实验一:检测生物组织中的糖类脂肪蛋白质
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实验报告实验名称:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一、实验原理及流程1.原理:(1)本尼迪特试剂(CuSO、柠檬酸钠、碳酸钠按一定比例的混合溶液)检测4。
土豆汁和梨汁中是否含有还原糖:若含有还原糖则反应生成砖红色沉淀即OCu2(2)碘液检测土豆汁和梨汁中是否含有淀粉:碘液遇到淀粉会变蓝,因此若含有淀粉则溶液会变为蓝色。
2.流程图(1)取6支试管,用滴管分别在两支试管内各滴加1mL土豆汁,在另两支试管内各滴加1mL梨汁,并在余下的两支试管中分别1mL本尼迪特试剂。
(2)取一支装有土豆汁的试管和一支装有梨汁的试管,分别在两支试管内各加入1mL本尼迪特试剂,振荡,将这两支试管放入沸水加热2分钟左右,观察期颜色的变化。
(3)取余下的一支装有土豆汁和余下的一支装有梨汁的试管,用滴管分别在两支试管内各滴加一滴碘液,振荡,观察其颜色的变化。
二、实验结果及分析(1)实验结果:梨汁和本尼迪特试剂的混合溶液放入沸水中加热后由蓝色迅速变为绿色,然后逐渐变为黄色,颜色逐渐加深,最终变为砖红色(产生砖红色沉淀);土豆汁和本尼迪特试剂的混合溶液加热后由蓝色变为黄色(产生浑浊的黄色沉淀物)。
分析:因为梨汁和本尼迪特试剂的混合溶液加热后的颜色为较深的砖红色,所以梨汁中还原糖含量较高;而土豆汁和本尼迪特试剂的混合溶液加热后的颜色为较浅的黄色,所以土豆汁中还原糖含量较低。
(2)实验结果:土豆汁中滴加入碘液后迅速变成蓝黑色,梨汁中滴加入碘液后变为透明的黄色。
分析:因为土豆汁中滴加入碘液后溶液迅速变为蓝黑色,所以土豆汁中含有大量淀粉;而梨汁中滴加入碘液后溶液颜色变为与碘液颜色相近的透明的黄色,所以梨汁中几乎不含淀粉。
还原糖淀粉梨汁含有(较多)几乎不含土豆汁含有(较少)含有(较多)三、实验讨论及反思实验中遇到的问题:1.取梨汁和土豆汁样品时分不清哪支试管中取的是梨汁,哪只试管中取的是土豆汁。
反思:土豆汁较为浑浊,梨汁相比之下较为清澈,且装有梨汁的试管壁上会附着较多的透明颗粒物。
检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质(教学案]
1. 糖类检测:可以采用苏丹红反应法和不定量蓝色磷钼酸法。
苏丹红反应法基于苏丹红与糖类产生的红色复合物,颜色深浅程度可以反映糖类的含量;不定量蓝色磷钼酸法则是利用蓝色磷钼酸与糖类生成蓝色复合物,再根据颜色深浅程度进行糖含量的定量。
2. 脂肪检测:可以采用苏丹三染色法和乙醇提取法。
苏丹三染色法是将组织切片染色,然后进行显微镜观察,染色深的部位表示脂肪含量高;乙醇提取法是用乙醇将脂肪溶解,然后通过温度恒定、有机溶剂飘移法进行脂肪量的测定。
3. 蛋白质检测:可以采用比色法和光度法。
比色法根据蛋白质与某种化学试剂生成的色素深度,来反映蛋白质的含量;光度法则是利用蛋白质与特定光源产生的光学反应,通过光密度来测定蛋白质含量。
需要注意的是,具体选择哪种检测方法要根据样本的类型和检测的目的确定。
同时,检测前要进行适当的样本处理和前处理,以保证检测的准确性和重复性。
检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质实验报告实验报告:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一、实验目的本实验旨在通过生化实验的方法,检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,以了解这些物质在生物组织中的分布和含量,为生物组织代谢研究提供基础数据。
二、实验原理1.糖类检测:糖类物质在生物组织中广泛存在,包括单糖、低聚糖和多糖。
其中,还原性糖如葡萄糖、果糖等可与斐林试剂发生氧化还原反应,产生砖红色沉淀。
非还原性糖如淀粉、纤维素等则不能与斐林试剂反应。
2.脂肪检测:脂肪是生物组织中重要的储能物质。
在酸性条件下,脂肪可被脂酶分解为脂肪酸和甘油,脂肪酸可与热硫酸反应生成硫酸酯,产生绿色荧光。
3.蛋白质检测:蛋白质是生物组织中功能多样性的基础。
在碱性条件下,蛋白质可与双缩脲试剂发生紫色反应。
三、实验步骤1.准备试剂和样品:分别准备斐林试剂、脂酶、硫酸、双缩脲试剂;选取具有代表性的生物组织样品,如动物肝脏、植物叶片等。
2.制备样品溶液:将生物组织样品研碎,加入适量溶剂制成样品溶液。
3.检测糖类:取样品溶液适量,加入斐林试剂,加热至沸腾,观察颜色变化。
4.检测脂肪:取样品溶液适量,加入脂酶,在酸性条件下加热一定时间,加入热硫酸,观察颜色变化。
5.检测蛋白质:取样品溶液适量,加入双缩脲试剂,搅拌均匀,观察颜色变化。
四、实验结果与分析1.实验结果:通过上述实验步骤,我们得到了生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的检测结果。
具体数据如下:2.结果分析:从实验结果可以看出,该生物组织中糖类含量较高,这可能与该生物组织的能量需求有关;脂肪含量相对较低,这可能与该组织的生理功能有关;蛋白质含量适中,表明该组织具备一定程度的生物活性。
此外,通过对不同物质含量的比较分析,我们可以初步推断该生物组织的代谢类型和生理功能。
五、结论本实验通过生化实验方法成功地检测了生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质含量,得到了较为可靠的实验数据。
这些数据为进一步研究生物组织的代谢过程提供了基础资料。
实验一检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质,阐明实验原理—颜色反应,识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色,初步掌握鉴定上述化合物的基本方法,学会描述实验现象,掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。
二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
1.生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖.前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖;蔗糖分子内没有,为非还原糖.实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖,而不能鉴定可溶性非还原糖。
可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀。
如:葡萄糖+ 2Cu2+ + 4OH—加热葡萄糖酸+ Cu 2O↓(砖红色)+ H 2O 即Cu 2+被还原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色(直链)或紫(红)色(支链)。
2.脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。
它是构成人体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。
在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。
脂类的主要功能是氧化供能。
脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。
在病理检验中,脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。
脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等。
脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。
经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好。
根据这一原理,适当提高温度(37℃—60℃)对组织切片染色效果是有好处的.脂类染色,用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。
专题01 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.检测原理(1)糖类的检测①还原糖+斐林试剂―――→水浴加热砖红色沉淀。
②淀粉+碘液―→蓝色。
(2)脂肪的检测:脂肪+⎩⎪⎨⎪⎧ 苏丹Ⅲ染液―→橘黄色苏丹Ⅳ染液―→红色(3)蛋白质的检测:蛋白质+双缩脲试剂―→紫色。
2.实验步骤(1)还原糖的检测(2)脂肪的检测方法一:花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色方法二取材:花生种子(浸泡,去掉种皮)↓切片:将子叶切成薄片↓制片⎩⎪⎨⎪⎧ ①取最薄的切片,放在载玻片中央②染色:滴2~3滴苏丹Ⅲ染液,染色3 min ③去浮色:加1~2滴体积分数为50%的酒精溶液④制成临时装片:滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片↓观察:先在低倍显微镜下寻找已着色颗粒,再用高倍显微镜观察↓结论:圆形小颗粒呈橘黄色,证明花生种子中含有脂肪(3)蛋白质的检测选材与制备:蛋清稀释液或豆浆滤液↓ 颜色反应:↓结论:组织样液中含有蛋白质考点一:生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖;蔗糖分子内没有,为非还原糖。
实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖,而不能鉴定可溶性非还原糖。
例一、 (2017某某卷)下列关于糖类化合物的叙述,正确的是( )A .葡萄糖、果糖、半乳糖都是还原糖,但元素组成不同B .淀粉、糖原、纤维素都是由葡萄糖聚合而成的多糖C .蔗糖、麦芽糖、乳糖都可与斐林试剂反应生成砖红色沉淀D .蔗糖是淀粉的水解产物之一,麦芽糖是纤维素的水解产物之一【答案】B【解析】葡萄糖、果糖和半乳糖都具有还原性,属于还原糖,组成元素相同,都是C 、H 、O ,A错误;淀粉、糖原和纤维素的基本组成单位都是葡萄糖,都是由葡萄糖聚合而成的多糖,B正确;蔗糖不具有还原性,属于非还原糖,不能与斐林试剂发生反应,麦芽糖和乳糖都具有还原性,都能与斐林试剂发生反应,生成砖红色沉淀,C错误;淀粉的初步水解产物是麦芽糖,彻底水解产物是葡萄糖,纤维素的初步水解产物是纤维二糖,彻底水解产物是葡萄糖,D错误。
实验检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质
一、实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
注意事项:
还原糖的检测和观察:
①还原糖有葡萄糖,果糖,麦芽糖;
②甲乙液必须等量混合均匀后再加入样液中,现配现用;
③必须用水浴加热
脂肪的鉴定:
①切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰,有的地方模糊。
②酒精的作用是:洗去浮色
③需使用显微镜观察
④使用不同的染色剂染色时间不同
蛋白质的鉴定:
①先加A液1ml,再加B液4滴
②鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比
资料一:生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖;蔗糖分子内没有,为非还原糖。
可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀。
如:
加热
葡萄糖+ 2Cu2+ + 4OH—葡萄糖酸+ Cu 2O↓(砖红色)+ H 2O 即Cu 2+被还原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色(直链)或紫(红)色(支链)。
资料二:脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。
它是构成人体组织的正常成分,脂类的主要功能是氧化供能。
脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞内。
苏丹三染液其实是苏丹三固体颗粒溶于高浓度乙醇(70%-95%,多用95%)配制而成的,而脂肪同样较易溶于高浓度乙醇,所以染色时间长了就会让样品中的脂肪溶解,洗浮色的时
候被洗掉,就观察不到了。
在病理检验中,脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。
脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等。
脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。
临床上常对组织切片进行染色观察。
资料三:蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。
)
资料四:在实验中液体的材料可以直接利用,而有些固体的材料需经过处理后才能用于实验。
如苹果、萝卜、梨、西瓜等可以支撑匀浆过滤后利用。
一种检测脂肪的方法:取少量生物组织,制成临时装片,用苏丹Ⅲ后者苏丹Ⅳ染色后,用50%酒精洗去浮色,在高倍显微镜下观察。
这样即使生物组织中脂肪含量少,显色不明显也能观察到。