(整理)基因重组与基因工程
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【导语】既然⼈⽣的幕布已经拉开,就必须要⽤⼼的演出;既然脚步已经跨出,风⾬坎坷也不能退步;既然我已把希望播在那⾥,就必须要坚持到胜利的谢幕……⾼⼆频道为你整理了以下⽂章,希望可以帮到你! 【⼀】 ⼀、基因⼯程的概念 基因⼯程是指按照⼈们的愿望,进⾏严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予⽣物以新的遗传特性,创造出更符合⼈们需要的新的⽣物类型和⽣物产品。
基因⼯程是在DNA分⼦⽔平上进⾏设计和施⼯的,⼜叫做DNA重组技术。
⼆、基因⼯程的原理及技术原理:基因重组技术 基因⼯程的基本⼯具 1.“分⼦⼿术⼑”——限制性核酸内切酶(限制酶) (1)来源:主要是从原核⽣物中分离纯化出来的。
(2)功能:能够识别双链DNA分⼦的某种特定的核苷酸序列,并且使每⼀条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸⼆酯键断开,因此具有专⼀性。
(3)结果:经限制酶切割产⽣的DN*段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端. 2.“分⼦缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的⽐较: ①.相同点:都缝合磷酸⼆酯键。
②.区别:E•coliDNA连接酶来源于T4噬菌体,只能将双链DN*段互补的黏性末端之间的磷酸⼆酯键连接起来;⽽T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作⽤的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸⽚段的末端,形成磷酸⼆酯键。
DNA连接酶是连接两个DN*段的末端,形成磷酸⼆酯键。
3.“分⼦运输车”——载体 (1)载体具备的条件: ①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有⼀⾄多个限制酶切点,供外源DN*段插⼊。
③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。
(2)最常⽤的载体是质粒: 它是⼀种*露的、结构简单的、独⽴于细菌染⾊体之外,并具有⾃我复制能⼒的双链环状DNA分⼦。
(3)其它载体:噬菌体的衍⽣物、动植物病毒 基因⼯程的基本操作程序 第⼀步:⽬的基因的获取 1.⽬的基因是指:编码蛋⽩质的结构基因。
基因工程知识点整理1DNA技术,是指对不同生物的遗传基因,根据人们的意愿,进行基因的切割、拼接和重新组合,再转入生物体内,产生人们所期望的产物,或创造出具有新的遗传特征的生物类型。
2DNA片段,这种DNA片段被称为“目的基因”;二是将目的基因与质粒或病毒DNA连接成重组DNA(质粒和病毒DNA称为载体);三是把重组DNA引入某种细胞(称为受体细胞);四是把能表达目的基因的受体细胞挑选出来。
3“DNA→RNA→蛋白质”这一方向进行的,相反的信息传递即“RNA→DNA RNA为模板,反转录出一条DNA单链,再以互补的方式加倍成DNA双链。
56等动物)或其组成部分(器官、组织、细胞等)发展新工艺或新产品的一种科学技术体系。
7DNA(20世纪40年代)②搞清楚了DNA的双螺旋结构和半保留复制激励==机理(20世纪50年代)③确定了遗传信息的传递方式(20世纪60年代)。
8、①DNA切割和连接技术②基因工程载体的研究③DNA重组技术。
9DNA重组、细胞培养和DNA芯片三个平台取得的成果。
10基因组长达3×109碱基对的序列,发明所有的人类基因并阐明它们在染色体上的位置,从而揭示人类的遗传信息。
11品毒性②食品过敏性③产生抗生素抗性④导致食物营养价值下降或体内营养素紊乱。
1213离心法、碱变性法和微量碱变性法。
14、基因工程涉及一系列作用于DNA或RNA的酶催化反应,包括核酸的切割、连接、聚合、转录及反转录等,这些酶均是基因工程不可或缺的工具。
15DNA切割成大小不同的片段,然而要将不同的片段连接起来组成新的杂种DNA片段,则需要连接酶的作用。
目前有三种方法可将体外DNA连接起来:其一是用DNA连接酶连接具有互补黏性末端的DNA片段;其二是用T4 DNA连接酶直接将平末端的DNA连接起来,或是用末端核苷转移酶给平末端的DNA片段加上poly(dA)—poly(dT)尾巴之后,再用DNA连接酶将它们连接起来;其三是先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头,使之形成黏性末端之后,再用DNA连接酶将它们连接起来。
基因重组的方式近十几年,基因工程技术及基因重组的方式的发展,在很大程度上影响了生物学的发展,也深刻影响了人们对疾病治疗的认识,把有关基因疾病的细节掌握在自己手中,做出一系列修复或者优化,以帮助人们解决生活中的病痛。
一、基因重组的方式基因重组是把一个或多个基因片段从一个DNA分子复制,并将它们插入另一个DNA分子的过程。
基因重组可以用于改变一种有机生物的各种行为,如形态、生长、代谢、发育和可塑性,以及抗逆性或致病性。
有几种常见的基因重组技术,如克隆、插入、嵌合、突变等,它们在形成由定向复制、基因修饰、基因克隆、转基因有机体等方面,都发挥着重要作用。
克隆是指从细胞或器官分离和复制DNA片段(即基因克隆),以获取需要的基因片段,实现特定基因的克隆。
克隆的方案可以分为体外克隆和体内克隆两种,体外克隆技术指的是从外部提取待克隆的DNA 片段,将其与适当的载体宿主混合,然后将克隆的基因片段复制到适当的宿主接受体中,以实现克隆的目的;而体内克隆技术则是在宿主体中发生的,这种方式广泛应用于人工转化植物,并被用于研究有机生物的染色体变化以及转基因动物研究方面。
插入是指在没有复制DNA片段的情况下,将一个或多个基因片段插入DNA分子中以改变其行为,从而实现基因重组的一种技术。
插入通常指的是一种器官插入技术,即在植物、动物或细菌的某个器官中添加额外的基因,以达到预期的目的。
嵌合是指将两个或多个DNA片段连接在一起,以产生包含不同DNA之前没有的特定基因序列,从而改变DNA分子的性质和功能,形成新的基因组合。
嵌合技术有助于研究有关疾病的家系谱系、遗传学规律、形态遗传及染色体结构的改变等,为更好地掌握疾病的发病机制和遗传变异的过程提供重要的信息。
突变指的是在DNA序列中发生的改变,其结果可能是基因的编码功能的失去或增加,使基因的功能发生明显的变化,从而影响有机体的性状和适应性。
突变技术被广泛应用于转基因动物及细菌中,以得到改良后的有机体,从而实现基因重组。
生物学知识点基因工程基因工程是生物学中的一个重要分支,它涉及到对基因的操作和改造,以达到改良生物体的目的。
本文将介绍基因工程的基本概念、技术方法以及应用领域。
一、基因工程的概念与原理基因工程是指通过对生物体的基因进行人为的操作和改造,以达到改良生物体的目的的一门学科。
其基本原理是利用现代分子生物学的技术手段,对生物体的基因进行剪接、克隆、转移等操作,从而实现对生物体特性的调控和改变。
基因工程的核心技术是基因重组技术,即将不同生物体的基因进行重组,形成新的基因组合,然后将其导入目标生物体中,使其表达出新的特性。
基因重组技术主要包括以下几个步骤:1. DNA提取:从生物体中提取出含有目标基因的DNA片段。
2. 基因剪接:利用限制酶将目标基因与载体DNA进行剪接,形成重组DNA。
3. 转化:将重组DNA导入到宿主细胞中,使其表达出目标基因。
4. 选择与筛选:通过选择性培养基或标记基因等方法,筛选出带有目标基因的转基因细胞或生物体。
5. 鉴定与分析:对转基因细胞或生物体进行鉴定和分析,确认其是否成功表达目标基因。
二、基因工程的应用领域1. 农业领域:基因工程在农业领域的应用十分广泛。
通过基因工程技术,可以改良农作物的抗病性、耐逆性和产量等性状,提高农作物的品质和产量。
例如,转基因水稻可以提高抗虫性和耐盐碱性,转基因玉米可以提高抗除草剂和杂草的能力。
2. 医学领域:基因工程在医学领域的应用主要包括基因治疗和基因诊断。
基因治疗是指利用基因工程技术,将正常的基因导入到患者体内,以治疗遗传性疾病或其他疾病。
基因诊断是指通过对患者的基因进行检测和分析,以确定患者是否携带某种疾病的遗传基因。
3. 环境保护领域:基因工程可以应用于环境污染治理和生物修复。
通过基因工程技术,可以改造微生物,使其具有降解有机污染物的能力,从而实现对环境污染物的清除和修复。
4. 工业领域:基因工程在工业领域的应用主要包括生物制药和生物能源。
选修3易考知识点背诵专题1 基因工程基因工程的概念1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有特异性。
(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较:①相同点:都缝合磷酸二酯键。
②区别:E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。
DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。
③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。
(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
(3)其它载体:噬菌体、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取1.目的基因是指:是人们所需要转移或改造的基因2.获取目的基因的方法____________ _________________ _____________3.原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成。
人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。
4.PCR技术扩增目的基因(1)原理:DNA双链复制(2)过程:第一步:加热至90~95℃DNA解链;第二步:冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
⾼中⽣物必修⼆基因⼯程 基因⼯程是指按照⼈们的愿望,进⾏严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予⽣物以新的遗传特性,创造出更符合⼈们需要的新的⽣物类型和⽣物产品。
下⾯是店铺为⼤家整理的⾼中⽣物必修⼆基因⼯程,希望对⼤家有所帮助! ⾼中⽣物必修⼆基因⼯程⼀ ⼀、基因⼯程的概念 基因⼯程是指按照⼈们的愿望,进⾏严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予⽣物以新的遗传特性,创造出更符合⼈们需要的新的⽣物类型和⽣物产品。
基因⼯程是在DNA分⼦⽔平上进⾏设计和施⼯的,⼜叫做DNA重组技术。
⼆、基因⼯程的原理及技术原理:基因重组技术 基因⼯程的基本⼯具 1.“分⼦⼿术⼑”——限制性核酸内切酶(限制酶) (1)来源:主要是从原核⽣物中分离纯化出来的。
(2)功能:能够识别双链DNA分⼦的某种特定的核苷酸序列,并且使每⼀条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸⼆酯键断开,因此具有专⼀性。
(3)结果:经限制酶切割产⽣的DNA⽚段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端. 2.“分⼦缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的⽐较: ①.相同点:都缝合磷酸⼆酯键。
②.区别:E•coliDNA连接酶来源于T4噬菌体,只能将双链DNA⽚段互补的黏性末端之间的磷酸⼆酯键连接起来;⽽T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作⽤的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸⽚段的末端,形成磷酸⼆酯键。
DNA连接酶是连接两个DNA⽚段的末端,形成磷酸⼆酯键。
3.“分⼦运输车”——载体 (1)载体具备的条件: ①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有⼀⾄多个限制酶切点,供外源DNA⽚段插⼊。
③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。
(2)最常⽤的载体是质粒: 它是⼀种裸露的、结构简单的、独⽴于细菌染⾊体之外,并具有⾃我复制能⼒的双链环状DNA分⼦。
高中生物重点学习的就是遗传学、基因重组等,基因工程我们都知道,这也是属于基因重组。
那么基因重组有哪些类型呢,各自有什么特点?
基因重组的类型有3种,分别是:减数第一次分裂的前期,同源染色体的非姐妹染色单体交叉互换;减数第一次分裂的后期,随着等位基因的分离,非同源染色体上的等位基因自由组合;基因工程中,人们将目的基因加到运载体上再导入受体细胞,这也属于基因重组。
根据重组的机制和对蛋白质因子的要求不同,可以将狭义的基因重组分为三种类型,即同源重组、位点特异性重组和异常重组。
1、自然重组
自然界不同物种或个体之间的基因转移和重组是经常发生的,它是基因变异和物种进化的基础。
2、噬菌体
噬菌体的基因重组和细菌不同,而和真核的重组十分相似。
杂交是用标记不同的噬菌体之间进行。
然后计算重组噬菌体占总的子代噬菌体的比例来确定重组值。
3、基因重组知识
首先,基因重组的概念:控制不同形状的基因重新组合。
第二,发生时间:减数分裂过程中。
第三,也就是您问到的“类型”:共分为两种:(注意发生的两个时期)。
1、简单来说就是减数分裂形成四分体时,同源染色体上的非姐妹染色单体之间的交叉互换(发生在前期);
2、即减数第一次分裂后期非同源染色体的自由组合导致的非等位基因的自由组合。
第四,其意义:基因重组为生物的变异提供了极其丰富的来源,是生物变异的主要来源,为生物进化提供原材料。
可编辑修改精选全文完整版基因工程一、基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
由于基因工程是在二、基因工程的基本工具1、限制性核酸内切酶-----“分子手术刀”2、DNA连接酶-----“分子缝合针”3、基因进入受体细胞的载体-----“分子运输车”1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)存在:主要存在于原核生物中。
(2)特性:特异性,一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。
(3)切割部位:磷酸二酯键(4)作用:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
(5)识别序列的特点:(6)切割后末端的种类:DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——黏性末端和平末端。
当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端,而当限制酶在它识别序列的中轴线处切开时,产生的则是平末端。
2.“分子缝合针”——DNA 连接酶(1)作用:将限制酶切割下来的DNA 片段拼接成DNA 分子。
(2)类型相同点:都连接磷酸二酯键3.“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一个至多个限制酶切点,供外源DNA 片段插入。
③具有标记基因,供重组DNA 的鉴定和选择。
(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核之外,并具有自我复制种类 E ·coli DNA 连接酶 T 4DNA 连接酶 来源 大肠杆菌 T 4噬菌体 功能特性只能将双链DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来 缝合两种末端,但连接平末端之间的效率较低能力的双链环状DNA分子。
(3)其他载体:λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。
什么是基因重组如今,生物技术已蓬勃发展,基因重组技术是其中不可或缺的重要组成部分。
它不仅对生命科学的发展影响深远,同时也成为帮助改变世界的重要基石。
以下是关于基因重组技术的科普:1、基因重组技术简介基因重组技术是一种基因工程技术,它以生物学原理为基础,通过将两个或多个不同基因组合,以获取更多新型基因来完成生物体遗传结构变异的技术。
它可以将基因片段的信息从一个细胞或物种转移到另一个细胞或物种,明显地改变了——甚至是完全替代——母体的特征基因,实现了全新的基因组合,形成重组。
2、基因重组技术的应用(1)基因重组技术可以用于培养新品种,改善或调控植物的生长性状。
植物基因重组技术可以帮助提高农作物的耐旱性,耐盐性,耐热性,以及抵抗病害的能力。
(2)基因重组技术可用于研究植物的发育,测定外源 DNA的特性,确定基因的表达模式,培育抗性品种,以及发现新的植物基因组。
(3)基因重组技术也可以用于研究异常细胞的发展,并介入基因表达调控,以及植物性状转移。
3、基因重组技术的研究方法(1)克隆基因技术:克隆技术可以从不同细胞中检测、克隆和表达基因,这一技术在基因重组技术中具有重要意义。
(2)染色质免疫沉淀(CIAP): CIAP技术可以在细胞内查找病原体的DNA,这种技术允许快速识别病原体的病毒,以及利用特异性核酸特征来克隆和分离特定的基因特异性信息。
(3)传递性痕量组学(TIMS):通过TIMS,准确的分析痕量水平的特性,可以有效地提高基因重组技术的效率。
TIMS也可以让研究者对池中基因片段中生物学功能进行研究。
综上所述,基因重组技术已经在生物技术领域取得了重大突破,其技术有着广泛的应用前景,同时也将促进生物安全的进一步发展。
复习提纲1.什么是基因?基因:DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位。
2.基因工程的诞生基因工程诞生于1973年。
1973-1974年,美国科学家科恩等以大肠杆菌为材料,成功地进行了三次基因工程试验。
试验结果证明,用基因工程可以打破不同物种间在亿万年中形成的天然屏障,任何不同种类生物的基因都有可能通过基因工程技术而组合到一起。
人类进入了激动人心的基因工程时代。
3.基因工程的定义及三大基本元件。
定义:基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技术两大组成部分。
上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建(即重组DNA技术);而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。
三大基本元件:限制性核酸内切酶(restriction enzymes)/DNA连接酶(ligase)/基因工程载体(vector)4.基因工程的研究内容(1) 从生物有机体复杂的基因组中,分离出带有目的基因的DNA片段;(2) 在体外,将带有目的基因的DNA片段连接到能够自我复制并具有选择标记的载体分子上,形成重组DNA分子;(3) 将重组DNA分子引入(转)到受体细胞(亦称宿主细胞或寄主细胞);(4) 从大量的细胞繁殖菌落中,筛选出具有重组DNA分子的细胞克隆;(5) 将目的基因克隆到表达载体上,导入寄主细胞,使之在新的遗传背景下实现功能表达,产生出所需要的物质。
5.基因工程的技术准备及技术支撑。
技术准备技术支撑:核酸凝胶电泳技术核酸分子连接技术/细菌转化技术/DNA序列分析技术/寡核苷酸合成技术/基因定点突变技术/聚合酶链式反应(PCR)技术5.基因工程的基本用途分离、扩增、鉴定、研究、整理生物信息资源大规模生产生物活性物质设计、构建生物的新性状甚至新物种基因工程在农业生产中的应用1.提高植物的光合作用效率2.提高豆科植物的固氮效率3.转基因植物4.转基因动物基因工程在工业中的应用1.纤维素的开发利用2.酿酒工业基因工程在医药上的应用1.用转基因植物或动物生产药物2.用微生物生产药物3.设计高效高特异性的生物制剂4.研制疫苗5.基因诊断6.法医鉴定7.基因治疗基因工程在环境保护中的应用1.检测水污染2. 生物降解7.核酸酶的分类1)根据核酸底物分RNA酶(Rnase)/DNA酶(Dnase)/底物非专一性核酸酶;2)根据作用方式分内切核酸酶(endonuclease)/外切核酸酶(exonuclease);3) 根据对底物碱基专一性分碱基专一性核酸酶(切割部位的碱基序列高度专一性)非碱基专一性核酸酶(切割部位的碱基序列随机性)8.细菌中的防卫系统:限制与修饰现象。
高中生物选修三基因工程知识点总结基因工程是生物选修三课本的内容,也是高中生要掌握的重要知识点。
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基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。
二、基因工程的原理及技术原理:基因重组技术基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。
(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端.2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较:①.相同点:都缝合磷酸二酯键。
②.区别:E•coliDNA连接酶来源于T4噬菌体,只能将双链DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。
DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。
③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。
(2)最常用的载体是质粒:它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
(3)其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取1.目的基因是指:编码蛋白质的结构基因。
生物化学试题及答案(14)第十四章基因重组与基因工程[测试题]一、名词解释:1. 基因工程(genetic engineering)。
2. 接合作用(conjugation )。
3. 转化作用(transforation )。
4. 转导作用(transduction )。
5. 转座(transposition )。
6. 转座子(transposons )。
7. 同源重组(homologous recombination )。
8. 基本重组(general recombination )。
9. DNA克隆(DNA cloning )。
10. 复制子( replicon )。
11. 限制性核酸内切酶(restriction endonuclease )。
12. 回文结构(palindrome )。
13. 配伍末端(compatible end )。
14. 目的DNA (target DNA)。
15. 互补DNA (complementary DNA;cDNA )。
16. 克隆载体(cloning vector )。
17. 表达载体(expression vector )。
18. 质粒(plasmid )。
19. α—互补(alpha complementation )。
20. 基因组DNA文库( genomic DNA library )。
21. 标志补救(marker rescue )。
22. 转染(transfection )。
23. 基因组DNA (genomic DNA)。
24. 感受态细胞(competent cell )。
25. 聚合酶链反应(polymerase chain reaction )。
26. cDNA文库(cDNA library )。
27. 保守性转座(conservative transposition )。
28. 复制性转座(duplicative transposition )。
基因重组与基因工程一、选择题1.F因子从一个细胞转移至另一个细胞的基因转移过程称为:A.转化B.转导C.转染D.转座E.接合2.通过自动获取或人为地供给外源DNA使受体细胞获得新的遗传表型,称为:A.转化B.转导C.转染D.转座E.接合3.溶原菌是指:A.整合了噬菌体基因组的细菌B.整合了质粒基因组的细菌C.含有独立噬菌体基因组的细菌D.含有独立质粒基因组的细菌E.含有独立噬菌体和质粒基因组的细菌4.由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为:A.转化B.转导C.转染D.转座E.接合5.由整合酶催化、在两个DNA序列的特异位点间发生的整合称为:A.位点特异的重组B.同源重组C.基本重组D.随机重组E.人工重组6.发生在同源序列间的重组称为:A.位点特异的重组B.非位点特异的重组C.基本重组D.随机重组E.人工重组7.限制性核酸内切酶切割DNA后产生:A.5'磷酸基和3'羟基基团的末端B.3'磷酸基和5'羟基基团的末端C.5'磷酸基和3'磷酸基团韵末端D.5'羟基和3'羟基基团的末端E.以上都不是8.可识别并切割特异DNA序列的称:A.限制性核酸外切酶B.限制性核酸内切酶C.非限制性核酸外切酶D.非限制性核酸内切酶E.DNA酶9.限制酶的识别顺序通常是:A.聚腺苷酸B.聚胞苷酸C.RNA聚合酶附着点D.回文对称序列E.甲基化“帽”结构10.限制酶:A.从噬菌体中提取而得B.可将单链DNA任意切开C.可将双链DNA任意切开D.可将双链DNA特异切开E.不受DNA甲基化影响.11.限制酶的作用特性不包括:A.在对称序列处切开DNAB.同时切开双链DNAC.DNA两链的切点常在同一位点D.酶切后的DNA片段多具有粘性互补末端 E.酶辨认的碱基一般为4—6个12.限制酶的特点不包括:A.只识别一种核苷酸序列B.其识别不受DNA来源的限制C.不同生物的DNA经相同限制酶切割后产生相同末端D.对双链和单链DNA同样切割E.同一限制酶在一DNA分子上可有数个切点13.关于限制酶的叙述错误的是:A.能识别DNA特定的碱基顺序并在特定的位点切开DNA B.切割点附近的碱基顺序一般呈回文结构C.它能专一降解经甲基化修饰的DNAD.是重组DNA的主要工具酶E.主要从细菌中获得14.在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的是DNA的:A.聚合酶B.解链酶C.连接酶D.拓扑酶E.内切酶15.在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指: A.建立单克隆抗体B.建立多克隆抗体C.构建重组DNA分子D.无性繁殖DNA-E.有性繁殖DNA16.无性繁殖依赖DNA载体的最基本性质是:A.青霉素抗性B.卡那霉素抗性C.自我复制能力D.自我转录能力E.自我表达能力17.重组DNA技术领域常用的质粒DNA是:A.细菌染色体DNA的一部分B.细菌染色体外的独立遗传单位C.病毒基因组DNA的一部分D.真核细胞染色体DNA的一部分E.真核细胞染色体外的独立遗传单位18.pBR322是:A.天然的酵母质粒B.经人工改造的酵母质粒C.天然的大肠杆菌质粒D.经人工改造的大肠杆菌质粒E.经人工改造的噬菌体19.基因工程的操作程序可简单地概括为:A.载体和目的基因的分离、提纯与鉴定B.分、切、接、转、筛C.将重组体导人宿主细胞,筛出含目的基因的阳性株 D.将载体和目的基因接合成重组体E.限制酶的应用20.基因工程的基本过程不包括:A.载体和目的基因的分离B.限制酶的切割C.DNA重组体的形成及转化D.重组体的筛选与鉴定E.重组体的序列分析21.理想的基因工程载体应:A.分子尽可能大B.有适宜的限制酶切割位点C.含有多个耐药性基因D.不易在宿主细胞间转移E.能整合于宿主细胞DNA,并随其复制22.下列哪一种物质不能作为基因(克隆)载体:A.质粒B.λ噬菌体C.M13噬菌体D.病毒RNAE.逆转录病毒DNA23.用于转化哺乳类动物细胞的常用载体是:A.质粒B.λ噬菌体C.M13噬菌体D.逆转录病毒DNAE.大肠杆菌基因组24.关于建立cDNA文库的叙述,错误的是:A.从特定组织中提出mRNAB.将特定细胞的DNA用限制酶切割后,克隆到噬菌体或质粒中C.用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNAD.用DNA聚合酶,以单股DNA为模板合成双链DNAE.加SAM,以使新生的DNA双链甲基化25.cDNA文库包括该种生物:A.某些蛋白质的结构基因B.所有蛋白质的结构基因C.所有结构基因D.结构基因与不表达的调控区E.内含子和调控区26.某限制性内切核酸酶切割5'…GGGGGG …3'序列后产生:A.5'突出末端B.3'突出末端C.5'及3'突出末端D.5'或3'突出末端E.平头末端27.目的基因与载体连接不涉及:A.限制酶B.单链核酸酶C.末端脱氧核苷酸转移酶D.DNA连接酶E.核酸外切酶28.理想的宿主细胞不应有下列哪种特点:A.易接纳重组子B.对载体的复制扩增无严格限制C.不存在特异的限制酶体系以降解外源DNAD.不对外源DNA进行修饰E.含有载体的筛选标记基因29.基因工程中不需要:A.限制酶B.基因载体C.DNA连接酶D.末端脱氧核苷酸转移酶E.核酶30.重组噬菌体DNA转入宿主细胞的过程属于:A.转化B.转导C.转位D.转染E.转录31.有关重组体转化及表达的叙述,错误的是:A.宿主细胞经CaCl2处理后对重组体的通透性增加B.电击法也可增加宿主细胞的通透性C.噬菌体为载体的重组体必须以体外包装的方式转化宿主细胞 D.真核基因难于在原核细胞中表达E.转化生殖细胞可采用直接导入的方法32.连接目的基因与载体不能采用:A.粘端连接B.平端连接C.尾接法D.人工连接器E.非共价键连接33.直接针对目的DNA进行筛选的方法是:A.青霉素抗药性B.氨卞青霉素抗药性C.分子杂交D.分子筛E.电泳34.“克隆”某一目的DNA的过程不包括: A.基因载体的选择与构建B.外源基因与载体的拼接C.重组DNA分子导入受体细胞D.筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞 E.表达目的基因编码的蛋白质35.表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是:A.E.coli表达体系B.原核表达体系C.酵母表达体系D.昆虫表达体系E.哺乳类细胞表达体系36.不能用作克隆载体的DNA是:A.质粒DNAB.噬菌体DNAC.细菌基因组DNAD.腺病毒DNAE.逆转录病毒DNA37.克隆的真核黄素基因组DNA可在多种系统表达,例外的是:A.E.coli表达体系B.酵母表达体系C.昆虫表达体系D.COS细胞表达体系E.CHO细胞表达体系38.原核生物的粘端连接方式不涉及;A.质粒B.限制性核酸内切酶C.核酸外切酶D.退火E.DNA连接酶二、X型选择题1.自然界基因转移可能伴发基因重组的有:A.接合作用B.转化作用C.转导作用D.转座2.基因组通常是指:A.一个病毒所含的全套基因B.几个基因组成的DNA片段C.体细胞或生殖细胞所含的一整套基因D.一条染色体上所含的全部基因3.基因工程的特点:A.在细胞水平上操作B.在分子水平上操作C.在细胞水平上表达D.在分子水平上表达4.基因工程过程涉及:A.载体和目的基因的分离B.限制酶切割载体和目的基因C.DNA重组体的转化与表达D.DNA重组体扩增、筛选与鉴定5.限制酶:A.能识别并切开DNA分子中某些碱基序列B.酶辨认的碱基序列具有回文结构C.酶辨认的碱基序列不具有倒转的重复顺序D.能切断DNA的一条单链6.限制酶作用于DNA;A.可将单链DNA特异切开B.可将双链DNA任意切开C.酶切后可产生粘性末端D.酶切后可产生平头末端7.经限制酶切割的DNA,可产生:A.粘性末端B.平头末端C.带有5' -磷酸基的末端D.带有3' -羟基的末端8.目的基因的获得,可以:A.直接从染色体DNA中分离B.利用已知序列人工合成C.提取mRNA,逆转录合成cDNAD.利用探针自基因文库中“钓”取9.在分子克隆中,目的DNA的获取途径有:A.基因组DNA文库B.真核细胞染色体DNAC.真核细胞mRNA反转录获得的cDNAD.聚合酶链式反应10.从基因组DNA文库或cDNA文库分离、扩增某一感兴趣基因的过程就是: A.基因克隆B.分子克隆C.重组DNA技术D.构建基因组DNA文库11.可用作克隆基因载体的DNA有:A.细菌质粒DNAB.噬菌体DNAC.病毒DNAD.酵母人工染色体(YAC)12.基因工程的载体有:A.pBR322B.大肠杆菌C.M13噬菌体D.昆虫病毒DNA13.多拷贝质粒是指:A.细菌中存在多个同种质粒B.质粒中存在多个目的基因C.细菌中存在多种质粒D.在细菌中可自我复制的质粒14.具有互补粘性末端的载体与目的基因组连接,需经:A.变性B.混合C.退火D.DNA连接酶催化15.目的基因与载体连接成的重组体:A.有独立的繁殖能力B.无独立的繁殖能力C.两者用DNA连接酶连接D.连接键为非共价键16.“尾接法”的连接方式涉及:A.polyGB.po1yCC.TdTD.ATP17.进行基因工程实验时,常用技术有:A.分子杂交技术B.DNA探针技术C.质粒重组技术D.基因调控技术18.将重组DNA分子导人受体细菌的方法有: A.接合B.转座C.转化D.转染19.下述操作可能用于DNA克隆过程的是:A.DNA的制备和酶解B.不同来源DNA的拼接C.核酸分子杂交D.细菌的生长和繁殖20.关于质粒DNA的叙述正确的是:A.是基因组DNA的组成部分B.具有独立复制功能C.具有编码蛋白质的功能D.含有感兴趣的目的DNA三、填空题1.自然界基因转移伴发重组有几种形式分别为___________、___________、___________及___________。
2.通过自动获取或人为地供给外源____________,使细胞或培养的受体细胞获得新的____________,这就是转化作用。
3.噬菌体感染宿主菌其核酸进入菌体的过程称为___________,是___________的一种形式。
4.由____________和____________介导的基因移位或重排,称为转座。
5.转座子是可从一个___________位点转移至另一位点的分散的___________序列。
6.基因重组有两种类型,即____________和____________。
7.依赖整合酶,在两个DNA序列的____________发生的整合称____________重组。
8.发生在同源序列间的重组称为____________,又称为____________。