昆明小鼠肺癌模型建立的初步研究
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昆明小鼠原位胃癌移植模型的建立实验具体步骤及说明采用两种不同的肿瘤细胞株分别在昆明小鼠胃部原位建立胃癌模型。
造模后对原位移植瘤的生长速度进行观察,并对胃癌组织中v EG F 的表达及M v D 进行检测,结果显示模型的成瘤率均为100%。
昆明鼠胃部原位移植瘤的生长速度快,缩短了胃癌模型建立周期,为筛选抗胃癌药物提供了有效简单的模型。
一、昆明小鼠皮下移植瘤传代S180 细胞注人小鼠腹腔内,进行体外培养,5 -7 d 可见小鼠腹部肿胀,有腹水,收集腹水,细胞计数,调整细胞密度在2 x 106- 2x 107注射到昆明小鼠的腋部皮下形成实体瘤。
待肿瘤生长至直径1.5 -2.0 cm 之间,处死小鼠,按上述方法反复传3 代后作为原位移植用瘤源。
二、原位移植模型的建立1. 取一中传3 代后生长4 周左右处于对数生长期的昆明小鼠,常规消毒,从腋部皮下剥取肿瘤组织。
2. 剔除纤维包膜、血管,切开去除中间坏死的组织,选取生长良好、呈淡红色、鱼肉状的瘤组织,剪成约1-2 mm ,小块备用。
3. 昆明小鼠术前禁食12 h,以0.5% 戊巴比妥钠腹腔内注射(50 mg/kg)麻醉,固定小鼠,常规消毒皮肤,用手术剪刀在小鼠沿左侧腹部正中旁线切开,切口约1.5 cm ,小心暴露腹膜、胃壁,用一次性注射针头轻微损伤胃大弯中部浆膜层,以出血为度,用无齿镊将破损处向内推压,使局部胃壁形成凹完,植入1 块1-2 mm3瘤组织块,并在瘤表面滴1 滴OB生物胶,使其覆盖瘤组织表面,然后分层关腹。
4. 人胃癌组织块昆明小鼠原位种植后,逐日观察裸鼠全身状况,运动情况,腹部体征。
若实验过程中出现动物死亡,记录时间,并全面探查腹腔,观察胃肿瘤原位生长情况。
三、处死动物及移植瘤的观察定时观察所有裸鼠全身状况、运动情况、腹部体征、移植后脱颈处死解剖,取原位瘤。
所取标本经10%甲醛固定、石蜡包埋、切片、HE染色,做组织病理学检查。
四、免疫组化染色1. 采用EnVision免疫组织化学技术检测VEGF蛋白表达。
小鼠小细胞肺癌模型的建立王子乔;张雪茜;孟凡荣;刘喆【摘要】目的:建立小鼠小细胞肺癌动物模型,为进一步研究小细胞肺癌的发展进程以及化疗药物的筛选提供实验平台.方法:采用Trp531loxP/loxP;Rb1loxP/loxP小鼠肺部插管吸入Adeno-Cre (Ad-Cre)重组腺病毒的方法建立小鼠小细胞肺癌模型,通过对模型小鼠肺组织进行石蜡切片以及HE染色,并通过免疫组化等方法检测肺组织中神经内分泌特异性标记蛋白CgA、Cgrp的表达情况.结果:成功建立了小鼠小细胞肺癌的模型,模型小鼠肺组织中TTF-1、CgA、Cgrp的表达水平显著升高.结论:成功建立小鼠小细胞肺癌动物模型,为后续研究人的小细胞肺癌发病机制以及相关化疗药物的筛选提供了实验手段.%Objective:To establish a model of small cell lung cancer in mice to study the progression of small cell lung cancer and to provide an experiment platform for the screening of chemotherapy drugs.Methods:The small cell lung cancer model was established by intratracheal injection of Adeno-Cre (Ad-Cre) intoTrp53loxP/loxP;Rb1loxP/loxP mice.The lung tissues of model mice were sectioned and stained with HE.Immunochemistry of neuroendocrine cell-specific markers CgA and Cgrp was performed on lungsections.Results:The small cell lung cancer model was successfully established and a significant increase was observed in the expression of TTF-1,CgA and Cgrp.Conclusion:This mice model provides an experiment method for the study of pathogenesis of human small cell lung cancer and the screening of chemotherapy drugs.【期刊名称】《天津医科大学学报》【年(卷),期】2018(024)001【总页数】3页(P29-31)【关键词】Ad-Cre;Trp53loxP/loxP;Rb1loxP/loxP小鼠;小细胞肺癌;动物模型【作者】王子乔;张雪茜;孟凡荣;刘喆【作者单位】天津医科大学医学检验学院,天津300070;天津医科大学医学检验学院,天津300070;天津医科大学医学检验学院,天津300070;天津医科大学医学检验学院,天津300070【正文语种】中文【中图分类】R734.2肺癌占全世界肿瘤发病率的12.7%、死亡率的18.2%,是目前最常见的引发死亡的疾病之一[1]。
肺癌骨转移小鼠模型的建立孟越;杨德鸿;李春雨;郝松;胡少宇;林振;袁亮;李威;闫文娟;陈建庭【摘要】目的:通过短暂免疫抑制,在免疫功能正常小鼠复制肺癌骨转移模型。
方法6周龄雌性C57BL/6J小鼠40只,随机分为对照组(CON)、低剂量免疫抑制组(C100/D50)、中等剂量免疫抑制组(C150/D100)及高剂量免疫抑制组(C200/D150)。
低剂量免疫抑制组、中等剂量免疫抑制组及高剂量免疫抑制组在实验的第1天分别腹腔注射环磷酰胺(CTX)100、150、200 mg/kg,在次日分别注射地塞米松钠(DXM)50、100、150 mg/kg,连续注射3 d。
对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水。
第5天,取对数生长期的人肺腺癌A549细胞,注射1.0×109个/L浓度的细胞悬液于小鼠右后肢胫骨平台下。
造模后第28天进行影像学测定并取材,评估骨质缺损程度,HE染色及免疫组织化学法观察肿瘤形态,并通过检验学指标评估骨破坏程度。
结果在肿瘤注射过程中除对照组外每组各有1只死亡。
试验结束时对照组小鼠全部存活;C100/D50组小鼠9只存活,仅有1只成瘤;C150/D100组小鼠存活8只,7只成瘤;C200/D150组小鼠存活4只,全部成瘤。
中、高剂量免疫抑制组的小鼠体重降低明显,与其他组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。
X线及显微CT可见中、高剂量免疫抑制组小鼠胫骨平台下出现明显的骨缺损与骨破坏,其影像学表现符合肿瘤性骨破坏的改变。
病理可见溶骨病变为主的混合性骨质破坏。
中、高剂量免疫抑制组小鼠ALP活性明显高于其他两组,差异有显著性意义(P<0.05),但这两组间之间无明显差异。
结论中、高剂量免疫抑制剂在制备小鼠肺癌骨转移模型中均具有较高的成瘤率,但中等剂量组小鼠存活率高,效果更理想。
建立了比较成熟的人肺腺癌细胞移植瘤模型制备方法,为转移瘤的研究和治疗提供动物模型。
%Objective To establish a model bearing human lung cancer xenograft with bone metastasis in mice withnormal immune function. Methods Forty female C57BL/6J mice were randomly allocated into 4 equal groups, including a control group and 3 immunosuppression groups treated with low, moderate, and high doses of dexamethasone (50, 100, and 150 mg, respectively). Four days after immune suppression, the mice were subjected to percutaneous injection of1.0 × 109 L-1 A549 cells into the tibial plateau, and the bone defects were assessed radiographically 28 days after modeling. HE staining and immunohistochemical staining were used to examine the tumor tissues and bone tissue damages. Results In each of the 4 groups one mouse died during tumor cell injection. Only 1 mouse showed tumor formation in low-dose immunosuppression group, as compared to 7 and 4 in moderate- and high-dose immunosuppression groups. X-ray and microCT scan showed significant tibial bone destruction in moderate- and high-dose groups. The moderate- and high-dose groups showed similar ALP activities but both were significantly higher than those in the other two groups (P<0.05). Conclusion Immunosuppression with a moderate dose of dexamethasone results in longer survival time of the human lung cancer xenograft-bearing model mice as well as a higher tumor formation rate.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】5页(P664-668)【关键词】肺癌;骨转移;模型/小鼠【作者】孟越;杨德鸿;李春雨;郝松;胡少宇;林振;袁亮;李威;闫文娟;陈建庭【作者单位】南方医科大学南方医院脊柱骨科,广东广州 510515;南方医科大学南方医院脊柱骨科,广东广州 510515;南方医科大学南方医院脊柱骨科,广东广州 510515;南方医科大学南方医院脊柱骨科,广东广州 510515;南方医科大学南方医院脊柱骨科,广东广州 510515;南方医科大学南方医院脊柱骨科,广东广州510515;南方医科大学南方医院脊柱骨科,广东广州 510515;南方医科大学南方医院脊柱骨科,广东广州 510515;南方医科大学南方医院脊柱骨科,广东广州510515;南方医科大学南方医院脊柱骨科,广东广州 510515【正文语种】中文肺癌转移发生率非常高,其中50%~70%发生骨转移[1]。
小鼠Lewis肺癌胸腔移植模型的建立【摘要】目的:通过胸腔移植的方法建立晚期肺癌的动物模型。
方法:经C57BL/6小鼠的腋后线第6肋间胸腔(胸腔模型组)或小鼠腋部皮下(皮下模型组)分别移植鼠源性Lewis肺癌细胞0.2ml (5×106ml-1),观察小鼠的生存时间、小鼠体重、饲料消耗量、游泳试验、常压耐缺氧试验,大体观察胸腔、纵隔、胸水等肺癌细胞浸润和转移情况。
结果:胸腔模型组小鼠中位数生存时间13.5(8~18)d,皮下模型组小鼠中位数生存时间45(25~71)d,胸腔模型组的生存期范围离散程度较皮下模型组小(P<0.05)。
病程中胸腔模型组小鼠体重下降、摄食减少等恶病质体征较皮下模型组明显(P<0.01),胸腔模型组小鼠活动减少、睡眠时间缩短、蜷曲、毛发脱落等现象较皮下模型组多见,胸腔模型组小鼠游泳实验及耐缺氧实验时间较皮下模型组明显缩短(P<0.01),胸腔模型组小鼠早期可出现胸水和肿瘤转移,而皮下模型组小鼠早期未见胸水和肿瘤转移。
结论:胸腔移植模型可作为晚期肺癌动物模型。
【关键词】 Lewis肺癌胸腔移植模型皮下移植模型晚期肺癌小鼠肺癌动物模型与临床结果一直存在差距,尤以晚期模型更为明显。
我们在进行动物实验研究中发现,目前使用的肿瘤皮下移植模型中,动物生存时间差异很大,不利于生存期观察。
肿瘤发展到晚期也可以出现转移,但是发生率很不一致。
另外,模型的肿瘤负荷和产生的症状、并发症、生存状态也很不一致。
为了克服皮下移植模型缺陷,有学者采用将人类癌组织或肿瘤细胞悬液直接植入支气管的方法,可以很好模拟支气管肺癌的临床特征,但是其技术要求较高,成功率较低[12]。
另外,也有人采用外科手术移植方法,同样也是成功率低于10%[3]。
这些模型都需要无胸腺裸鼠或SCID小鼠,饲养条件高,实验费用昂贵。
鉴于肺癌模型的建立现状,至今未见有经胸腔直接移植建立晚期肺癌模型的报道,因此,作者采用清洁级小鼠C57BL/6胸腔种植鼠源性Lewis肺癌细胞的方法,进一步比较该模型和皮下移植模型肿瘤生长状况,观察治疗前后小鼠生存时间、生存状态及其相互关系,研究该模型稳定性和实用性。
小鼠肺癌原位模型的建立Establishment of orthotopic lung cancer model in mice XU Zihang LIU Fei ZOU Chunpu ZHU Shiguo CHEN XiaoSchool of Basic Medical Science ,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine ,Shanghai 201203 ,China[] Objective Morbidity and mortality remain high in lung cancer ,but the animal lung cancer models used for the experimental research are limited ,so to establish an orthotopic lung cancer model,which is stable and similar to the human tumor microenvironment ,is a foundation for the further study of lung cancer research. Methods Luciferase-expressed LLC cells and matrigel matrix were directly injected into the left lung of C57BL/6 mice after cutting open a incision of the skin ,which about 1 cm ,and there was no need to open the chest. Small animal in vivo bioluminescence imaging system was used to monitor tumor growth and metastasis. At different time points ,mice were sacrificed and the lung tissues were isolated and imbedded with paraffin. Pathological diagnosis was madebysliced and HEstained. Results LLC cells (0.5 x 105) were enough to form an orthotopic pulmonary tumor ,and the success rate wasabove 90%. The metastases to contralateral thoracic ,contralateral lung ,bilateral axillary and inguinal lymph nodes were monitored by bioluminescence technique. Conclusion The orthotopic tumor models of lung cancer can successfully built by injection ofluciferase-expressed LLC cells and matrigel matrix mixture. Furthermore ,a few LLC cells are needed ,and the tumor formation rate is high ,besides there is no operation death risk. It has good metastases and high repeatability ,in addition it's easy to operate and easy to be monitored ,which provides a good method for the establishment of mouse models for further study of lung cancer.目前,肺癌动物模型的构建方法有化学诱导法、转基因法、异位移植法、原位移植法等。
小鼠癌症模型的建立及治疗策略研究近年来,癌症带来的威胁越来越大,不仅给人类带来巨大的伤害,也给动物带来不少困扰。
小鼠在癌症模型的建立上具有很大优势,因为小鼠与人类的遗传相似度较高,又可以轻松获取,更因其短生命周期、高繁殖速度和低成本等特征,成为了目前最为理想的癌症研究模型之一。
一、小鼠癌症模型的建立1、人工诱导模型人工诱导模型是一种基于实验室操作、通过引入损伤而引发癌症的模型。
这种模型常用的方法有放射线照射、化学物质注射等。
人工诱导模型的优点在于可以直接控制造模方式,不过可能存在某些限制和安全性问题。
2、遗传性模型遗传性模型通常是通过引入特定基因完成,以模拟人类遗传癌症疾病。
该类模型具有遗传多变性,可以在不同的背景上诱导不同的癌症类型。
遗传模型介绍最广泛的例子是P53突变小鼠模型,这些小鼠胚胎会带有p53 突变,从而使正常细胞失去周期和死亡机制,成为体内肿瘤的最终形成因素。
3、转移性模型转移性瘤模型是通过将人类癌细胞注射到小鼠体内,通过它转变成更具有侵略性的癌症类型,具有可应用性强的特点。
二、小鼠癌症治疗策略研究癌症治疗的核心目标是发现癌症细胞生长与传播所依赖的特定靶标,这被称为“拿下癌症的脚踏实地”。
1、药物治疗药物治疗是癌症治疗的核心部分之一,其核心目标是发现治疗癌症所依赖的特定靶标,然后研究合适的化学物质,以达到影响癌症细胞可持续性生长的效果。
比如,索非布韦(sorafenib)是通过抑制血管生成来阻止癌细胞迅速生长的化学物质。
2、放疗治疗放疗,即同位素治疗,是一种通过放射性同位素结合寻找癌症细胞,从而与癌症细胞特异性相结合的治疗方法。
同位素在特定时间释放出粒子,杀死癌细胞,起到治疗作用。
3、免疫治疗免疫疗法是癌症治疗中的一项重要策略,用于提高体内免疫细胞对某种癌细胞的抗体反应。
癌症也被称为“免疫逃避性疾病”,因为它可以通过发生在免疫细胞和肿瘤组织之间的复杂相互作用,从而在某种程度上逃避宿主的免疫攻击。
移植性肺癌动物模型的建立和研究进展胡丽丽;阮永华【摘要】肺癌是目前对人类威胁最大的恶性肿瘤之一,其发病率呈逐年上升趋势.肺癌动物模型在研究人类肺癌的诊断和治疗等方面发挥非常重要的作用,建立肺癌动物模型为研究者探索肺癌发病机制、研究预防策略、评价临床疗效提供基础.本文从理想的模型实验动物、移植方法、三种不同的裸鼠移植性肺癌动物模型建立方法等方面对国内外移植性肺癌动物模型的研究现状作一综述.【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2012(028)008【总页数】3页(P906-908)【关键词】肺肿瘤;裸鼠;动物模型;文献综述【作者】胡丽丽;阮永华【作者单位】昆明医科大学病理学系,昆明,650031;昆明医科大学病理学系,昆明,650031【正文语种】中文【中图分类】R734.2;R73-35+2肺癌是目前最常见的恶性肿瘤之一,病死率居恶性肿瘤的第一位,严重威胁人类的健康。
2012年美国肺癌的新发病例约226 160例,死亡160 340例[1]。
第3次全国居民死因调查结果显示我国肺癌的病死率比30年前上升了465%,肺癌已成为我国癌症患者的首位恶性肿瘤死亡的主要原因[2]。
据统计,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的5年生存率仅为10%~15%,小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)也仅为5%。
为深入了解肺癌的生物学特征以制定出更有效的治疗措施,需模拟出与人类肺癌病因、发病机制、发展过程及治疗相似的动物模型。
本文主要介绍肺癌动物模型的制备方法及其在肺癌研究中的应用。
1 人肺癌研究模型的理想实验动物用于人类肿瘤研究的实验动物主要是免疫缺陷动物,包括裸鼠、严重联合免疫缺陷(severe combined immuno-deficient,SCID)小鼠及NOD/SCID小鼠等。
裸鼠是20世纪60年代初发现并培育的一种自发突变种,表现为无毛、裸体和无胸腺,随着鼠龄的增加,皮肤变薄、头颈部皮肤皱褶、发育迟缓。