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根据蛋白质带电状态分离
离子交换层析IEC是根据蛋白质的两性解离性质、在溶液中所带 电荷不同进行分离的。
离子交换层析中,基质由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电 荷的为阴离子交换树脂;反之为阳离子交换树脂。当蛋白质处于不同的 pH值条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋 白质,被留在层析柱上,通过提高洗脱液中的盐浓度,将吸附在层析柱上的 蛋白质洗脱下来,其中结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。反之阳离子交 换基质结合带有正电荷的蛋白质,结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中 的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。
第5页/从细胞破碎一步开始蛋白质就脱离 了天然的环境，受到各种不同试剂的干扰，其结构和功能会受 到不同程度的可逆或不可逆的损害。因此，在蛋白质纯化的各 步骤都要小心地控制所采用的提纯条件，以避免蛋白质变性。
在提纯蛋白质过程中需要在每一步检测蛋白质（酶）的存 在及提纯的情况，即建立蛋白质定量检测方法。
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蛋白质的抽提
一般的蛋白质通常选择适当的缓冲溶液把蛋白质提取出来，再 用离心法除去不溶物得到含有目的物的粗抽提液。抽提所用缓冲溶 液的PH值、离子强度、组成成分等应根据目的蛋白质的性质而定。
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蛋白质粗分级
采用分级盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方 法将目标蛋白质与其他蛋白质分离开来。
蛋白质分离与纯化技术
蛋白质（protein）是生命的物质基础，没有蛋白质就没有生 命。因此，它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的 物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。
蛋白质分离纯化是用生物工程下游技术从混合物当中分离纯化 出所需要的目的蛋白质的方法。由于深入研究蛋白质的结构与功能 需要用到高纯度的蛋白质，因此蛋白质分离与纯化技术是生物产业 中的核心技术。
