海蜇胶原蛋白提取工艺及促愈合作用研究
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海水养殖海蜇的生物学特性与生长规律研究引言:海水养殖是一项重要的水产养殖业,它为人们提供了丰富的海产品。
海蜇是其中一种重要的养殖品种,具有高经济价值和广阔的市场前景。
了解海蜇的生物学特性和生长规律对于提高养殖效益和可持续发展至关重要。
本文将介绍海蜇的生物学特性,包括形态特征、生理生化特性和环境适应能力;同时研究海蜇的生长规律,包括生长速度、影响生长的因素和生长周期等。
这些知识将为海蜇养殖提供基础理论和技术指导。
一、海蜇的生物学特性:1. 形态特征:海蜇体长较短,呈伞状,主要由伞盖和伞褶组成。
伞盖呈半透明状,一般为半球形或镜面形。
伞褶位于伞盖的边缘,具有管状结构,可以收缩和扩展,帮助海蜇进行游泳。
海蜇的触手数目较多,位于伞褶的下方,用于捕捉猎物和防御敌害。
2. 生理生化特性:海蜇的身体大部分由软骨质的胶原蛋白构成,具有较高的弹性和透明度。
它们的触手上有许多毒细胞,能产生刺激性的毒液,可以用来攻击捕获的猎物或抵御敌害。
此外,海蜇对于温度、盐度和PH值等环境因素的适应能力较强,能够在不同的海洋环境中生存和繁殖。
二、海蜇的生长规律:1. 生长速度:海蜇的生长速度受到多种因素的影响,包括温度、光照、饵料质量和密度等。
一般来说,较高的温度和光照条件有助于海蜇的生长,而适宜的饵料质量和密度能够提高其生长速度。
海蜇的生长速度呈现出一个先快后慢的趋势,最快的生长期一般为出生后的前几个月。
2. 影响生长的因素:除了温度、光照、饵料质量和密度等环境因素外,海蜇的生长还受到遗传因素的影响。
不同品种的海蜇生长速度和体型大小可能存在差异。
此外,水质条件的变化、病原微生物的感染以及捕食者的存在都可能对海蜇的生长产生影响。
3. 生长周期:海蜇的生长周期一般较短,通常为几个月到一年不等,但具体周期因品种和环境条件的不同而有所差异。
在海蜇的培育过程中,通过控制温度、饵料和光照等因素,可以调节其生长周期,以提高养殖效益。
三、海蜇养殖的发展前景与挑战:1. 发展前景:海蜇具有高蛋白、低脂肪、无胆固醇等特点,被誉为海洋“美容师”,并且具有抗氧化、抗肿瘤和免疫调节等保健功能。
海蜇头在皮肤护理中的应用价值皮肤护理是现代社会中人们越来越注重的一个话题。
随着科技的不断进步,人们对于皮肤护理产品的需求也越来越高。
海蜇头作为一种天然的皮肤保养成分,正逐渐受到人们的关注和喜爱。
海蜇头在皮肤护理中具有丰富的应用价值,下面就让我们来详细了解一下。
首先,海蜇头富含多种重要的营养成分,如蛋白质、胶原蛋白、维生素等。
这些成分对于皮肤的保养具有重要作用。
海蜇头中的胶原蛋白能够增强皮肤的弹性和韧性,有效减少细纹和皱纹的出现,让皮肤更加平滑和紧致。
同时,海蜇头中的维生素能够滋养皮肤,增强皮肤的自我修复能力,使肌肤更加健康靓丽。
其次,海蜇头具有极强的保湿功效。
皮肤缺水是导致肌肤干燥、粗糙和敏感的主要原因之一。
而海蜇头中含有丰富的水分和润滑成分,能够迅速渗透到皮肤深层,有效补充水分,改善肌肤干燥问题。
海蜇头中的保湿成分还能够形成一层保护膜在皮肤表面,防止水分的流失,使肌肤长时间保持水润嫩滑的状态。
此外,海蜇头具有很强的抗氧化功效。
随着年龄的增长,皮肤中的自由基会逐渐增多,导致皮肤老化和细胞损伤。
而海蜇头富含的抗氧化物质可以中和自由基,保护皮肤免受损伤,延缓衰老过程。
海蜇头中的抗氧化成分还可以减少黑色素的沉着,使肌肤更加明亮均匀。
因此,使用含有海蜇头的皮肤护理产品能够帮助人们拥有年轻、健康的肌肤。
此外,海蜇头还具有一定的消炎和抗菌作用。
皮肤炎症和感染是导致皮肤问题的主要原因之一。
而海蜇头中含有的活性成分可以有效抑制细菌的繁殖,减少炎症的发生。
因此,使用含有海蜇头的护肤品可以有效减少痘痘、粉刺等皮肤问题,并促进伤口的愈合。
海蜇头还可以舒缓皮肤的刺激和红肿,帮助肌肤恢复健康。
最后,海蜇头还可以调节皮肤的油脂分泌。
皮肤过度油脂分泌会导致毛孔堵塞、痘痘的产生。
而海蜇头中的活性成分可以控制皮脂的分泌,减少油脂的堆积,使皮肤更加清爽干净。
同时,海蜇头还可以收缩毛孔,使肌肤更加细致平滑。
综上所述,海蜇头在皮肤护理中具有丰富的应用价值。
海蜇胶原蛋白肽的生物活性研究李玉芬;郑明星;叶秀云;林娟【摘要】Proteolysis of jellyfish waste materials were carried out with proteases to obtain antioxidant peptides.And then the bioactivities of different molecular weight fractions of jellyfish collagen peptides (JCP1 >10 kDa > JCP2 > 3 kDa > JCP3 >1 kDa > JCP4) prepared by ultrafiltration were evaluated.The result showed that JCP1 showed the highest rates to scavenge super oxide anion free radicals and inhibit tyrosinase activity,with the IC50 values of 22.6 and 11.96mg/mL,respectively.JCP3 presented the highest capacities of hydroxyl and ABTS free radical-scavenging activities,reducing power and ACE inhibitor activity,while the IC50 values were 14.9,2.21,0.61 and 15.8 mg/mL respectively.JCP4 exhibited the best performance on DPPH free radical-scavenging activity(IC50 of 28.3 mg/mL).%以海蜇加工下脚料为原料提取胶原蛋白,酶解制备胶原蛋白肽并对酶解液进行抽滤分离,并对所得不同分子量的胶原蛋白肽进行生物活性研究.结果表明:抽滤分离到四种不同分子量的胶原蛋白肽:分子量> 10 kDa(JCP1)、分子量3~10 kDa(JCP2)、分子量1~3 kDa(JCP3)和<1 kDa(JCP4).生物活性研究表明,JCP1具有最强的超氧阴离子自由基清除能力和酪氨酸酶双酚酶抑制效果,其IC50值分别为22.6和11.96 mg/mL,JCP1对酪氨酸酶的抑制类型为可逆混合竞争型抑制;JCP3具有最强的还原力、羟自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力和血管紧张素转换酶(ACE)抑制活性,其IC50值分别为14.9、2.21、0.61和15.8 mg/mL;JCP4具有最强的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力,其IC50值为28.3 mg/mL.【期刊名称】《食品工业科技》【年(卷),期】2018(039)008【总页数】7页(P67-72,84)【关键词】胶原蛋白肽;抗氧化活性;ACE抑制活性;酪氨酸酶抑制活性【作者】李玉芬;郑明星;叶秀云;林娟【作者单位】福州大学,福建省海洋酶工程实验室,福建福州350116;福州大学,福建省海洋酶工程实验室,福建福州350116;福州大学,福建省海洋酶工程实验室,福建福州350116;福州大学,福建省海洋酶工程实验室,福建福州350116【正文语种】中文【中图分类】TS254.9胶原蛋白是细胞外基质的结构蛋白,是结缔组织的主要组成成分,一般为白色纤维,广泛分布在多细胞动物体内,胶原蛋白中存在着多种生物活性肽,生物活性肽是一类由氨基酸组成的拥有特殊生理活性的多肽总称(其氨基酸数目一般小于50,分子量小于6 ku),根据其氨基酸种类和排列方式的不同,多肽呈现的生理活性也各不相同,即使相同蛋白来源的多肽也可能拥有不同的功能活性[1]。
降血脂、抗氧化海蜇胶原蛋白肽值得一试作者:刘凤翊姜莉莉杜国丰张林杨大苹来源:《中国食品》2020年第13期海蜇富含蛋白质、矿物质和维生素等,可作为胶原蛋白的新型原料,应用于滋补和护肤等领域。
海蜇胶原蛋白经过酶解产生胶原蛋白肽,可用于降低血脂指数、肝系数等。
一、研究对象和方法1.研究对象。
由盐渍海蜇中提取海蜇胶原蛋白,经胰蛋白酶和中性蛋白酶酶解后超滤,得到海蜇胶原蛋白肽。
选取10只年龄、身体状况一样的小白鼠,用高脂饲料喂养6个月,并限制它们的活动,让小白鼠的血脂指数、肝系数升高。
2.研究方法。
将小白鼠分为实验组和对照组,其中实验组5只,放在甲笼中;对照组5只,放在乙笼中。
实验组小白鼠食用海蜇肽,对照组不食用海蜇肽,两组小白鼠在生活环境、身体状况、饮食、作息时间等方面基本一致,无差异(p>0.05)。
6个月后,观察两组小白鼠的血脂指数、肝系数等身体指标的变化,分析海蜇胶原蛋白肽在降血脂及抗氧化方面的作用。
二、结果食用海蜇膠原蛋白肽6个月后,实验组小白鼠的血脂指数、肝系数等身体指标恢复正常,明显低于对照组。
结果表明,海蜇肽能有效降低小白鼠血脂指数和肝系数。
研究结果具有明显差异,有统计学意义(p三、结论通过实验分析对比可以得出结论:海蜇胶原蛋白肽具有降血脂及抗氧化的作用,且抗氧化作用更为明显,可尝试应用于人类治疗。
相关工作人员可深入挖掘海蜇的药用价值、食用价值和皮肤护理价值,让海蜇成为大众养生滋补和女性延缓衰老的佳品。
(基金项目:营口市“企业·博士双创计划”项目-海蜇胶原蛋白高附加值产品的开发;营口理工学院科研项目,项目编号YYL201814。
)作者简介:刘凤翊(1982.11-),女,辽宁营口,博士,营口理工学院副教授,研究方向:海洋资源利用。
海蜇皮的抗衰老作用及机制研究分析随着人口老龄化的加剧和人们对健康长寿的追求,抗衰老研究成为当前重要的科研领域之一。
而在众多的抗衰老天然物质中,海蜇皮备受研究者们的关注。
海蜇是一种富含胶原蛋白的海洋生物,其皮质部分具有显著的抗衰老活性。
本文将对海蜇皮的抗衰老作用及其机制进行研究分析。
1. 海蜇皮的抗衰老作用海蜇皮具有多种抗衰老作用,例如抗氧化、抗糖化、抗炎症等。
研究表明,海蜇皮中富含多种活性成分,如多肽、多糖、抗氧化物质等,这些化合物具有抗氧化自由基、清除自由基、增强肌肤弹性和保湿作用等,从而减轻皮肤衰老的迹象。
海蜇皮中的多糖还具有良好的保湿和锁水效果,有助于皮肤保持水分平衡,改善干燥、粗糙等问题。
2. 海蜇皮的抗衰老机制海蜇皮的抗衰老机制可能涉及多个方面。
首先,海蜇皮中富含的多肽和多糖等活性成分具有较强的抗氧化活性,可以中和体内自由基,减少氧化应激对细胞和组织的损伤,延缓衰老过程。
其次,海蜇皮中的活性成分还可以抑制炎症反应,减少炎症因子的释放,从而降低皮肤炎症和红肿等现象,保持皮肤的健康状态。
此外,海蜇皮中的天然保湿物质可以形成保护膜,提高皮肤的保湿能力,并改善皮肤的弹性和紧致度。
3. 海蜇皮的抗氧化机制抗氧化是海蜇皮抗衰老作用的重要机制之一。
海蜇皮中的多肽和多糖等活性成分具有较强的自由基清除能力,可以中和氧化应激引起的自由基,从而减少细胞和组织的氧化损伤。
研究发现,海蜇皮中的多肽具有较高的 DPPH自由基清除活性和金属螯合活性,能够有效清除自由基,抑制氧化反应。
此外,海蜇皮中的多糖还具有良好的抗氧化活性,可以提高细胞的抗氧化能力,减轻氧化应激带来的损伤。
4. 海蜇皮的抗糖化作用糖化是导致细胞老化和皮肤衰老的重要原因之一。
海蜇皮中的多糖成分具有抗糖化作用,可以抑制糖化过程的发生。
研究发现,海蜇皮中的多糖可以抑制葡萄糖酵解过程中关键酶的活性,减少葡萄糖的降解,从而降低糖化产物的生成。
此外,海蜇皮中的多糖还可以抑制糖化终产物的产生,减少其对皮肤和细胞的损伤,延缓糖化引起的衰老过程。
海蜇皮的免疫调节作用及机制研究进展引言:海洋生物被广泛认为是一种优质的天然资源,其中海蜇皮作为一种特殊的海洋动物组织,具有广泛的药用价值。
近年来,越来越多的研究关注海蜇皮对免疫系统的影响及其调节机制。
本文将回顾过去的研究进展,总结海蜇皮在免疫调节领域的作用及其可能的机制。
一、海蜇皮的化学成分海蜇皮是由胶原纤维组成的并富含多种生物活性物质。
目前研究发现,海蜇皮中含有多糖、多肽、蛋白质和多种生物活性化合物,这些成分对免疫系统具有调节作用。
二、海蜇皮对免疫细胞的影响1. 海蜇皮促进免疫细胞增殖和活化研究表明,海蜇皮中的多糖和多肽成分可以显著促进免疫细胞的增殖和活化。
这些成分可以通过诱导细胞因子的产生,如促炎细胞因子和干扰素,从而增强免疫细胞的功能。
2. 海蜇皮抑制炎症反应炎症反应是免疫系统的一种重要应答,但过度或长期的炎症反应会导致各种疾病的发生。
研究发现,海蜇皮中的某些化合物可以抑制炎症反应,减轻组织损伤和疾病发展。
3. 海蜇皮调节免疫细胞的分化和功能海蜇皮中的生物活性成分可以影响免疫细胞的分化和功能。
研究表明,海蜇皮可以调节巨噬细胞、淋巴细胞、泛素蛋白酶和增殖因子等免疫细胞的功能,从而对免疫系统产生广泛的影响。
三、海蜇皮的免疫调节机制1. 抗氧化作用海蜇皮中的多糖和多肽成分具有明显的抗氧化活性,可以清除自由基,保护免疫细胞的功能和稳定免疫系统的平衡。
2. 免疫因子介导的调节海蜇皮中某些化合物可以直接或间接地影响免疫细胞因子的产生和信号传导,从而调节免疫细胞的功能和免疫系统的平衡。
3. 免疫细胞信号通路的调节海蜇皮中的成分可以通过影响免疫细胞内的信号通路,如NF-κB、MAPK和JAK-STAT等通路,从而调节免疫细胞的功能和免疫系统的平衡。
四、海蜇皮在免疫调节中的应用前景海蜇皮作为一种天然药物资源,具有广泛的应用前景。
目前已有研究表明,海蜇皮对于免疫调节性疾病的治疗具有一定的效果,如炎症性疾病、免疫性疾病和抗肿瘤等。
海蜇头的食品营养学和人体营养素相互作用研究海蜇头是一种广泛食用的海鲜食材,拥有丰富的营养价值。
近年来,越来越多的研究聚焦于海蜇头的食品营养学以及人体营养素与其相互作用的研究。
本文将深入探讨海蜇头的营养成分及其对人体健康的益处,并阐述其中复杂的相互作用过程。
首先,海蜇头是一种低热量、低脂肪和高蛋白的食物。
它富含蛋白质、维生素和矿物质等营养成分。
其中,蛋白质是构成人体细胞的重要组成部分,对维持正常的生理功能起着重要作用。
海蜇头中的蛋白质含量较高,具有优良的生物利用度,能够为人体提供充足的氨基酸,有助于增强机体的免疫力和维持组织的修复。
此外,海蜇头中还富含多种维生素和矿物质。
维生素B12、维生素C和维生素E是其中重要的成分之一。
维生素B12有助于维持人体的神经系统功能和促进红细胞的正常形成,维生素C则具有抗氧化作用,有助于增强免疫力和抵抗疾病。
此外,维生素E对于保护细胞膜的完整性和维持血管的功能也具有重要作用。
矿物质方面,海蜇头富含钠、钙、镁和铁等元素,这些矿物质是维持人体正常代谢所必需的,对于维持骨骼健康、血液循环和造血功能起着关键作用。
然而,需要注意的是,海蜇头的主要成分是多糖,特别是海蜇头中含有丰富的海蜇胶原蛋白。
海蜇胶原蛋白是一种结构独特的蛋白质,具有很强的保湿性和抗氧化性。
它对于维护皮肤的弹性和保持关节灵活性非常重要。
同时,海蜇胶原蛋白还具有抗炎作用,有助于缓解炎症相关的疾病。
在人体营养素与海蜇头相互作用的研究中,研究人员认识到海蜇头中的一些活性成分可能与某些疾病的预防和治疗相关。
例如,海蜇胶原蛋白中的活性肽已被发现具有抗肿瘤、抗糖尿病和抗高血压的潜力。
另外,海蜇头中的多糖成分还被发现具有调节免疫功能的作用,能够提高人体的免疫力和抵抗力。
这些发现为海蜇头作为一种健康食材的推广和应用提供了科学支持。
虽然海蜇头在食品营养学方面的研究已经取得了许多进展,但依然存在一些挑战和未解决的问题。
首先,由于海蜇头的成分复杂,不同种类和产地的海蜇头中的营养成分可能会有所差异,因此需要更多的研究来明确不同海蜇头样品的营养价值。
海蜇胶原蛋白提取工艺及促愈合作用研究丁进锋,苏秀榕*,张春丹,李妍妍,徐嘉杰(宁波大学生命科学与生物工程学院,浙江 宁波 315211)摘 要:通过响应面法优化海蜇胶原蛋白的提取工艺,并通过小鼠皮肤创伤模型研究海蜇胶原蛋白的促愈合作用。
通过单因素试验选取因素与水平,根据Box-Benhnken 中心组合试验设计原理,在单因素基础上采用三因素三水平响应面分析法(RSM),对海蜇胶原蛋白的酸法提取工艺进行优化;采用小鼠皮肤创伤模型,创面外用胶原蛋白,并以云南白药处理为阳性对照,通过十字测量法测量创面大小并计算创面愈合率。
结果显示海蜇胶原蛋白的最佳提取工艺条件为提取时间62.64h 、液料比23.6:1,醋酸浓度0.562mol/L ;动物实验表明海蜇胶原蛋白能够明显缩短伤口愈合时间,对创面修复有促进作用。
响应面法优化得到的提取条件准确可靠;海蜇胶原蛋白具有明显的促愈合作用。
关键词:海蜇;胶原蛋白;响应面;伤口愈合Extraction of Collagen from Jellyfish (Rhopilema esculentum ) and Wound Healing-Promoting Effect in MouseDING Jin-feng ,SU Xiu-rong*,ZHANG Chun-dan ,LI Yan-yan ,XU Jia-jie (Faculty of Life Science and Biotechnology, Ningbo University, Ningbo 315211, China)Abstract :The optimum condition of jellyfish (Rhopilema esculentum Kiahinouye 1891) collagen was studied, and the effect of jellyfish collagen on promoting the wound healing was studied based on the model of mouse skin wounds. Experimental factors and their levels were determined by single-factor tests, and then a three factors and three levels test was designed based on the principle of Box-Benhnken design. The extraction conditions were optimized through response surface method (RSM).In the experiment of wound healing in mouse, cutting-skin injures model in mouse were created and wounds were treated with collagen, at the same time yunnan baiyao was used as positive control. The size of wounds was measured through cross measurement, and the healing rates were calculated. Results showed the optimal conditions of jellyfish collagen extraction were obtained as following: extraction time 62.64 h, the solid/water ratio of 1:23.6, acetic acid concentration of 0.562 mol/L. Animal tests showed that treatment with collagen could significantly accelerate the process of re-epithelialization, and promote wound healing.Key words :jellyfish ;collagen ;Response surface method (RSM);wound healing中图分类号:TS254.4 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2010)24-0019-05收稿日期:2010-08-13基金项目:浙江省自然科学基金项目(Y304358);宁波市科技局重点资助项目(200120041)作者简介:丁进锋(1984—),男,硕士研究生,研究方向为水产品加工与贮藏工程。
E-mail :djfeng_0617@ *通信作者:苏秀榕(1956—),女,教授,博士,研究方向为食品科学与工程、生物化学与分子生物学。
E-mail :suxiurong@海蜇(Rhopilema esculentum Kiahinouye)隶属于腔肠动物门(Coelentera)、钵水母纲(Scyphozoa)、根口水母(Rhizostomeae)、根口水母科(Rhizostomatidae)、海蜇属(Rhopilema )的无缘膜动物。
世界已记录的海蜇属只有海蜇(R.esculentum )、黄斑海蜇(R.hispidum )、棒状海蜇 (R.rhopalophorum )和疣突海蜇(R.verrilli )等4种。
前3种在我国已有记录。
棒状海蜇个体小(40~100mm),伞部的中胶层薄,数量稀少,没有捕捞价值。
作为渔业生产的只有海蜇和黄斑海蜇两种[1]。
海蜇经加工后,伞部称为海蜇皮,口腕部称为海蜇头,二者均具有很高的经济和营养价值,富含较高的蛋白质及钙、磷、碘、铁等无机盐和维生素等营养成分[2],去水分蛋白质占总干质量的50%左右,其脂肪含量低[3],是一种高蛋白低脂肪的食品。
海蜇不仅是宴席佳肴,也是一味治病良药。
海蜇性咸、平,入肝肾,可消热解毒、软坚散结、降压消肿等功效,并对气管炎、哮喘、高血压、口噪咽干、阴虚便秘等有一定的治疗作用[2-5]。
海蜇富含一些具有生物活性的物质,如胶原蛋白、毒素、糖胺聚糖、糖蛋白等[5-8],其中胶原蛋白的含量最为丰富[9]。
胶原蛋白由3条α多肽链构成三股螺旋结构,其分子结构十分稳定,分子质量在30kD以上,不利于人体直接吸收。
国内外研究表明,水解胶原蛋白的主要产物胶原多肽,具有保护胃黏膜、抗溃疡、抑制血压上升,促进骨形成、皮肤胶原代谢等营养及生理功能,在食品及医药等领域具有巨大的开发前景[10-11]。
伤口愈合是机体所具有的一种修复功能,它包括炎症、增生期、伤口收缩、胶原代谢和上皮形成等一系列复杂过程[12]。
胶原具有很强的生物活性及生物功能,能参与细胞的迁移、分化和增殖,使骨、腱、软骨和皮肤具有一定的机械强度。
因胶原的抗原性和良好的生物相容性,在烧伤、创伤、眼角膜疾病、美容、矫形、硬组织修复、创面止血等医药卫生领域用途广泛[13]。
长期以来,人们都是使用猪、牛的皮和骨提取胶原蛋白和明胶。
但因疯牛病、口蹄疫等疾病的爆发对牲畜胶原制品安全性产生疑虑。
另外,由于宗教和习俗等原因,有些地区也不能使用牲畜胶原蛋白制品。
因此,获得胶原蛋白的新来源显得十分迫切[14]。
本实验利用响应面设计酸法提取海蜇胶原蛋白工艺,并研究海蜇胶原蛋白的促伤口愈合作用,旨在为海蜇生物活性物质的进一步研究提供实验依据,并为其在功能食品、医药、化妆品等方面的应用提供理论依据。
1材料与方法1.1材料与试剂海蜇购于浙江省岱山县;ICR小鼠浙江省实验动物中心。
L-羟脯氨酸Sigma公司;氯胺T、盐酸、氢氧化钠、柠檬酸、高氯酸、无水乙醇、乙二醇独甲醚、对二甲基氨基苯甲醛、浓硫酸、醋酸等均为AR 宁波奥博科学仪器有限公司;云南白药云南白药集团股份有限公司。
1.2仪器与设备T6新悦可见分光光度计北京普析通用仪器有限责任公司;DKS-26电热恒温水浴锅宁波江南仪器厂。
1.3方法1.3.1胶原蛋白提取1.3.1.1单因素试验选取提取时间、料液比及醋酸浓度三个因素,探讨其对海蜇胶原蛋白提取效果的影响。
取一定量捣碎均匀的海蜇,加入适量的醋酸,在4℃条件下浸提一定时间后,10000r/min、4℃离心30min,取上清液,加入6mol/L盐酸后130℃水解6h,测定羟脯氨酸含量[15]。
提取率/%=m/M×100式中:m为提取的胶原质量/mg;M为海蜇质量/mg。
1.3.1.2响应面优化提取条件根据单因素试验确定各因素最佳条件后,以Box-Benhnken中心组合试验设计原理设计试验,设计3因素3水平试验优化海蜇胶原蛋白提取条件。
1.3.2促愈合作用1.3.2.1动物分组及伤口模型建立ICR小鼠45只,平均质量为(20±2)g。
将小鼠随机分为3组,每组15只,分别为正常对照组(NG)、海蜇胶原蛋白组(JG)及云南白药组(YG)。
小鼠以戊巴比妥钠腹腔麻醉后,背部去毛,消毒。
在小鼠背部剪去直径约1cm的全层皮肤,造成全皮层缺损动物模型。
JG 组每天涂抹0.2mL 1mg/mL海蜇胶原蛋白溶液,YG组每天涂抹0.2mL 0.6mg/mL云南白药悬浮液。
以上各组均用无菌纱布包扎好,每日换药1次,连续14d。
每天对创伤口面观察,测量伤口大小,并记录结果。
1.3.2.2伤口愈合率每天用游标卡尺测量创面大小(十字测量法),创伤口面积按椭圆面积计算[16],并计算伤口愈合率。
原始创面面积-未愈合创面面积伤口愈合率/%=——————————————×100原始创面面积S=0.25abπ式中:a为伤口长轴长度;b为伤口短轴长度。
2结果与分析2.1胶原蛋白提取单因素试验2.1.1提取时间对胶原蛋白提取率的影响图1提取时间对海蜇胶原蛋白的影响Fig.1 Effect of extraction time on the yield of jellyfish collagen0.90.80.70.60.5胶原蛋白提取率/%提取时间/h020*********取一定质量的海蜇,加入0.5mol/L醋酸,液料比为10:1(V/m),在4℃条件分别浸提12、24、48、72、84h。
在48h内,随着浸提时间的延长,胶原蛋白提取率也随之增加,但超过48h后,提取率不再增加,因此提取时间以48h 为佳(图1)。
2.1.2醋酸浓度对胶原蛋白提取率的影响取一定质量的海蜇,分别加入0.1、0.2、0.5、0.7、1.0mol/L 醋酸,液料比为10:1,在4℃条件浸提48h 。