不同产地黄芪药材的UPLC_Q_TOF_MS指纹图谱研究_芮雯
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黄芪药材指纹图谱的研究进展【摘要】黄芪是经常使用中药,制定科学靠得住的质量标准意义重大。
文章简要概述了黄芪药材指纹图谱的研究方式为黄芪药材的质量操纵提供了依据。
【关键词】黄芪指纹图谱黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astraglus membranaceus( Fisch) Bge. var. mongholicus (Bge. ) Hsiao或膜荚黄芪Astragalus mem branaceus ( Fisch. ) Bge的干燥根。
春、秋二季采挖,除去须根及根头,晒干.甘、温,归肺、脾经。
具补气固表、利尿托毒、排浓、敛疮生肌的作用。
临床用于气虚乏力,食少便溏,中气下陷,久泻脱肛,便血崩漏,表虚自汗,气虚水肿,痈疽难溃,久溃不敛,血虚痿黄,内热消渴;慢性肾炎蛋白尿、糖尿病[1]等症。
黄芪为经常使用中药,每一年需求量约600万kg[2]。
黄芪的化学成份要紧有黄酮类、皂苷类和多糖等[3]。
长期以来对黄芪的质量操纵,人们仅以黄芪甲苷的含量作为黄芪及其复方制剂的质量标准,传统的方式一般是薄层法,最近几年来,随着科学技术的飞速进展,高效液相色谱法已愈来愈普遍的应用于质量操纵中。
但仅仅测定一个、两个单一成份无法完整表现中药材的全面情形。
指纹图谱方式的显现为全面靠得住的保证黄芪药材及其制剂的质量提供了靠得住保证。
所谓中药指纹图谱是指某种(或某产地)中药材或中成药进行适当处置后,采纳必然的分析手腕取得的、能够标示该中药材或中成药特性的某类或数类成份的色谱或光谱的图谱,它具有特点性和稳固性[4]。
利用色谱技术进行指纹图谱分析的中药材,因生常年限、生长环境的转变而可能产生个体间较为明显的不同,但个体间必然有群体共有的相似性[5]。
因此,整体性和模糊性是其大体特点。
整体性是指比较完整的反映药材的面貌,模糊性强调样品之间的相似程度。
最近几年来对黄芪药材指纹图谱的研究包括色谱法、光谱法和其他方式。
那个地址以介绍色谱法为主。
现介绍如下。
不同产地黄芪药材质量的差异性分析段琦梅;梁宗锁;杨东风;聂小妮;刘婷;兰晓继【摘要】[目的]结合<中国药典>(2005年版)规定指标及HPLC指纹图谱,对不同来源黄芪药材质量进行综合评价.[方法]测定来源于甘肃渭源、吉林舒兰、陕西凤县、甘肃陇西、山西浑源、陕西旬邑和陕西杨凌7个产区黄芪的总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物及黄芪甲苷的含量;建立黄芪药材样品的HPLC指纹图谱;对不同产地黄芪药材的质量指标和指纹图谱进行比较分析.[结果]不同产地黄芪样品的总灰分和水溶性浸出物均符合<中国药典>标准;醇溶性浸出物存在一定差异性;黄芪甲苷含量差异较大;不同样品HPLC指纹图谱共有15个共有峰,图谱间相似性较高.[结论]不同产地黄芪药材质量存在差异,多个指标综合评价能够更准确地反映黄芪药材的质量.【期刊名称】《西北农林科技大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2010(038)010【总页数】6页(P187-191,198)【关键词】黄芪;药材质量;HPLC指纹图谱【作者】段琦梅;梁宗锁;杨东风;聂小妮;刘婷;兰晓继【作者单位】西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;陕西省中药指纹图谱与天然产物库研究中心,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;陕西省中药指纹图谱与天然产物库研究中心,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;陕西省中药指纹图谱与天然产物库研究中心,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;陕西省中药指纹图谱与天然产物库研究中心,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100【正文语种】中文【中图分类】R282.710.5黄芪为豆科植物蒙古黄芪(Astragalus membranaceus (Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hisao)或膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.)的干燥根,为常用大宗药材,主要功能为补气固表,利尿脱毒,排脓,敛疮生肌[1]。
利用FTIR指纹图谱研究中药材黄芪
华夏文明源远流长,古代医药学就是华夏文明的璀璨之一,中草药更是古代医药学的重要组成部分。
而黄芪是中药材的重要代表之一,被人们广泛用于中药制剂和保健品中。
随着科学技术的进步,研究黄芪的质量管理和药效成为中药学研究的关键问题。
其中,FTIR(傅里叶红外光谱仪)指纹图谱技术是一种有效的质量评价方法,本文将结合研究示例,探讨如何利用FTIR指纹图谱分析黄芪的化学成分。
FTIR指纹图谱是通过傅里叶变换红外光谱仪测量样品吸收红外光谱,并将其转化为频率图,即指纹图谱。
其中,每个红外频率对应着不同的分子振动方式,不同的样品会在不同的频率上表现出不同的吸收峰,形成特有的指纹图谱。
因此,通过分析样品的FTIR指纹图谱,可以对其化学组分进行快速而可靠的鉴定。
对于黄芪这类中草药,其化学成分复杂、质量参差不齐,而传统的化学分析需要大量的时间和精力,难以在较短的时间内得到准确的结果。
因此,利用FTIR指纹图谱技术对黄芪进行化学成分鉴定具有重要意义。
例如,一项研究利用FTIR指纹图谱技术对不同产地的黄芪进行分类分析。
研究结果表明,不同产地的黄芪在红外频率上具有差异,形成不同的指纹图谱,从而可以对黄芪的产地进行快速鉴别。
此外,另一项研究则着重分析了黄芪不同部位的化学成分,利用FTIR指纹图谱技术对其进行快速鉴定,并对其药效和品质提出了一些有意义的结论。
总之,FTIR指纹图谱技术在中药材研究中的应用已越来越广泛,其快速、准确、可靠的特点得到了广泛认可。
通过利用FTIR指纹图谱技术对黄芪等中药材进行研究,能够更加深入地揭示其化学成分和药效,为其质量控制和临床应用提供重要参考。
黄芪药材RRLC 2UV 2MS 指纹图谱研究苏娴1,2,吴立军1,屠鹏飞2*(11沈阳药科大学天然药物化学系,辽宁沈阳110016;21北京大学药学院天然药物学系,北京100091)[摘要] 目的:建立黄芪的RRLC /UV 2M S 指纹图谱分析方法。
方法:采用Agilent Zorbax Extend C 18色谱柱(211mm @100mm,118L m );以乙腈2011%甲酸为流动相进行梯度洗脱;流速013mL #m i n -1,进样量015L L ;柱温30e ;检测波长254n m 。
结果:建立了黄芪药材RRLC /UV 2MS 指纹图谱分析方法,对11批样品进行了分析,其相似度均达到0192以上,并对其中7个色谱峰进行了初步归属。
结论:本方法快速高效,可用于黄芪指纹图谱的测定,并为其全面质量控制提供参考。
[关键词] 黄芪;指纹图谱;RRLC 2M S[收稿日期] 2009203223[基金项目] 国家自然科学基金杰出青年科学基金项目(30525043)[通信作者]*屠鹏飞,教授,博士生导师,Te:l (010)82802750,E 2m a i :l pengfeit u@b j m u 1edu 1c n黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astraga lusme mbrana 2ce us (Fisch 1)Bge 1var 1mongholicus (Bge 1)H siao 或膜荚黄芪A 1me mbrana ce us (F isch 1)Bge 1的干燥根。
近年来对黄芪药材指纹图谱的研究以色谱法为主,其中包括H PLC 2UV ,H PLC 2ELS D ,HPL C 2MS D 等方法[122],其中H PLC 2MS 方法对于药材中各种化合物均有较好的响应[3],对于含有多类成分,特别皂苷类成分的黄芪,具有较好的检测灵敏度。
为了建立黄芪药材有效、快速的指纹图谱分析方法,本研究首次采用Agilent 1200系列高分离度快速液相色谱系统(1200系列RRL C 系统),使用亚二微米填料RRH T 色谱柱进行分离,实现了黄芪中各类成分的快速高效分离,采用MS 技术,对部分色谱峰进行了鉴定,建立了黄芪药材RRL C 2UV 2M S 指纹图谱的分析方法,并对11个产地的药材进行了分析,为其质量控制提供参考。
黄芪药材的高效液相色谱指纹图谱及主要成分的含量测定方法研究进展梁瑾;封士兰;刘小花;党子龙;梁建娣;杨春霞【摘要】目的对黄芪药材的HPLC指纹图谱和主要成分的含量测定方法做一概述.方法查阅2002年以来国内外报道的有关黄芪药材的文献,研读有关高效液相色谱指纹图谱和含量测定的文献,对其研究进展进行综述.结果对黄芪药材的指纹图谱和含量测定的研究方法做了总结,并提出了建议.结论国内外有关黄芪药材的研究较多,为深入研究黄芪奠定了基础.%Objective To make a summary for the HPLC fingerprint of Radix Astragali and the method of the determination for some main ingredients. Methods Papers about Radix Astragali reported since 2002 about HPLC fingerprint and determination were reviewed. Results A summary and proposal for the method of HPLC fingerprint and determination were made. Conclusion There are much research on Radix Astragali , which is a helpful foundation for further study.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2012(027)005【总页数】4页(P490-493)【关键词】黄芪;指纹图谱;含量测定【作者】梁瑾;封士兰;刘小花;党子龙;梁建娣;杨春霞【作者单位】兰州大学药学院,兰州,730000;兰州大学药学院,兰州,730000;兰州大学药学院,兰州,730000;兰州大学药学院,兰州,730000;兰州大学药学院,兰州,730000;兰州大学药学院,兰州,730000【正文语种】中文【中图分类】R282黄芪(Radix astragali)为豆科植物蒙古黄芪(Astragalus membranaceus (Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao)或膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根,始载于《神农本草经》,列为上品,李时珍谓“耆,长也。
较大变异性的真实原因有待进一步深入研究。
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第49卷第4期兰州大学学报(自然科学版)Vol.49No.4文章编号:0455-2059(2013)04-0573-08黄芪药材不同极性部位的指纹图谱刘小花1,白仲梅2,梁瑾1,封士兰11.兰州大学药学院,兰州7300002.靖远煤业集团有限责任公司总医院药剂科,甘肃白银730913摘要:对黄芪药材不同极性部位进行指纹图谱对比研究.采用HPLC法分别对10批黄芪药材的5个提取部位研究,流动相乙腈−−水溶液梯度洗脱.建立10批不同产地黄芪中5种极性部位的模式指纹图谱.首次鉴别7个主要指标成分.方法准确可靠,为全面控制药材质量提供了一种方法.关键词:高效液相色谱;指纹图谱;质量控制;黄芪中图分类号:Q819文献标识码:AChromatographicfingerprints of different polarities fromRadix AstragaliLIU Xiao-hua1,BAI Zhong-mei2,LIANG Jin1,FENG Shi-lan11.School of Pharmaceutics,Lanzhou University,Lanzhou730000,China2.Pharmacy Department,General Hospital of Jingyuan Coal Industry Co Ltd,Baiyin730913,Gansu,ChinaAbstract:The chromatographicfingerprints of different polarities from Radix Astragali andfive extracts from 10batches of Radix Astragali were studied.The mobile phase underwent ACN and H2O,gradient elution and the mode was established for thefingerprints of thefive extracts from the10batches of Radix Astragali and seven main index components were identified for thefirst time.The method was accurate and reliable and the study may contribute to the quality control of Radix Astragali.Key words:high performance liquid chromatography;fingerprint;quanlity control;Radix Astragali黄芪(Radix Astragali)为豆科植物蒙古黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mong-holicus(Bge.)Hsiao)或膜荚黄芪(Astragalus mem-branaceus(Fisch.)Bge的干燥根,具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌之功效[1].现代药理研究表明黄芪具有增强免疫力、抗疲劳、降糖、抗病毒、降脂、改善神经内分泌因子分泌、利尿、强心、降压等多种作用.黄芪不仅产量大,年消耗量也高达2.5×107kg,是中国药食两用的大宗药材品种之一.目前国内外报道的关于黄芪药材指纹图谱研究的文献较多[2−11],但是指纹图谱研究所用的样品处理方法是采用单一溶剂,如甲醇、乙醇或石油醚,然后用正丁醇萃取的方法,只测定黄芪某一提取部位的指纹图谱,对黄芪不同极性部位指纹图谱的研究尚属空白.黄芪含有多种类型的化学成分,如低极性化合物黄酮苷元类,中等极性化合物黄芪皂苷类、黄酮苷类,极性化合物腺苷、多糖类.仅用一种溶剂处理样品,研究的指纹图谱不够全面.本文采用不同极性的溶剂提取黄芪药材,得到5个极性部位(总提取部位、石油醚部位、乙酸乙酯部位、乙醇部位和水部位),测定了10个不同地区黄芪药材的高效液相色谱(High performance liquid chromatog-raphy,HPLC)的5种极性部位的指纹图谱,建立10个不同产地黄芪中5种极性部位的模式指纹图谱,首次鉴别7个主要指标成分,为全面评价黄芪药材的质量提供了技术支持.1仪器与试药Waters2695高效液相色谱仪,Millennum32工作站,2771自动进样器,柱温箱,2996二极管阵列检测器,蒸发光散射检测器(Alltech ELSD2000);Hypersil ODS-1C18柱(250.0mm×4.6mm×5µm)(大连依利特有限公司),Spursil TM C18柱(250.0mm×4.6mm×5µm)(北京迪马有限公司).乙腈为色谱纯(德国默克),水为超纯水.数据处理软件:中药色谱指纹图谱计算机辅助相似性评价系统软件(版本1.0,中南大学提供).黄芪药材为全国各地采集或购买的种植或野生黄芪,经兰州大学药学院生药学研究所马志刚鉴定为蒙古黄芪,共10批,见表1.对照品毛蕊异表1黄芪药材的来源与品种Table1Origins and varieties of Radix Astragali编号来源品种编号来源品种0 1.059530 1.0406065 1.0604090 1.09540取总提取部位供试品溶液20µL,注入高效液相色谱仪进行分析.所得10批药材总提取部位HPLC-DAD指纹图谱如图1,HPLC-ELSD指纹图谱如图2,模式指纹图谱如图3−4.对各个峰紫外光谱图进行对比分析,10批药材总提取部位HPLC-DAD指纹图谱共找到14个共有峰,其中12毛蕊异黄酮;14芒柄花素图1黄芪药材总提取部位HPLC-DAD指纹图谱(254nm)Figure1HPLC-DAD chromatogram of the total extractof Radix Astragali(254nm)1毛蕊异黄酮苷;5黄芪甲苷;6黄芪皂苷Ⅲ;7黄芪皂苷Ⅱ图2黄芪药材总提取部位HPLC-ELSD 指纹图Figure 2HPLC-ELSD fingerprint of the total extract ofRadix Astragali12毛蕊异黄酮;14芒柄花素图3黄芪药材总提取部位HPLC-DAD 模式指纹图谱(254nm)Figure 3HPLC-DAD model fingerprint of the totalextract of Radix Astragali (254nm)12,14号峰分别与对照品毛蕊异黄酮和芒柄花素的保留时间和紫外光谱图相同,鉴定为毛蕊异黄酮和芒柄花素.HPLC-ELSD 指纹图谱共找到9个共有峰,通过与对照品保留时间的比较,确定1号峰为毛蕊异黄酮苷,5号峰为黄芪甲苷(黄芪皂苷Ⅳ),6号峰为黄芪皂苷Ⅲ,7号峰为黄芪皂苷Ⅱ.采用夹角余弦法原理,以共有峰的峰面积计算相似度,10个样品的相似度均大于90%,结果见表3−4.甘南野生、甘肃陇西、甘肃岷县1、甘肃岷县2、甘肃首阳、甘肃临洮、甘肃西和、内蒙、陕西、甘肃陇南的HPLC-DAD 指纹图谱共有峰的相似度分别为95.95%,94.34%,98.89%,98.90%,99.17%,99.33%,97.76%,97.87%,91.40%,96.59%,HPLC-ELSD 指纹图谱共有峰的相似度分别为98.51%,99.92%,96.49%,98.57%,99.20%,97.78%,99.64%,98.80%,93.87%,94.91%.1毛蕊异黄酮苷;5黄芪甲苷;6黄芪皂苷Ⅲ;7黄芪皂苷Ⅱ图4黄芪药材总提取部位HPLC-ELSD 模式指纹图谱Figure 4HPLC-ELSD model fingerprint of the totalextract of Radix Astragali相似度的日内和日间精密度与重现性:取1号黄芪药材总提取部位供试液,进样5次,每次进样量为20µL ,测定指纹图谱相似度的日内精密度,计算得图谱的相似度大于0.98,RSD <1.0%.连续5天每天进样1次,测定指纹图谱相似度的日间精密度,计算得图谱的相似度大于0.97,RSD <2.8%.取1号黄芪药材总提取部位浸膏5份,按供试品溶液制备方法制备样品溶液,测定指纹图谱相似度的重复性,计算得图谱的相似度大于0.98,RSD <1.2%.表3总提取部位HPLC-DAD 指纹图谱共有峰的保留时间Table 3Common peaks of retention time of the total extracts in HPLC-DAD fingerprintmin共有峰甘南野生甘肃陇西甘肃岷县1甘肃岷县2甘肃首阳甘肃临洮甘肃西和内蒙陕西甘肃陇南表4总提取部位HPLC-ELSD指纹图谱共有峰的保留时间Table4Common peaks of retention time of the total extracts in HPLC-ELSDfingerprintmin共有峰甘南野生甘肃陇西甘肃岷县1甘肃岷县2甘肃首阳甘肃临洮甘肃西和内蒙陕西甘肃陇南0 1.05955 1.0257520 1.0455535 1.0505050 1.0802070 1.0955取石油醚部位供试品溶液20µL,进入高效液相色谱仪进行分析.所得10批药材石油醚部位指纹图谱如图5,模式指纹图谱如图6.对各个峰紫外光谱图进行对比分析,10批药材石油醚部位指纹图谱共找到14个共有峰,其中5号峰与对照品芒柄花素的保留时间和紫外光谱图相同,将其确定为芒柄花素(表6).采用夹角余弦法原理,以共有峰的峰面积计算相似度,10个样品的相似度均大于90%.甘南野生、甘肃陇西、甘肃岷县1、甘肃岷县2、甘肃首阳、甘肃临洮、甘肃西和、内蒙、陕西、甘肃陇南的石油醚部位指纹图谱共有峰的相似度分别为93.86%,93.95%,91.82%,90.76%,92.08%, 98.26%,94.98%,91.1%,94.71%,96.57%.相似度的日内和日间精密度与重现性:取1号黄芪药材石油醚部位供试液,进样5次,每次进样量为20µL,测定指纹图谱相似度的日内精密度,计算得图谱的相似度大于0.96,RSD<1.2%.连续5天每天进样1次,测定指纹图谱相似度的日间精密度,计算得图谱的相似度大于0.97,RSD<2.7%.取1号黄芪药材石油醚部位浸膏5份,按供试品溶5芒柄花素图5黄芪药材石油醚部位HPLC指纹图谱(240nm) Figure5HPLCfingerprint of the petroleum ether extract of Radix Astragali(240nm)5芒柄花素图6黄芪药材石油醚部位HPLC模式指纹图谱(240nm) Figure6HPLC model chromatogram of the petroleum ether extract of Radix Astragali(240nm)液制备方法制备样品溶液,测定指纹图谱相似度的重复性,计算得图谱的相似度大于0.95,RSD<1.5%.2.4.3黄芪药材乙酸乙酯部位指纹图谱的建立色谱条件:色谱柱为Hypersil ODS-1C18柱(250.0mm×4.6mm×5µm);流动相为乙腈和水,梯度洗脱(表7);进样量为20µL,柱温为25◦C,检测波长为280nm.取乙酸乙酯部位供试品溶液20µL,进入高效液相色谱仪进行分析.所得10批药材乙酸乙酯部位指纹图谱如图7,模式指纹图谱如图8.对各个表6石油醚部位HPLC 指纹图谱共有峰的保留时间Table 6Common peaks of retention time of the petroleum ether extract in HPLC fingerprintmin共有峰甘南野生甘肃陇西甘肃岷县1甘肃岷县2甘肃首阳甘肃临洮甘肃西和内蒙陕西甘肃陇南0 1.0158540 1.04555801.01004毛蕊异黄酮;7芒柄花素图7黄芪药材乙酸乙酯部位HPLC 指纹图谱(280nm)Figure 7HPLC chromatogram of the ethyl acetateextract of Radix Astragali (280nm)4毛蕊异黄酮;7芒柄花素图8黄芪药材乙酸乙酯部位HPLC 模式指纹图谱(280nm)Figure 8HPLC model chromatogram of the ethylacetate extract of Radix Astragali (280nm)峰紫外光谱图进行对比分析,10批药材乙酸乙酯部位指纹图谱共找到8个共有峰,其中4号和7号峰分别与对照品毛蕊异黄酮和芒柄花素的保留时间和紫外光谱图相同,鉴定为毛蕊异黄酮和芒柄花素(表8).采用夹角余弦法原理,以共有峰的峰面积计算相似度,10个样品的相似度均大于90%.甘南野生、甘肃陇西、甘肃岷县1、甘肃岷县2、甘肃首阳、甘肃临洮、甘肃西和、内蒙、陕西、甘肃陇南的乙酸乙酯部位指纹图谱共有峰的相似度分别为98.35%,99.29%,99.34%,90.28%,90.96%,95.68%,97.63%,92.33%,94.20%,92.60%.相似度的日内和日间精密度与重现性:取1号黄芪药材乙酸乙酯部位供试液,进样5次,每次进样量为20µL ,测定指纹图谱相似度的日内精密度,计算得图谱的相似度大于0.96,RSD <0.8%.连续5天每天进样1次,测定指纹图谱相似度的日间精密度,计算得图谱的相似度大于0.97,RSD <2.0%.取1号黄芪药材乙酸乙酯部位浸膏5份,按供试品溶液制备方法制备样品溶液,测定指纹图谱相似度的重复性,计算得图谱的相似度大于0.94,RSD <1.5%.2.4.4黄芪药材乙醇部位指纹图谱的建立色谱条件:色谱柱为SpursilTM C18柱(250.0mm ×4.6mm ×5µm);流动相为乙腈和水,梯度洗脱(表9);进样量为20µL ,柱温为25◦C ,检测波长为254nm .取乙醇部位供试品溶液20µL ,进入高效液相色谱仪进行分析.所得10批药材乙醇部位指纹图谱如图9,模式指纹图谱如图10.对各个峰紫外光谱图进行对比分析,10批药材乙醇部位指纹图谱表8乙酸乙酯部位HPLC 指纹图谱共有峰的保留时间Table 8Peaks of retention time of the ethyl acetate extract in HPLC spectrummin共有峰甘南野生甘肃陇西甘肃岷县1甘肃岷县2甘肃首阳甘肃临洮甘肃西和内蒙陕西甘肃陇南0 1.059530 1.0406065 1.0604066 1.0955761.09554毛蕊异黄酮;7芒柄花素图9黄芪药材乙醇部位HPLC 指纹图谱(254nm)Figure 9HPLC chromatogram of the ethanol extract ofRadix Astragali (254nm)共找到8个共有峰(表10).采用夹角余弦法原理,以共有峰的峰面积计算相似度,10个样品的相似度均大于90%.甘南野生、甘肃陇西、甘肃岷县1、甘肃岷县2、甘肃首阳、甘肃临洮、甘肃西和、内蒙、陕西、甘肃陇南的乙醇部位指纹图谱共有峰的相似度分别为97.73%,99.42%,97.81%,99.78%,97.99%,99.94%,100%,96.51%,98.19%,98.56%.4毛蕊异黄酮;7芒柄花素图10黄芪药材乙醇部位模式HPLC 指纹图谱(254nm)Figure 10HPLC model chromatogram of the ethanolextract of Radix Astragali (254nm)相似度的日内和日间精密度与重现性:取1号黄芪药材乙醇部位供试液,进样5次,每次进样量为20µL ,测定指纹图谱相似度的日内精密度,计算得图谱的相似度大于0.95,RSD <0.8%.连续5天每天进样1次,测定指纹图谱相似度的日间精密度,计算得图谱的相似度大于0.96,RSD <1.9%.取1号黄芪药材乙醇部位浸膏5份,按供试品溶液制备方法制备样品溶液,测定指纹图谱相似度的重复性,计算得图谱的相似度大于0.97,RSD <1.5%.2.4.5黄芪药材水部位指纹图谱的建立色谱条件:色谱柱为Spursil TM C18柱(250.0mm ×表10乙醇部位HPLC 指纹图谱共有峰的保留时间和相似度Table 10Peaks of retention time of the ethanol extract in HPLC spectrummin共有峰甘南野生甘肃陇西甘肃岷县1甘肃岷县2甘肃首阳甘肃临洮甘肃西和内蒙陕西甘肃陇南4.6mm×5µm);流动相为乙腈和水,梯度洗脱(表11);进样量为20µL,柱温为25◦C,检测波长为240nm.表11水部位的梯度洗脱条件Table11Condition of gradient elution of thewater extractT/min流速/(mL/min)A道乙腈/%B道水/%1 5.70 5.52 5.72 5.65 5.67 5.64 5.66 5.47 5.91 5.3828.888.418.518.218.988.538.908.858.368.4339.249.089.359.179.099.159.148.809.588.98411.9912.0212.1611.8611.6511.7911.7612.2511.6112.33 522.0322.0322.0722.0220.0822.0322.0021.9421.9521.96 624.9925.0425.0925.0325.0525.0625.0424.9424.9424.96 727.0427.0827.1227.0927.0927.1027.1027.0227.0327.043讨论对黄芪不同极性部位样品进行了HPLC分析,对提取方法、流动相及洗脱梯度、检测波长等色谱条件进行了优化,构建了黄芪药材5种极性部位HPLC指纹图谱,运用各部位共有峰峰面积计算了10批黄芪药材各部位的相似度,结果相似度均大于90%.以往指纹图谱评价中药质量,都是仅考察单一极性部位指纹图谱,这样就掩盖了不同极性成分之间的差别.本文通过建立不同极性部位的指纹图谱,对各个部位逐一考察相似度,从而更加全面地评价中药质量.构建黄芪不同极性部位的指纹图谱在国内外尚未见文献报道,本研究不仅具有理论意义,而且具有实用价值.10批黄芪药材总提取部位HPLC-DAD指纹图谱确定14个共有峰,标定了其中2个指纹峰的结构(毛蕊异黄酮和芒柄花素).总提取部位HPLC-ELSD指纹图谱确定9个共有峰,标定了其中4个指纹峰的结构(毛蕊异黄酮苷、黄芪甲苷即黄芪皂苷Ⅳ、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪皂苷Ⅱ).10批黄芪药材石油醚部位指纹图谱共确定14个共有峰,标定了其中1个指纹峰的结构(芒柄花素).10批黄芪药材乙酸乙酯部位指纹图谱共确定8个共有峰,标定了其中2个指纹峰的结构(毛蕊异黄酮和芒柄花素).10批黄芪药材乙醇部位指纹图谱共确定8个共有峰. 10批黄芪药材水部位指纹图谱共确定7个共有峰,标定了其中1个指纹峰的结构(腺苷).HPLC-DAD 只能检测到有紫外吸收的物质,HPLC-ELSD可以检测到无紫外吸收或有紫外末端吸收的物质,故总提取部位共确定23个共有峰,标定了其中6个指纹峰的结构,而其他4个部位指纹峰只在HPLC-DAD检测到,在HPLC-ELSD检测不到,这与各成分含量及检测器灵敏度有关.参考文献[1]国家药典委员会.中国药典2010年版:一部[S].北京:中国医药科技出版社,2010:283−285.[2]贾晓斌,陈彦,蔡宝昌,等.黄芪皂苷类成分的HPLC指纹图谱研究[J].中医药学刊,2004, 22(12):2227−2229.[3]黄际薇,李瑞珍,刘杰,等.黄芪药材HPLC指纹图谱研究[J].中成药,2005,27(11):1244−1246. 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不同产地黄芪的电化学指纹图谱研究作者:胡俊平李国凯任云来源:《江苏农业科学》2019年第12期摘要:在BrO3--Mn2+-H+-CH3COCH3振荡体系中加入黄芪为反应底物,通过电化学工作站测定黄芪的电化学指纹图谱,设计正交试验考察建立黄芪电化学指纹图谱的条件并考察黄芪加入量、药材粒度对黄芪电化学指纹图谱的影响。
结果表明,黄芪加入量0.5 g,粒度为80目时可以取得理想的电化学指纹图谱。
在此测定条件下,研究不同产地黄芪的电化学指纹图谱,通过分析图谱中的特征物理参数,达到鉴定黄芪真伪和对不同产地黄芪进行质量评价的目的。
关键词:电化学指纹图谱;黄芪;不同产地;质量评价;正交试验;真伪鉴定;质量评价;产地鉴别中图分类号: S567.23+9.01 ;文献标志码: A ;文章编号:1002-1302(2019)12-0224-04黄芪(Radix Astragali)为豆科植物膜荚黄芪或蒙古黄芪的干燥根,具有健脾补中、利水消肿、升阳举陷、利尿之功效,主要分布在山西、甘肃、黑龙江、吉林、辽宁、河北、内蒙等地。
黄芪的化学成分为黄芪皂苷、黄酮、多糖、单糖、生物碱、叶酸、多种氨基酸以及人体所需要的微量元素[6]。
本研究分析了黄芪在BrO3--Mn2+-H+-CH3COCH3体系中做振荡反应的电化学指纹图谱,其特征物理量为(1)诱导时间(t诱导):从加入试剂到振荡发生的时间;(2)振荡寿命(t振荡):振荡开始到振荡结束的时间;(3)最高电位(Emax):振荡曲线的电位最高值;(4)平衡电位(E平衡):振荡结束时所对应的电位。
同时,本研究探讨了振荡体系各物质浓度、温度、药材粒度、加入量等对电化学指纹图谱的影响,分析了不同产地黄芪电化学指纹图谱的特征,结果表明不同产地黄芪的电化学指纹图谱有明显区别,该方法可用于黄芪药材的产地鉴别[7]。
1 仪器与材料1.1 仪器WK-600A高速药物粉碎机(山东省青州市精誠机械有限公司);DF-101S聚热式恒温加热磁力搅拌器(河南省巩义市予华仪器有限公司);电化学工作站(瑞士万通204);烧杯;容量瓶;玻璃棒;滴管。