【CN109811026A】一种胶原蛋白的提取方法【专利】

(10)申请公布号 (43)申请公布日 2014.09.03C N 104017073A (21)申请号 201410274732.X(22)申请日 2014.06.18C07K 14/78(2006.01)C07K 1/34(2006.01)C07K 1/14(2006.01)(71)申请人常州药物研究所有限公司地址213003 江苏省常州市新北区高新科技园10号(72)发明人高坚杰 杨双双 钱陈(74)专利代理机构常州市科谊专利代理事务所32225代理人袁兴隆(54)发明名称一种胶原蛋白的制备方法(57)摘要本发明涉及一种胶原蛋白的制备方法，具有如下步骤：①取动物尾，并对动物尾进行灭菌处理，手术剥离筋腱，并收集筋腱；②使用含尿素溶液筋腱浸没，在溶液中将筋腱破碎，将已破碎的尾腱尿素混合液在2-25℃提取；③将混合溶液进行过滤处理，去除未溶解的杂质后获得粗提液，对粗提液进行凝胶分离；④将粗提液进行去除盐和去杂质处理后得到精制液；⑤取精制液用冻干机冻干，即可得到医用级胶原蛋白。

本发明可以大大节省提取和纯化的时间，并且收率可以达到90%以上，大大提高了提取和纯化的效率，同时，利用本发明所提供的方法所生产的胶原蛋白产品杂质少，纯度高，避免了提取过程所引起的降解，保证了产品胶原蛋白的完整性和生物活性。

(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书6页 附图1页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书6页 附图1页(10)申请公布号CN 104017073 A1/1页1.一种胶原蛋白的制备方法，其特征是具有如下步骤：①动物尾腱的准备取动物尾，并对动物尾进行灭菌处理后，手术剥离筋腱，并收集筋腱；②胶原蛋白的提取使用含尿素溶液将步骤①中得到的筋腱浸没，在溶液中将筋腱破碎，将已破碎的尾腱尿素混合液在2-25℃提取；③胶原蛋白的纯化将步骤②得到的混合溶液进行过滤处理，去除未溶解的杂质后获得粗提液，对粗提液进行凝胶分离，根据紫外吸收选取合适体积段的溶液进行收集；④精制将步骤③收集的粗提液进行去除盐和去杂质处理后得到精制液，精制液中含盐量低于0.1%；⑤冻干取步骤④得到的精制液用冻干机冻干，得到医用级胶原蛋白。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201510080321.1(22)申请日 2015.02.14(71)申请人 上海拜瑞曼克生物科技有限公司地址 201612 上海市松江区新桥镇莘砖公路518号11幢2层B-6、B-8室(72)发明人 李炎　(74)专利代理机构 上海容慧专利代理事务所(普通合伙) 31287代理人 于晓菁(51)Int.Cl.C12P 21/06(2006.01)C07K 14/78(2006.01)C07K 1/34(2006.01)C12R 1/10(2006.01)C12R 1/125(2006.01)(54)发明名称一种胶原蛋白的制备方法(57)摘要本发明提供了一种胶原蛋白的制备方法，包括以下步骤：1)将含有胶原蛋白的原料进行粉碎；2)将获得的粉碎物去除杂质；3)第一次分解；4)第二次分解；5)提纯；6)干燥。

所述第一次分解为复合微生物发酵分解或复合植物蛋白酶分解；所述第二次分解为动物蛋白酶分解，所述动物蛋白酶为胃蛋白酶或胰蛋白酶。

本发明的技术方案，采用两次蛋白质分解，两次膜分离相结合的方式，制造成本低、胶原蛋白分子量小；在常温下进行有效成分损失极少，保持原有特性。

本发明的提供的胶原蛋白用于制备面膜、眼膜、腹膜、手膜、脚膜等均有很好的抚平皱纹、保湿、补水等效果。

权利要求书2页 说明书4页CN 105985996 A 2016.10.05C N 105985996A1.一种胶原蛋白的制备方法，包括以下步骤：1)将含有胶原蛋白的原料进行粉碎；2)将获得的粉碎物去除杂质；3)第一次分解；4)第二次分解；5)提纯；6)干燥。

2.根据权利要求1所述的胶原蛋白的制备方法，其特征在于：所述第一次分解为复合微生物发酵分解或复合植物蛋白酶分解；所述第二次分解为动物蛋白酶分解，所述动物蛋白酶为胃蛋白酶或胰蛋白酶。

专利名称：一种胶原蛋白的提取工艺
专利类型：发明专利
发明人：王利强,刘迪,杨思聪,王琳,沈俊逸,杨振宇,李思聪申请号：CN201510849921.X
申请日：20151130
公开号：CN105255983A
公开日：
20160120
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种胶原蛋白的提取工艺，其先将猪跟腱洗净粉碎成猪跟腱颗粒，再将猪跟腱颗粒脱脂，再将脱脂后的猪跟腱颗粒放入乙酸溶液中并加入胃蛋白酶，将它们充分混匀，使用磁力搅拌在常温下浸泡，获得酶解液；再将酶解液过滤、离心，获得胶原蛋白溶液粗品；再用乙酸溶液对胶原蛋白溶液粗品透析，最终剩下的透析液即为胶原蛋白提取液。

本发明以猪跟腱为原材料，采用酸酶结合提取胶原蛋白，可促进猪跟腱的深加工利用，避免猪跟腱潜在巨大价值的埋没浪费。

申请人：江南大学
地址：214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号
国籍：CN
代理机构：无锡市大为专利商标事务所(普通合伙)
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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710196069.X(22)申请日 2017.03.29(71)申请人 武汉医佳宝生物材料有限公司地址 430070 湖北省武汉市洪山区书城路28号(72)发明人 柯林松　陈鹏　唐小雄　(51)Int.Cl.C12P 21/06(2006.01)C07K 14/78(2006.01)C07K 1/36(2006.01)C07K 1/34(2006.01)C07K 1/30(2006.01)(54)发明名称一种提取I型胶原蛋白的方法(57)摘要本发明涉及一种提取I型胶原蛋白的方法，该方法包括如下步骤：将牛跟腱清洗干净后冷冻切片，采用75%酒精与正己烷进行消毒脱脂，进过脱杂蛋白和匀浆破碎工艺后，向匀浆液加入适量的活性酶进行酶解消化，再将上清液先后进行盐析和透析处理，将透析后的胶原原液进行冷冻干燥和真空包装得到I型胶原蛋白产品。

本发明的制备工艺简单、可实现大规模生产，是一种经济有效的提取方法。

本发明提取的I型胶原蛋白具有优良的生物相容性和生物活性，能够适应生物医学的应用，同时能够活化上皮细胞，促进上皮细胞增生和胶原酶生成，使皮肤紧致有弹力，在化妆品领域也具有重要的应用价值。

权利要求书1页 说明书4页CN 106701879 A 2017.05.24C N 106701879A1.一种提取I型胶原蛋白的方法，其特征在于，制备方法包括以下五个步骤：步骤一： 将新鲜的牛跟腱用超纯水清洗干净，采用手术刀片剔除筋膜、碎骨、廋肉和脂肪，在-20℃冰箱中将牛跟腱冷冻至硬化，取出后沿着组织纤维方向将牛跟腱切成1mm厚度的跟腱片；步骤二：称取适量跟腱片置于消毒脱脂溶液中浸泡，机械搅拌，采用不锈钢丝网滤去溶液，取出后用超纯水清洗若干次；步骤三：将步骤二处理后的跟腱片用碱性溶液浸泡进行脱杂蛋白，机械搅拌，间隔6~8h 更换一次碱性溶液，采用不锈钢丝网滤去溶液，取出后用超纯水清洗若干次至跟腱片表面为中性（pH值为7）；步骤四：将步骤三中脱杂蛋白后的跟腱片放入绞肉机中绞碎，并将绞碎后的跟腱组织置于1000mL的酸性溶液中，采用匀浆机对其匀浆破碎若干次，每次匀浆5min；步骤五：将步骤四中的匀浆液置于大容量的不锈钢容器中，继续向匀浆液中加入1000mL酸性溶液，再向其中加入适量的活性酶，搅拌消化，离心15~30min，取上清液备用；步骤六：使用氢氧化钠溶液将步骤五中的上清液中和至溶液呈中性，加入氯化钠进行搅拌盐析，离心15~30min，沉淀即为I型胶原蛋白初品，用超纯水冲洗沉淀若干次，沥干，将沥干的沉淀溶解于透析液中，在进行透析；步骤七：将步骤六中透析后的胶原原液进行干燥处理，取出后真空封装。

一种胶原蛋白的提取方法胶原蛋白是一种重要的蛋白质，存在于人体的各种组织中，包括肌肉、骨骼、皮肤、血管和肌腱等。

其具有良好的生物相容性和生物可降解性，被广泛应用于医学、食品、化妆品等领域。

下面我将介绍一种常用的胶原蛋白提取方法。

胶原蛋白的提取主要包括以下几个步骤：1. 原料准备：选择富含胶原蛋白的动物组织，如牛皮、鱼鳞、鸡爪等。

这些组织通常是食品加工过程中的副产物，可以充分利用。

清洁和处理好原料，去除杂质和污垢。

2. 酸性处理：将原料浸泡在酸性条件下，如醋酸、盐酸或硫酸中。

酸的作用是使胶原纤维的交联结构松弛，溶解胶原蛋白的非共价键。

调整酸浓度、温度和处理时间，以最大程度提取胶原蛋白。

3. 脱色：通过酸性处理后，胶原蛋白溶液通常呈现黄色或浅棕色。

为了提高其纯度和质量，需要进行脱色处理。

常用的脱色方法包括活性炭吸附法、酸性过氧化物氧化法、过滤等。

4. 澄清和浓缩：将脱色后的胶原蛋白溶液进行澄清处理，以去除悬浮物和残留的杂质。

常用的澄清方法包括沉淀、离心、过滤等。

澄清后的溶液可以通过浓缩技术提高蛋白质的浓度，如真空浓缩法、逆渗透浓缩法等。

5. 细胞外基质的提取与分离：胶原蛋白通常存在于动物组织的细胞外基质中。

细胞外基质的提取需要将组织经过化学和生物学方法进行分离。

首先利用酶或酸处理组织细胞，在保持胶原蛋白完整性的前提下去除细胞和细胞器。

然后通过离心、过滤等方式，分离胶原蛋白。

6. 纯化和检测：通过离心、电泳、超滤等技术进一步纯化胶原蛋白。

同时可以进行蛋白质浓度的测定，如比色法、BCA法等，确保胶原蛋白的纯度和浓度。

以上是胶原蛋白提取的主要步骤，值得注意的是，在整个提取过程中，应严格控制操作条件，如温度、pH值、时间等，以免对胶原蛋白产生不良影响。

此外，不同的动物组织、原料处理方式和蛋白纯化方法也会影响最终提取的胶原蛋白质量和产率。

值得一提的是，胶原蛋白的提取方法在不同领域有所差异。

例如，在食品行业中，为了满足特定功能要求，可能会选择特定的提取方法。