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血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的应用及价值分析地中海贫血一直是现阶段困扰着孕妇妈妈的问题。
地中海贫血的又被称为“海洋性贫血”及“珠蛋白合成障碍性贫血”，是一种非常常见的遗传性血红蛋白型疾病。
简单而言，就是患者体内血液红细胞中血红蛋白的产生量出现了明显的不足，导致了组织细胞携氧量的缺乏，身体各个部分器官及组织的功能也都受到了很明显的影响。
而血红蛋白电泳可以有效的进行地中海贫血的筛查工作。
具体的情况就让我们一同来看看。
血红蛋白电泳血红蛋白是人体内部负责运输氧气的蛋白质，同时也是人体红细胞的主要组成物质。
血红蛋白病是一种由珠蛋白肽链结构异常或合成肽链速率发生变化而产生的，可引发血红蛋白功能失效的常见类疾病。
日常我们所能见到的血红蛋白病有地中海贫血、血镰状细胞贫血、高铁血红蛋白血症、不稳定血红蛋白病等等。
这种疾病的诊断常常需要依赖实验室进行检测，因此血红蛋白电泳的应用就是现阶段最为有效也最为常见的手段，是确诊地中海贫血问题的重要方式。
地中海贫血病因及临床表现地中海贫血的分子结构通常是由基因所决定的。
因此它也是一种遗传性的贫血疾病。
而根据珠蛋白链缺乏种类的不同，可以将其分为α型、β型、δβ型和δ型四种，其中以α型、β型较为常见。
当γ、δ、ε和β珠蛋白基因可以构成“β基因族”，ζ和α珠蛋白则可以构成“α基因族”。
正常人的父母双方会各自继承2个α珠蛋白基因，从而合成足够的α珠蛋白链。
但当珠蛋白基因发生缺失或是突变后，肽链就出现合成型障碍最终导致发病。
α珠蛋白生成障碍性贫血，大部分α珠蛋白生成障碍性贫血都是由α珠蛋白基因缺失所导致的，少数因基因点突变所导致。
而β珠蛋白生成障碍性贫血的发生概率比较复杂，现阶段已有100种以上的β基因发生突变，其中以基因的点突变为主，少数会因基因缺失引发。
地中海贫血临床表现：根据病情轻重不同临床表现可分为以下几种，其一是重型，在患儿出生后数日内就出现了贫血情况，并且随着时间的变化，肝脾肿大的情况也会出现加重的可能性，黄疸出现的概率增大，并且患者会表现出发育不良，最为明显的就是头大、眼距增宽，马鞍鼻、前额突出、两颊突出等，同时也还会出现臀状头，长骨可发生骨折等。
血红蛋白电泳
珠蛋白生成障碍性贫血是世界上最常见和发病率最高的一种单基因遗传病，常见有两类，即α和β海洋性贫血(以往称地中海贫血)，是由于基因突变引起存在于红细胞内的几种血红蛋白(Hb)合成异常。
此项化验可用于检验异常Hb，进一步诊断一些相关疾病。
参考值
HbA：96％-98％
HbA2：1％--3％
HbF：1％～2％
临床意义
(1)HbA2增高是轻型β—海洋性贫血最重要的诊断依据；
(2)HbS病、β链异常的不稳定Hb病及某些巨幼细胞性贫血患者HbA2也可增高；
(3)缺铁性贫血时，HbA2常降低，可与轻型β—海洋性贫血鉴别；
(4)正常人Hb电泳后，一般只见两条区带(HbA和HbA2)，若出现新的区带，则可能为异常Hb，应进一步检查。
要求
用肝素或EDTA抗凝血。
实验汇报实验名称：血红蛋白电泳项目名称：两种碱性血红蛋白样品处理方法的电泳结果实验时间：2018年9月17日实验室：龙泉驿区妇幼保健院检验科实验人员：杨松报告单位：成都温伦科技有限公司一、实验目的：1、掌握生理盐水处理血红蛋白样品的方法2、掌握四氯化碳处理血红蛋白样品的方法3、掌握电泳仪实验的操作4、分析两种碱性血红蛋白样品处理方法电泳结果的不同二、实验原理：血红蛋白电泳就是利用在电场的作用下, 由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小, 形状等性质的差异, 使带电分子产生不同的迁移速度, 从而对样品进行分离, 鉴定或提纯的技术，在临床检验中, 主要用于分离各类蛋白分子。
三、实验方法：琼脂糖电泳法四、实验器械：样品：10个EDTA抗凝管抽取的病人全血样品试剂：0.9%生理盐水500ml，四氯化碳500ml，界面液250ml，美国Helena Spife3000血红蛋白电泳检测试剂盒器材：移液枪，一次性移液枪头若干，EDTA抗凝管10个，玻璃试管10个设备：美国Helena Spife3000 全自动电泳仪五、实验步骤：1、取得医院检验科EDTA抗凝管抽取的病人全血样品10个，编号为1，2,3......10。
2、将1-10号十个个样品分别用移液枪取200ul到玻璃试管中，编号为1-1,2-1,3-1,.....10-1。
3、将1-10号10个样品进行生理盐水前处理，处理方法如下：-用0.9%生理盐水混匀，3500 rpm离心10分钟.-吸走弃去清液。
-以上步骤连续进行三次。
-完全吸走弃去上清液。
-20ul制作后的样本+80ul溶血素，混匀。
-取溶血后的样本17ul加入样品孔。
4、将1-1到10-1号10个样品进行四氯化碳前处理，处理方法如下：-用0.9%生理盐水溶液5000μL与样品混合。
-3000rpm离心5分钟。
-弃去上清液，只留下红细胞。
-加入200ul 蒸馏水溶解红细胞。
-加入300ul 的四氯化碳，混合均匀，3000rpm离心5分钟。
血红蛋白电泳操作规程一．项目名称血红蛋白电泳（HYDRAGEL HEMOGLOBIN）二．检验方法名称琼脂糖凝胶区带电泳三．方法学原理血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。
氨基酸不同可形成不同的血红蛋白，其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同，这还与pH、电泳缓冲液的离子强度等有关。
血红蛋白异常有二种类型：血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。
血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。
实验使用洗涤过红细胞的溶血液来进行，在碱性的凝胶片上进行电泳来分离血红蛋白，分离出来的片段通过氨基黑染色剂来显色，烘干后的凝胶片就可以用来解释结果了。
四．方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳（moving boundary eectrophoresis），而后，这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳（zone elecrrophoresis）所克服，区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
五．仪器（一）型号：SEBIA HYDRASYS (PN1210)（二）分析和计算参数：1．处理量：约45个样本/小时2．所需样本量：10ul3．检验时间：约半小时4．重复性：有良好的批内和批间重复性5．电泳参数：电压0－300V（可选至3000V）电流0－500mA功率0－100W六．试剂及配套品（一）试剂1．HYDRAGEL 7 HEMOGLOBIN（E）试剂盒HYDRAGEL 15 HEMOGLOBIN（E）试剂盒（1）商标：SEBIA（2）包装规格：70测试/150测试（3）货号：PN4106/ PN41262．脱色液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×100ml（3）货号：PN4540(4) 成分：柠檬酸3．洗涤液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×80ml（3）货号：PN4541（4）成分：叠氮钠4．生理盐水（二）配套品血红蛋白质控（1）商标：SEBIA(2) 包装规格：Pack for 1×1ml(3) 货号：PN4791七．操作步骤㈠开机，启动电泳仪。
血红蛋白电泳解读？
答：血红蛋白电泳是一种常用的检测方法，主要用于诊断血红蛋白病，尤其是地中海贫血。
这种方法能够定量检测血红蛋白A（HbA）、血红蛋白F（HbF）、血红蛋白A₂（HbA ₂）的含量，有助于对地中海贫血进行初步分类，并筛查出各种异常血红蛋白。
血红蛋白电泳结果的解读主要依赖于各种血红蛋白的含量。
正常情况下，血红蛋白A是主要的血红蛋白，一般占95%以上；血红蛋白A2占血红蛋白的2%左右；而血红蛋白F主要用于胎儿，其含量在出生后逐渐降低。
如果血红蛋白A2或血红蛋白F的含量出现异常，可能提示患有某种血红蛋白病。
例如，如果血红蛋白A2的含量增高，可能是地中海贫血的重要标志，特别是β地中海贫血。
此外，如果血红蛋白F 的含量异常增高，可能提示患有α地中海贫血或其他血红蛋白病。
然而，血红蛋白电泳只能提供初步的诊断信息，对于确诊还需要进行进一步的基因诊断和遗传咨询。
同时，血红蛋白电泳的结果也可能受到一些因素的影响，如年龄、性别、生理状态等，因此在解读结果时需要综合考虑。
血红蛋白电泳实验报告实验报告：血红蛋白电泳实验一、引言血红蛋白（hemoglobin）是一种具有输送氧气功能的蛋白质，存在于人类和许多动物的红细胞中。
它由四个亚基构成，包括两个α亚基和两个β亚基。
血红蛋白的功能和结构与其所含的亚基类型密切相关，而异常的血红蛋白亚基组合可能导致一些血液疾病的发生。
血红蛋白电泳实验是一种常用的实验方法，用于检测血液中血红蛋白的类型和数量，以帮助诊断和监测相关疾病。
二、实验目的通过血红蛋白电泳实验，了解不同类型血红蛋白的迁移速度，并根据实验结果对血液样本进行分类和鉴定。
三、实验材料与方法实验材料：1. 血液样本2. 血红蛋白电泳试剂盒3. 相关实验设备：电泳仪、垂直电泳槽、电源等实验方法：1. 血液样本处理：将血液样本离心，取上清液得到红细胞。
2. 血红蛋白裂解：将红细胞加入裂解液，用振荡器进行充分混合。
3. 准备样品槽：将电泳槽填充足够量样品缓冲液，并插入电泳纸。
4. 样品加载：取相应量的裂解液，滴于电泳纸上。
5. 电泳：将电泳槽连接至电源，设定电压和时间。
6. 停止电泳：电泳结束后，断开电源，取出电泳纸。
7. 进行染色：用染色试剂将血红蛋白带染色。
8. 结果分析：观察电泳纸上的血红蛋白带，根据迁移速度和染色程度对其进行鉴定和分类。
四、实验结果与讨论实验结果显示，通过血红蛋白电泳实验，可以清晰地观察到不同类型血红蛋白的迁移带。
血红蛋白A带出现在电泳纸上最远的位置，表明它的迁移速度最快，而其他类型的血红蛋白则随着亚基结构的不同而迁移速度差异明显。
根据实验结果，我们可以将血红蛋白带分为以下几类：1. 血红蛋白A：正常血红蛋白，包括两个α亚基和两个β亚基。
2. 血红蛋白S：镰状细胞贫血患者中常见的异常血红蛋白，由两个α亚基和两个替代的βS亚基组成。
3. 血红蛋白C：血红蛋白C病患者中可见的异常血红蛋白，由两个α亚基和两个替代的βC亚基组成。
4. 血红蛋白F：胎儿血红蛋白，包括两个α亚基和两个γ亚基。
血红蛋白电泳简易操作流程样本的制备：1）洗涤红细胞。
取400μL血细胞加4mL生理盐水，上下颠倒5次或吹打混匀。
2）用3000转速的离心机离心全血5分钟并弃去浮在表面上的悬浮液3）重复1）和2）步骤，尽量吸走红细胞表面多余的生理盐水。
6) 取40l RBC于一试管中，加150l裂解液7) 充分混匀，放置15-20分钟。
说明：RBC及裂解液比例浓度可据标本情况调整。
注意：1、每次洗涤需要充分混匀。
2、吸取40l RBC时，需要枪头深入至压积红细胞内部或底部，完全吸取40l 之后再提起枪头，避免吸到生理盐水，保证RBC的量。
3、裂解时间最少15分钟，以保证裂解充分。
电泳前准备：1. 打开电脑以及电泳仪器右侧的主开关。
2. 试剂检查及准备：每次在开始新的电泳前，应检查如下内容：染色液是否在Min-Max标记线之间，染色液用过10次染色循环后不能再使用；脱色液及蒸馏水是否过少；点样器是否放置在准确的位置中；废液是否清空。
3. 放置海绵条：用干净的镊子把海绵条插入电泳槽的两侧电极中，轻轻压平。
注意：请勿将海绵条插入到中间的电极中。
4. 样本装载：从仪器中抽出样盘托，取开吸磁铁片，将一次性载样盘放置样盘托中，盖好铁片，然后按1-13号顺序每孔加入30ul裂解后的样本，并将其插入仪器相应位置中。
5. 胶片准备：取胶片一块用配套滤纸沿同一方向将多余的缓冲液吸走，应保证滤纸完全贴在胶片的表面，然后快速移走滤纸。
将胶片装在胶片架上，装胶片时抓住胶片有条形码侧的一角，将有凝胶面向上，箭头向胶片架上方，沿上下卡口轻轻插入，然后将胶片架放回电泳仪对应位置。
注：滤纸在胶片上约5s就必须要移走，防止胶片脱水。
6. 检查各项准备情况，完全准备好后切记要合上仪器盖。
电泳分析软件操作：1. 双击电脑桌面上的电泳扫描图标（Elfolab）→ 数据库（Database）→ 打开数据库（Open Database）→ 数据库（Database）→ 工作数据库（Working Database）→ 新的工作数据库（New working Database）→ 在胶片1中选择血红蛋白→ OK。
