血小板功能检测共识ppt课件

使计数结果偏低，但时间不宜放置过长，否则出现颗粒沉淀物，使计数无法 进行。 血小板在镜下为富于折光之小点，约为红细胞的1/2～1/3大小。 计数光线不可太强，1h内计数完成。如红细胞不完全溶解，影响血小板计数 时，可加大稀释倍数，或另换稀释液。
临床意义
血小板减少是引起出血的常见原因
20～50×109/L时，可有轻度出血或手术后出血； <20×109/L，可有较严重的出血； <5×109/L时，可导致严重出血； >400×109/L为血小板增多
备用。
试剂器材
器材 改良牛鲍计数板 采血针 微量吸管 显微镜
操作步骤
吸取血小板稀释液0.38ml于康氏试管中。 用一次性微量吸管吸血20ul于上述稀释液中。充分混
匀后取一小滴于血球计数池内，静止10-15分钟. 用低倍镜或高倍镜计数中央大方格中五个中方格内之
血小板数。
血小板计数方法
血小板计数方法学评价
SUCCESS
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2019/7/30
血小板计数原理
血液经血小板稀释液稀释后，红细胞被溶 解，注入计数池后，在显微镜下计数血小板。经 换算求出每升血液中的血小板数。
试剂器材
试剂
草酸铵稀释液 草酸铵10克 EDTA0.12克 蒸馏水加至1000ml，过滤后
影响血小板形状改变 的因素很多，各种形态异常又 无特异性。因此，不规则和畸 形的血小板比值超过10%时才 有临床意义。
3．聚集性和分布异常 血小板聚集、分布状态可间 接反映其功能。聚集功能正常的血小板在非抗凝血的外周血涂片 中常可见3～5个聚集成簇或成团，聚集与散在血小板之比为 20∶1。
在EDTA抗凝血 的血涂片中，可见血小 板不聚集而呈散在分布 状态或出现诱发的血小 板聚集现象。

红细胞 血小板 白细胞
1.粘附(adhesion)：与非血小板表面 2.释放(release) 3.聚集(aggregation)：与血小板之间 4.收缩(contraction)：收缩蛋白 5.吸附(adsorption)：凝血因子(I、V、XI、XIII)
1·黏附
定义：血小板与非血小板表面的黏着称为血小板 黏附（platelet adhesion)
血小板的黏附、聚集与释放几乎同时发生， 能引起血小板聚集的因素，多数能引起血 小板释放反应。
许多血小板释放的物质可进一步促进血小 板的活化、聚集、加速止血过程。
临床上通过测定血浆β-血小板球蛋白和PF4 的含量来了解体内血小板的活化情况。
1.定义：
血小板与血小板之间的相互黏着称 为血小板聚集。
释放
1.血小板释放：血小板受刺激后将储存在致密体、α -颗粒
或溶酶体内的物质排出的现象，称为血小板释放（platelet release)或血小板分泌（platelet secretion).
2.释放的物质： 致密体：ADP、ATP、5-HT 、Ca2+ αW-颗F、粒纤：维β-蛋血白小原板、球凝蛋血白因、子血V小（板FV因）子凝4血（酶PF敏4）感v蛋 白、PDGF等 临时合成并释放：血栓烷A2(TXA2)
2.参与：纤维蛋白原、Ca2+和血小板膜上 GPⅡb/Ⅲa。
在未受刺激的血小板，其膜上的GPⅡb/Ⅲa 并不能与纤维蛋白原结合。
血管破损
露
致聚剂的激活 Ca2+
结合
GPⅡb/Ⅲa 活化 ，纤维蛋白原受体暴
受体与纤维蛋白原
为桥梁
板
纤维蛋白原
连接相邻血小
血流中的正常血小板 血小板粘附于受损内膜并激活

Large PLT
MPC MPM PCDW P Count-2D
平均血小板成分浓度
平均血小板聚集 血小析成分分布宽度 在血小板测定中血小板的原始计数 血小板压积
PCT
PDW PLTN PLTX PLTY PMDW R Count-2D RBC-2D Count RBC Fragments RBC Ghosts
存在不足
血小板检测面临的挑战
• • • • • • • •
RBC fragments WBC fragments 和 complexes 细菌、寄生虫 细胞碎片 、杂质 大血小板 、血小板微泡 交叉污染 血小板聚集 抗凝集影响
测试原理
ADVIA 2120 2D－PLT检测
• 二维参数：PLT体积 (V) 和 折射指数 (MPC)
R = 0.6877
2
Immunophenotypic Count (x 10 9/L)
Immunophenotypic Count (x 10 9/L)
Impedance (2)
120 Impedance (2) (x10 9/L) Impedance (3) (x 10 9/L) 100 80 60 40 20 0 0 20 40 60 80 100 y = 0.9757x + 1.2843 R = 0.808
2500
/m L)
One-Dimensional PLT Count (x10
– 采用专利的Mie原理进行激光散射分析 – 对血小板细胞逐一进行二维检测 – 提高对血小板、 细胞碎片、低色素细胞和小红细胞的鉴别• PLT体积检测范围Fra bibliotek1 - 60 fL
– 血小板计数包 括大血小板（>20fL） – 提高对化疗、免疫性血小板减少症（ITP）、 BernardSoulier综合症、骨髓增值症等大血小板样本计数的准确性

• 血小板聚集是指活化的血小板导致粘附的血小板之间聚集成团的 特性。
• 血小板聚集功能主要与血小板膜GPⅡb／Ⅲa、Ⅰb、血浆纤维蛋 白原及细胞外钙离子等有关。
2017.8.23
12
• 动脉粥样硬化 • 冠状动脉疾病，CAD和急性心肌梗死 • 脑血管疾病和中风 （脑血管意外） • 周围动脉闭塞性疾病 （PAOD） • 糖尿病
2019/5/27
血小板聚集的测定
• 1.样品制备 • （1）抗凝剂采用3.28%的枸橼酸钠，抽血量与抗凝剂应为9：1。 • （2）PRP（富血小板血浆）制备：抗凝血800转/分，10min。 • （3）PPP（贫血小板血浆）制备：将抗凝管第二次离心，3000转/min，10min。
• 2.光路矫正
血小板聚集的测定 与临床应用
检验科 方媛
2017.8.23
1
血小板聚集与临床应用
• 再认识血小板 • 血小板聚集的病理生理 • 血小板聚集的测定方法 • 血小板聚集的临床应用
2017.8.23
2
血小板
2017.8.23
3
血小板
• 血小板是骨髓中巨核细胞质脱落下来的小块，故无细胞核，表面 有完整的细胞膜。
• 饮食，采血前须空腹或12小时内未进高脂食物。 • 烟酒，采血前12小时内禁用烟酒。 • 药物，一周内不用阿司匹林类药物。 • 三天内不用影响血小板功能的药物，如潘生丁、消炎痛、维生素E、维生素B6、氨茶碱、
血管扩张剂(硝普钠、硝酸甘油、亚硝酸钠)、心得安、速尿、利尿酸、氨丙嗪、非那根、 苯海拉明、安妥明、青霉素、羧苄青霉素、呋喃坦丁、蝮蛇类降纤药（Svate）、丹参、 川芎、赤芍、红花、当归等活血化瘀中药等。 • 采血前需处于安静状态,运动可使血小板激活。 • 注意年龄、经期、妊娠期等生理因素的影响。月经和妊娠，雌激素对聚集和释放功能 有影响。