白细胞计数正常的脑脊液中检出肿瘤细胞病例回顾性分析
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细胞 。
关 键 词 ： 脊 髓 液 ； 细 胞 系 ， 瘤 ； 细 胞 计 数 ； 脑 膜 癌 病 ； 脑 脊 液 细 胞 学 脑 肿
Ｄ Ｉ １． ９ ９ ｊｉ ｎ １ ７ —１０ ２ １ ．４ ０ ２ Ｏ ：０ ３ ６ ／．ｓ ． ６ ３４ ３ ． ０ １ １ ． ６ ｓ 文 献 标 识 码 ： Ｂ 文 章 编 号 ：６ ３４ ３ （ ０ １ １—６ ２０ １ ７—１ ０ ２ １ ）４１４ —２
５ 消 化 与 染 色
・
［ ］ 慕 明涛 ， 满 鹏 ， 力 群 ， ． 外 周 血 染 色 体 标 本 制 备 失 败 的 影 ４ 霍 蒲 等 人 响 因素 分 析 Ｌ３ 延 安 大学 学 报 ： Ｊ． 医学 科 学 版 ，０ ７ ５ ４ ：－． ２ ０ ， （ ）３４ ［ ］ 赵小 平 ， 红 ， 燕 ， ． 片 对 染 色 体 Ｇ 显 带 标 本 质 量 的 影 响 分 ５ 余 黄 等 烤 析［ ］ 现 代 医 药 卫 生 ，０ ９ ２ （ ） ３３ Ｊ． ２０ ，５ ３ ： ９ ．
４ 国际检验 医学杂 志 ２１ ０１年 ９ 第 ３ — ４Ｎ Ｉｔ ａ ｄＳ ｐ ｅ ｅ ０ １ Ｖｏ． ２ Ｎｏ １ 月 ２ ￣ １ ｇ ｎ ＬｂＭｅ ｅ ｔ ｍｂ ｒ２ １ ， ｉ ３ ， Ｊ
，
—
．
—
—
微 升 视 为细 胞 数 正常 的 Ｃ Ｆ， 般 不 提 倡 分 类 。而 恰 恰 是 这 种 Ｓ 一
。
在制 片时 ， 玻片 的清洁度将 直接 影响 细胞 的贴附 能力 。 载
因此 ， 制 片 前 ， 玻 片 要 经 泡 酸 处 理 ， 清 除 载 玻 片 上 的 阴 阳 在 载 以 离 子 与 杂 质 。适 当 的 滴 片 高 度 也 是 获 得 高 质 量 染 色 体 的 必 然 要 求 。高 度过 高 ， 色 体 分 散 范 围 过 大 ， 至造 成染 色 体 丢 失 ； 染 甚 高 度 过 低 ， 染 色体 分 散 不 良 。经 过 探 索 ， 室 滴 片 的 高 度 保 则 本
（ 稿 日期 ： ｏ １Ｏ 一 ７ 收 ２ ｌ ｌ２ ）
经验 交流 ・
白细胞 计 数 正 常 的脑 脊 液 中检 出肿瘤 细 胞 病例 回顾 性 分析
万均成 ， 文 芳 ， 玲 肖
（ 汉 大学人 民 医院神 经精神 病研 究所 武
摘
４ ０６ ） ３ ０ ０
要： 脑 脊 液 （ Ｓ ） 分 类 计 数 中 检 出肿 瘤 细 胞 及 其 对 脑 膜 癌 的 诊 断 价 值 。方 法 Ｃ Ｆ在
放 。此 外 ， 胞 悬 液 的 浊 度 也 要 适 中 ， 液 浊 度 太 小 ， 片 后 载 细 悬 制
目前 ， 色 体 制 作 过 程 没 有 统 一 的 质 量 控 制 ， 剂 生 产 厂 染 试 家 多 ， 质 量 也 参 差 不 齐 ， 实 验 室 制 作 的染 色 体 质 量 与 实 验 且 各 环 境 、 剂 质 量 、 员 素 质 均 有 很 大 的 关 系 。为 了 尽 可 能 的 获 试 人
２ ０ １ １ 】 — ５ ０ ２， ｏ（ ）： ２ １ ．
玻 片 上 细 胞 数 量 少 ； 度 太 大 也 不 利 于 染 色 体 分 散 ， 色 体 交 浊 染
叉， 均不 利 于 分 析 。
４２ 滴 片 ．
一
滴 片 质 量 的 好 坏 也 是 染 色 体 制 作 的 关 键 步 骤 之
细 胞 培 养 、 片 、 片 过 程 做 得 多 么完 美 ， 果 没 有 很 好 地 把 握 制 烤 如 消 化 与 染 色 过 程 ， 不 能 获 得 显 带 清 晰 的 染 色 体 。 消 化 过 程 是 也 去 除 染 色 体 上 的蛋 白质 （ 括 组 蛋 白 和 非组 蛋 白 ） 获 得 良好 包 而
随着脑脊液 （ Ｓ ） Ｃ Ｆ 细胞玻 片离 心法 的不 断推 广应用 ， Ｓ ＣＦ
细 胞 学 检 查 对 神 经 系 统 疾 病 诊 断 的帮 助 越 来 越 大 ， 别 是 对 中 特
枢 神经 系 统 感 染 性 疾 病 和 脑 膜 癌 的 诊 断具 有 其 他 检 查 不 可 取 代 的优 势 。在 临 床 检 验 学 教 材 中 把 白 细 胞 计 数 小 于 １ ／ Ｏ个
持在 ８ １ ｍ， 获 得 比较 好 的 分裂 象 。 ～ ５ｃ 能
Ｅ ３ 曹 海 涛 ． 色 体 外 周 血 淋 巴细 胞 培 养 中 的 几 点 体 会 ［］ 现 代 中 西 ２ 染 Ｊ．
医结 合 杂 志 ，０ ７ １ （ ０ ：４ ５ ２ ０ ，６ ３ ） ４ ８ 。
４ ３ 烤 片 烤 片温 度 的 高低 和 时 间 的 长 短 会 影 响显 带 标 本 的 ． 质 量 ， 握 好 适 宜 的 烤 片 温 度 和 时 间 ， 能 制 备 高 质 量 的 显 带 掌 才 标 本 。烤 片 温 度 过 高 、 间 过 长 ， 酶 对 标 本 的 消 化 时 间 也 时 胰
细 胞 ， 有 病例 均 可 见 肿 瘤 细 胞 。发 现 肿 瘤 细 胞 的 ９例 患 者 中有 ８ 找 到 了 原 发 灶 。结 论 检 验 者 对 白 细胞 计 数 小 于 １ 所 例 Ｏ个 ／ 微
升 的 Ｃ Ｆ要 足 够 重 视 ， 能 免 去 分 类 环 节 ， 过 观 察 全 片 ， 分 惠 者 可 找 到 具 有 诊 断 价 值 的 细 胞 ， 别 是 具 有 确 诊 价 值 的 肿 瘤 Ｓ 不 通 部 特
看 似 正 常 的 Ｃ Ｆ在 分 类 计 数 时 可 能 检 出 特 殊 细 胞 ， 临 床 提 Ｓ 为
１３ 方法 ．
常 规 腰 穿 取 Ｃ Ｆ ２ ， ２瓶 按 次 序 编 １ ２ Ｓ ～４ｍＬ 分 、
号 送 检 。第 １瓶 做 生 化 及 相 关 检 查 ， ２瓶 先 混 匀 滴 人 血 球 计 第 数 板 行 白细 胞 计 数 。再 取 Ｃ ＦＯ ５ １ｍ Ｓ ． ～ Ｌ加 入 Ｃ Ｆ细 胞 沉 淀 Ｓ
・
１ ４ ・ ６２
国际检验 医学杂 志 ２１ 年 ９月第 ３ ０１ ２卷第 １ ４期
Ｉｔ ａ ｎ ＬｂＭｅ，ｅｔｍ ｅ ２１ ，ｏ．２Ｎ ．４ Ｊ ｄＳｐｅ ｂｒ ０ ｌＶ １ ，ｏ１ ３
低 、 渗 时 问 过 长 会 使 核 膜 破 裂 ， 色 体 提 前 释 放 ， 不 仅 会 使 低 染 这 分 裂 中期 细 胞 减 少 ， 在 的 染 色 体 也 会 在 滴 片过 程 中 随机 分 布 散 在 载玻 片 上 ， 响其 他 细 胞 的 染 色 体 计 数 ， 影 降低 制 片 质 量 ； 渗 低 时 间 过 短 ， 部 分 细胞 的 细 胞 膜 未 破 裂 ， 致染 色 体 释 放 障碍 ， 一 导
湖 南 湘 雅 基 因 技 术 有 限 公 司 的 商 品 化 的 姬 姆 萨 染 液 ， 有 方 具
便 、 量 稳 定 的优 点 。 由 于 放 置 过 久 的 姬 姆 萨 染 液 有 效 成 分 会 质 下 沉 ， 之 前 需 摇 匀 ， 能 获 得 质 量 良好 的 制 片 。另 外 ， 姆 萨 用 才 姬 染液对稀释液 的 ｐ 值 也有 一定 的要求 ， 室 采用 ｐ ， Ｈ 本 Ｈ７ ４的 Ｐ Ｓ作 为 稀 释 液 ， 可 获 得 清 晰 的 染 色 体 图像 。 Ｂ 即
４ １ 细 胞 悬 液 配 制 经 过 低 渗 、 固定 、 ． 预 固定 ， 获 得 淋 巴 细 即 胞 。 此 时 的 细 胞 非 常 脆 弱 ， 配 制 细 胞 悬 液 时 要 轻 轻 地 吹 打 混 在
匀 ， 打 方 式 或 者 力 量 不 当 ， 会 使 核 膜 破 裂 ， 成 染 色 体 释 吹 都 造
收 集 细 胞 过 程 中加 入 固 定 剂 的 目 的是 维 持 染 色 体 的形 态 。
一
般 实 验 室 使 用 的都 是 按 甲 醇 ： 乙 酸 一 ３：１比例 配 制 的 混 冰
合 液 。一 方 面 ， 定 剂 可 以 使 细 胞 脱 水 、 白 质 变 性 而 使 染 色 固 蛋
体 变 得 粗 大 并 适 中 ； 一 方 面 ， 机 溶 液 可 以让 红 细 胞破 裂 ， 另 有 通 过 离 心 可 以获 得 比较 纯 净 的 淋 巴细 胞 。 固定 液 需 新 鲜 配 制 ， 主 要 是 由于 固定 液所 含 的 水 分 和 固 定 效 果 有 关 。 另外 ， 以适 当 可 增 加 冰 乙 酸 的 比例 来 达 到 良好 的效 果 。
Ｅ ３ 董 烁 ， 振 兴 ． 谈 人 体 外 周 血 淋 巴 细 胞 染 色 体 的 制 备 ［ ］ 食 晶 ３ 谢 浅 Ｊ．
工 程 ， ０ ８（ ）： ５ ２ ． ２ ０ ２ ２ — ７
随 之 增 加 ， 既 影 响 工 作 效 率 ， 影 响 标 本 的 显 带 质 量 ， 显 带 这 也 使
同 样 不 利 于 核 型 分 析 。本 室 采 用 常 规 的 ０ ０ ５ ｍｏ／ ＫＣ 溶 ． ７ ｌＩ １ 液 ８ｍＬ 低 渗 （ ０ ） ｉ， 获 得 足 够 数 量 的 分 裂 中 期 细 胞 。 ， ３ ±５ ｒ ｎ 可 ａ
３ 固 定
５ １ 消化 ．
Ｇ 显 带 标 本 是 临床 上 运 用 最 多 的 显 带 技 术 。无 论
的显 带 标 本 ， 常 用 的 消 化 酶 为 ０ ０ ５ 的 胰 蛋 白 酶 。 然 而 ， 通 ． ２
消 化 时 间根 据 胰酶 的浓 度 、 量 不 同 而 定 ， 同 的 实 验 室 消 化 质 不 时 间不 一 ， 即使 同 一 实 验 室 不 同 时 间消 化 所 需 的 时 间 也 不 同 。 这 就 要求 实 验 人 员 在 每 次 批 量 消 化 之 前 都 要 进 行条 件 摸 索 ， 以 获得最佳 的实验条件 。
得 稳 定 的染 色 体标 本 ， 实 验 室应 该 参 考 其 他 实 验 室 的 成 功 经 各 验 ， 据 自 己实 验 室 条 件 进 行 摸 索 ， 获 得 质 量 尽 可 能 高 的染 根 以 色体标本 。 参 考 文 献
关 键 词 ： 脊 髓 液 ； 细 胞 系 ， 瘤 ； 细 胞 计 数 ； 脑 膜 癌 病 ； 脑 脊 液 细 胞 学 脑 肿
Ｄ Ｉ １． ９ ９ ｊｉ ｎ １ ７ —１０ ２ １ ．４ ０ ２ Ｏ ：０ ３ ６ ／．ｓ ． ６ ３４ ３ ． ０ １ １ ． ６ ｓ 文 献 标 识 码 ： Ｂ 文 章 编 号 ：６ ３４ ３ （ ０ １ １—６ ２０ １ ７—１ ０ ２ １ ）４１４ —２
５ 消 化 与 染 色
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［ ］ 慕 明涛 ， 满 鹏 ， 力 群 ， ． 外 周 血 染 色 体 标 本 制 备 失 败 的 影 ４ 霍 蒲 等 人 响 因素 分 析 Ｌ３ 延 安 大学 学 报 ： Ｊ． 医学 科 学 版 ，０ ７ ５ ４ ：－． ２ ０ ， （ ）３４ ［ ］ 赵小 平 ， 红 ， 燕 ， ． 片 对 染 色 体 Ｇ 显 带 标 本 质 量 的 影 响 分 ５ 余 黄 等 烤 析［ ］ 现 代 医 药 卫 生 ，０ ９ ２ （ ） ３３ Ｊ． ２０ ，５ ３ ： ９ ．
４ 国际检验 医学杂 志 ２１ ０１年 ９ 第 ３ — ４Ｎ Ｉｔ ａ ｄＳ ｐ ｅ ｅ ０ １ Ｖｏ． ２ Ｎｏ １ 月 ２ ￣ １ ｇ ｎ ＬｂＭｅ ｅ ｔ ｍｂ ｒ２ １ ， ｉ ３ ， Ｊ
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微 升 视 为细 胞 数 正常 的 Ｃ Ｆ， 般 不 提 倡 分 类 。而 恰 恰 是 这 种 Ｓ 一
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在制 片时 ， 玻片 的清洁度将 直接 影响 细胞 的贴附 能力 。 载
因此 ， 制 片 前 ， 玻 片 要 经 泡 酸 处 理 ， 清 除 载 玻 片 上 的 阴 阳 在 载 以 离 子 与 杂 质 。适 当 的 滴 片 高 度 也 是 获 得 高 质 量 染 色 体 的 必 然 要 求 。高 度过 高 ， 色 体 分 散 范 围 过 大 ， 至造 成染 色 体 丢 失 ； 染 甚 高 度 过 低 ， 染 色体 分 散 不 良 。经 过 探 索 ， 室 滴 片 的 高 度 保 则 本
（ 稿 日期 ： ｏ １Ｏ 一 ７ 收 ２ ｌ ｌ２ ）
经验 交流 ・
白细胞 计 数 正 常 的脑 脊 液 中检 出肿瘤 细 胞 病例 回顾 性 分析
万均成 ， 文 芳 ， 玲 肖
（ 汉 大学人 民 医院神 经精神 病研 究所 武
摘
４ ０６ ） ３ ０ ０
要： 脑 脊 液 （ Ｓ ） 分 类 计 数 中 检 出肿 瘤 细 胞 及 其 对 脑 膜 癌 的 诊 断 价 值 。方 法 Ｃ Ｆ在
放 。此 外 ， 胞 悬 液 的 浊 度 也 要 适 中 ， 液 浊 度 太 小 ， 片 后 载 细 悬 制
目前 ， 色 体 制 作 过 程 没 有 统 一 的 质 量 控 制 ， 剂 生 产 厂 染 试 家 多 ， 质 量 也 参 差 不 齐 ， 实 验 室 制 作 的染 色 体 质 量 与 实 验 且 各 环 境 、 剂 质 量 、 员 素 质 均 有 很 大 的 关 系 。为 了 尽 可 能 的 获 试 人
２ ０ １ １ 】 — ５ ０ ２， ｏ（ ）： ２ １ ．
玻 片 上 细 胞 数 量 少 ； 度 太 大 也 不 利 于 染 色 体 分 散 ， 色 体 交 浊 染
叉， 均不 利 于 分 析 。
４２ 滴 片 ．
一
滴 片 质 量 的 好 坏 也 是 染 色 体 制 作 的 关 键 步 骤 之
细 胞 培 养 、 片 、 片 过 程 做 得 多 么完 美 ， 果 没 有 很 好 地 把 握 制 烤 如 消 化 与 染 色 过 程 ， 不 能 获 得 显 带 清 晰 的 染 色 体 。 消 化 过 程 是 也 去 除 染 色 体 上 的蛋 白质 （ 括 组 蛋 白 和 非组 蛋 白 ） 获 得 良好 包 而
随着脑脊液 （ Ｓ ） Ｃ Ｆ 细胞玻 片离 心法 的不 断推 广应用 ， Ｓ ＣＦ
细 胞 学 检 查 对 神 经 系 统 疾 病 诊 断 的帮 助 越 来 越 大 ， 别 是 对 中 特
枢 神经 系 统 感 染 性 疾 病 和 脑 膜 癌 的 诊 断具 有 其 他 检 查 不 可 取 代 的优 势 。在 临 床 检 验 学 教 材 中 把 白 细 胞 计 数 小 于 １ ／ Ｏ个
持在 ８ １ ｍ， 获 得 比较 好 的 分裂 象 。 ～ ５ｃ 能
Ｅ ３ 曹 海 涛 ． 色 体 外 周 血 淋 巴细 胞 培 养 中 的 几 点 体 会 ［］ 现 代 中 西 ２ 染 Ｊ．
医结 合 杂 志 ，０ ７ １ （ ０ ：４ ５ ２ ０ ，６ ３ ） ４ ８ 。
４ ３ 烤 片 烤 片温 度 的 高低 和 时 间 的 长 短 会 影 响显 带 标 本 的 ． 质 量 ， 握 好 适 宜 的 烤 片 温 度 和 时 间 ， 能 制 备 高 质 量 的 显 带 掌 才 标 本 。烤 片 温 度 过 高 、 间 过 长 ， 酶 对 标 本 的 消 化 时 间 也 时 胰
细 胞 ， 有 病例 均 可 见 肿 瘤 细 胞 。发 现 肿 瘤 细 胞 的 ９例 患 者 中有 ８ 找 到 了 原 发 灶 。结 论 检 验 者 对 白 细胞 计 数 小 于 １ 所 例 Ｏ个 ／ 微
升 的 Ｃ Ｆ要 足 够 重 视 ， 能 免 去 分 类 环 节 ， 过 观 察 全 片 ， 分 惠 者 可 找 到 具 有 诊 断 价 值 的 细 胞 ， 别 是 具 有 确 诊 价 值 的 肿 瘤 Ｓ 不 通 部 特
看 似 正 常 的 Ｃ Ｆ在 分 类 计 数 时 可 能 检 出 特 殊 细 胞 ， 临 床 提 Ｓ 为
１３ 方法 ．
常 规 腰 穿 取 Ｃ Ｆ ２ ， ２瓶 按 次 序 编 １ ２ Ｓ ～４ｍＬ 分 、
号 送 检 。第 １瓶 做 生 化 及 相 关 检 查 ， ２瓶 先 混 匀 滴 人 血 球 计 第 数 板 行 白细 胞 计 数 。再 取 Ｃ ＦＯ ５ １ｍ Ｓ ． ～ Ｌ加 入 Ｃ Ｆ细 胞 沉 淀 Ｓ
・
１ ４ ・ ６２
国际检验 医学杂 志 ２１ 年 ９月第 ３ ０１ ２卷第 １ ４期
Ｉｔ ａ ｎ ＬｂＭｅ，ｅｔｍ ｅ ２１ ，ｏ．２Ｎ ．４ Ｊ ｄＳｐｅ ｂｒ ０ ｌＶ １ ，ｏ１ ３
低 、 渗 时 问 过 长 会 使 核 膜 破 裂 ， 色 体 提 前 释 放 ， 不 仅 会 使 低 染 这 分 裂 中期 细 胞 减 少 ， 在 的 染 色 体 也 会 在 滴 片过 程 中 随机 分 布 散 在 载玻 片 上 ， 响其 他 细 胞 的 染 色 体 计 数 ， 影 降低 制 片 质 量 ； 渗 低 时 间 过 短 ， 部 分 细胞 的 细 胞 膜 未 破 裂 ， 致染 色 体 释 放 障碍 ， 一 导
湖 南 湘 雅 基 因 技 术 有 限 公 司 的 商 品 化 的 姬 姆 萨 染 液 ， 有 方 具
便 、 量 稳 定 的优 点 。 由 于 放 置 过 久 的 姬 姆 萨 染 液 有 效 成 分 会 质 下 沉 ， 之 前 需 摇 匀 ， 能 获 得 质 量 良好 的 制 片 。另 外 ， 姆 萨 用 才 姬 染液对稀释液 的 ｐ 值 也有 一定 的要求 ， 室 采用 ｐ ， Ｈ 本 Ｈ７ ４的 Ｐ Ｓ作 为 稀 释 液 ， 可 获 得 清 晰 的 染 色 体 图像 。 Ｂ 即
４ １ 细 胞 悬 液 配 制 经 过 低 渗 、 固定 、 ． 预 固定 ， 获 得 淋 巴 细 即 胞 。 此 时 的 细 胞 非 常 脆 弱 ， 配 制 细 胞 悬 液 时 要 轻 轻 地 吹 打 混 在
匀 ， 打 方 式 或 者 力 量 不 当 ， 会 使 核 膜 破 裂 ， 成 染 色 体 释 吹 都 造
收 集 细 胞 过 程 中加 入 固 定 剂 的 目 的是 维 持 染 色 体 的形 态 。
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般 实 验 室 使 用 的都 是 按 甲 醇 ： 乙 酸 一 ３：１比例 配 制 的 混 冰
合 液 。一 方 面 ， 定 剂 可 以 使 细 胞 脱 水 、 白 质 变 性 而 使 染 色 固 蛋
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Ｅ ３ 董 烁 ， 振 兴 ． 谈 人 体 外 周 血 淋 巴 细 胞 染 色 体 的 制 备 ［ ］ 食 晶 ３ 谢 浅 Ｊ．
工 程 ， ０ ８（ ）： ５ ２ ． ２ ０ ２ ２ — ７
随 之 增 加 ， 既 影 响 工 作 效 率 ， 影 响 标 本 的 显 带 质 量 ， 显 带 这 也 使
同 样 不 利 于 核 型 分 析 。本 室 采 用 常 规 的 ０ ０ ５ ｍｏ／ ＫＣ 溶 ． ７ ｌＩ １ 液 ８ｍＬ 低 渗 （ ０ ） ｉ， 获 得 足 够 数 量 的 分 裂 中 期 细 胞 。 ， ３ ±５ ｒ ｎ 可 ａ
３ 固 定
５ １ 消化 ．
Ｇ 显 带 标 本 是 临床 上 运 用 最 多 的 显 带 技 术 。无 论
的显 带 标 本 ， 常 用 的 消 化 酶 为 ０ ０ ５ 的 胰 蛋 白 酶 。 然 而 ， 通 ． ２
消 化 时 间根 据 胰酶 的浓 度 、 量 不 同 而 定 ， 同 的 实 验 室 消 化 质 不 时 间不 一 ， 即使 同 一 实 验 室 不 同 时 间消 化 所 需 的 时 间 也 不 同 。 这 就 要求 实 验 人 员 在 每 次 批 量 消 化 之 前 都 要 进 行条 件 摸 索 ， 以 获得最佳 的实验条件 。
得 稳 定 的染 色 体标 本 ， 实 验 室应 该 参 考 其 他 实 验 室 的 成 功 经 各 验 ， 据 自 己实 验 室 条 件 进 行 摸 索 ， 获 得 质 量 尽 可 能 高 的染 根 以 色体标本 。 参 考 文 献
