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第49卷第8期2021年4月广州化工Guangzhou Chemical IndustryVol.49No.8Apr.2021钩藤不同部位生物碱类成分的含量测定及其质量评价刘小芬I,蔡洪鲍打王琼I,胡嘉璇打聂海澜I,蒋范任2(1益阳医学高等专科学校，湖南益阳413000；2益阳市食品药品检验所，湖南益阳413000)摘要：采用反相高效液相色谱法，对钩藤不同部位异钩藤碱、钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱4种生物碱类成分进行含量测定。
采用Gemini NX C18(250mmX4.6mm,5|im)色谱柱，以1%醋酸钱(A)-乙睛(B)为流动相进行梯度洗脱，流速l.OmL-min-1；检测波长为245nm；柱温25t；进样量10jl L o本方法简便可靠，专属性强，重现性好，适用于钩藤中生物碱的含量测定；钩藤不同部位生物碱类成分含量差异显著。
关键词：钩藤；异钩藤碱；钩藤碱；去氢钩藤碱；异去氢钩藤碱；反相高效液相色谱法；不同部位中图分类号：0657.72；R284.1文献标志码：B文章编号：1001-9677(2021)08-0153-03 Determination and Quality Evaluation of Alkaloids in Different Parts of Uncaria*LIU Xiao-fen,CAI Hong-kun1,WANG Qiong1,HU Jia-xuan,NIE Hai-lan,JIANG Fan-ren'(1Yiyang Medical College,Hunan Yiyang413000；2Yiyang Institute for Food and Drug Control,Hunan Yiyang413000,China)Abstract:The contents of isorhynchophylline；rhynchophylline,corynoxeine and isocorynoxeine in different parts of Uncaria were determined by RP-HPLG.The method was performed on a Gemini NX C18chromatographic column(250mmx 4.6mm,5|JLm),with1%ammonium acetate(A)-acetonitrile(B)as the mobile phase with gradient elution,the flow rate was1.0mL•min-1,the detect wavelength was245nm,the column temperature was25T,and the injection volume was10p,L.The method was simple,reliable,specific and reproducible.It was suitable for the determination of alkaloids in Uncaria.The contents of alkaloids in different parts of Uncariawere significantly different.Key words:uncaria;isorhynchophylline；rhynchophylline；corynoxeine；isocorynoxeine；RP-HPLC；different parts钩藤是《中国药典》収载品种，为茜草科植物钩藤干燥带钩茎枝，秋冬两季采收。
HPLC测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的方法学探讨目的：探讨钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的HPLC含量测定方法。
方法：采用RP-HPLC，对钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的HPLC含量测定方法学进行考察，同时采用HPLC-ESI-MS研究钩藤碱和异钩藤碱在加热过程中的化学成分转化情况。
结果：钩藤碱在0.064～5.100 mg线性关系良好，精密度良好；当样品采用回流提取时，平均加样回收率87.51%～88.83%，提取回收率12.60%；当样品采用超声提取时，平均加样回收率99.48%～103.2%，提取回收率47.08%。
异钩藤碱在0.064～5.110 mg线性关系良好，精密度良好；当样品采用回流提取时，平均加样回收率107.9%～113.9%，提取回收率40.00%，当样品采用超声提取时，平均加样回收率97.00%～99.59%，提取回收率51.03%。
质谱分析结果表明回收率不合格的原因是钩藤碱在提取过程中大部分转化为异钩藤碱，有一小部分转化为未知成分；异钩藤碱在提取过程中转化为钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱及22-O-β-D-glucopyranosyl isocorynoxeinic acid 4种成分。
结论：HPLC测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱宜采用超声提取法，并应注意回收率问题。
标签：钩藤；钩藤碱；异钩藤碱；HPLC钩藤为茜草科植物钩藤Uncaria rhynchophylla、大叶钩藤U. rhynchophylla、毛钩藤Uncaria hirsuta、华钩藤U. sinensis或无柄果钩藤U. sessili fructus的干燥带钩茎枝[1]，主要分布于江西、广东、广西等地。
钩藤始载于《名医别录》，现仍为临床常用中药，主治小儿寒热，十二惊痫等[2-4]。
现代研究表明，钩藤的有效成分为吲哚类生物碱，主要为钩藤碱和异钩藤碱等，具有降血压、抗心律失常及抗血小板聚集和抗血栓形成作用[5-6]。
《中国药典》2010年版（一部）中钩藤的质量标准简单，未收录含量测定项。
HPLC法测定钩藤提取物中钩藤碱含量作者：张建奇金海燕来源：《科学与财富》2018年第35期摘要：建立反相高效液相色谱法测定钩藤提取物中钩藤碱的含量。
方法：采用奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-甲醇-5mmol/L乙酸铵水溶液用氨水调pH=9.8（20：30：50）为流动相，检测波长为240nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。
钩藤碱在5～50μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
钩藤碱平均回收率分别为99.5%。
结论：本法简便、准确，可用于钩藤提取物中钩藤碱的含量测定。
关键词：钩藤提取物；含量；测定钩藤始载于《别录》，原名钓藤。
钩藤别名为吊藤（陶弘景）、钓钩藤（《滇南本草》）、金钩藤（《贵州民间方药集》）、挂钩藤（《药材学》）、钩耳（《湖南药物志》）等。
钩藤具有清热平肝，熄风止痉的功效。
《本草新编》记载：“钩藤，去风甚速，有风症者必宜用之。
但风火之生，多因于肾水不足，以致木燥火炎，于补阴药中，少用钩藤，则风火易散，倘全不补阴，纯用钩藤以祛风散火，则风不能息，而火且愈炽矣。
”钩藤具有抗炎、镇痛、抗肿瘤等多种药理作用[1-4]。
本文采用高效液相法对钩藤提取物中的钩藤碱的进行了含量测定。
1 仪器与试药1.1 仪器：VWR天平防震垫（北京慧龙环科环境仪器有限公司）；JJ-BF 0.001g天平（上海仁沃实业发展有限公司）；天星进样瓶清洗机TX-500型（北京天星科仪科技有限公司）；LC1620A高效液相色谱仪（河南郑州南北仪器设备有限公司）；长城狮鼎SHB-III型台式循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；Milli-Q Direct水纯化系统（上海力晶科学仪器有限公司）；新芝scientz-T超声波提取机（宁波新芝生物科技股份有限公司）。
1.2 色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）。
1.3 对照品：钩藤碱。
HPLC法测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱含量[摘要]目的建立中药钩藤中钩藤碱和异钩藤碱含量的高效液相色谱检测方法，为中药钩藤中有效成分的含量测定提供科学的参考。
方法高效液相色谱条件为：色谱柱 phenomenex c18 （250 nm ×4.0 nm， 5μm），流动相：甲醇-水（55∶45），紫外检测波长：254 nm，流速：1.0 ml/min，柱温：28℃，进样量：20μl。
结果以峰面积为纵坐标浓度为横坐标，计算得到钩藤碱和异钩藤碱回归方程分别为y=0.999 e + 6x-21 133，r2=0.9998和y=1.008 e+ 6x-13 556，r2=0.9999。
结果显示钩藤碱和异钩藤碱分别在0.244～1.534 μg和0.226～1.288 μg浓度范围内其浓度与峰面积具有良好的线性关系。
另外本法在精密度、稳定性、重复性上均取得了较好结果。
结论高效液相色谱法测定钩藤中藤碱和异钩藤碱含量，具有快速、简便、重复性好的特点，值得在中药含量测定上大力推广应用。
[关键词] 钩藤；钩藤碱；异钩藤碱；含量检测；高效液相色谱法[中图分类号] r284.1 [文献标识码] b [文章编号] 2095-0616（2013）13-97-02study of the content determination of rhynchophylline and isorhynchophylline in uncaria rhynchophylla by hplczhao xiaoli ma yanhenan province zhumadian institute for food and drugcontrol，zhumadian 463000，china[abstract] objective establish the hplc method to determine the contents of rhynchophylline and isorhynchophylline in uncaria rhynchophylla and provide scientific guidance for determining the contents of active ingredient in uncaria rhynchophylla. methods contents of rhynchophylline and isorhynchophylline was measured by hplc. column of diamonsi （250 nm×4.0 nm，5μm），solvent system：methanol︰h2o（55︰45），uv wave：254 nm，flow rate：1.0 ml/min，column temperature：28℃，injection volume：20μl. results we established the regression equation of rhynchophylline and isorhynchophylline y=0.999 e+6x-21133，r2=0.9998 and y=1.008 e+ 6x-13556，r2=0.9999，by making peak area as the ordinate and concentration as abscissa. moreover this method got good results in precision，stability and repeatability. conclusion the method that determining the contents of rhynchophylline and isorhynchophylline in uncaria rhynchophylla by hplc has the advantage on quick，simple，reproducible，and has a huge value in determining the contents of chinese traditional medicine.[key words] uncaria rhynchophylla；rhynchophylline；isorhynchophylline；content determine；hplc钩藤（uncaria rhynchophylla）是一种具有降血压、镇静、抗惊厥作用的传统中药[1]。
钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定在预后中的应用分析张恒;饶坤林【摘要】目的：：探讨钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定在预后中的应用。
方法：采取水煎液以及甲醇提取液的方式对钩藤中的钩藤碱及异钩藤碱进行提取,并使用高效液相色谱系统分别对其提取的含量进行测定。
结果：在2．5~80μg/mL的范围内钩藤碱的线性关系良好,此时的回归方程为Y=76．7170X-0．0727(r=0．9998),RSD<8．7%；在2．0 ~80μg/mL的范围内异钩藤碱的线性关系良好,此时的回归方程为Y=87．4729X-0．3666(r=0．9997),RSD<7．3%。
甲醇提取液的方式所提取钩藤碱和异钩藤碱的含量高于水煎液的方式,并且使用二十倍质量的甲醇量,24 h的冷侵时间以及60 min的超声时间最合适。
结论：使用甲醇进行提取在用于钩藤中钩藤碱及异钩藤碱中作用优异,对其质量的控制性好,重复性高,操作方法简单,可提高预后,值得在临床上应用推广。
%Objective:To explore the application of extraction and content determination in the prognosis of uncaria rhynchophyl-line and isorhynchophylline in Gambir Plant Nod. Methods:The uncaria rhynchophylline and isorhynchophylline extract was taken by water extract and methanol extract methods, and the content of the extract was determined by high performance liquid chroma-tography. Results:The good linear relationship of rhynchophylline was in the range of 2. 5~80μg/mL, the regression equation for the time Y=76. 717 0X-0. 072 7(r=0. 999 8),RSD<8. 7%; In the linear relationship between the range of 2. 0~80 μg/mL, rhynchophylline was good, the regression equation for the timeY=87. 472 9X-0. 366 6(r=0. 999 7), RSD<7. 3%. The content of rhynchophylline and isorhynchophylline extracted by methanol extraction liquid was higher than those extracted by the water. And the best way to extract the contents was under the condition of 20 times the maximum amount of methanol, 24 hours of the invasion of cold time and 60 min of sonication. Conclusion:The methanol extraction method is prominent in extracting in un-caria rhynchophylline and isorhynchophylline, with good quality control, high repeatability, simple operation, and effect of impro-ving prognosis, which is worthy of clinical application and promotion.【期刊名称】《世界中医药》【年(卷),期】2016(011)007【总页数】4页(P1331-1333,1336)【关键词】钩藤碱;异钩藤碱;提取方法【作者】张恒;饶坤林【作者单位】湖北省荆州市中心医院药学部，荆州，434020;湖北省荆州市中心医院药学部，荆州，434020【正文语种】中文【中图分类】R284.2钩藤是一种传统中药，其种类众多，有钩藤、毛钩藤、大叶钩藤、华钩藤等，有15种，属于一种茜草科植物[1-2]。
