金黄色葡萄球菌的检验PPT课件

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医学金黄色葡萄球菌PPT

表皮剥落脱毒素B 1971
33000
7.0
染色体质粒
烫伤样皮肤综合症
剥落性皮炎
中毒性休克综合症 1981
24000
7.0
毒素（TSST-1）
转座子
毒性休克综合症
金黄色葡萄球菌肺炎（staph
ylococcus aureus pneumonia）是由金黄色葡萄球菌（一般为凝固酶阳性）所致的肺炎。由于滥用抗生素的结果，抗药性金黄色葡萄球菌的菌株明显增加，金黄色葡萄球菌感染也见增多。本病大多并发于葡萄球菌败血症，多见于幼婴及新生儿，年长儿也可发生。
生物学特性
❖ 形态与染色
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。
A蛋白已广泛应用于细菌、病毒等病原诊断及分析等方面。
其细胞壁含有3种主要成分：核糖醇磷壁酸、肽聚糖和A 蛋白（SPA）。
金黄色葡萄球菌A蛋白
金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛，大多数无荚膜。
革兰氏染色阳性。
❖ 为检测食品中的SAU, 国内外常用的微生物定量方法有平板计数法、细菌磷酸酶活性定量法、MPN-PCR 法等, 这些方法耗时费力、特异性不强、需要PCR后处理。
❖ 另一种定量方法是荧光定量PCR , 该方法能够定量测定DNA 的含量, 因此也具有对微生物进行计数的能力。但许多食品基质、培养基等都可能对PCR 有抑制作用, 导致假阴性结果, 这是荧光定量PCR全面引入常规食品分析的一大障碍。
金
分类地位
黄色
生物学特性
葡萄
功能/危害
球
作用机理
菌
最新研究进展
球菌金黄色葡萄球菌
细菌杆菌

微生物检测技术--金黄色葡萄球菌检测PPT课件

❖ β溶血: 呈完全性溶血，在血平皿上菌落周围有2～4mm宽、界限分明、无色透明的溶血环。
❖ γ溶血:不产生溶血素，在血琼脂平皿上的菌落周围无溶血环。
2021
9
❖ 可产生卵磷脂酶，在卵黄高盐培养基上形成周围有白色沉淀环的菌落。
2021
10
1.3 生化反应
❖ 大多数菌株分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。
❖ 分解甘露醇，产酸。
2021
11
2、致病性
❖ 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，为条件致病菌。可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。
2021
12
葡萄球菌皮肤感染
2021
13
❖ 菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶：
a.溶血素：外毒素，分α、β、γ多种，能损伤血小板，破坏溶酶体，
C. 分解甘露醇
D. 产生耐热核酸酶
3．金黄色葡萄球菌的培养特性是—————— A.营养要求高，必须在血平板上才能生长
B.均能产生金黄色色素
C. 耐盐性强, 可在含7%～15%NaCL的培养基中生长
D.专性需氧
2021
34
课堂练习
4．金黄色葡萄球菌定性试验中所用的增菌液是( )。
A 7.5%氯化钠肉汤 B 10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤
2021
32
检样:25 g(mL)样品+225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或10 % 氯化钠胰酪胨大豆肉汤，均质
36 ℃±1 ℃ 18 h～24 h
Baird-Parker 平板,血平板
36℃±1℃
18 h～24 h
增菌分离
涂片染色

第六章金黄色葡萄球菌的检验PPT资料

3、生化特性：
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
金黄色葡萄球菌的致病性
金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶： a.溶血毒素：外毒素，分α、β、γ、δ，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞； c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌； e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E及F六种血清型。
比如：法国梅里埃公司生产的RPF培养基、API检测系统等。当用接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； 5%氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤50 mL培养基内，36℃±1℃培养24 h，转种血平板和Baird-Parker平板， 36℃±1℃培养24 h，挑取血平板上金黄色（有时为白色）菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血平板上呈金黄色，有时也为白色，大而突出、圆形、不透明、表面光滑，周围有溶血圈。 Staphylococcus aureus Enhanced sem w: 7. 5～15%NaCl肉汤中生长。中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞；

金黄色葡萄球菌pptppt课件

.
8
治疗方法
现在有金黄色葡萄球菌感染者者，可选用：红霉素、新型青霉素、庆大霉素、万古霉素或先锋霉素Ⅵ治疗。
.9检测方法Fra bibliotek一般方法
快速检测法
革兰染色镜检耐热核酸酶试验血浆凝固酶试验生化反应试验
金黄色葡萄球菌鉴别培养基
3M 金黄色葡萄球菌快速测试片法
金黄色葡萄球菌乳胶凝集试验
.
10
企业
个人
.
11
企业
防止金黄色葡萄球菌污染食品防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成杀死金黄色葡萄球菌
.
12
个人
1、皮肤、口腔、鼻咽腔中寄居的葡萄球菌，常是感染的来源。因此，首先要注意个人的清洁卫生，皮肤有创伤时不
要直接接触食物，并应及时消毒处理，防止感染。 2、食物要新鲜。尽量不吃隔夜菜，保存食物尽量选择低温、通风的条件，可阻止致病菌的生长繁殖。 3、生熟分开。从检测的结果看，生的食物带有致病菌的比例远高于熟食。同时，冰箱里中剩菜和生的原料(如蔬菜) 不要混放，要有相对隔离，或者简单包装(如放在保鲜盒内) 后再盛放。处理食材的案板、菜刀等最好要生熟分开使用。
个特性进行污染标本分离。
%蔗糖或15 %以上食盐食品中
才可被抑制，能在15 %NaCl
和40 %胆汁中生长。
.
4
存在什么危害
谁会受到危害
危害怎么发生
危害性评估
.
5
人食用了被金黄色葡萄球菌及其毒素污染的食物，会引起急性胃肠炎，有恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状。严重者可虚脱或休克。
金黄色葡萄球菌可经皮肤伤口，引起局部化脓感染。如果人抵抗力低下，则会因其在身体内大量繁殖，而引起多发性脓肿和炎症。

第六章_金黄色葡萄球菌的检验ppt课件

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17
血平板上金黄色葡萄球菌菌落形态
金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血平板上呈金黄色，有时也为白色，大而突出、圆形、不透明、表面光滑，周围有溶血圈。
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18
溶血圈
-
19
金黄色葡萄球菌在BP平板上的菌落形态
在Baird-Parker琼脂平板上菌落呈圆形，表面光滑、凸起、湿润，直径2～3 mm。灰黑色至黑色，有光泽，常有浅色（非白色）的边缘，周围绕以不透明圈（沉淀），其外常有一清晰带。当用接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感。有时可见到不分解脂肪的菌株，除没有不透明圈和清晰带外，其他外观基本相同。从长期贮存的冷冻或脱水食品中分离的菌落，其黑色常较典型菌落浅些，且外观可能较粗糙，质地较干燥。
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8
3、生化特性：
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
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金黄色葡萄球菌的致病性金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶： a.溶血毒素：外毒素，分α、β、γ、δ，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞； c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌； e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E及F六种血清型。

金黄色葡萄球菌演示课件

诊断方法
根据临床表现、细菌学检查和血清学检查等综合判断。其中，细菌学检查包括涂片镜检、分离培养和药敏试验等。
02
生物学特性
形态与结构特点
革兰氏阳性球菌，呈葡萄串状排列细胞壁含有肽聚糖和磷壁酸
无芽孢、无鞭毛，大多数无荚膜
生长条件及繁殖方式
01
需氧或兼性厌氧菌，最适生长温度为37°C
02
在普通培养基上生长良好，形成圆形、凸起、光滑、湿润的菌落
05
临床治疗策略与预防措施
抗菌药物治疗原则及选用建议
早期、足量、联合使用敏感抗菌药物
01
在感染初期，应尽早使用足量、敏感的抗菌药物，以迅速控制
感染，减少并发症的发生。
个体化治疗方案
02
根据患者的年龄、病情严重程度、感染部位等因素，制定个体
化的治疗方案，以提高治疗效果。Biblioteka 避免滥用抗菌药物03
严格掌握抗菌药物的使用指征，避免不必要的滥用，以减少耐
04
实验室检测方法与技术
传统培养法鉴定原理及操作步骤
鉴定原理
通过选择性培养基，如Baird-Parker琼脂平板，抑制其他细菌生长，促进金黄色葡萄球菌生长并形成典型菌落。根据菌落形态、色素产生和生化反应进行鉴定。
免疫学检测方法介绍及应用范围
免疫学检测方法
利用抗原抗体特异性结合的原理，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光技术、免疫磁珠分离技术等检测金黄色葡萄球菌。
03
繁殖方式主要为二分裂，也可进行多次分裂形成短链状
代谢途径与产物分析
01
主要代谢途径包括糖酵解、磷酸戊糖途径和三
羧酸循环等
02
可产生多种酶类，如凝固酶、葡萄球菌溶血素

金黄色葡萄球菌的检测技术ppt课件

食品中金黄色葡萄球菌检验技术
金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、土壤、水及人和动物的排泄物中都可以找到。因而，食品受其污染的机会很多。近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大责更多占百分之45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。
头孢呋辛酯 - 适应症皮疹本品适用于溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌（耐甲氧西林株除外）及流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌等肠杆菌科细菌敏感菌株所致成人急性咽炎或扁桃体炎、急性中耳炎、上颌窦炎、慢性支气管炎急性发作、急性支气管炎、单纯性尿路感染、皮肤软组织感染及无并发症淋病奈瑟菌性尿道炎和宫颈炎。儿童咽炎或扁桃体炎、急性中耳炎及脓疱病等。
二、检验所需器材
金黄色葡萄球菌检验的器材主要有：胰酪胨大豆肉汤、 7.5%氯化钠肉汤、血琼脂平板、Baird-Parker琼脂平板、肉浸液肉汤、灭菌盐水、兔血浆及显微镜、培养箱、离心机、1ml和10ml灭菌吸管、灭菌试管、灭菌平皿、均质器、载玻片、L形涂布棒、酒精、接种环等。
25g（ml）+225ml灭菌生理盐
2.直接计数方法 1）检样处理同“增菌培养法”。 2）样品稀释吸取上述1:10混悬液，进行10倍递增稀释。 3）分离接种根据样品污染情况，选择适宜浓度的稀释液1ml，分别加入三个Baird-Parker平板，每个平板接种量分别为 0.3,0.3,0.4ml，然后用灭菌L棒涂布整个平板。如水分不易吸收，可将平板放在 (36+1) ℃ 温箱1h，等水分蒸发后反转平皿置(36+1) ℃ 温箱培养。 4）菌落计数在三个平板上将周围有浑浊带的黑色菌落计数。 5）接种血平板任选5个菌落，分别接种血平板，（36+1）℃ 培养24h后进行革兰氏染色镜检。

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金黄色葡萄球菌的致病性
金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶： a.溶血毒素：外毒素，分α 、β 、γ 、δ ，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞； c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌； e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E及F六种血清型。
季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。
金黄色葡萄球菌的检验
GB4789.10-2010 √第一法：金黄色葡萄球菌的定性检测 √第二法：金黄色葡萄球菌Baird-Parker平板计数 √第三法：金黄色葡萄球菌MPN计数
*金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。肠毒素形成条件：
√存放温度，在37℃内，温度越高，产毒时间越短；
√存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；
√食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。
• 7月2日，大阪府公共卫生研究所证实，从患者饮用剩余的雪印牛奶中检查出了金黄色葡萄球菌，这种葡萄球菌导致A型肠毒素滋生，该毒素可造成饮用者腹泻、呕吐及全身不适。
• 牛奶被污染原因何在？
一、金黄色葡萄球菌的生物学特性
1、形态与染色：(staphylococcus aureus)
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，不运动典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 mm左右，显微镜下排列成葡萄串状。革兰氏染色阳性
金黄色葡萄球菌的定性检验
检样
增菌（7.5％氯化钠肉汤或
10％氯化钠胰酪胨大豆肉汤）
BP平板，血平板
涂片染色
观察溶血报告
BHI肉汤和营养琼脂血浆凝固酶实验
金黄色葡萄球菌的检验
1、样品制备按无菌操作取检样25 g（mL），加入
225 mL灭菌生理盐水，固体样品研磨或置均质器中制成1:10样品混悬液。
＊＊＊当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品，如牛奶和乳制品、肉、蛋等，在温度条件适宜时，经过8～10小时即可产生相当数量的肠毒素，肠毒素可耐受100℃煮沸30分钟而不被破坏。
人摄食该菌污染的食物2～3h后可引起中毒症状，它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。
金黄色葡萄球菌的流行病学特点
供计数检验时，可按十进位递增稀释法将样品匀液再进行适当稀释。
金黄色葡萄球菌的检验
2、增菌及分离培养吸取5 mL混悬液，接种于7.5%氯化钠
肉汤或胰酪胨大豆肉汤50 mL培养基内， 36℃±1℃培养24 h，转种血平板和BairdParker平板， 36℃±1℃培养24 h，挑取血平板上金黄色（有时为白色）菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。
血平板上金黄色葡萄球菌菌落形态
金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血平板上呈金黄色，有时也为白色，大而突出、圆形、不透明、表面光滑，周围有溶血圈。
溶血圈
金黄色葡萄球菌在BP平板上的菌落形态
在Baird-Parker琼脂平板上菌落呈圆形，表面光滑、凸起、湿润，直径2～3 mm。灰黑色至黑色，有光泽，常有浅色（非白色）的边缘，周围绕以不透明圈（沉淀），其外常有一清晰带。当用接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感。有时可见到不分解脂肪的菌株，除没有不透明圈和清晰带外，其他外观基本相同。从长期贮存的冷冻或脱水食品中分离的菌落，其黑色常较典型菌落浅些，且外观可能较粗糙，质地较干燥。
附：金黄色葡萄球菌的显微照片金黄色葡萄球菌的染色照片金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片金黄色葡萄球菌的透射电镜照片

金黄色葡萄球菌的显微照片
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 mm 左右，显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌革兰氏染色显微照片
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜
革兰氏染色阳性
金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 Staphylococcus aureus Enhanced sem w: 7.9 micron
金黄色葡萄球菌的透射电镜照片 Tem x12000 digitized Staphylococcus aureus
2、培养特性：
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，加少量葡萄糖或血液生长更旺盛。需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃，最适生长pH 7.4
金黄色葡萄球菌检验
雪印牛奶中毒事件
• 人民日报（记者于青管克江）报导 6月底以来，日本关西等地区发生特大食品中毒事件，截至6月30日晚间，因喝下有问题的雪印牌低脂肪牛奶而产生上吐下泻、腹痛等不适症状的患者人数为4891人，到7月1日中午，中毒人数已经超过5000人！且受害范围也由原来的5个行政区域扩大至8个。这是战后日本发生的规模最大的一起食品中毒事件。
成分：
胰蛋白胨牛肉膏酵母膏丙酮酸钠甘氨酸氯化锂卵黄亚碲酸钾琼脂
亚碲酸钾
卵磷脂环
甘氨酸、氯化锂
BP平板主要成分及作用
• 氯化锂、甘氨酸抑制非致病性葡萄球菌的生长
• 丙酮酸钠促进葡萄球菌生长
• 亚碲酸钾抑制G-杆菌生长，可被金黄色葡萄球菌还原为碲盐呈黑色
• 卵黄含蛋白质、卵磷脂、脂肪，提供营养和有利于观察卵磷脂环
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在7.5～ 15%NaCl肉汤中生长。
3、生化特性：
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。