生物技术制药问答题
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1、生物技术制药的特征
答：高技术、高投入、长周期、高风险、高收益。
2、质粒不稳定分为那两类?
答：基因重组菌的稳定性是高水平发酵生产的基本条件。
工程菌在传代过程中经常出现质粒不稳定的现象，质粒不稳定分为分裂不稳定和结构不稳定。
提高质粒稳定性的方法
(1)选择合适的宿主菌:遗传稳定(2)选择合适的载体:高拷贝数;(3)选择压力:如加抗生素提高稳定性;(4)分阶段控制培养:先使菌体生长至一定密度;再诱导外源基因的表达 (5)控制培养条件 (6)固定化
3、什么是高密度发酵?影响高密度发酵的因素有哪些?可采取哪些方法实现高密度发酵?
答：(1)高密度发酵:一个相对概念，一般指培养基中工程菌的菌体浓度在 50gDCW/L 以上，理论上的最高值可达200gDCW/L。
(2)影响高密度发酵的因素:培养基;溶氧浓度;pH;温度;代谢副产物
(3)实现高密度发酵的方法①发酵条件的改进 a.培养基的选择 b.建立流加式培养的方式;c.提高供氧能力②构建出产乙酸能力低的工程化宿主菌 a.阻断乙酸产生的主要途径;b.对碳代谢流进行分流;c.限制进入糖酵解途径的碳代谢流; d.引入血红蛋白基因③构建蛋白水解酶活力低的工程化宿主菌
4、动物细胞大规模培养的方法
答：1.悬浮培养悬浮培养即让细胞自由地悬浮于培养基内生长增殖。
优点是操作简便，培养条件比较均一，传质和传氧较好，容易扩大培养规模，在培养设备的设计和实际操作中可借鉴许多有关细菌发酵的经验。
不足之处是细胞体积较小，较难采用灌流培养，因此细胞密度一般较低。
(目前在生产中用于悬浮培养的设备主要是通气搅拌罐式生物反应器和气升式生物反应器。
)
2.贴壁培养贴壁培养是必须让细胞贴附在某种基质上，细胞才能生长繁殖的培养方法。
优点是使用的细胞种类广（因为生产中所使用的细胞绝大多数是贴壁细胞），较容易采用灌流培养的方式使细胞达到高密度。
不足之处是操作比较麻烦，需要合适的贴附材料和足够的面积，培养条件不易均一，传质和传氧较差，这些不足常常成为扩大培养的“瓶颈”。
3.贴壁-悬浮培养①微载体培养:可创造相当大的贴附面积供细胞贴附生长增殖，载体的体积很小，比重较轻，在轻度搅拌下即可携带细胞自由地悬浮在培养基内。
②包埋和微囊培养:包埋和微囊培养培养细胞不是贴附在载体表面，而是被包埋或包裹在凝胶载体或微囊内。
包埋或包裹在载体或微囊内的细胞可获得保护，避免了剪切力的损害; 可以获得较高的细胞密度;可采用多种生物反应器进行大规模培养。
(目前最普遍的是琼脂糖和海藻酸钙凝胶) ③结团培养 :结团培养的实质是用细胞本身作为基质，相互贴附后，再用悬浮的方法进行培养，所以它也是一种贴附-悬浮培养。
该培养方法操作简便，节省了微载体的成本。
5、基因工程抗体及其特性和制备方法
答：(1)人鼠嵌合抗体(2)改形抗体(CDR 移植抗体)(3)Fab 抗体(4)Fv 抗体(5)单链抗体(6)单域抗体 (7)最小识别单位
6、模拟酶
答：根据酶的作用原理，用各种方法人为制造的具有酶性质的催化剂，简称人工酶或模拟酶。
它们一般具有高效和高适应性的特点，在结构上比天然酶相对简单。
分类：根据Kirby分类法，模拟酶可分为（1）单纯酶模型（2）机制酶模型（3）单纯合成的酶样化合物
按照模拟酶的属性可分为（1）主-客体酶（2）胶束酶（3）肽酶（4）半合成酶（5）分子印迹酶等
青霉素的发酵工艺
答：1)砂土管菌种; 2)转移到固体琼脂培养斜面上培养，25℃培养5-6天，获得孢子;
3)孢子悬浮于无菌水，进行摇瓶培养; 4)进入移种瓶培养; 5)进一级种子罐，25℃培养40-45h，使菌丝浓度达40%（V/V）以上; 6)进入繁殖罐(二级种子罐)，接种量为5%-10%，25℃培养13-15h，使菌丝浓度达40%（V/V）以上，残糖1%左右; 7)进入发酵罐，接种量30%，开始生产; 8)鼓式过滤; 9)第一次萃取; 10)纯压柱; 11)第二次萃取; 12)第三次萃取; 13)真空结晶釜; 14)瓷过滤器; 15)结晶洗涤釜; 16)真空干燥管;。
