脑组织中的海马取法

海马记忆法——帮你拥用超常的记忆力你在工作和生活中，遇到过这样的烦恼吗？上午看了一个笑话，打算晚饭时说里家人听，明明记在脑子里了，晚饭时却偏偏想不起来？为什么越是担心忘记的事件，却会忘记呢？对海马体与记忆关系的研究，是近年来神经生理心理方面一个有趣而重要的进展。

通过有针对性的锻炼，能促进海马体的活性，帮你拥有超常的记忆力。

首先我们一起来认识一下，大脑中掌管记忆的核心部——海马记体。

海马体是指人类大脑颞叶内侧以及腹侧卷曲的海马回及齿状区域，海马通过脑干网状结构系统及皮质下行纤维接受来自视、听、触、痛等多种感觉信息。

当大脑对某类信息非常感兴趣，或者由于不断重复某种信息，使大脑认为这个信息非常重要时，这些信息不仅会被保存在颞叶中，还会经由神经系统被传送到海马体，成为永久性的记忆。

这个过程听上去有点像计算机的内存，它将短时间内的记忆暂时留存，以便快速存取。

比如我们记忆最近一段时间发生的事情比较容易，而我们能记住童年发生的某些事情，是因为它们是进入了海马体的深层记忆区域。

大脑可以像身体一样得到锻炼，积极刺激海马体的脑神经细胞，促进树突的生长，让脑积极接触陌生领域，在日常生活中有意识的增加一些举动或改变一些行为方式，比如，捏住鼻子喝咖啡、有意识的走进死胡同，走一些没有走过的无名小路等等，可以在不知不觉中活化大脑，刺激大脑，增强脑活力，提高记忆力。

人的记忆力没有天生好坏的区别，只有右脑与左脑的区别。

左脑记忆是语言性记忆，不仅记忆容量小，而且记忆速度慢。

同时左脑会随着年龄的增长而逐渐衰老。

右脑记忆属于图像性记忆，记忆容量大，记忆速度快，并且可以随时再现。

所以，我们要积极的开发右脑。

——在此我们要澄清几个观点IQ和脑记忆力没有必然联系，所以充分挖掘和发挥自身潜能的人记忆力最好，他们懂得调动身体的一切细胞为记忆服务。

脑有自己的喜好，只有脑喜欢的刺激，才有积极的反应，所以人对自已感兴趣的事情，会从内心深处来调动一切器官为之服务，事情当然做做好。

大脑海马分离图谱（一）step 1:This is a dorsal view of a mouse’s skull, in order to access the brain you can cut along the coronal suture and sagittal suture then pull off both sides of parietal bone and interparietal bonestep 2: Now the skull is open and you can see the brain clearly, in order to get the hippocampus you’d better keep the brain in the cranial cavity so the brain will not move when you continue with the following stepsstep 3: In order to expose the hippocampus you need to remove the cerebral cortex covering it. The first incision is at the end of the hemisphere; the incision should be about 0.7mm deep for most adult mouse that you might not hurt the hippocampus while to expose it. The 2nd incision is about 1.5-2mm in front of the first one, this incision you need cut into the lateral ventricle, both of the incisions go to the ventral of the brain and meet there. Now this piece of cortex is free, pull it up, you will see the hippocampus just like in this picture, also you can see the CSF in the opened ventricle.step 4: Keep working on the other side of the brain pull up both sides of the cortex that covering the hippocampus along the ventricle. Now you can see the dorsal part of the hippocampus. Separate the rest of the hippocampus from the cortex coveringit along the surface of the hippocampus towards the ventral part of the hippocampus.step 5: Keep working on the other side of the brain pull up both sides of the cortex that covering the hippocampus along the ventricle. Now you can see the dorsal part of the hippocampus. Separate the rest of the hippocampus from the cortex covering it along the surface of the hippocampus towards the ventral part of the hippocampus.step 6: Now you need to free the hippocampus from the surrounding tissuestep 7: Here is the hippocampus picked out from the brain.（二）大鼠的海马的分离是很容易的,具体做法是:首先对大鼠进行麻醉后断头取脑,手持头部将大鼠的颈部用剪刀剪断,用手指将其头皮拉到前端,用小剪刀沿中线位置将颅骨剪开,轻轻用剪刀将颅骨向两边翻开,这是就将这个大脑暴露出来,用神经剥离子轻轻剥出大脑,放入通入氧气的0-4度的ACSF 中降温一分钟左右取出,用剃须刀片在两个大脑半球一下切出脑干部分,并将大脑从中间切开,用剥离分针轻轻将大脑和小脑分开中间的部分就是海马,用剥离分针的钝端轻轻的挤出海马就可以了。

海马神经元的培养总结1.新生大鼠海马常规取法：断头，线剪剪去皮肤，组织剪从椎管纵向剪开颅骨，再颅顶横向剪一刀。

暴露两侧大脑半球，用小弯镊翻出大脑，延纵裂分别向两侧翻开大脑半球，在底部可见新月形的海马，用眼科镊取出置于冰浴的盐溶液中，在解剖镜下剥离周围组织和血管膜。

2.培养基：我用的接种培养基是DMEM/F12+10的胎牛血清＋胰岛素＋葡萄糖＋谷胺酰胺，维持培养基里就是多加了5uM的阿糖胞苷。

培养液的pH调至6.8—7.4可，最好不要调至7.4或高。

一般在培养液放置两周后，加入终浓度为2mM的谷氨酰胺3.胰酶：酶用0.125的。

其实一次性消化比较简单，关键是消化时间不要太长，不知你用多长时间，一般是15-20分。

4.多聚赖氨酸的配置：可以用去离子水配, 也可以用D-HANKS也配(我用的配方),或者PBS 效果都差不多. 一般先配成1mg/ml的母液, 用高压过的滤器过滤,最好分装以后放在-20度, 用的时候再稀释至0.01mg/ml.5.铺板：我的办法是将盖玻片直接经泡酸后要反复的洗干净，用单蒸后用双蒸水。

后放在75％的酒精中浸泡半个小时以上，在超净台中取出后用酒精灯烧一下，注意不要太久，以防破碎，后放在24或6孔板中，加入稀释好的多聚赖氨酸，室温放置3小时以上或过夜，切记不要照紫外，可以在上面覆盖东西。

结束后回收多聚赖氨酸，并用灭菌水或PBS等清洗三遍以上即可使用，我用的效果非常好。

6. 1. 盖玻片洗净之后, 需要泡酸过夜处理, 这样玻片会比较干净, 养原代背景会干净的多. 就算是新的也要洗(曾经有过教训).2.包被多聚赖氨酸用之前要用高压的去离子水洗3遍,再用D-HANKS过一遍.3. 多聚赖氨酸包被时,如果有条件可以放在4度振摇过夜,效果更佳.4. 神经元细胞种植之前1小时把种植培养基加进去,会提高细胞活力.7.纯化细胞方法：1.差速贴壁：接种前可将制备的细胞悬液放入底面积为75cm2的培养瓶中（未包被），然后放入37度，5%CO2培养箱中半小时，然后再过滤，转移至培养皿/瓶中。

海马回规律
海马体又称海马回、海马区、大脑海马，位于大脑丘脑和内侧颞叶之间，属于边缘系统的一部分，主要负责短时记忆的存储转换和定向等功能。

海马体是中枢神经系统中大脑皮质部分中被研究得最详细的一个部位，其形成于婴儿受孕后4周，在之后的6个月里，大脑会完成860多亿个神经细胞和数亿个辅助细胞的发育。

海马效应是指人类在现实环境中（相对于梦境），突然感到自己“曾于某处亲历过某画面或者经历一些事情”的感觉。

依据人们多数忆述，好像于梦境中见过某景象，但已忘了，后来在现实中遇上该景象时，便会浮现出“似曾相识”的感觉。

总之，海马体在人类的记忆和认知中起着重要的作用，对其规律的研究和探索仍在不断进行中。

小鼠海马组织提取过程
小鼠海马组织提取过程
海马是大脑皮层中与记忆处理相关的区域，小鼠海马组织提取过程是神经科学研究中重要的一步。

下面将介绍小鼠海马组织提取的步骤和注意事项。

步骤一：准备实验材料
需要准备组织切片刀、显微镜、培养培养皿、离心机等实验材料；还需要购买磷酸盐缓冲液(PBS)、胶原酶等药品。

步骤二：准备小鼠海马
在实验前将小鼠捕捉并消毒，随后在其头部进行开颅手术，取出大脑组织样本，分离出小鼠海马组织。

步骤三：组织分离
将小鼠海马组织切成小块，用胶原酶等酶类溶液进行处理，避免组织死亡和堆积。

处理后的组织可以通过显微镜进行查看，并且在操作中应让操作规范化和标准化，以避免人为干扰。

步骤四：离心处理
将处理后的小鼠海马组织进行离心处理，取出其上清液，用PBS溶液进行洗涤，防止污染物质残留。

步骤五：离心沉淀
将洗涤后的小鼠海马组织进行离心沉淀，分离出其中的细胞块，获得目标提取物质。

注意事项：
1. 在处理小鼠海马组织的过程中，应防止组织的氧化和干燥，避免影响实验结果。

2. 在组织分离的过程中，应选择合适的酶类溶液，并进行恰当的组织处理处理。

3. 在离心沉淀的时候，顶部要避免和底部过于接近，避免损坏组织和提取物。

小鼠海马组织的提取对于神经科学研究具有重要的作用，在实验中应遵守实验规范，保护动物权益，准确完成实验操作。

磁共振（MRI）海马、颞叶扫描技术检查前准备: 检查前去除患者身上的金属异物。

线圈：头颅正交线圈或相控阵线圈。

体位：仰卧位，头先进，身体与床体保持一致，使扫描部位尽量靠近主磁场及线圈的中心，双手置于身体两侧，头部用海绵垫固定。

定位位置：双眉中心连线。

常规扫描方位：横断位，冠状位,必要加SAG。

横断面：BH Calibration Scan，横轴位扫描校准序列如使用相控阵线圈，所有序列需进行扫描校准序列，如使用头颅正交线圈则不需扫描校准序列。

中心定于扫描部位的中心位置，层厚8MM，单次采集，如范围不够，可增加层厚。

相控线圈需使用Asset或Pure针对相应的线圈进行校准。

Pure可改善多通道线圈图像的均匀性，Asset可加快扫描速度。

频率编码为前后。

横轴位： Ax T2 FSE 横轴面T2加权序列在冠状面及矢状面上定位，在矢状位上定位线平行海马的走形，冠状位上调整角度，使定位线平行两侧颞叶连线，扫描范围包括整个海马结构(如扫描颞叶应包括整个颞叶结构)，需包括整个病变范围。

如采用螺旋桨成像序列，可改善图像质量。

使用上下饱和带，可减轻血管搏动伪影。

频率编码方向为前后。

冠状面：COR T2 FLAIR，冠状面T2水抑制序列在矢状位和横轴位上定位。

在矢状面上找到显示海马结构最好的层面，定位线垂直于海马的走形，在横轴位上调整角度，使定位线垂直于大脑中线，双侧对称扫描。

扫描范围包括整个海马结构(如扫描颞叶应包括整个颞叶结构)，需包括整个病变范围。

添加上下饱和带，减小血管搏动伪影。

频率编码方向为上下方向。

冠状面：COR T1 FLAIR，冠状面T1水抑制序列复制COR T2 FLAIR定位线。

添加上下饱和带，减小血管搏动伪影。

频率编码方向为上下方向。

该序列注意TR与TI时间选择，否则会影响图像对比度。

矢状面：SAG T2 FSE，矢状面T2序列在横轴位和冠状位上定位，在横轴面上找到显示海马结构最好的层面，分别在两侧定位使定位线平行于海马的走形，在冠状位上调整角度，使两侧分别于两侧颞叶底垂直，范围包括整个海马结构(如扫描颞叶应包括整个颞叶结构)，需包括整个病变范围。

海马区在大脑哪个位置你知道海马区位于大脑哪个位置吗?你知道海马体有什么作用吗?让来帮你吧!小编精心的整理了关于它的信息，欢迎点击。

海马区大脑中的一部分上个世纪50年代，科学家发现大脑中的“海马区”在存储信息的过程中扮演着至关重要的角色——如果切除掉海马区，那么以前的记忆就会一同消失。

但是海马区的神经细胞如何把信息固定下来?科学家发现一些分子参与到了记忆的形成。

此外，神经细胞突触地形成也与记忆相关联。

但是，科学家目前对于记忆的运作机制的了解还不够——而这一机制对于理解我们自身是非常重要的。

海马体主要负责学习和记忆，日常生活中的短期记忆都储存在海马体中，如果一个记忆片段，比如一个电话号码或者一个人在短时间内被重复提及的话海马体就会将其转存入大脑皮层，成为永久记忆。

所以海马体比较发达的人，记忆力相对会比较强一些。

存入海马体的信息如果一段时间没有被使用的话，就会自行被“删除”，也就是被忘掉了。

而存入大脑皮层的信也息并不就是永久不会给忘掉了，当你长时间不使用该信息的话大脑皮层也许就会把这个信息给“删除”掉了。

有些人的海马体受伤后就会出现失去部分或全部记忆的状况。

这全取决于伤害的严重性，也就是海马体是部分失去作用还是彻底失去作用了研究显示大脑海马区受损影响想象力英国科学家最近研究发现，大脑海马区受损的人除记忆力不好之外，想象能力也会变差。

据外电报道，科学家此前已知道海马区受损会导致健忘，英国伦敦大学学院研究人员进一步探索了对其他方面的影响。

海马区受损者被要求想象未来的一次朋友见面或圣诞晚会，或者想象自己身处海滩、酒吧之中，但他们报告说，自己无法在大脑中形成具体形象，取而代之的是一堆分离的图像碎片。

研究人员认为，这可能是因为海马区负责为大脑提供构建各类形象的环境。

研究人员已将这项研究成果发表在美国《国家科学院学报》上。

训练海马记忆法的方法你今天出门是不是又忘记带钥匙了?记忆力越来越不好，很多人都存在这种现象。

人的记忆力好不好，和人的大脑中掌管记忆的核心部——海马记体有很大的关系。

下面由店铺给你带来关于训练海马记忆法的方法，希望对你有帮助!训练海马记忆法的方法1、吃早餐能活化大脑。

不管多忙，每天都要吃早餐噢!2、闻咖啡看鱼的图片。

3、捏住鼻子喝咖啡。

4、闭上眼睛吃饭。

吃饭的时候多咀嚼。

5、用左手端茶杯。

6、用手指分辨硬币。

7、戴上耳机上下楼梯。

8、放开嗓子大声朗读。

9、去陌生的地方散步。

10、每天快走20分钟。

11、勤锻炼，每季度学一项新运动。

12、听不同类型的歌曲，看从来不看的电视节目，品尝没吃过的菜肴。

海马图像记忆方法举例例如，要记忆以下 16个词语，我们来看看用图像记忆如何来记忆：自行车、奖杯、火炬、帆船、大象、长颈鹿、乌龟、钢琴、螃蟹、电吹风、树叶、蝴蝶、恐龙、溜冰鞋、沙发、鳄鱼。

如果用传统的声音记忆，就需要把这些词语反复地读很多遍才能记住，而且记住之后很容易就会忘记。

如果用图像记忆方法来记忆，可以这样进行：首先通过想像，把上面这16个词语的图像都想像出来，有了这些图像之后，我们再进行运用想像力，把它们联结成为生动活泼的活动图像，让我们能够像看电影一样来进行记忆。

例如我们可以这样想：参加自行车比赛获得冠军，就得到了一个奖杯，然后想像一个火炬插到了奖杯里面，接着拿这个火炬去把帆船烧着了，这时来了一头大象用鼻子吸水来救火，然后大象跟长颈鹿打架，用长长的鼻子把长颈鹿的脖子卷了起来仍到空中，长颈鹿掉下来之后压扁了一个乌龟，这只乌龟爬到钢琴上去弹钢琴;乌龟弹钢琴的优美旋律吸引了一只螃蟹，这只螃蟹就爬到钢琴上跳起了螃蟹舞，跳完之后就拿起一个电吹风，一阵大风把树上的树叶都纷纷吹了下来，一只又红又大的蝴蝶飞到了树叶上来休息，这时来了一只恐龙把蝴蝶吃掉了，恐龙吃掉蝴蝶之后就穿上溜冰鞋到沙发上溜冰，结果把沙发底下的一只鳄鱼压制扁了。

一,脑组织取材:(1)断头后取脑，在视交叉后1mm及4mm处冠状切面切开,取中间脑组织。

(2)4℃的4%多聚甲醛磷酸盐缓冲液中后固定2h。

(3)蒸馏水浸泡4h。

(4)梯度酒精脱水，顺序为：70%酒精(3h)→85%酒精(2h)→95%酒精Ι、Π(各2h)→100%酒精Ι、Π(各2h)。

(5)二甲苯Ι、Π(共2h)透明。

浸腊：石蜡Ι、II、III、各1h。

(7)石蜡包埋。

切片：载波片预先经多聚赖氨酸行防脱片处理，在海马齿状互包平面连续冠状切片，片厚5μm，贴片后60℃烤箱烤片2h后室温保存备用。

二HE染色(1)石蜡切片常规脱腊水化至水。

(2)Harris苏木素液5min，自来水冲洗。

(3)75%盐酸乙醇分化30s，自来水冲洗。

(4)酸化伊红乙醇1-2min，自来水冲洗。

(5)常规脱水、透明、中性树胶封片。

光镜观察海马神经元形态。

三.TUNEL法检测细胞凋亡(1)石蜡切片常规脱蜡水化至水。

(2)新鲜配制3%H2O2，室温处理10分钟。

蒸馏水洗涤2分钟×3次。

(3)标本片加0.01MTBS1:200新鲜稀释ProteinaseK，37℃消化1—15分钟,0.01M TBS洗2分钟×3次。

(4)标本片加标记缓冲液20ul/片,以保持切片湿润。

按每张切片取TdT和DIG-d-UTP各1ul，加入18μι标记缓冲液中，混匀。

甩去切片上多余液体后加标记液，20ul/片。

置样品于湿盒中，37℃标记2小时。

(5)0.01M TBS洗2分钟×3次。

加封闭液50ul/片，室温30分钟，甩掉封闭液，不洗。

(7)用抗体稀释液1：200稀释生物素化抗地高辛抗体，混匀后50ul/片加至标本片上。

置样品于湿盒中，37℃反应30分钟。

0.01M TBS洗2分钟×3次。

用抗体稀释液1：100稀释SABC，混匀后50ul/片加至切片。

37℃反应30分钟。

0.01M TBS洗5分钟×4次。

海马体提取脂质的方法海马体（hippocampus）是大脑中一个重要的结构，负责记忆和学习。

脂质是海马体中的一种重要成分，对其功能发挥具有重要作用。

因此，提取脂质并对其进行分析可以帮助我们更好地理解海马体的功能和相关疾病的机制。

下面将介绍一种常用的海马体脂质提取方法：材料：-冷冻存储的海马体样本-甲醇-水-氯仿-脂质标准物质（用于质量分析）步骤：1.取出冷冻存储的海马体样本，室温下迅速切割成小块，以便更好地提取脂质。

2.在一个玻璃容器中加入足够的甲醇，将海马体样本放入其中。

确保样本完全浸泡在甲醇中，以便提取更多的脂质。

3.将容器密封，并将其放入冰箱中，在4摄氏度下冷冻24小时。

冷冻可以帮助提取更多的脂质，并防止其降解。

5.将离心管中的上清液转移到一个新的离心管中，加入相等体积的氯仿。

轻轻摇晃混合物，然后再次离心10分钟以分离两相。

6.注意观察离心管中两相的分离情况。

上层液体为甲醇相，下层液体为氯仿相。

使用吸管小心地移除上层液体，丢弃不需要的部分。

7.将氯仿相转移到一个新的离心管中，并加入少量的水。

再次轻轻摇晃混合，然后离心10分钟以分离两相。

8.取出上清液（水相）并保存，以备后续分析使用。

下层液体为脂质相，将其转移到干燥玻璃试管中。

9.使用氮气或其他适当的方法将脂质相中的溶剂完全蒸发，留下脂质样品。

10.将脂质样品重新溶解在适当的溶剂（如乙醇或甲醇）中，以备后续分析。

这个方法可以提取到大部分的海马体脂质，并保证其纯度和完整性。

提取的脂质样品可以用于分析，如质谱分析、气相色谱-质谱分析、脂质组分分析等，从而进一步研究其成分和功能。

总结一下，海马体脂质的提取方法涉及到海马体样本的冷冻、甲醇萃取、氯仿分离和干燥等步骤。

这个方法可以帮助研究者从海马体中获得高纯度的脂质样品，为进一步的分析和研究提供了基础。

实验记录一、实验名称：海马细胞培养二、实验目的：在细胞水平评估给药后是否能够提高突触可塑性三、实验时间：年月日四、实验地点：五、实验人：六、实验试剂：1.完全DMEM培养基：2.1×PBS：厂家：HyClone；3.0.25%胰酶消化液：4.硼酸盐缓冲液（poly-L-lysine)：5.Neurobasal全培+双抗：6.HBSS缓冲液：七、实验仪器：1.湘仪TD5A-WS台式低速离心机，转子号为853590，水平转子，容量为32×15 ml。

2.培养箱：Thermo SCIENTIFIC培养箱，HERACELL 150i CO2 Incubator。

3.倒置显微镜4.解剖镜八、实验过程：1.准备24孔板，每孔放入一个处理好的玻片，共24孔。

分别加poly-L-lysineBuffer 500μl/孔，放入37℃培养箱中包被2小时以上。

2.4小时后，准备3个10-cm无菌培养皿，分别加20ml的HBSS-buffer，放在冰袋上预冷。

3.用75% 乙醇喷洗剪刀一把、尖头镊子两把、称量勺一把、手术刀片一个；将新生E19小鼠的头和身体分离，把头放在其中一个预冷的平皿中。

4.取大脑：左手用一把尖头镊子压住小鼠头部的眼睛处，右手用手术刀片将头顶处划开，再用另一把尖头镊子扒开头部的皮和脑壳，（注意不要弄坏大脑）右手拿称量勺尾端轻轻插入需出的大脑的底部，轻挑出大脑，放入到另一个干净的平皿中。

5.用上述取大脑的方法将剩余的小鼠大脑取出。

6.取海马体：在解剖镜下，左手用尖头镊子压住小脑处，右手翻开大脑的半球，去除血网，分离血网下的海马体（带状深色，半透明，靠近大脑半球的边缘），将海马体移入最后一个干净的平皿中。

7.用上述取海马体的方法将剩余的海马体取出。

8.全部海马体取出出后，用1ml 枪把海马体轻吸到1个无菌的1.5 ml EP管中，等海马体沉淀后，吸出上清，用PBS清洗10次，1ml/次。

【记忆力训练方法】池谷裕二的30个海马记忆法如果明白了记忆机制，并能够控制记忆力的话，我们大概就能够轻松应付学校的考试了。

如果能够掌握更多的知识的话，或许就能过上更加丰富多彩的生活了。

但仅仅知道这些还不够，现代脑科学已经掌握了增强记忆力的线索。

首先要介绍的是脑科学的基本概念和记忆机制，然后再谈一下有关海马和 LTP（Long Term Potentiation长时程增强）现象的最新话题，并以此为中心来展开如何在现实中增强记忆力的话题。

不顾一切地拼命学习对脑没有任何益处，脑本身就有高效的学习方法。

如果能够理解脑的结构，自然也就能了解提高脑学习和记忆的效率的方法。

为什么做了那么多记忆训练，记忆力还是没有提高？因为方法没有触及大脑记忆的本质。

为什么池谷裕二的海马记忆法有效？最新脑科学研究证实，人是通过海马体记忆的，通过针对性的锻炼，能促进海马体的活性，就可以从根本上增强记忆力。

海马活化训练体系是著名脑科学家池谷裕二多年研究成果的精华。

为什么是明明在脑子里偏偏想不起来？为什么越是怕忘记越忘记？最新脑科学研究表明，人是通过海马体来记忆的，通过针对性的锻炼，能促进海马体的活性，就可以从根本上增强记忆力。

著名脑科学家池谷裕二，经过多年研究和实验，总结出一套切实有效的海马活化记忆训练体系，通过科学方法快速增强记忆力。

介绍的30个小方法，把这些方法变为生活小习惯，长期坚持下来：一、唤醒身体1、闭上眼睛吃饭。

2、用手指分辨硬币。

3、戴上耳机上下楼梯。

4、捏住鼻子喝咖啡。

5、放开嗓子大声朗读。

6、闻咖啡看鱼的图片。

二、寻求脑刺激7、到餐馆点没吃过的菜。

8、把自己的钱花掉。

9、专门绕远路。

10、用左手端茶杯。

11、听不同类型的歌曲。

12、每天睡觉6小时。

三、积极锻炼左右脑13、去陌生的地方散步。

14、判断自己是右脑型还是左脑型。

15、用直觉作决断。

四、补充脑营养16、甜食让你变聪明。

17、吃早餐能活化大脑。

18、多咀嚼可以提高成绩。

实验所需用品：400μm膜；培养皿：60mm ；100mm ；离心管：1.5ml；15ml；50ml；枪头：200μl；1ml；5ml；pll(多聚赖氨酸)；H-DMEM（高糖）；P培（plating medium）；PBS液；10%水合氯醛；木瓜蛋白酶；台盼蓝染液（自配）；75%酒精;ARAC液(工作时浓度为0.0625mmol/L)大镊子；大剪刀；眼科镊；尿垫；解剖镊；1ml注射器前一天的准备1.pll(多聚赖氨酸)：10mg/ml,用时稀释20倍加pll 2ml 至60mm 皿中，3h后吸出液体，用PBS洗两次，每次2ml（放入孵箱）2.准备400μm膜（用于过滤细胞，除去大颗粒组织块）3.解剖用的100mm皿；大镊子；大剪刀；眼科镊；尿垫4.H-DMEM配制木瓜蛋白酶2mg/ml实验第一天：1.大鼠肌肉注射（大腿内侧）10%水合氯醛2ml ，两侧各1ml2.待麻醉后，放至尿垫，腹部及用具喷洒酒精3.打开腹腔，剪去脂肪层，取出子宫放入皿中，喷洒酒精，移至细胞房4.准备4个60mm皿（每个皿加4ml P培）；1个100mm皿（每个皿加6ml P培）；2个100mm皿（每个皿加6ml H-DMEM）将子宫剪开，剪去胎鼠头部放入100mm H-DMEM皿中洗一遍再放入另一个100mm H-DMEM皿中洗一遍；洗完后放至100 mm P培皿中取脑；取出的脑分别放至60mm P 培皿中（放冰上）。

取脑步骤：左手插眼固定，右手撕皮，去脑壳，取脑（使用眼科镊）5.放至解剖镜下，分离皮层与海马，步骤如下：去嗅球，小脑脑一分为二掏出部分内容物平口处撕去血管膜取出海马去除剩余内容物每取完一个脑即将皮层放至10ml P培的50ml离心管中，海马至有1ml P培的1.5ml离心管中。

6.海马：3支管（1.5ml离心管），每管800μl H-DMEM，洗3次（1ml枪头吸）皮层：2支管（50ml离心管），每管5~10ml H-DMEM，洗2次（5ml枪头吸）7.海马：1ml木瓜蛋白酶加至1.5ml离心管；15min,5min/振摇，水浴（新洁尔灭一盖），37℃。

取小鼠脑组织HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】丁香园上面总结的方法，排版有点乱。

其实过程与大鼠近似，我的经验是：1.?材料准备；大剪刀、眼科剪、眼科镊、大镊子、滤纸、竹签等；2.?步骤：处死小鼠，取头颅；剪开皮肤，漏出颅骨；用大尖镊子夹住两侧眼眶，用眼科剪稍剪除颅骨中线；再用眼科镊夹住颅骨从内向外夹，从下向上逐步去除颅骨；当全脑露出时，再用眼科镊去除脑膜和血管；然后用竹签从嗅球处向下取出全脑，即可。

3.?注意事项：用力轻柔，否则容易弄破脑部；用剪刀剪颅骨时，一定要贴壁向上剪，否则容易剪破脑部；去除脑膜时，不能硬拉，否则容易弄破大脑；取出全脑时应把头顶朝下，用竹签轻轻取出，离桌面也不要太远、高；若留病理，建议一定要取完整无损的大脑。

做免疫组化的话，稍微麻烦一点儿，因为脑组织含水量多，要固定的好，就需要先灌注。

先麻醉小鼠剪开胸腔，找到心脏，从心尖入针，剪开右心耳先用生理盐水灌注直到从心耳流出来的水清亮了再改用固定液（一般是4%多聚甲醛）灌注至小鼠四肢僵硬小鼠只需要用注射器就行了，我做的25～35g的小鼠一般用50mLNS+30mL多聚甲醛。

具体步骤：常规麻醉小鼠，将其固定，用剪刀剪开胸部皮肤，暴露出皮下组织，剪开时注意钝性分离，以免误伤。

然后用镊子提起剑突，用剪刀剪开胸腔，剪断两侧肋骨，暴露整个胸腔，小心误伤肺及心脏、大血管。

用镊子撕开心包膜，暴露心脏，用眼科剪剪开右心耳，然后提起心尖将准备好的生理盐水注射器插入左心室，注射，注射时小心针头滑脱。

生理盐水灌流至肺和肝的颜色都变成灰白色即可。

然后用多聚甲醛灌流，针孔最好是同一个，多聚灌流时小鼠四肢会抽搐，待抽搐结束，小鼠僵硬即可。

取下小鼠，用剪刀在颈部离断头颅，用剪刀在小鼠头颅中间皮肤剪一刀，将两边皮肤向下翻用手捏住，暴露整个颅骨，用眼科剪从脊髓端插入椎孔，沿着颅正中线剪开颅骨，注意剪刀向上翘一些，以免误伤脑组织，剪开后用弯眼科镊分离颅骨，小心分离，直至暴露整个大脑，然后用弯镊伸入颅底离断颅底神经，就可以取出整个脑子了。

《海马记忆法》集中介绍脑组织中“海马”对记忆的影响。

如果你在读这本书之前带着以下问题去看或许会更为快速和轻松：什么是记忆的分层？什么是内隐记忆和外显记忆？海马在什么情况下较为活跃(此时人的记忆能力更强)？如果将语义记忆转换为情景记忆？增强记忆的方法有哪些？看完后，也许会觉得记忆似乎也没有什么奇特之处。

然而，许多事情，原理都是简单的，但真正学习起来却是最费劲的。

记忆亦是如此。

记忆力增强的重点貌似又要回所有的学习方法中最笨也是最有效的办法：“重复”和“坚持”。

当这两种办法发生作用时，海马就会把你想要记忆的信息永久的存储在你的大脑颞叶中了。

最后，借用书中原话，以鼓励自我。

“如果坚持不懈地学习下去，眼前就会海阔天空，豁然开朗，这一瞬间就会有一种洞察万物的深感。

从某种意义上讲，这是一种近似于大彻大悟的体验。

这种现象就源自于学习的积累效果。

”========================================================================以下是书摘：1. 每个人的脑结构和神经细胞的排列方式都是相同的。

2. 神经细胞的数量是只减不增的，已经死亡的神经细胞也不会再度复活。

3. 人脑的使用率不到10%，而无论怎样运用头脑去抑制神经细胞的死亡速度几乎都是不可能的，我们不要太在意神经细胞连接死亡的事实。

4. 对脑有用的神经细胞也会死亡，这种情况下，脑机能就会发生重大的问题。

如，记忆关系密切的脑细胞的大量死亡的话，就会导致痴呆症，这种称为阿尔兹海默氏症；控制人体运动的神经细胞死亡的话，就会引起运动障碍，这种称为帕金森氏症。

5. 造成脑神经细胞死亡的原因：头部爱外力的撞击和敲打都会造成大量神经细胞的死亡。

酒精会加速神经细胞的死亡。

某些药物也会引发神经细胞的死亡，如安眠药，麻醉剂，兴奋剂等。

另外，脑血管阻塞，氧气以及营养的供给就会断绝，神经细胞也会随之死亡。

6. 脑神经细胞与记忆力的增强人们从事某一职业，经验越丰富，其脑组织的某个部位就会较发达，并且从事的时间越长神经细胞的数目就越多。

取活组织需要玻璃分针，止血钳和冰袋，组织剪。

取的时候先断头，从枕骨大孔往前剪开颅骨，完全暴露脑组织，用玻璃分针分离脑组织和颅骨。

分离下来的全脑组织置于冰袋上，用玻璃分针从后往上揎起端脑，即可看见海马，左右各一，之间有组织相连，分离的时候要轻柔，尽量避免破坏组织结构。

分离下来的组织根据试验安排做后续处理.step 1:This is a dorsal view of a mouse’s skull, in order to access the brain you can cut along the coronal suture and sagittal suture then pull off both sides of parietal bone and interparietal bone . 这是大鼠头部背面观，为了接触到脑，需沿冠状缝和矢状缝切开，然后把顶骨和枕间骨取下。

step 2: Now the skull is open and you can see the brain clearly, in order to get the hippocampus you’d better keep the brain in the cranial cavity so the brain will not move when you continue with the following steps 现在头盖骨被打开，你可以清楚地看到大脑，但为了获得海马你最好把大脑保持在颅腔内，这样在你进行下列操作时大脑就不会移动。

step 3: In order to expose the hippocampus you need to remove the cerebral cortex covering it. The first incision is at the end of the hemisphere; the incision should be about 0.7mm deep for most adult mouse that you might not hurt the hippocampus while to expose it. The 2nd incision is about 1.5-2mm in front of the first one, this incision you need cut into the lateral ventricle, both of the incisions go to the ventralof the brain and meet there. Now this piece of cortex is free, pull it up, you will see the hippocampus just like in this picture, also you can see the CSF in the opened ventricle 为了看到海马你需要移动覆于其上的大脑皮层。