结，然后再将其放置在真空中进行升华干燥，去除冰晶，并且等待升华完成后再对其进行解析干燥，然后去除药品中的结合水的干燥方法。
药品冷冻干燥的过程主要表现为：准备药品—预冻—升华干燥—解析干燥—密封保存这五个步骤，采用冷冻干燥的药品，能够在室温下进行长期的避光保存，在使用时，只需要添加适量的生理盐水或者注射用水，将药品制成悬乳液，然后就能恢复其冷冻干燥前的状态。
冷冻干燥和其他干燥方法比较，其优点主要表现在以下几个方面：①在进行冷冻干燥前，对药品的药液进行分装，这样剂量相对准确；②脱水彻底，能够进行长期的保存，并且其还能进行长途运输；③复溶性好，通过添加适量的生理盐水或者注射用水，药品就能迅速的恢复到冷冻干燥前的状态；④被干燥的药品能够形成药品“骨架”，干燥完成后药品能够保持原形，并且其颜色基本不变；⑤在低压状况下进行干燥，其因为缺氧而能够抑制某些细菌的活力，保证药品不被氧化变质；⑥在低温状况下进行干燥，能够将药品中的热敏物质保存下来。
冻干工艺对药品稳定性的影响冻干工艺对药品稳定性的影响冻干工艺是一种常见的制药技术，广泛应用于药品生产过程中。
它通过将液态药物冷冻并在真空环境下蒸发水分，从而将药物转化为固态粉末，以提高药品的稳定性和延长保质期。
然而，冻干工艺对药品稳定性的影响也是需要重视的。
首先，冻干工艺可以避免药物在常温下的化学反应和微生物污染。
由于冻干过程中药物处于冷冻状态，化学反应的速度大大降低，从而减少了药物分解和降解的可能性。
同时，真空环境下的低温蒸发也可以有效杀灭微生物，避免药品受到细菌和霉菌等污染。
其次，冻干工艺还可以保留药物的活性成分。
在冻干过程中，药物的水分被蒸发，但药物的活性成分被冻结在固态粉末中。
这种冻结状态可以阻止活性成分的分解和损失，从而提高药物的稳定性。
此外，冻干工艺还可以减少药物与其他成分的相互作用，进一步保护活性成分的稳定性。
然而，冻干工艺也存在一些影响药品稳定性的风险。
首先，冻干过程中的温度和压力变化可能导致药物的结构改变。
这种结构改变可能会导致活性成分的降解或改变，从而影响药物的疗效。
此外，冻干过程中的冷冻和蒸发也可能对一些药物产生机械应力，进一步影响药物的稳定性。
为了克服这些风险，制药厂商通常会对冻干工艺进行优化和控制。
他们会选择适宜的冻干温度和蒸发速率，以减少对药物的不良影响。
此外，他们还会对冻干过程中的压力和温度进行严格监控，确保药物的结构和活性成分不受损害。
同时，药品的包装和储存条件也会被精心设计，以保证冻干工艺的稳定性和有效性。
总结起来，冻干工艺在提高药物稳定性方面发挥着重要作用。
它通过避免化学反应和微生物污染，保留药物的活性成分，提高药品的稳定性和延长保质期。
然而，冻干工艺也存在一定的风险，需要制药厂商进行优化和控制。
通过科学的工艺设计和严格的质量控制，我们可以更好地发挥冻干工艺的优势，提高药物的稳定性和质量。
冻干保护剂对胶体微粒给药系统包封率和粒径的影响张海龙 097211043摘要：衡量脂质体和SLN药物品质的两个重要指标是脂质体和SLN包裹药物的粒径分布和包封率，在冷冻干燥过程中脂质体药物的粒径分布和包封率会发生变化。
本文综述了冻干保护剂的保护机理，在脂质体和SLN冷冻干燥过程中经常使用的四种冻干保护剂——葡萄糖、蔗糖、甘露醇、海藻糖，以及这四种不同保护剂、不同浓度在冻干过程中对脂质体和SLN粒径和包封率的影响。
关键词：冻干保护剂，脂质体，固体脂质纳米粒1前言胶体微粒系统是靶向给药系统常用的载体，可注射给药，也可制成各种剂型，用于皮肤、鼻腔等粘膜，在生物技术药物的给药中亦起重要作用。
脂质体、固体脂质纳米粒（SLN）是胶体微粒系统常用的药物载体。
虽然脂质体和SLN可以利用其独有的特性将毒副作用大、在血液中稳定性差、降解快的药物粉末或溶液包埋在直径为纳米级的脂质体和SLN微粒中，这种微粒与人体细胞膜有相似成分而有良好生物相容性等特点，但它也存在一些缺点，影响着它在临床方面的应用[1]。
脂质体和SLN都是混悬液，易受pH值、温度、环境中物质以及包封的药物性质影响[2]。
在贮存期间易发生聚集、沉降、融合及药物渗漏，且主要脂质材料易氧化、水解，难以满足药物制剂稳定性的要求，使应用受到了很大限制[3]。
因此，通常采用冷冻干燥法提高脂质体和SLN的贮存稳定性。
制成冻干脂质体和冻干SLN可显著降低脂质和药物的水解和氧化速度。
同时，冻干保护剂也保持了脂质体膜结构的完整性，克服脂质体和SLN聚集、融合及药物渗漏等不稳定因素，显著提高贮存稳定性。
虽然冷冻干燥法对于脂质体和SLN的贮存、包装、运输等方面的方便和稳定都不失为一种良好的选择。
但在冷冻过程形成的冰晶会使脂质微粒聚集融合，在冷冻和解冻过程中，膜内外冰晶形成速度不同引起渗透压差，造成微粒裂解，所以在冷冻干燥过程中，应加入冷冻保护剂以减少破坏[4]。
不同种类与浓度的冻干保护剂对脂质体和SLN的保护能力各不相同，本文将讨论葡萄糖、蔗糖、甘露醇和海藻糖等作为冻干保护剂，对胶体微粒给药系统的冻干过程进行研究。
通过对脂质体和SLN冻干前后的包封率和粒径变化来考察冻干保护剂对微粒的保护效果。
2冻干保护剂的保护原理2.1 玻璃化作用所谓玻璃态是物质以非晶体形式存在的一种状态，此状态下物质的粘度极大。
玻璃态转化温度(Tg)是指当溶液浓度达到最大浓缩状态发生玻璃态转化时的温度[5]。
脂质体和SLN冻干过程中玻璃化作用发生在预冻阶段。
随冰晶的产生，体系中游离水不断减少，形成玻璃态物质和未冻结水的混合体系。
残余的水分越少，最终产物的Tg越高。
预冻过程中，浓缩的糖溶液能抑制冰晶的生长，减小冰晶嵌入脂质体双层膜的几率，防止膜破裂。
且可作为间隔基质阻碍脂质体或SLN相互聚集和融合。
脂质体和SLN冻干品处于玻璃态环境，分子的活动范围和程度受到限制，对提高冻干脂质体和SLN的长期稳定性具有重要意义[3]。
试验表明，当环境温度接近Tg时，脂质体和SLN会产生药物渗漏，复水后粒径增大；低于Tg时，则未见融合和药物渗漏。
因此，玻璃态有助于提高冻干品的稳定性[6]。
葡萄糖冻干保护作用较差的原因之一是该冻干体系的Tg较低，如将葡萄糖与羟乙基淀粉合用，可提高冻干体系的Tg 提高贮存稳定性[7]。
van Winden等[8]报道以麦芽糖和海藻糖为保护剂制备的冻干脂质体在低于Tg的温度贮存时，仍可见脂质体融合及药物渗漏，说明仅保证冻干品处于玻璃态并不一定能提高脂质体和SLN的稳定性。
LI Bao-guo等[9]利用差示扫描量热仪 (DSC)测量了以葡萄糖、蔗糖、甘露醇、海藻糖作为保护剂的脂质体悬浮液的玻璃化转变温度Tg，结果表明：以海藻糖作为保护剂的脂质体的玻璃化转变温度Tg最高为-30.4℃，而以葡萄糖作为保护剂的Tg最低为-39℃。
2.2 水置换假说冻干保护剂可与脂质体磷脂的极性基团或SLN固体脂质的极性基团形成氢键，脱水后代替水作为脂质体和SLN的稳定剂，保持脂质体膜的完整性，抑制药物的渗漏。
这种机制称为“水置换假说”。
在无冻干保护剂的情况下，冻干会使冻干品相转化温度（Tm）大幅提高。
若加入糖类作为保护剂，则可在膜界面的极性区域代替失去的水，使Tm大大降低；随冻干条件的不同Tm可高于或低于水化脂质体的结晶温度（Tc）[10]。
糖与磷脂间的相互作用越强，Tm 越低，保护作用就越强。
Tm降低的程度与冻干品的稳定性有较好的相关性[11]。
Crowe等[12]认为，当蛋白质结构水失去时，海藻糖可在失水部位以羟基和分子形成氢键，及时形成新的保护膜以替代原先失去的结合水膜，这使得分子在缺水条件下仍能保持其原有结构，而不丧失活性。
脱水过程中，海藻糖一方面能和磷脂形成氢键，抑止膜泡聚合，另一方面在高温下能有效降低膜相变温度，防止再水化时发生吸水破坏。
3冻干保护剂的性质与分类根据上述对冻干保护机理的分析，冻干保护剂通常应该具有以下几种性质：3.1 结晶率低保护剂在冷冻干燥过程中的结晶通常伴随着相分离，相分离会破坏保护剂分子和脂质分子间的相互作用，从而使保护剂失去保护作用。
因此保护剂的结晶率应尽量低，最好能全部或部分玻璃化。
3.2 最大冻结浓缩液的玻璃化转变温度Tg’和干物质的玻璃化转变温度Tg高按照玻璃化保护机理的分析，保护剂在冷冻干燥和储存过程始终保持玻璃态能最大程度地保护微粒。
因此，尽量提高保护剂的Tg’。
就允许提高冷冻干燥的操作温度，加速干燥过程而不造成细胞损伤；尽量提高保护剂的Tg高于储存温度，就使微粒处于玻璃态的安全温度范围更广，更能适应储存温度波动等不利条件。
3.3 吸湿性差玻璃态物质的Tg依赖于保护剂自身的特性和水分含量，水是一种良好的增塑剂，玻璃态物质对水分的吸收会使Tg显著下降，因此理想的保护剂不仅要求玻璃化转变温度高而且其吸湿性应较低。
3.4 不含还原性基团还原性基团能够与脂质发生反应，严重影响微粒的稳定性，因此一般不采用还原性保护剂[13]。
3.5 冻干保护剂分类常用的冻干保护剂根据其化学性质，可分为：糖类/多元醇：单糖(葡萄糖、半乳糖)、低聚糖(蔗糖、海藻糖)、多元醇(甘露醇、山梨醇、丙三醇)等；表面活性剂：Tween80等；氨基酸类(主要是a-氨基酸)：甘氨酸、谷氨酸、精氨酸和组氨酸等；其它类保护剂：抗氧化剂(如维生素E等)、缓冲剂(如磷酸二氢钾等)等[3]。
聚乙二醇(PEG)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、明胶、聚乙烯亚胺等聚合物也常作为冷冻干燥保护剂。
蛋白质类保护剂通常作为生物制品脂质体和SLN冷冻干燥保护剂。
4常用冻干保护剂对包封率和粒径的影响最常用冻干保护剂包括糖类中的葡萄糖、蔗糖、海藻糖和多羟基化合物中的甘露醇。
M. Glavas-Dodov等[14]研究了冷冻干燥过程对5-FU脂质体的影响，作者以包封率和粒径为指标，考察了蔗糖作为冷冻保护剂对5-FU脂质体的影响。
结果显示：未加保护剂冻干后，脂质体粒径增大，泄露严重；添加蔗糖为冷冻保护剂冻干后，脂质体粒径几乎没有发生变化，而且脂质体的泄露大大减少，说明蔗糖为冷冻保护剂能大大提高脂质体的稳定性。
LI Bao-guo等[9]在以葡萄糖、蔗糖、甘露醇、海藻糖作为保护剂的脂质体悬浮液的冻结和冷冻干燥过程中发现，以海藻糖作为保护剂的脂质体的粒径变化最小，以葡萄糖为保护剂的脂质体粒径变化最大。
还对脂质体包封水溶性药物喃氟啶和脂溶性药物维生素A冻干后脂质体包封率进行了研究。
结果显示：以海藻糖为保护剂的脂质体对药品的包封率较高，泄露少，而以葡萄糖为保护剂的脂质体对药品的包封率较低，泄露多。
李珺婵[15]采用葡萄糖、蔗糖、甘露醇、海藻糖作为冻干保护剂，考察其对9-硝基喜树碱纳米脂质载体系统的影响。
实验结果显示，与葡萄糖、蔗糖、甘露醇相比，用海藻糖作为冻干保护剂，其冻干粉重分散后粒径变化较小，具有较好的重分散性。
作者还研究了2%、5%和10%三种不同浓度海藻糖溶液对9-硝基喜树碱纳米脂质载体系统的包封率和粒径的影响。
实验结果显示，用5％海藻糖溶液作为冻干保护剂制备9-NC-NLC冻干粉，其包封率的变化及冻干粉重分散后粒径变化均较其他两种浓度较小。
张丽霞等[16]以以冻干品再分散后的粒径、包封率为评价指标，考察了葡萄糖、蔗糖、甘露醇、海藻糖作冻干保护剂对两性霉素B长循环脂质体冻干品的影响。
结果显示葡萄糖、蔗糖、甘露醇、海藻糖作为冻干保护剂对脂质体冻干过程中的粒径都有保护作用，海藻糖对两性霉素B长循环脂质体的保护作用，明显好于葡萄糖和甘露醇，略好于蔗糖。
苏树强等[17]研究了不同保护剂对HB-Ia脂质体冻干前后包封率的影响。
结果显示：在对 HB-I a脂质体包封率的提高与冻干保护方面，蔗糖及甘氨酸、麦芽糖、甘露醇均显示良好的效果，其中蔗糖及甘氨酸所组成的二元保护剂效果最好，麦芽糖、甘露醇保护效果稍差，而保护剂葡萄糖和PVP实际运用效果不佳；在保护剂使用过程中，过高或过低的蔗糖或麦芽糖浓度均对提高冻干HB-I a脂质体的包封率不利，而甘露醇浓度稍低时对提高冻干 HB-I a脂质体的包封率有利。
同时，作者以粒径为指标考察了不同保护剂对HB-Ia脂质体冻干前后的影响，结果显示，蔗糖的保护效果较优，甘露醇次之，PVP和甘氨酸相对较差，蔗糖和甘氨酸组成的二元保护剂保护效果较蔗糖更好[18]。
郭丹[19]在Nobiliside A冻干脂质体的研究中发现：甘露醇的成型性最好，但是复溶性差，且粒子聚合和粒径增大的几率增大；山梨醇的成型性以及复溶性均较差；海藻糖、蔗糖的成型性、复溶性以及粒径分布均较好；乳糖、麦芽糖、葡萄糖和果糖作为保护剂在冻干的过程中有严重的起泡现象；当甘露醇和蔗糖合用时，虽然平均粒径符合要求，但是粒径分布较宽，且有大粒子存在。
刘占杰等[1]在研究不同保护剂、不同保护剂浓度在冻干过程中对脂质体粒径的影响中发现：以葡萄糖作保护剂的脂质体粒径最大，以海藻糖作保护剂的脂质体粒径最小；并且不同浓度保护剂的保护效果也不同，对于每种保护剂都有最佳保护浓度，葡萄糖为5％，蔗糖为10％，甘露醇为15％，海藻糖为10％，葡萄糖浓度为5％的脂质体冻干前、冻干后的平均粒径分别为0.592um、0.749um；蔗糖浓度为10％的脂质体冻干前、冻干后的平均粒径分别为0.592um、0.751um；甘露醇浓度为15％的脂质体冻干前、冻干后的平均粒径分别为0.376um、0.426um；海藻糖浓度为10％的脂质体冻干前、冻干后的平均粒径分别为0.264um、0.294um。
李茗等[20]对以冻干品的外观、重建粒子形态以及40℃初步稳定性为指标，分别考察了乳糖、蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、甘露醇5种保护剂单用及合用对尼莫地平鼻用冻干脂质体的保护作用。
