抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的检测及临床意义教学提纲

HA_1200_I_CN_A02B 反应区胞浆荧光 B 反应区阴性ANA 在C 和D 反应区有反应粒细胞增强（D ）B 反应区胞浆无荧光同时采用间接免疫荧光法和靶抗原（尤其是PR3和 MPO ）明确的酶联免疫法检测抗中性粒细胞胞浆自身抗体可以获得更高的诊断灵敏度。

但是基于成本和最优化选择因素的考虑，可以首先单独采用免疫荧光法进行检测，然后对阳性结果再进行特异性ELISA 法检测。

乙醇固定的人中性粒细胞是间接免疫荧光法检测ANCA 的标准基质。

该基质可区分出两种荧光模型：与Wegener’s 肉芽肿相关的胞浆型（cANCA ）和对多种疾病有提示作用的核周型（pANCA ）。

pANCA 与抗核抗体（ANA ）常常难以区分，因此，另外增加了HEp-2细胞基质（可能有粒细胞沉积）。

灵长类肝脏基质的作用：肝细胞核和血窦中的中性粒细胞处于同一视野中，如果同时存在ANA 和pANCA ，中性粒细胞的荧光强度比肝细胞核更强。

欧蒙生物薄片技术可以将所有实验基质整合在同一反应区，所以不需要在另一张载片上平行温育人上皮细胞以排除抗核抗体的干扰。

第四种生物薄片是甲醛固定的中性粒细胞，主要用于检测具有诊断价值的髓过氧化物酶，而其它pANCA （尤其对胃肠疾病较为重要）和几乎所有的抗核抗体（在自身抗体诊断中单独介绍了其区分方法）则完全被抑制。

欧蒙推荐间接免疫荧光法的起始稀释度为1:10，但检测不到一些低滴度抗体（主要是抗PR3抗体）。

因此Wegener’s 患者采用间接免疫荧光法的检出率为80%-90%（cANCA ），94%的cANCA 阳性病例可通过最新抗PR3-hn-hr ELISA 得到确证（传统抗PR3ELISA 为79%）。

许多Wegener’s 患者在检查时并无该疾病征兆或其临床活动性很低。

但多数情况下这些结果对此类患者并没有治疗意义，因此在常规实验室诊断中采用上述经济适用的方案较为合适。

但是如果临床症状和实验室检查结果不符时，建议同时开展所 4有可能的检测方法。

血清抗中性粒细胞胞浆抗体血清抗中性粒细胞胞浆抗体（Antineutrophil Cytoplasmic Antibodies, ANCA）是一种自身免疫性疾病相关的免疫球蛋白G（IgG）抗体。

它们被广泛应用于临床实践中，对于辅助诊断和监测特定类型的自身免疫性疾病具有重要意义。

下面将对血清抗中性粒细胞胞浆抗体进行详细介绍。

一、血清抗中性粒细胞胞浆抗体的作用机制血清抗中性粒细胞胞浆抗体主要作用于中性粒细胞的胞浆内，导致细胞溶酶体的融合和释放。

这些抗体还可以刺激巨噬细胞释放炎症介质，如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1（IL-1）等，从而引发炎症反应和组织损伤。

二、血清抗中性粒细胞胞浆抗体与系统性血管炎的关系1. 小血管变源性肾炎（ANCA相关的肾炎）小血管变源性肾炎是一种严重的自身免疫性肾脏疾病，常伴有肾小球肾炎和间质性肾炎。

大部分患者血清中存在血清抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA），尤其是抗中性粒细胞胞浆抗体向髓过氧化物酶（MPO）和抗溶血细胞胞浆抗体向酸性肉芽肿因子（PR3）抗原的抗体。

2. 大血管变源性肾炎（ANCA阴性肾炎）大血管变源性肾炎是一种罕见的肾脏疾病，与ANCA无关。

它通常与其他自身免疫疾病，如系统性红斑狼疮、风湿性关节炎等同时存在。

大血管变源性肾炎患者的血清中通常不检测到ANCA。

三、血清抗中性粒细胞胞浆抗体与其他疾病的关系除了系统性血管炎外，血清抗中性粒细胞胞浆抗体还可能在其他疾病中存在。

临床上，一些自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等，也可能引起血清抗中性粒细胞胞浆抗体的阳性反应。

因此，在解读血清抗中性粒细胞胞浆抗体结果时，应该结合临床表现和其他实验室检查结果进行综合分析。

四、血清抗中性粒细胞胞浆抗体的临床应用1. 诊断系统性血管炎血清抗中性粒细胞胞浆抗体作为系统性血管炎的诊断指标，具有较高的敏感性和特异性。

通过检测不同类型的抗体，如MPO-ANCA和PR3-ANCA，可以区分干燥型肾和泛发性肾炎。

封闭纤维膜阻止非特异反应区发生反应。检测时，膜条与稀释的病人 血清共同孵育使血清中的抗体与膜条上的抗原结合。利用辣根过氧化 物酶标记抗人IgG二抗检测此结合抗体。加入底物后，此结合抗体表现 为可见的蓝色条带，终止反应后为棕色。将实验结果与试剂盒提供的
LIA特异判读卡比较，可判断病人的自身抗体特性。
及血管壁引起者为继发性血管炎，只是多种组织的病理改
变之一，与血管炎疾病不同。
病症特征

1、肺部 2、肾： 3、肝脏 4、心血管： 5、神经系统：


6、鼻咽部：
7、皮肤：
病理病因

血清病 药物变态反应及感染 乙型肝炎病毒 中华巨细胞病毒 单纯疱疹病毒

成人T细胞白血病病毒
ANCA的临床应用
•最常见的疾病如韦格纳肉芽肿（WG ）、原发性局灶节段坏死 性肾小球肾炎（ NCGN ）、结节性多动脉炎（ PAN ）等均可检 出ANCA。WG的cANCA阳性率可高达90%，抗PR3抗体是诊断 WG的特异性指标。在坏死性或新月型肾小球肾炎患者，ANCA 的阳性率可达 80% ， pANCA 对应的特异性抗原主要为 MPO 。 ANCA的检测可大大提高肾血管炎的早期诊断率。 •与ANCA 阳性相关的疾病还有继发性血管炎、非血管炎性疾病 （如肺部炎症疾病）、炎性溃疡、RA、SLE、自身免疫性肝脏 疾病等。但这些疾病中各自相关的ANCA靶抗原各不相同，不同
本病有诊断意义，其他检查有血管造影检查、自身抗体检
查等。
2、皮肤型变应性血管炎；红斑、结节、紫癜、风团、血疱、丘疹、坏死、溃疡、 脓疱 3、系统型变应性血管炎；多脏器受累
头痛、发热、乏力、关节及肌肉疼痛
粘膜:鼻衄、咯血、便血、 肾：蛋白尿、血尿

肾脏病患者血清ANCA的检测与临床意义作者：周福利来源：《中国社区医师》2015年第02期摘要目的：探讨抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）的检测在肾脏病诊断中的临床意义。

方法：应用间接免疫荧光（ⅡF）法检测抗ANCA，联合ELISA方法检测过氧化物酶（MPO）和蛋白酶3（PR3），观察99例肾脏病患者血清抗中性粒细胞胞浆抗体的阳性率。

结果：应用ⅡF检测ANCA，联合ELISA检测MPO和PR3，肾脏病ANCA阳性率37%，其中‘肾小球肾炎、紫癜性肾炎、狼疮陛肾炎阳性率分别为57%、21%和20%。

结论：ANCA在肾小球肾炎和紫癜生肾炎中阳性率高，有重要诊断意义。

关键词抗中性粒细胞胞浆抗体；间接免疫荧光法；肾脏病抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）是以中性粒细胞胞浆成分为靶原的一类自身抗体。

于1982年在坏死性肾小球肾炎血清中首次发现，并很快证实为系统性原发性小血管炎的重要血清学标记抗体。

ANCA-经发现就在医学界得到了广泛深入的研究，目前被作为自身免疫抗体应用于肾小球疾病的研究。

本文应用间接免疫荧光法（ⅡF）检测ANCA联合ELISA法检测MPO和PR3，观察99例多种疾病导致的肾脏病ANCA阳性率，以探讨ANCA在肾脏病中的临床意义。

资料与方法2010年9月-2012年12月收治肾脏病患者99例，临床诊断符合国内统一标准。

其中男37例、女62例，年龄12～62岁，平均（45±15）岁，肾脏病的基础疾病包括急进性肾炎综合征19例，狼疮性肾炎49例，紫癜性肾炎23例，混合性结缔组织病4例，重叠综合征2例，系统性原发性小血管炎2例。

其27例作了肾活检，其病理类型IGA肾炎2例，系膜增生性肾炎8例，新月体性肾炎8例，弥漫增生性肾炎6例，系统性血管炎肾损害3例。

正常对照组为50例健康体检者，其中男15例，女35例，年龄30～70岁，平均（50±10）岁。

抽取静脉血冷冻待测。

实验方法：①采用欧蒙试剂，间接免疫荧光法（ⅡF）检测ANCA：加1：10稀释的待检血清、阴性和阳性血清对照各25uL到反应区。

抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的检测及临床意义抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)检测及临床意义――间接荧光免疫(IIF)方法（欧盟）一、ANCA概念及分类抗中性粒细胞胞浆抗体是一种以中性粒细胞和单核细胞胞浆成份为靶抗原的自身抗体，对系统性血管炎炎症性肠病等多种疾病的诊断和鉴别诊断具有重要的意义，已成为自身免疫性疾病的一项非常重要的常规检测项目。

目前，已经有十余种中性粒细胞胞浆成分被证实为ANCA的靶抗原，蛋白酶3(PR3)，髓过氧化物酶(MPO)，人白细胞弹性蛋白酶(HEL)，乳铁蛋白(LF)，组织蛋白酶G(Cath G)，杀菌/通透性增强蛋白(BPI)，人溶酶体相关膜蛋白 2 (H-LAMP2)，溶菌素(LYS)，天青杀素，防御素，烯醇化酶，葡萄糖醛酸酶。

根据乙醇固定的中性粒细胞基质片中，可以区分两种不同的荧光模型：一种胞浆型（c-ANCA），是均匀分布在整个中性粒细胞胞浆中的颗粒型荧光，细胞核无荧光。

在乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片中，其荧光模型表现相同。

其主要的靶抗原是蛋白酶3(PR3)。

另一种是核周型（p-ANCA），是围绕中性粒细胞细胞核周围的平滑带状荧光。

由多种抗原引起，主要靶抗原是髓过氧化物酶(MPO)，人白细胞弹性蛋白酶(HEL)，乳铁蛋白(LF)，组织蛋白酶G(Cath G)，杀菌/通透性增强蛋白(BPI)，人溶酶体相关膜蛋白 2 (H-LAMP2)，溶菌素(LYS)等。

不同抗体在乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片中，其荧光模型表现有所不同。

抗MPO抗体产生的p-ANCA因耐甲醛，其荧光模型与在乙醇固定的中性粒细胞中出现的c-ANCA类似故叫甲醛抗性的p-ANCA。

而其他非MPO抗体不与甲醛固定的中性粒细胞反应，无荧光表现，这种类型又称为甲醛敏感的p-ANCA。

故根据乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片表现，可初步判定ANCA的靶抗原PR3，MPO，非MPO三类。

二、ANCA 的检测间接荧光免疫方法是检测ANCA 的参考方法或者标准方法，至今也是最常用的经典方法。

抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)检测及临床意思之阳早格格创做――间交荧光免疫(IIF)要领（欧盟）一、ANCA观念及分类抗中性粒细胞胞浆抗体是一种以中性粒细胞战单核细胞胞浆成份为靶抗本的自己抗体，对于系统性血管炎炎症性肠病等多种徐病的诊疗战鉴别诊疗具备要害的意思，已成为自己免疫性徐病的一项非常要害的惯例检测名目.暂时，已经有十余种中性粒细胞胞浆身分被证据为ANCA的靶抗本，蛋黑酶3(PR3)，髓过氧化物酶(MPO)，人黑细胞弹性蛋黑酶(HEL)，乳铁蛋黑(LF)，构造蛋黑酶G(Cath G)，杀菌/通透性巩固蛋黑(BPI)，人溶酶体相闭膜蛋黑2(H-LAMP2)，溶菌素(LYS)，天青杀素，防卫素，烯醇化酶，葡萄糖醛酸酶.根据乙醇牢固的中性粒细胞基量片中，不妨区别二种分歧的荧光模型：一种胞浆型（c-ANCA），是匀称分集正在所有中性粒细胞胞浆中的颗粒型荧光，细胞核无荧光.正在乙醇战甲醛牢固的中性粒细胞片中，其荧光模型表示相共.其主要的靶抗本是蛋黑酶3(PR3).另一种是核周型（p-ANCA），是盘绕中性粒细胞细胞核周围的仄滑戴状荧光.由多种抗本引起，主要靶抗本是髓过氧化物酶(MPO)，人黑细胞弹性蛋黑酶(HEL)，乳铁蛋黑(LF)，构造蛋黑酶G(Cath G)，杀菌/通透性巩固蛋黑(BPI)，人溶酶体相闭膜蛋黑2(H-LAMP2)，溶菌素(LYS)等.分歧抗体正在乙醇战甲醛牢固的中性粒细胞片中，其荧光模型表示有所分歧.抗MPO抗体爆收的p-ANCA果耐甲醛，其荧光模型与正在乙醇牢固的中性粒细胞中出现的c-ANCA类似故喊甲醛抗性的p-ANCA.而其余非MPO 抗体没有与甲醛牢固的中性粒细胞反应，无荧光表示，那种典型又称为甲醛敏感的p-ANCA.故根据乙醇战甲醛牢固的中性粒细胞片表示，可收端判决ANCA 的靶抗本PR3，MPO ，非MPO 三类.二、ANCA 的检测间交荧光免疫要领是检测ANCA 的参照要领大概者尺度要领，于今也是最时常使用的典范要领.IIF 是区别c-ANCA 战p-ANCA 的前提，有较下敏感性，可半定量，但是IIF 测定的是总ANCA ，没有克没有及准确区别靶抗本，需特同性的检测要领动做补充.由于多种免疫性徐病患者存留ANA ，用IIF 法检测ANCA 时，会爆收搞扰真验截行的推断.为预防搞扰局面，采与了四基量共同的检测即：乙醇牢固的粒细胞；甲醛牢固的粒细胞；Hep-2（人喉癌细胞）细胞；猴肝细胞.基量片各细胞分集及意思如表一所述.ANCA 荧光模型及表示如表二所述.表一：四联基量片分集及意思区别ANA 的搞扰：Hep-2细胞有典型荧光表示，Hep-2细胞甲醛牢固 粒细胞1：推断c-ANCA ，2：区别 p-ANCA 对于甲醛敏感仍旧耐受甲A 粒甲A ，表二：ANCA 荧光模型及表示三、注意事项为普及对于徐病诊疗的特同性，检测时应注意以下问题1、检测ANCA ，普遍修议共时搞IIF 初筛战确认真验，以普及ANCA 的临床应用价格，没有搞单独初筛大概单独确认真验，免得落矮对于徐病诊疗的特同性.2、没有克没有及仅检测抗PR3战MPO 二种特同性抗体，而没有检测，那样简单节造ANCA 对于徐病诊疗的特同性.3、用IIF 检测时，仅使用乙醇牢固的粒细胞片，那样没有克没有及庄区别ANA 与ANCA ：借帮猴肝细胞战其中的肝血窦粒细胞.ANCA 阳性，惟有肝血窦粒细胞出现荧光，.如果二者共时阳性，所有肝细胞核皆有荧光.猴肝细胞乙醇牢固 粒细胞是尺度真验基量.区别二种荧光模型：c-ANC荧光模型荧光表示乙醇牢固粒细胞 甲醛牢固粒细胞 Hep-2细胞 猴肝细胞A N A 阳性c-ANCA 阳性胞量浮现弥集的细颗粒荧光，胞量荧光浑晰勾勒出核的表面，分页核之间荧光巩固.胞量浮现弥集的细颗粒荧光，胞量荧光浑晰勾勒出核的表面，分页核之间荧光巩固. 阳性肝细胞自己无荧光. 仅肝血窦粒细胞出现荧光.p-ANCA 阳性甲醛耐受p -ANC A 浮现核周胞量仄滑丝状戴荧光.荧光阳性的胞量主要集结正在分页核周围，产死环状大概没有准则的块状.胞量浮现弥集的细颗粒荧光，胞量荧光浑晰勾勒出核的表面，分页核之间荧光巩固.阳性肝净细胞自己无荧光. 仅肝血窦粒细胞出现荧光.甲醛敏感p -ANC A浮现核周胞量仄滑丝状戴荧光.荧光阳性的胞量主要集结正在分页核周围，产死环状大概没有准则的块状.阳性 阳性肝净细胞自己无荧光. 仅肝血窦粒细胞出现荧光.A N A 阳性ANCA 阳性 细胞核阳性，荧光强度巩固 阳性细胞核浮现荧光表示，如ANA 所述 肝细胞核阳性.肝血窦粒细胞已睹荧光.甲醛耐受p-ANCA 阳性细胞核阳性，荧光强度巩固荧光表示如c-ANCA 阳性，乙醇，甲醛牢固粒细胞所述细胞核浮现荧光表示，如ANA 所述.肝细胞战肝血窦粒细胞皆有荧光.甲醛敏感p-ANCA 阳性 细胞核阳性，荧光强度巩固阳性细胞核浮现荧光表示，如ANA 所述.肝细胞战肝血窦粒细胞皆有荧光.重排除ANA的搞扰，简单出现假阳性.四、临床意思（一）ANCA与本收性小血管炎韦格纳肉芽肿(WG)，隐微多动脉炎(MPA)，坏死性月牙体性肾小球肾炎(NCGN)战变应性肉芽肿性血管炎(CSS)等等本收性系统性小血管炎的收病与ANCA稀切相闭，临床上已将上述徐病统称为ANCA相闭小血管炎.ANCA,特同性PR3抗体战抗MPO抗体的检测已成为本收性小血管炎的敏感特同的血浑教检测名目.1、抗PR3抗体特同性PR3抗体为WG的标记性抗体，抗PR3抗体荧光模型以c-ANCA为主.但是以c-ANCA诊疗WG特同性为90％，而以抗PR3抗体的特同性可超出95％.抗PR3抗体正在其余的本收性血管炎中业不妨检测出去，但是阳性率较矮.抗PR3抗体敏感度与徐病的活动性及病程有闭，正在徐病的早期症状没有明隐时，便可出现阳性.果而抗PR3抗体常动做WG的早期诊疗、疗效推断、复收预计的指标，对于临床治疗有要害的参照价格.2、抗MPO抗体抗MPO抗体荧光模型以p-ANCA为主，主要与MPA、NCGN、CSS相闭.还可睹于其余徐病，如节结性多动脉炎，抗肾小球基底膜肾病，WG，SLE，RA，药物诱导的狼疮，Felty概括症等.抗体滴度与徐病活动性相闭，可用于早期诊疗、疗效推断、复收预计的指标，对于临床治疗有要害的参照价格.抗MPO抗体阳性下度提示坏死性血管炎大概特收性NCGN，对于诊疗本收性小血管炎的特同性达到99％.果而每一个没有明本果的血管炎大概肾小球肾炎的患者，皆该当检测ANCA.表三：ANCA 与本收性小血管炎（二）ANCA 与药物诱导性血管炎连年去没有竭有药物治疗引起的ANCA 阳性的病例报导，如丙基硫氧嘧啶，肼苯哒嗪，普鲁卡果酰胺，青酶胺，好谦霉素，他巴唑/甲巯咪唑等.其中报导比较多的是少久使用丙基硫氧嘧啶引起的ANCA ，其特性是滴度下，抗体谱广（抗本主假如MPO ，也可共时陪随大概单独出现其余靶抗本，如PR3，LF ，Cath G ，BPI ，LYS 等）.药物诱导性血管炎患者临床表示与本收性血管炎类似，停行丙基硫氧嘧啶用药后，临床症状佳转，ANCA 可转阳.果此，少久使用丙基硫氧嘧啶治疗历程中，应定期检测ANCA ，趁早创造药物诱导性血管炎.（三）ANCA 与其余徐病除本收性血管炎中，其余一些徐病中也可出现ANCA ，主要为p-ANCA ，其靶抗本并没有是PR ，MPO ，而是LF ，Cath G ，BPI ，LYS 等1、缓性炎症性肠病(CIBD)CIBD 是一种消化系统的自己免疫性徐病，包罗溃疡性结肠炎（UC ），克罗恩病（CD ）二种.往常的CIBD 诊疗依好X 线查看，内窥镜及构造教诊疗，缺累灵验的考查室指标.连年去钻研创造UC 病人血浑中ANCA 阳性率为60-80％，而CD 患者的阳性率为10-20％，多为p-ANCA ，相闭靶抗本有BPI 等.滴度与徐病的活动度战病程无闭.果相闭徐病荧光模型靶抗本（％）韦格纳肉芽肿(WG) C ，P （少睹） PR3（85），MPO （10） 隐微多动脉炎(MPA)C ，PPR3（45），MPO （45） 坏死性月牙体性肾小球肾炎(N CGN)C ，P （少睹） PR3（25），MPO （65） 变应性肉芽肿性血管炎(CSS) C ，P （少睹） PR3（10），MPO （60） 结节性多动脉炎（PAN ）少睹 PR3（5），MPO （15） 抗肾小球基底膜病（抗GBN ）PMPO为p-ANCA正在UC阳性率下，CD阳性率矮，故可动做二者的鉴别诊疗及UC早期诊疗指标.2、结缔构造病正在结缔构造病中，ANCA阳性主要睹于SLE战RA，其余结缔构造病中少睹.但是文件报导正在SLE战RA阳性率好别特地大（16-69％），那大概与使用要领，抗本基量片及处事人员火仄有很大闭系.SLE中ANCA阳性大概与缓性炎症反应有闭，如动脉炎，浆膜炎战CRP减少等.有报导抗MPO抗体与RA的闭节中益伤及血管益伤有闭.3、自己免疫性肝病正在自己免疫性肝病中，也可检测到p-ANCA.正在本收性软化性胆管炎(PSC)患者中，p-ANCA阳性率下达70-80％，是该病要害的血浑教指标.4、其余徐病有文件报导，HIV,阿米巴，细菌熏染以及没有明本果的肺部缓性炎症及纤维化患者中有p-ANCA阳性.。

抗中性粒细胞胞浆抗体的检测及临床意义【摘要】目的：探讨抗中性粒细胞胞浆抗体（anca）检测及其临床意义。

方法：采用间接免疫荧光法（iif）和酶联免疫吸附法（elisa）对610例患者进行anca检测。

结果：患者中panca阳性69例，占11.31%，canca阳性43例，占7.05%，不典型anca（aanca）6例，占0.98%。

结论：采用iif法elisa法联合检测anca有利于anca相关疾病的诊断与鉴别诊断。

anca阳性患者临床表现为多脏器受累， anca检测对及时诊断，尽早开展治疗提供有力依据，有助于提高生存率。

【关键词】抗中性粒细胞胞浆抗体；pr3；mpo【中图分类号】r446 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2013）06-0480-01抗中性粒细胞胞浆抗体（antineutrophil cytoplasmic autoanti bodies）是以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原的自身抗体，对系统性血管炎、炎症性肠病等多种疾病的诊断和鉴别诊断具有重要意义。

anca作为特异性血清学诊断工具对anca相关疾病的诊断、疗效观察、判断病情活动和复发有重要意义。

为此，对我院610例行anca检测的患者分析，情况如下：1 资料与方法1.1一般资料采样鞍山市中心医院2010年5月～2011年4月检测anca的610例患者，女性占57.4%，男性42.6%。

1.2采用间接免疫荧光技术（iif）对anca进行检测。

抗原基质为hep-2细胞/猴肝/甲醛固定的中性粒细胞/乙醇固定的中性粒细胞。

乙醇固定的基质显示两种荧光模型：一种是胞浆型（canca），为均匀分布在整个中性粒细胞胞浆中的颗粒型荧光。

其主要靶抗原为位于中性料细胞嗜苯胺蓝颗粒中的蛋白酶3（pr3）。

另一种是核周型（panca），是围绕细胞核的平滑带状荧光。

主要靶抗原为髓过氧化物酶（mpo），其它还有粒细胞特异性弹性蛋白酶、乳铁蛋白、溶菌酶、组织蛋白酶g等。

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临床意义： 各不相同，不同的抗原抗体系统与不同的 疾病有关，故对ANCA 的特异性靶抗原检 测更有助于临床诊断。
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正常值： 阴性。 (注：具体参考值请根据各实
验室而定。)。
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临Hale Waihona Puke 意义：omephritis，IFSNG N)，新月形肾小球肾 炎(NCGN)，结节性多动脉炎(PAN)等均可 检出ANCA 。WG 的cANCA 阳性率可高达 90%，抗PR3抗体阳性是诊断WG的特异性指 标。在坏死性或新月形肾小球肾炎患者， ANCA的阳性率可达80%，pANCA 对应的特 异性
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简介：
)加到已知抗原标本上，在湿盒中37℃保 温30min，使抗原抗体充分结合，然后洗 涤，除去未结合的抗体。
第二步，加上荧光标记的抗球蛋白抗 体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了 抗原抗体反应，标记的抗球蛋白抗体就会 和已结合抗原的抗体进一步结合，从而可 鉴定未知抗体。
相关疾病：
溃疡性结肠炎、懒惰白细胞综合征、急性 海绵窦栓塞性静脉炎、血管炎性周围神经 病、显微型多血管炎、非特异性系统性坏 死性小血管炎、系统性血管炎、显微镜下 多血管炎、大动脉炎、韦格纳肉芽肿、颞 动脉炎、类风湿性关节炎、红斑狼疮、克 罗恩病、原发性小血管炎性肾损害、变应 性血管炎、韦格内肉芽肿、系统

EUROIMMUN
cANCA: 相关疾病
韦格纳肉芽肿（WG） - 典型的WG：可逐渐发展成为肾小球肾炎 - 局限性的WG：可不累及肾小球
>90% 70%
显微镜下多动脉炎（MPA）
up to 30%
变应性肉芽肿性血管炎（Churg-Strauss 综合征）
10-20%
结节性多动脉炎(PAN)
c, p p, c(少见)
p, c(少见) 低阳性率 p
PR3(30%),MPO(70%) PR3(25%),MPO(65%)
PR3(10%),MPO(60%) PR3( 5%),MPO(15%) MPO(30%)
EUROIMMUN
ANCA临床意义(2)：IBD/ALD/CTD
相关疾病
炎症性肠病 溃疡性结肠炎(UC, 60-80%) 克罗恩病(Crohn’s病, 10-20%)
结果
EUROIMMUN
间接免疫荧光法检测ANCA 间接免疫荧光法是检测ANCA的经典方法
特点：敏感性高，半定量，是区分cANCA和 pANCA的基础
局限性：间接免疫荧光法测定的是总ANCA，不能 区分靶抗原，需要确认实验作为补充
EUROIMMUN
间接免疫荧光法检测ANCA
核周型ANCA（pANCA）
ANA阴阳性
1）ANA阴阳性 2）ANCA：粒细胞是否荧光增强
pANCA
猴肝
注意
ANA阳性 ANA阳性 辅助判读 辅助判读
EUROIMMUN
cANCA
1
4
粒细胞 (乙醇固定)
猴肝
2
3
粒细胞 (甲醛固定)
EUROIMMUNHEp-2 cells
cANCA: 靶抗原

定期随访
对已经确诊的血液透析患者抗粒 细胞胞浆抗体阳性患者进行定期 随访，监测病情变化和治疗效果 。
调整治疗方案
根据患者的病情变化和治疗效果 ，及时调整治疗方案，以提高治 疗效果和改善预后。
预防并发症
对于已经确诊的血液透析患者抗 粒细胞胞浆抗体阳性患者，应积 极预防相关并发症的发生，如感 染、心血管疾病等。
肾功能异常
血液透析患者抗粒细胞胞浆抗体检测异常时，可能出现肾功能异 常，表现为血肌酐升高、尿素氮升高等。
免疫指标异常
血液透析患者抗粒细胞胞浆抗体检测异常时，可能出现免疫指标 异常，如补体降低、免疫球蛋白降低等。
04
血液透析患者抗粒细胞胞 浆抗体检测的预防与治疗
血液透析患者抗粒细胞胞浆抗体检测的预防措施
血液透析患者抗粒细胞胞浆抗体检测的意义
01
通过抗粒细胞胞浆抗体检测，可 以早期发现ANCA相关血管炎， 为患者提供及时的治疗和干预。
02
抗粒细胞胞浆抗体检测有助于评 估患者的病情和预后，指导医生 制定合适的治疗方案。
血液透析患者抗粒细胞胞浆抗体检测的应用
以便早期发现ANCA相关血管炎。
表现。
正常免疫指标
血液透析患者抗粒细胞胞浆抗体检 测阴性时，相关免疫指标通常正常 ，如白细胞计数、血小板计数等。
正常肾功能
血液透析患者抗粒细胞胞浆抗体检 测阴性时，肾功能通常正常，无肾 功能不全的表现。
血液透析患者抗粒细胞胞浆抗体检测的异常表现
血常规异常
血液透析患者抗粒细胞胞浆抗体检测异常时，可能出现血常规异 常，如白细胞计数下降、血小板计数下降等。
对于已经确诊的ANCA相关血管炎患者，抗粒细胞胞浆抗体 检测可以用于监测病情变化和治疗效果。

抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎等ANCA相关性血管炎诊断标准、复发和感染、治疗进展、治疗共识不同总结诊断标准抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎（AAV）是一组自身免疫性疾病，主要累及小血管，病理以血管壁坏死性炎症为特征，少见免疫复合物沉积。

主要包括肉芽肿性血管炎（GPA）、显微镜下多血管炎（MPA）、嗜酸性肉芽肿性血管炎（EGPA）。

表1：2022年ACR/EULAR关于GPA分类标准确诊为小或中血管炎，并且排除其他诊断：以上得分≥5分者可以分类诊断为GPA，敏感性92％，特异性94％表2：2022年ACR/EULAR关于EGPA分类标准确诊为小或中血管炎，并且排除其他诊断：以上得分≥6分的患者可以分类诊断为EGPA，敏感性85％，特异性99％表3：2022年ACR/EULAR关于MPA分类标准确诊为小或中血管炎，并且排除其他诊断以上得分≥5分的患者可以分类诊断为MPA，该标准敏感性91%、特异性94%。

AAV复发和感染ANCA检测对诊断及分类、病理活检的重要性（如肾或肺组织活检），血管炎的病情评估包括疾病活动度、严重程度、损伤，并结合分期来判断病情是否严重。

此外，AAV最大的临床特点是极易复发，约25%~33%的患者会出现复发，平均复发时间为24个月。

复发时临床表现各不相同，以皮肤和关节表现最多见，而肺、肾表现较少，也可出现以往末受累器官受累。

另外治疗免疫抑制使用不足会导致AAV复发，而免疫抑制过度则会发生感染。

随着长期应用糖皮质激素和细胞毒药物或免疫抑制剂治疗，临床医生还需要密切重视其副作用尤其是感染。

AAV治疗进展AAV的治疗分为诱导缓解与维持缓解阶段，戴冽教授指出在诱导缓解治疗期间应尽快使疾病达到缓解，以防止造成器官的不可逆损害。

维持阶段的治疗是使疾病持续处于缓解状态，减少疾病复发。

1、诱导缓解的治疗药物是糖皮质激素联合免疫抑制剂。

糖皮质激素是AAV诱导缓解的一线治疗药物。

最常用于诱导缓解治疗的免疫制剂为环磷酰胺（CTX）、以B细胞为靶向的单克隆抗体利妥昔单抗。

ANA、ANCA检测及临床应用1、检测原理及方法1.1 ANA检测原理ANA（自身抗体）是机体免疫系统产生的抗体，针对自身组织中的核糖核酸和核蛋白进行作用。

ANA检测是通过间接免疫荧光抗体（IFA）技术，观察患者血液标本中的自身抗体与细胞核内抗原结合的荧光反应，以判断患者是否存在ANA阳性。

1.2 ANCA检测原理ANCA（抗中性粒细胞胞浆抗体）是机体免疫系统产生的抗体，针对中性粒细胞胞浆成分进行作用。

ANCA检测是通过酶联免疫吸附试验（ELISA）或免疫荧光抗体（IFA）技术，观察患者血液标本中的ANCA与中性粒细胞胞浆成分结合的反应，以判断患者是否存在ANCA阳性。

2、ANA检测及临床应用2.1 检测适应症ANA检测广泛应用于自身免疫性疾病的诊断和鉴别诊断，包括系统性红斑狼疮、干燥综合征、结核性脓毒症、类风湿关节炎等。

2.2 临床意义ANA阳性表明免疫系统对自身抗原产生异常反应，但并不代表特定疾病的存在。

ANA阳性结果应结合患者的病史、临床表现和其他辅助检查结果进行综合分析和判断。

2.3 结果解读ANA检测结果通过荧光显微镜或荧光显微镜图片解读。

阳性结果表示患者血清中存在与细胞核内抗原结合的自身抗体。

阴性结果表示未检测到自身抗体。

3、ANCA检测及临床应用3.1 检测适应症ANCA检测主要应用于自身免疫性疾病，如无器官限定型小血管炎、肾小球肾炎、全身性血管炎等。

3.2 临床意义ANCA阳性结果提示存在抗中性粒细胞胞浆抗体，但并不一定与特定疾病相关。

阳性结果应结合患者的病史、临床表现和其他辅助检查结果进行综合分析和判断。

3.3 结果解读ANCA检测结果通常通过ELISA或免疫荧光染色解读，阳性结果表示患者血清中存在与中性粒细胞胞浆成分结合的自身抗体。

阴性结果表示未检测到自身抗体。

4、附件相关文献和研究报告等附件详见附件部分。

5、法律名词及注释5.1 ANA：自身抗体（Anti-Nuclear Antibody）5.2 ANCA：抗中性粒细胞胞浆抗体（Anti-Neutrophil Cytoplasmic Antibodies）5.3 IFA：间接免疫荧光抗体（Indirect Immunofluorescence Assay）5.4 ELISA：酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）6、结束语感谢您阅读本文档，如有任何问题或需进一步了解，请随时与我们联系。

抗中性粒细胞胞浆抗体在肾小球疾病中的检测及临床意义李培睿;王铁萍;张普生【期刊名称】《中国冶金工业医学杂志》【年(卷),期】2003(20)5【摘要】目的:检测各种肾小球疾病患者血清中抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)并探讨其临床意义。

方法:应用间接免疫荧光法(IIF)检测20例正常人及131例各种肾小球疾病患者血清中ANCA。

结果:131例患者中有11例ANCA阳性性(阳性率为8.4％),且均为P-ANCA阳性,而20例正常对照组无1例阳性(P<0.05)。

ANCA阳性中以新月体性肾炎、狼疮性肾炎、紫癜性肾炎的阳性率较高,分别为67％、25％、16.7％。

新月体性肾炎与IgA肾病等原发性肾小球疾病组比较有显著性差异(P<0.05)。

结论:ANCA在各种肾小球疾病中并不少见,尤其是新月体性肾炎、狼疮性肾炎、紫癜性肾炎的阳性率较高,推测ANCA可能在这些疾病的发病机理中起了一定的作用。

【总页数】2页(P336-337)【关键词】抗中性粒细胞胞浆抗体;肾小球疾病;临床意义;间接免疫荧光法;血清学检查;发病机理【作者】李培睿;王铁萍;张普生【作者单位】攀钢职工总医院肾内科【正文语种】中文【中图分类】R692.6;R446.6【相关文献】1.抗中性粒细胞胞浆抗体检测在类风湿性关节炎并发新月体性肾小球肾炎中的临床意义 [J], 廖永强;彭可君;刘剑荣;任妹2.抗中性粒细胞胞浆抗体检测在肾功能不全肾病中的临床意义 [J], 赵春;符布清;史桂兰3.抗中性粒细胞胞浆抗体检测在肾脏病中的临床意义 [J], 靳淑玲;李彩;王北宁4.急进性肾炎患者抗肾小球基底膜抗体及抗中性粒细胞胞浆抗体的检测及其临床意义 [J], 刘娜;赵明辉;章友康5.抗中性粒细胞胞浆抗体在肾小球疾病中的检测及临床意义 [J], 李桂英;白宝银;路学文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

抗中性粒细胞胞浆抗体的检测方法及临床意义赵秀芬,孙　彬,钱　军,邢昌赢(南京医科大学第一附属医院肾内科研究室,江苏南京,210028) 关键词:抗中性粒细胞胞浆抗体;酶联免疫吸附测定;间接免疫荧光 中图分类号:R 557 文献标识码:A 文章编号:1672Ο2353(2008)06Ο0079Ο01 作者对220份不同患者的空腹静脉血进行了抗中性粒细胞胞浆抗体的检测,现将结果报告如下。

1　材料与方法1.1　待测血清均取自2002年12月～2003年10月收到的本院220份不同患者的空腹静脉血1mL ,离心提取血清,-20℃保存备用。

1.2　实验方法和结果测定每份血清均分别进行IIF 与MPO 和PR3ΟEL ISA 检测、分析。

IIF 法:健康人新鲜肝素抗凝血加0.9%生理盐水对比稀释,用淋巴细胞分离液分离中性粒细胞,调整细胞浓度为4.5～5.5×104/mL ,涂成薄片,经无水酒精固定、干燥后,置-20℃保存备用。

血清及抗体均用0.01mol/L P B S (p H7.2)稀释,加1:10稀释待测血清、阴性、阳性对照血清,温育洗涤后加异硫氰酸荧光素(FITC )标记羊抗人IgG,温育洗涤后,室温晾干,于Leica 荧光显微镜下读片,结果判定:阴性结果不着色或显很浅的背景颜色,在中性粒细胞胞浆存在黄绿色荧光为C ΟANCA ,在中性粒细胞核周有黄绿色荧光为P ΟAN CA 。

MPO 和PR3ΟEL ISA 法:本试剂由AES K U 诊断试剂公司提供,每种抗原均设阴性、阳性对照、标准曲线,严格按试剂盒说明进行操作,用美国S YNTRON 酶标仪,于波长450nm 读取OD 值,最后根据标准曲线计算每种抗原的含量,结果判断:MPO 或PR3含量>10U/mL 为阳性,M PO 或PR3含量<10U/mL 为阴性。

2　结　果阳性率IIF 法N 阳性率3%(6220),其中C -ANCA 5.91%(13/220),p -AN 2CA 1.36%(3/220),可疑阳性2.72%(6/220);抗原特异性-EL ISA 法总阳性率3.64%(8/220),其中MPO ΟEL ISA 阳性率2.27%(5/220),PR3ΟEL ISA 阳性率1.36%(3/220)。

抗中性粒细胞胞浆抗体ANCA的检测及临床意义抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA，anti-neutrophil cytoplasmic antibodies）是一种自身免疫抗体，可对中性粒细胞胞浆内的不同成分产生免疫反应。

ANCA的检测对于自身免疫性疾病的诊断和治疗具有重要的临床意义。

本文将详细介绍ANCA的检测方法以及其在临床上的意义。

ANCA的检测一般采用免疫荧光法（IF）和酶联免疫吸附法（ELISA）。

IF法是目前最为常用和敏感的检测方法。

该方法通过将患者血清标本与蛇毒诱导的中性粒细胞发生免疫反应，然后使用荧光染料标记的二抗观察结果。

在IF法中，ANCA阳性可分为两种类型：周边型（P-ANCA，perinuclear ANCA）和细胞浆型（C-ANCA，cytoplasmic ANCA）。

P-ANCA主要与抗髓过氧化物酶（MPO，myeloperoxidase）产生免疫反应，而C-ANCA主要与抗蛋白酶3（PR3，proteinase 3）产生免疫反应。

ELISA法可以定量检测ANCA的水平，并且对于早期诊断和临床监测具有较高的灵敏度和特异性。

ANCA检测的临床意义主要涵盖以下几个方面：1. 诊断自身免疫性疾病：ANCA检测对于疾病诊断具有重要意义，尤其是与ANCA相关的疾病，如ANCA相关性血管炎（AAV，ANCA-associated vasculitis）、系统性红斑狼疮（SLE，systemic lupus erythematosus）等。

对于患者表现为肾脏、肺部和鼻部等炎症病变的情况，ANCA检测可以提供重要的辅助诊断依据。

2.评估疾病活动性和预测预后：ANCA检测可以在患者治疗期间监测疾病的活动性。

活动性的AAV常伴有ANCA滴度升高，检测ANCA可以帮助评估治疗的疗效和预测预后。

一些研究发现，ANCA滴度的下降可以与治疗反应的改善相关。

3.指导治疗策略：ANCA检测可以为治疗提供指导信息。

抗中性粒细胞胞浆抗体的实验室检测[摘要] 抗中性粒细胞胞浆抗体是一种以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原的自身抗体。

对系统性血管炎、炎症性肠病等多种疾病的诊断与鉴别具有重要意义。

已成为自身免疫性疾病的一项非常重要的常规检测项目。

检测anca的方法有多种，如：间接免疫荧光发、elisa、免疫印迹法、欧蒙斑点法、欧蒙印迹法等。

[关键词] 抗中性粒细胞胞浆抗体；iif检测方法；canca；panca 抗中性粒细胞抗体（anca）是指与中性粒细胞及单核细胞胞浆中溶酶体酶发生反应的抗体。

当中性粒细胞受抗原刺激后，胞浆中的α-颗粒释放蛋白酶-3、髓过氧化物酶物质及白细胞抗原生成，刺激机体而产生anca。

一般临床常规检测时，以anca（i i f）作为筛查实验，elisa 作为特异性抗体的确认实验，联合检测应用价值更高。

i i f是检测anca的参考方法或标准方法。

至今是检测anca的最常用的经典方法。

i i f是区分canca和panca的基础。

有较高的敏感性。

乙醇固定的人中性粒细胞是间接免疫荧光法检测anca的基本基质，可区分出两种不同的荧光模型：一种是均匀分布在整个中性粒细胞胞浆中的颗粒型荧光，细胞核无荧光（canca：胞浆型），其主要的靶抗原为位于中性粒细胞嗜苯胺蓝颗粒中的蛋白酶３，这种荧光模型在甲醛固定的中性粒细胞与乙醇固定的中性粒细胞中表现相同。

canca：抗原主要是蛋白酶-3（pr3-proteinase）。

canca主要见于韦格纳肉芽肿（阳性率占80％，且与病程、严重性和活动性有关）。

系wegener（wg）肉芽肿病的特异性抗体。

c-anca对呼吸道有亲合性，致上下呼吸道坏死，肉芽肿形成。

c-anca阳性也可见于少数显微镜下多动脉炎（mpa）、churg-strauss综合征（css）、结节性多动脉炎（pan）、少数巨细胞动脉炎、过敏性紫癜、白细胞破碎性皮肤性血管炎和白塞病。

另一种是围绕中性粒细胞细胞核的平滑带状荧光（panca：核周型），可由多种特异性特异性的抗体引起，目前发现的靶抗原有髓过氧化物酶、粒细胞特异性弹性蛋白酶、乳铁蛋白、溶菌酶。

抗中性粒细胞胞浆抗体检测对系统性血管炎的临床价值谭立明;李华;焦安君;冯晓晶;徐镠粤;谭福燕;何思齐;罗姮;陈娟娟;蒋永清【摘要】目的探讨抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)检测对系统性血管炎的临床意义.方法应用间接免疫荧光法(IIF)检测13866例患者血清ANCA,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗髓过氧化物酶(MPO)抗体和抗蛋白酶3(PR3)抗体.结果13866例患者共检出ANCA阳性318例,阳性率为2.29%.其中男性患者检出135例(2.07%)、女性患者检出183例(2.50%),2个组差异无统计学意义(χ2=2.650, P>0.05).不同年龄组患者间ANCA阳性率差异有统计学意义(χ2=28.978,P<0.01),且男、女性患者各自不同年龄组间ANCA阳性率差异亦有统计学意义(χ2=54.550,P<0.01;χ2=17.800,P<0.01).p-ANCA和c-ANCA 2种荧光核型及靶抗原分布差异有统计学意义(χ2=86.524,P<0.01).结论 ANCA的检测对血管炎及自身免疫性疾病的诊断和治疗极为重要,临床工作者应注重ANCA在系统性血管炎及自身免疫性疾病中的检测.%Objective To evaluate the role of anti-neutrophil cytoplasmic antibody(ANCA) determination for systemic vasculitis. Methods Indirect immunofluorescence(IIF) was performed to determine serum ANCA in 13 866 patients,and enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) was used to determine anti-myeloperoxidase (MPO) antibody and anti-protease 3(PR3) antibody. Results Among the 13 866 patients,there were 318 positive cases of ANCA,with the positive rate of 2.29%. There were 135(2.07%) males and 183(2.50%) females,and there was no statistical significance between the 2 groups(χ2=2.650,P>0.05). The difference of the ANCA positive rate with different ages had statistical significance(χ2=28.978,P<0.01). The positive rate of ANCA between malesand females in different age groups had statisticalsignificance(χ2=54.550,P<0.01;χ2=17.800, P<0.01). The p-ANCA and c-ANCA and target antigen distribution had statisticalsignificance(χ2=86.524, P<0.01).Conclusion s ANCA is potential in the diagnosis and treatment of vasculitis and autoimmune diseases, especially for ANCA-associated systemic vasculitis.【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2018(033)002【总页数】5页(P101-105)【关键词】抗中性粒细胞胞浆抗体;抗髓过氧化物酶抗体;抗蛋白酶3抗体;韦格纳肉芽肿;系统性红斑狼疮【作者】谭立明;李华;焦安君;冯晓晶;徐镠粤;谭福燕;何思齐;罗姮;陈娟娟;蒋永清【作者单位】南昌大学第二附属医院检验科,江西南昌 330006;南昌大学第二附属医院检验科,江西南昌 330006;南昌大学公共卫生学院,江西南昌 330031;南昌大学公共卫生学院,江西南昌 330031;南昌大学公共卫生学院,江西南昌 330031;南昌大学公共卫生学院,江西南昌 330031;南昌大学公共卫生学院,江西南昌 330031;南昌大学第二附属医院检验科,江西南昌 330006;南昌大学第二附属医院检验科,江西南昌 330006;南昌大学第二附属医院检验科,江西南昌 330006【正文语种】中文【中图分类】R446.62抗中性粒细胞胞浆抗体（anti-neutrophil cytoplasmic antibody，ANCA）是近些年针对以韦格纳肉芽肿（Wegener's granulomatosis， WG）为代表的系统性小血管炎的一类特定血清学标志性抗体，是一组以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原的自身抗体。