目录
1. 概述…………………………………………………………………………第2页
1.1验证目的……………………………………………………………………第2页
1.2验证频次……………………………………………………………………第2页
1.3适用范围……………………………………………………………………第2页
1.4参照标准……………………………………………………………………第2页
1.5验证小组人员及职责………………………………………………………第2页
2.试验前准备……………………………………………………………………第3页
2.1验证所需的文件资料………………………………………………………第3页
2.2验证条件……………………………………………………………………第3页
2.3回收试验……………………………………………………………………第5页
2.4结果判断……………………………………………………………………第7页
1 1. 概述
1.1验证目的
进行产品的微生物计数检查时，应进行方法适用性试验（即微生物回收试验），以确认所采用的方法适合于微生物限度检查。本次验证的目的就是确认本法适合生产原料、初包装材料、一次性妇用（壳聚糖）生物高分子止血吸附栓的微生物限度检查。
1.2验证频次
1.2.1建立生产原料、初包装材料一次性妇用（壳聚糖）生物高分子止血吸附栓的微生物限度检查法时。
1.2.2检验方法更改时。
1.2.3原料、初包装材料、产品发生变化或检验程序发生改变时。
1.3适用范围
生产原料、初包装材料、一次性妇用（壳聚糖）生物高分子止血吸附栓的微生物限度检查。
1.4参照标准
2015版《中国药典》第四部通则。
1.5验证小组人员及职责
组 长
姓 名 部门/职务 分 工
xxx 总经理 批准验证方案和报告，领导和组织验证工作
组 员
xxx 质量部负责人 起草验证方案、收集整理数据，完成验证报告
片剂
片剂系指原料药物与适宜的辅料制成的圆形或异形的片状固体制剂。中药还有浸膏片、半浸膏片和全粉片等。片剂以口服普通片（也包括糖衣片、薄膜衣片）为主，另有含片、舌下片、口腔贴片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡腾片、阴道片、阴道泡腾片、缓释片、控释片与肠溶片（包括肠溶衣片和结肠定位肠溶衣片）与口崩片等。
对片剂的质量要求除外观应完整光洁、色泽均匀，有适宜的硬度和耐磨性，以及药典品种项下规定的检验项目外，还应检查“重量差异”和“崩解时限”。此外，阴道片应检查“融变时限”，阴道泡腾片应检查“发泡量”，分散片应检查“分散均匀性”，口腔贴片、阴道片、阴道泡腾片和外用可溶片等局部用片剂应检查“微生物限度”。
“重量差异”检查法
1简述
本法适用于片剂的重量差异检查。凡规定检查含量均匀度的片剂，不再进行重量差异的检查。
在片剂生产中，由于颗粒的均匀度和流动性，以及工艺、设备和管理等原因，都会引起片剂重量差异。本项检查的目的在于控制各片重量的一致性，保证用药剂量的准确。
2仪器与用具
分析天平感量（适用于平均片重以下的片剂）或感量lmg（适用于平均片重或以上的片剂）。
扁形称量瓶。
弯头或平头手术镊。
3操作方法
取空称量瓶，精密称定重量；再取供试品20片，置此称量瓶中，精密称定。两
次称量值之差即为20片供试品的总重量，除以20，得平均片重（m）。
从已称定总重量的20片供试品中，依次用镊子取出1片，分别精密称定重量，得各片重量。
4注意事项
在称量前后，均应仔细查对药片数。称量过程中，应避免用手直接接触供试品。已取出的药片，不得再放回供试品原包装容器内。
遇有检出超出重量差异限度的药片，宜另器保存，供必要时的复核用。
糖衣片应在包衣前检查片芯的重量差异，符合规定后方可包衣。包衣后不再检查重量差异。
薄膜衣片在包衣后也应检查重量差异。
5记录与计算
记录每次称量数据。
求出平均片重（m），保留三位有效数字。修约至两位有效数字，选择重量差异限度。 按下表规定的重量差异限度，求出允许片重范围（m±m×重量差异限度）。
纯化水微生物限度检查记录 检验日期 年 月 日 报告日期 年 月 日 检验依据 《中国药典》2015年版二部、四部通则微生物检查法 需氧菌总数检查：取纯化水50ml，用薄膜过滤器（0.45±0.02um，50MM直径）过滤，减压抽干。取出滤膜，将滤膜放入制备好的R2A培养基平板上，在30～35℃培养3天，计数。 需氧菌阴性对照：取50ml已灭菌的纯化水按供试品同法处理，作为阴性对照。 R2A琼脂培养基配制批号 培养温度 放入培养时间 取出培养时间 累计培养时间 年 月 日 时 年 月 日 时 h 培养 时间 / 取样点编号 阴性对照
24h 1 □长菌 □未长菌 2
48h 1 □长菌 □未长菌 2
72h 1 □长菌 □未长菌 2 菌数报告 CFU/ml / 标准规定 需氧菌总数每1ml不得过100CFU。
项目结论 □符合规定 □不符合规定 □符合规定 □不符合规定 □符合规定 □不符合规定 □符合规定 □不符合规定 □符合规定 □不符合规定 □符合规定 □不符合规定 / 检验人： 复核人：
生物制品用内包材微生物限度检测方法的验证
目的 建立生物制品用内包材（中性硼硅玻璃管制注射剂瓶、药用卤化丁基橡胶塞和抗生素瓶用铝塑组合盖）微生物限度检查方法，并进行验证。 方法 采用薄膜过滤法检查上述3种内包材的微生物限度，并按照验证试验方法，在供试品中加入5种标准菌，测定其回收率。 结果 金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和黑曲霉5种标准菌在上述3种内包材供试品溶液中的平均回收率均为70%～110%，符合公示的2015年版药典中要求的50%～200%的标准。 结论 薄膜过滤法适用于上述3种内包材的微生物限度检验。
[Abstract] Objective To develop and verify a method for microbial limit test on
inner packing material of biologics. Methods The microbial limits of 3 kinds of inner
packing material of biologics， i.e. vial， rubber closures and aluminum-plastic
combination cover， were tested by membrane filtration method， and the developed
method was verified by adding standard microorganisms with known counts into the
test samples and determining their recovery rates. Results All the recovery rates of
standard Staphylococcus aureus， Pseudomonas aeruginosa， Bacillus subtilis，
