高中生物选修三：基因工程知识点填空.doc

高中生物选修三专题一基因工程知识点专题一基因工程基因工程的概念基因工程就是指按照人们的心愿，展开严苛的设计，通过体外dna重组和转基因技术，剥夺生物以代莱遗传特性，缔造出以合乎人们须要的代莱生物类型和生物产品。

基因工程就是在dna分子水平上展开设计和施工的，又叫作dna重组技术。

（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内乌酶（管制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

（2）功能：能辨识双链dna分子的某种特定的核苷酸序列，并且并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

（3）结果：经管制酶研磨产生的dna片段末端通常存有两种形式：黏性末端和平末端。

黏性末端：当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的dna两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。

平末端：当管制酶从辨识序列的中心轴线处剖开时，剖开的dna两条单链的切口，就是平坦的，这样的切口叫做元显恭末端。

2.“分子缝合针”——dna连接酶(1)两种dna连接酶（e·colidna连接酶和t4-dna连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区别：e·colidna连接酶源于大肠杆菌，就可以将双链dna片段优势互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而t4dna连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

(2)与dna聚合酶促进作用的优劣:dna聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

dna连接酶是（1）载体具有的条件：①能够在受到体细胞中激活并平衡留存。

②具有一至多个限制酶切点，供外源dna片段插入。

③具备标记基因，可供重组dna的鉴别和挑选。

④对受体细胞无害。

（2）最常用的载体就是质粒,它就是一种外露的、结构直观的、单一制于细菌染色体之外，并具备自我复制能力的双链环状dna分子。

专题一基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

黏性末端：当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。

平末端：当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coli DNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区别：E·coli DNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接DNA连接酶DNA聚合酶不同点连接的DNA双链单链模板不要模板要模板连接的对象2个DNA片段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链DNA片段上相同点作用实质形成磷酸二酯键化学本质蛋白质3.“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

生物选修3知识点专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过_____________________ ,赋予生物以 _____________ 创造出_____________________________ 。

基因工程是在上进行设计和施工的，又叫做。

（一）基因工程的基本工具1•“分子手术刀” 一一 ___________________________（1）来源：主要是从____________ 分离纯化出来的。

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种__________________ 的核苷酸序列，并且使每一条链中_ _ 部位的两个核苷酸之间的______________ 开，因此具有性。

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：________________ 和__________________2.“分子缝合针” 一一_______________⑴ 两种DNA连接酶（____________________ 和_____________________ ）的比较：①相同点：都缝合 __________________ 键。

②区别：E - coliDNA连接酶来源于_________________ ，只能将双链DNA片段互补的______________ 之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合__________________ ，但连接平末端的之间的效率较____________ 。

⑵ 与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将__________________ 加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接 _____________________ 的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车” 一一_（1）______________________________________________ 载体具备的条件：① 。

一、基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过_____________和________等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

由于基因工程是在______________水平上进行设计和施工的，因此又叫做_________________.二、基因工程的三大工具：______________—“分子手术刀”；________________—“分子缝合针”；___________—“分子运输车”。

三、限制性核酸内切酶的来源_________________作用部位__________________结果__________________________识别序列______________四、DNA连接酶作用部位是___________________两种常见的DNA连接酶：1._________________.来源____________，只连接______末端；2.______________提取自___________，可连接__________________，连接平末端效率______。

五、质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有______________能力的_________________________DNA分子。

六、标记基因的作用：____________________________.七、使用的载体除质粒外，还有_________________,_________________八、基因工程的步骤__________________________,__________________________,__________________________ ____，________________________________.九、获取目的基因的方法：方法一：______________________________方法二：_____________________方法三________________________.十、cDNA文库：某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中。

高中生物选修三基因工程主要知识点（1.1、1.2）1、基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

1、基因工程的三大工具：限制性核酸内切酶—“分子手术刀”；DNA连接酶—“分子缝合针”；基因进入受体细胞的载体—“分子运输车”。

2、限制性核酸内切酶的特点：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且是每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

3、限制酶识别序列的特点：反向对称，重复排列。

4、限制酶在原核生物中的作用：切割外源DNA，保护细菌细胞。

5、为什么限制酶不剪切原核生物自身的DNA分子？原核生物本身不含相应特异性序列；对DNA分子进行甲基化修饰。

6、两种常见的DNA连接酶：E·coli DNA连接酶：源自大肠杆菌，只连接黏性末端；T4DNA连接酶：提取自T4噬菌体，两种末端均可连接，连接平末端效率低。

7、DNA连接酶和DNA聚合酶的相同点：都是蛋白质；都能生成3'磷酸二酯键。

不同：前者在两个片段之间形成3'磷酸二酯键，后者只能将单个核苷酸连接到已有片段上；前者不需要模版，后者需要。

8、载体需要满足的条件：有一到多个限制酶切点；对受体细胞无害；导入基因能在受体细胞内复制和表达；有某些标记基因；分子大小合适。

9、质粒：一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。

10、标记基因的作用：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

11、三类载体：质粒；λ噬菌体的衍生物；动植物病毒。

12、获取目的基因的方法：说法一：从自然界已有的物种中分体（鸟枪法、反转录法）、用人工的方法合成；说法二：从基因文库中获取（鸟枪法、反转录法）、利用PCR技术合成、用化学方法人工合成。

13、基因库：一个物种中全部个体的全部基因的总和；基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，个个受体菌分别含有这种生物的不同的基因；基因组文库：含有某种生物全部基因的基因文库；部分基因文库：只含有一种生物部分基因的基因文库；cDNA文库：用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中。

基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

基因工程的原理及技术原理：基因重组技术基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

(2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

(3)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端.2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较：①.相同点：都缝合磷酸二酯键。

②.区别：E•coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

(2)最常用的载体是质粒：它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

(3)其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。

2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。

人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。

3.PCR技术扩增目的基因(1)原理：DNA双链复制(2)过程：①加热至90～95℃DNA解链;②冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链;③加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成第二步：基因表达载体的构建1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。

基因工程知识点填空一、基因工程的概念：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过和等技术，赋予生物以，从而创造出更符合人们需要的。

基因工程是在上进行设计和施工的，又叫做。

也叫技术。

二、基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——（1）来源：主要是从中分离纯化出来的。

（2）功能：能够双链DNA分子的某种的核苷酸序列，并且使每一条链中部位的两个核苷酸之间的断开，因此具有性。

（3）结果：产生：和。

2.“分子缝合针”——(1)两种DNA连接酶①E·coliDNA连接酶：来源：只能连接，形成键；②T4-DNA连接酶：来源：，能连接和，形成键。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”——（1）载体具备的条件：①。

②。

③。

（2）作用：携带进入受体细胞，使目的基因在受体细胞中稳定存在并表达。

（3）最常用的载体是,它是一种裸露的、结构简单的、独立于，很小的双链DNA 分子。

（4）其它载体：三、基因工程的基本操作程序（一）第一步：1、目的基因主要是指也可以是。

2、获取目的基因的方法有（1）从自然界中，（2）。

①从基因文库中获取目的基因：基因文库的类型：a ，包含了某种生物的全部基因。

B ，（如：cDNA文库）包含了某种生物的基因。

②PCR技术扩增目的基因a.原理：b.前提条件：,c.酶：;d.原料：;e.反应条件：;f.仪器：③人工合成目的基因:适用于基因，又已知。

仪器：(二)第二步（核心）：1.目的：使目的基因在受体细胞中，并且可以，使目的基因能够。

2.组成：、、、、（1）启动子：是一段有特殊结构的，位于基因的，是识别和结合的部位，能驱动基因，最终获得所需的。

（2）终止子：也是一段有特殊结构的，位于基因的。

使在所需要的地方停止。

（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中，从而将筛选出来。

常用的标记基因是。

人教版高中生物选修3专题一基因工程详细知识点生物选修三易考知识点背诵专题1基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）主要是从原核生物（微生物）中分离纯化出来的。

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端（中心轴线的两侧）和平末端（中心轴线）大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ)能识别GAATTC序列，SmaI识别CCCGGG序列:他们识别的核苷酸序列不同,但是切点都是在G↓C之间。

（4）比较有关的DNA酶（1）DNA水解酶：能够将DNA水解成四种脱氧核苷酸，彻底水解成膦酸、脱氧核糖和含氮碱基（2）DNA解旋酶：能够将DNA或DNA的某一段解成两条长链，作用的部位是碱基和碱基之间的氢键。

留意：使DNA解成两条长链的方法除用解旋酶之外，在适当的高温（如94℃）、重金属盐的作用下，也可使DNA解旋。

（3）DNA聚合酶：能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成DNA长链。

（4）DNA连接酶：是通过磷酸二酯键连接双链DNA的缺口。

留意比较DNA聚合酶和DNA连接酶的异同点。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区别：4DNA连接酶来自T4噬菌体，能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

(2)与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

生物选修三易考知识点背诵专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望, 进行严格的设计, 通过体外DNA重组和转基因技术, 赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的, 又叫做DN A重组技术。

（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源:主要是从原核生物（微生物）中分离纯化出来的。

（2）功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列, 并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。

（3）结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式: 黏性末端（中心轴线的两侧）和平末端（中心轴线）EcoRⅠ)能识别GAATTC序列, SmaI识别CCCGGG序列:他们识别的核苷酸序列不同,但是切点都是在G↓C之间。

（4）比较有关的DNA酶（1）DNA水解酶: 能够将DNA水解成四种脱氧核苷酸, 彻底水解成膦酸、脱氧核糖和含氮碱基（2）DNA解旋酶：能够将DNA或DNA的某一段解成两条长链, 作用的部位是碱基和碱基之间的氢键。

注意：使DNA解成两条长链的方法除用解旋酶以外, 在适当的高温（如94℃）、重金属盐的作用下, 也可使DNA解旋。

（3）DNA聚合酶: 能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成DNA长链。

（4）DNA连接酶: 是通过磷酸二酯键连接双链DNA的缺口。

注意比较DNA聚合酶和DNA连接酶的异同点。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较:①相同点: 都缝合磷酸二酯键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌, 只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA 连接酶来自T4噬菌体, 能缝合两种末端, 但连接平末端的之间的效率较低。

人教版高中生物选修3专题一基因工程详细知识点生物选修三易考知识点背诵专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，通过体外DNA重组和转基因技术，严格设计生物，赋予其新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程在DNA分子水平上进行设计和施工，又称为DNA重组技术。

一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）1）来源：主要从原核生物（微生物）中分离纯化出来。

2）功能：能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，具有专一性。

3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端（中心轴线的两侧）和平末端（中心轴线）。

大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ）能识别GAATTC序列，SmaI识别CCCGGG序列。

它们识别的核苷酸序列不同，但切点都在G↓C之间。

4）比较有关的DNA酶1）DNA水解酶：能够将DNA水解成四种脱氧核苷酸，彻底水解成膦酸、脱氧核糖和含氮碱基。

2）DNA解旋酶：能够将DNA或DNA的某一段解成两条长链，作用部位是碱基和碱基之间的氢键。

注意：使DNA解成两条长链的方法除用解旋酶以外，在适当的高温（如94℃）、重金属盐的作用下，也可使DNA解旋。

3）DNA聚合酶：能将单个核苷酸通过磷酸二酯键连接成DNA长链。

4）DNA连接酶：通过磷酸二酯键连接双链DNA的缺口。

注意比较DNA聚合酶和DNA连接酶的异同点。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶1）两种DNA连接酶（E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区别：E.coli DNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4 DNA连接酶来自T4噬菌体，能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

基因工程的原理及技术原理：基因重组技术基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

(2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

(3)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端.2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较：①.相同点：都缝合磷酸二酯键。

②.区别：E•coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

(2)最常用的载体是质粒：它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

(3)其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。

2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。

人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。

3.PCR技术扩增目的基因(1)原理：DNA双链复制(2)过程：①加热至90～95℃DNA解链;②冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链;③加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成第二步：基因表达载体的构建1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。

高中生物选修三《基因工程》知识点归纳1. 遗传工程：狭义：基因工程广义：把一种生物的遗传物质移到另一种生物的细胞中。

2. 基因工程的核心是构建重组DNA分子。

3. 基因工程诞生的理论基础：DNA是生物遗传物质的发现，DNA双螺旋结构的确立以及遗传信息传递方式的认定。

4. 实施基因工程的条件：工具酶(限制性内切酶、连接酶、聚合酶) 目的基因：基因载体：要求：①能自我复制。

②含限制性内切酶位点。

③含筛选标记(一般为抗性基因)。

④能启动外源目的基因的转录、翻译。

⑤在细菌中，质粒有较高的拷贝数与稳定性。

受体细胞:微生物、动植物细胞(用氯化钙处理大肠杆菌可增加其细胞壁通透性，方便重组质粒进入。

)5. 基因工程的工具：①限制性核算内切酶可作为切割DNA分子的手术刀，使DNA重组成为可能②DNA连接酶具有缝合DNA的作用，可以将外源基因和载体DNA连接在一起。

③载体：最常见的载体为大肠杆菌质粒，质粒常含抗生素抗性基因。

(质粒是能自主复制的双链环状DNA，在细菌中独立于染色体存在的特殊遗传物质)。

除常用细菌和酵母的质粒外，改造和修饰后的噬菌体和病毒DNA均可作为基因载体。

向双子叶植物导入基因时，常用土壤农杆菌的Ti质粒。

6. 基因工程的基本操作步骤：目的基因的获得、重组DNA的形成、重组DNA 导入受体细胞、筛选含有目的基因的受体细胞、目的基因的表达。

7. 获得目的基因的方法：若化学序列已知，则可用化学方法合成目的基因或用PCR扩增目的基因。

若序列未知，则应建立包含目的基因的基因文库后，从中寻找。

8. 转基因植物解决了传统育种中远缘亲本难以杂交的缺陷，并可以定向的改变植物的性状。

9. 基因工程在医药工业和医学领域的应用主要包括基因工程药物和基因治疗。

10. 基因工程药物有胰岛素，干扰素(病毒入侵细胞后产生的糖蛋白，有抗病毒，抗细胞分裂和免疫调节等多种生物学功能，是治疗病毒性肝炎和肿瘤的药物)，乙型肝炎疫苗等。

11. 基因治疗是向目标细胞中引入正常功能的基因，以纠正或补偿基因的缺陷，达到治疗的目的。

专题 1 基因工程1．基因工程又叫做或。

就是按照人们的愿望，把一种生物的某种基因提取出来，加以，然后放到另一种生物的细胞里，改造生物的。

2．基因工程是在上进行的设计施工，基本工具是：基因的剪刀（分子手术刀）——；基因的针线（分子缝合针）——；基因的（分子运输车）——。

3．限制酶（又称）：主要从中分离纯化出来；能够识别双链DNA 分子的某种，并且使每一条链中的两个核苷酸之间的断开，因此具有。

DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端有和两种形式。

例如，EcoRⅠ限制酶识别的序列是，在之间切割；SmaⅠ限制酶识别的序列是，在之间切割。

4．DNA连接酶的作用是将拼接（即形成，注意不是黏合或形成氢键）成新的DNA分子（注意DNA聚合酶只能在有的条件下将加到DNA片段的，形成磷酸二酯键）；E·coli DNA连接酶来源于，只能将双链DNA片段之间连接起来；而T4 DNA连接酶能缝合，但连接平末端的之间的效率。

5. 最常用的载体是，它是一种、结构简单、独立于细菌之外，并的很小的。

6．真正被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上进行过的，其上有一个至多个，供外源DNA 片段（基因）插入其中；还有特殊的供。

7．重组质粒进入受体细胞后，在细胞中进行自我复制（具有），或上，随染色体DNA进行同步复制；在基因工程中使用的载体除质粒外，还、8．基因工程的基本操作流程：9．目的基因主要是指，也可以是一些；目的基因可以从自然界中已有的物种中分离出来（，建立从中获取或通过获取，一般只适合于，真核基因因为含有不适合该类方法），也可以用人工的方法合成（，通过mRNA反转录得到cDNA，然后建立从中获取或通过获取；如果基因比较小且核苷酸序列已知，也可以通过用化学方法直接人工合成）。

10．基因组文库的构建： 将某种生物体内的 DNA 提取出来， 选用适当的 ，将 DNA12． cDNA 文库属于。

与基因组文库比较： cDNA 文库较小， ，仅15．基因表达载体的组成：、 、 、 、 。

专题一基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

〔一〕基因工程的根本工具1.“分子手术刀〞——限制性核酸内切酶〔限制酶〕1〕来源：主要是从原核生物中别离纯化出来的。

2〕功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

3〕结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

黏性末端：当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。

平末端：当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。

“分子缝合针〞——DNA连接酶两种DNA连接酶〔E·coli DNA连接酶和T4-DNA连接酶〕的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区别：E·coli DNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶DNA聚合酶不同点连接的DNA 双链单链模板不要模板要模板连接的对象2个DNA片段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链相同点作用实质形成磷酸蛋白质DNA片段上“分子运输车〞——载体1〕载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。