藻类培养基
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化学农药环境安全评价试验准则第14部分:藻类生长抑制试验1 范围本文件规定了化学农药藻类生长抑制试验的试验条件、试剂或材料、仪器设备、样品、试验步骤、试验数据处理、质量控制以及试验报告等的基本要求。
本文件适用于为化学农药登记而进行的藻类生长抑制试验。
2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
NY/T 3273 难处理农药水生生物毒性试验指南NY/T 4195.6 农药登记环境影响试验生物试材培养第6部分:近头状尖胞藻3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
3.1半效应浓度median effective concentration在生长抑制试验中,与对照相比,引起受试藻生物量增长或者平均生长速率下降50%时的被试物浓度,用EC50表示。
在本文件中,通过藻类生物量增长的抑制率计算而得到的EC50用E y C50表示,通过藻类平均生长速率的抑制率计算而得的EC50用E r C50表示。
注:单位为毫克每升(mg/L)。
3.2平均生长速率average growth rate (average specific growth rate)特定暴露时段内的平均生长速率,即暴露结束与暴露开始时受试藻生物量的自然对数值之差除以时长(如3 d),用μ表示。
3.3生物量增长量yield特定暴露时段内的生物量增长量,即暴露结束时的生物量减去暴露开始时的生物量,用Y表示。
4 原理用被试物及藻类培养基配制一系列不同浓度的试验药液,将试验药液与藻液混合后,连续染毒72 h。
试验期间观察受试藻的生长抑制情况,求出半效应浓度72 h- EC50(E y C50、E r C50)及其95%置信区间。
5 试验条件试验期间应满足以下条件:a) 环境温度21 ℃~24 ℃,但单次试验应控制在±1 ℃;b) 连续均匀光照,光源为400 nm~700 nm波长的冷白灯或日光灯,光照强度4440 lux~8880 lux,不同位点光照强度差异应控制在15%范围内;c) 空白对照pH变化范围不超过1.5;d) 以一定转速持续振荡或搅拌藻液,例如每分钟(100±20)转。
小球藻的培养一、小球藻小球藻是单细胞植物,种类较多,多数生活在淡水中,少数生活在海洋里。
按植物学分类,小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物,其体型小,直径一般为3~5μm,在显微镜下,需要放大400~600倍才能看到,我们肉眼看到的只不过是含有小球藻的绿色的水。
小球藻所含的营养成分很高,其蛋白质含量达到50%~60%(相当于花生米的2倍、鸡蛋的5倍),含脂肪10%~30%,还含有多种维生素。
小球藻的生物活性物质糖蛋白和多糖体的含量也相当高,这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素和迅速恢复机体损伤等功能。
因此,小球藻的培养前景广阔。
作为培养原料的小球藻,可以到较清洁的池塘、水坑中采集绿色的水,在显微镜下鉴定,然后再用。
也可以向培养它的人索取。
1 容器的准备小规模的培养可用瓶、缸等,大规模的培养可用水泥池。
首先,要对所使用的容器进行消毒,一般用100mg/L的漂白粉水溶液浸泡,再用水冲刷数次。
(100mg/L的漂白粉水溶液的配制:①天平称量5g2%漂白粉澄清液;②定量转移至容量瓶中;③加水至1L;④混匀。
2%漂白粉上清液的配制法:取漂白粉2克,加少量水搅匀,再加水至100毫升,充分调匀后,待澄清后取上清液使用。
)2 培养液的准备(1)BG11液体培养基配方:Stock1 定容100mL 柠檬酸0.3g 柠檬酸铁胺0.3g EDTANa2 0.05gStock2 定容1000mL NaNO3 30g K2HPO4 0.78g MgSO4·7H2O 1.5gStock3 定容100mL CaCl2·2H2O 1.9g Stock4 定容100mL Na2CO3 2gStock5 定容1000mL H3BO3 2.86g MnCl2·4H2O 1.81g ZnSO4·7H2O 0.222gNa2MnO4·2H2O 0.391g CuSO4·5H2O 0.079g Co(NO3)2·6H2O 0.049gStock1 取用2mL Stock2 取用20mL Stock3 取用2mL Stock4 取用1mL Stock5 取用1mL 总定容1000mL(2)购买2000元/套,九种原液各200ml(稀释1000倍),10瓶。
Zarrouk培养基基础(不含微量元素)使用说明书储存条件:粉末常温保存,溶液2-8℃保存。
产品编号:AMP271(不含微量元素)产品说明:Zarrouk培养基又名Z氏培养基,常用于螺旋藻、微小色球藻的培养。
A5和B6单独配制,要低温或冷冻保存,使用前要充分的摇动。
新培养基的pH值为8.2-8.5,可能会有少量沉淀产生,不影响藻类生长。
Zarrouk培养基套装组成(货号AMP271):产品组成规格编号Zarrouk培养基基础250g AMP271A5微量元素12mL(自备)AML101B6微量元素12mL(自备)AML121注:1.A5和B6已做无菌处理,并注意无菌操作,使用前要充分摇动。
2.如需制作培养基平板,应在灭菌前加入琼脂(15g/L)。
3.不同文章中Zarrouk培养基略有差异,可联系本公司定制。
液体培养基使用方法:1.烧杯中加入1L去离子水,打开磁力搅拌,缓慢加入22.04g粉末培养基,至完全溶解(可能会有少量沉淀或者浑浊,);2.pH值调节为8.2-8.5(可根据需要调整);3.121℃高压灭菌15min,冷却至室温,加入微量元素A5和B6各1mL。
固体培养基使用方法:22.04g粉末溶解于500mL去离子水;30g琼脂粉解于500mL去离子水,分别高压灭菌,之后再混合(如果培养基和琼脂一起高压灭菌,最终的培养基会变红色)。
Zarrouk培养基组分含量表:配方1(AMP272)配方2(AML331)基础配方(AMP271)组分工作液/L工作液/L工作液/L NaCl 1.00g 1.00g 1.00gCaCl20.08g0.08g0.08gNaNO3 2.5g 2.5g 2.5gFeSO4·7H2O0.01g0.01g0.01gNa2EDTA0.08g0.08g0.08gK2SO4 1.00g 1.00g 1.00g MgSO4·7H2O0.2g0.2g0.2gNaHCO316.8g16.8g16.8gK2HPO40.5g0.5g0.5gA5储备液1mL2mL-B6储备液1mL--注:1.Zarrouk培养基有多种配方,可联系我司定制。
小球藻的培养一、小球藻小球藻是单细胞植物,种类较多,多数生活在淡水中,少数生活在海洋里。
按植物学分类,小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物,其体型小,直径一般为3~5μm,在显微镜下,需要放大400~600倍才能看到,我们肉眼看到的只不过是含有小球藻的绿色的水。
小球藻所含的营养成分很高,其蛋白质含量达到50%~60%(相当于花生米的2倍、鸡蛋的5倍),含脂肪10%~30%,还含有多种维生素。
小球藻的生物活性物质糖蛋白和多糖体的含量也相当高,这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素和迅速恢复机体损伤等功能。
因此,小球藻的培养前景广阔。
作为培养原料的小球藻,可以到较清洁的池塘、水坑中采集绿色的水,在显微镜下鉴定,然后再用。
也可以向培养它的人索取。
1 容器的准备小规模的培养可用瓶、缸等,大规模的培养可用水泥池。
首先,要对所使用的容器进行消毒,一般用100mg/L的漂白粉水溶液浸泡,再用水冲刷数次。
(100mg/L的漂白粉水溶液的配制:①天平称量5g2%漂白粉澄清液;②定量转移至容量瓶中;③加水至1L;④混匀。
2%漂白粉上清液的配制法:取漂白粉2克,加少量水搅匀,再加水至100毫升,充分调匀后,待澄清后取上清液使用。
)2 培养液的准备(1)BG11液体培养基配方:Stock1 定容100mL 柠檬酸0.3g 柠檬酸铁胺0.3g EDTANa2 0.05gStock2 定容1000mL NaNO3 30g K2HPO4 0.78g MgSO4·7H2O 1.5gStock3 定容100mL CaCl2·2H2O 1.9g Stock4 定容100mL Na2CO3 2gStock5 定容1000mL H3BO3 2.86g MnCl2·4H2O 1.81g ZnSO4·7H2O 0.222gNa2MnO4·2H2O 0.391g CuSO4·5H2O 0.079g Co(NO3)2·6H2O 0.049gStock1 取用2mL Stock2 取用20mL Stock3 取用2mL Stock4 取用1mL Stock5 取用1mL 总定容1000mL(2)购买2000元/套,九种原液各200ml(稀释1000倍),10瓶。
盐藻藻种培养:1.藻种培养设施:藻种的培养要在保种室中进行,保种室要求通风条件好,光线条件好,温度可控性好,保种室要配有空调、冰箱、具有人工光源的培养架等。
培养中常用培养仪器有显微镜、解剖镜等,容器有三角烧瓶、广口玻璃瓶等。
保种室要严格消毒,防止病菌的侵入。
2.容器、工具的消毒:进行单细胞藻类的纯培养,容器、工具、培养基都要进行严格灭菌,但一般生产性的单种培养,则只须达到消毒目的就可以了。
常用的消毒方法有高温消毒法和化学药品消毒法。
高温消毒法是利用高温杀死微生物的方法。
不耐高温的容器如塑料和橡胶制品等不能利用高温法消毒。
a、直接灼烧消毒接种环、镊子等金属小工具,试管口、瓶口等可以直接在酒精灯火焰上短暂灼烧消毒。
载玻片、小刀等则最好先蘸酒精,然后在酒精灯火焰上点燃,等器具上的酒精烧完,也就完成了灭菌操作。
b、煮沸消毒把容器、工具放入锅中,加水煮沸消毒,一般煮沸10-20分钟。
大型锥形瓶消毒,可在瓶口上放一普通的玻璃漏斗,再在漏斗上放一称量瓶盖,在锥形瓶内加少量淡水,置电炉上加热煮沸5-10分钟,可使整个瓶壁消毒。
消毒完毕即用消毒的纸或消毒的纱布包扎瓶口。
此法适合消毒小型的容器工具。
c、烘箱干燥消毒将玻璃容器、金属工具用清水洗干净后,放入烘箱。
关闭烘箱门,打开通气孔,接通电源加热。
当温度上升到120℃时,关闭通气孔,停止加热。
如果进行纯培养,容器必须灭菌,当温度上升到105℃时,关闭通气孔,继续加热至160℃,保持温度,恒温2小时,然后停止加热。
必须要等到温度下降到60℃以下,才能打开烘箱门。
有棉塞和纸包扎的容器、工具灭菌,不能超过180℃,以免烘焦。
化学药品消毒主要用于生产性大量培养中,大型容器、工具、水泥池等常用化学药剂消毒。
a、漂白粉消毒工业用漂白粉一般含有效氯25%~35%,消毒时按万分之1-3的含量配成水溶液,把容器、工具在溶液中浸泡半小时,再用消毒水冲洗3~4次即可。
b、酒精消毒酒精消毒常用于中小形容器和工具,方法是用纱布蘸70%酒精在容器、工具的表面涂抹即可。
小球藻的培养一、小球藻小球藻是单细胞植物,种类较多,多数生活在淡水中,少数生活在海洋里。
按植物学分类,小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物,其体型小,直径一般为3~5μm,在显微镜下,需要放大400~600倍才能看到,我们肉眼看到的只不过是含有小球藻的绿色的水。
小球藻所含的营养成分很高,其蛋白质含量达到50%~60%(相当于花生米的2倍、鸡蛋的5倍),含脂肪10%~30%,还含有多种维生素。
小球藻的生物活性物质糖蛋白和多糖体的含量也相当高,这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素和迅速恢复机体损伤等功能。
因此,小球藻的培养前景广阔。
作为培养原料的小球藻,可以到较清洁的池塘、水坑中采集绿色的水,在显微镜下鉴定,然后再用。
也可以向培养它的人索取。
1 容器的准备小规模的培养可用瓶、缸等,大规模的培养可用水泥池。
首先,要对所使用的容器进行消毒,一般用100mg/L的漂白粉水溶液浸泡,再用水冲刷数次。
(100mg/L的漂白粉水溶液的配制:①天平称量5g2%漂白粉澄清液;②定量转移至容量瓶中;③加水至1L;④混匀。
2%漂白粉上清液的配制法:取漂白粉2克,加少量水搅匀,再加水至100毫升,充分调匀后,待澄清后取上清液使用。
)2 培养液的准备(1)BG11液体培养基配方:Stock1 定容100mL 柠檬酸0.3g 柠檬酸铁胺0.3g EDTANa2 0.05gStock2 定容1000mL NaNO3 30g K2HPO4 0.78g MgSO4·7H2O 1.5gStock3 定容100mL CaCl2·2H2O 1.9g Stock4 定容100mL Na2CO3 2gStock5 定容1000mL H3BO3 2.86g MnCl2·4H2O 1.81g ZnSO4·7H2O 0.222gNa2MnO4·2H2O 0.391g CuSO4·5H2O 0.079g Co(NO3)2·6H2O 0.049gStock1 取用2mL Stock2 取用20mL Stock3 取用2mL Stock4 取用1mL Stock5 取用1mL 总定容1000mL(2)购买2000元/套,九种原液各200ml(稀释1000倍),10瓶。
小球藻最简单繁殖方法小球藻是一种单细胞藻类,无颜色,呈现球形,体积一般在1-2微米之间,其细胞结构简单,生长快,具有很高的适应性和遗传稳定性,因此在生物学研究中被广泛应用。
小球藻的繁殖方式也很特殊,下面介绍一下小球藻最简单的繁殖方法。
第一步,准备培养基和小球藻。
小球藻的繁殖需要有营养的培养基,通常采用的是含有氮、磷、钾、镁等元素的培养液,在室温下保存,尽量避免光照和震动。
同时要选用健康且生长繁殖较快的小球藻,这有利于后续的繁殖。
第二步,将小球藻转移到新的培养基中。
在生长过程中,小球藻会释放出一定数量的母细胞,这些母细胞包含了小球藻细胞质和核酸,是小球藻繁殖的基本单位。
将这些母细胞过滤筛选出来,然后转移到新的培养基中,这样可以使小球藻的繁殖速度加快。
第三步,控制培养条件。
小球藻的繁殖需要有一定的培养条件,如光照强度、温度、pH值等,这些条件都会影响小球藻的生长速度和繁殖率。
要合理调整这些条件,使小球藻处于最适宜的生长条件下,从而加速小球藻的繁殖速度。
第四步,监测繁殖情况。
在繁殖过程中,要定期监测小球藻的生长情况,观察细胞数量、大小、形态等变化。
如果发现有异常的情况,要及时排查原因,调整培养条件,从而保证小球藻的繁殖效果。
通过上述步骤,小球藻的最简单繁殖方法就完成了。
值得注意的是,小球藻的繁殖速度非常快,可以在很短的时间内繁殖出大量的细胞。
但是在繁殖过程中,一定要注意控制细胞密度,避免过高的密度导致养分不足,从而影响小球藻的生长和繁殖效果。
另外,小球藻是一种重要的环境保护和生态修复材料,其繁殖还具有重要的科学意义和社会价值。
金球藻培养实验报告金球藻是一种常见的淡水微型藻类,具有很高的生物学研究价值。
为了更好地了解金球藻的生长特性和培养条件,我们进行了金球藻的培养实验。
我们准备了培养金球藻所需的培养基。
金球藻是一种光合作用藻类,所以培养基中需要添加光合作用所需的营养物质,如碳源、氮源和矿物元素等。
我们选择了含有碳酸氢钠、硝酸铵和磷酸二氢钾等营养物质的培养基来培养金球藻。
在制备培养基的过程中,我们严格控制了各种营养物质的浓度,以保证金球藻的正常生长。
接下来,我们将金球藻分装到装有培养基的培养皿中,并将培养皿放置在恒温恒湿的培养箱中。
为了保证充足的光照,我们将培养箱放置在有良好自然光照的地方,同时也可以使用专业的植物生长灯提供光源。
在培养过程中,我们对培养箱的温度和湿度进行了严格控制,以提供最适宜的生长环境。
在培养的过程中,我们定期观察金球藻的生长情况。
金球藻一般呈现绿色,形状呈现球状或椭圆状。
我们观察到,在适宜的培养条件下,金球藻的生长速度较快,藻体数量逐渐增多。
同时,我们还注意到金球藻的生长与光照强度、温度和营养物质浓度等因素密切相关。
过高或过低的光照强度、温度或营养物浓度都会对金球藻的生长产生负面影响。
在实验过程中,我们还进行了金球藻的采样和观察。
我们用显微镜观察了金球藻的细胞结构和细胞分裂现象。
金球藻的细胞呈现圆形或椭圆形,细胞质中含有叶绿体和细胞核等细胞器。
在适宜的培养条件下,金球藻的细胞分裂速度较快,每个细胞可以分裂成两个新的细胞。
通过本次实验,我们对金球藻的生长特性和培养条件有了更深入的了解。
金球藻是一种适应能力强、生长速度快的藻类,可以广泛应用于生物学研究和环境保护等领域。
同时,我们也发现金球藻的生长与光照强度、温度和营养物浓度等因素密切相关,为进一步优化金球藻的培养条件提供了参考。
金球藻的培养实验为我们提供了了解金球藻生长特性和培养条件的重要信息。
通过进一步的研究和实验,我们可以更好地利用金球藻的优势,并在生物学和环境保护等领域发挥更大的作用。
红球藻的养殖方法和注意事项红球藻,又称红藻球菌,是一种常见的食用藻类,具有丰富的营养价值和药用价值。
红藻球菌的养殖方法相对简单,只要掌握正确的操作技巧并注意一些注意事项,就可以成功地养殖红球藻。
下面将详细介绍红球藻的养殖方法和注意事项。
1. 培养基的配置:红球藻的培养需要使用合适的培养基。
常见的培养基包括藻类培养基、海水培养基、养殖池中的淡水和氨氮等。
根据具体的培养要求,可以选择合适的培养基进行配置。
2. 光照条件:光照是红球藻正常生长和繁殖的重要因素。
红球藻喜欢弱酸性环境,适宜的光照强度是3000-10000勒克斯。
在培养过程中,可采用自然光照或人工照明,保持每天8-10小时的光照时间。
3. 温度控制:红球藻的适宜生长温度为20-30摄氏度,最适宜的生长温度为25摄氏度。
在养殖过程中,要控制好水温,保持恒温状态,避免温度过高或过低对红球藻的生长造成不利影响。
4. pH值控制:红球藻生长的适宜pH值范围为7.5-9.0,最适宜的pH值为8.0。
因此,在养殖过程中,要定期检测和调整培养基的pH值,保持在适宜范围内。
5. 氧气供应:红球藻对氧气的需求量较大,因此要保证培养基中的氧气含量充足。
可以通过增加水面面积、提供适量的搅拌和增加通风设备等方式,有效提高培养基的氧气供应。
6. CO2浓度调控:红球藻需要充足的二氧化碳进行光合作用,因此可通过增加培养基中的二氧化碳浓度,提高红球藻的生长速度和产量。
7. 避免污染源:在红球藻的养殖过程中,要避免污染源的进入,以免影响红球藻的生长和质量。
定期清理养殖池的污物和残渣,保持培养环境的清洁和卫生。
8. 提供充足的营养物质:红球藻的生长需要充足的营养物质供应,如氮、磷、钾等。
可以添加适量的氨氮、磷酸氢二铵等营养物质,促进红球藻的生长和繁殖。
9. 适时采摘:红球藻的生长周期较短,一般为7-10天。
在红球藻达到一定密度后,可适时进行采摘。
采摘时应注意采用无菌操作,并及时清理残渣,避免感染和细菌繁殖。
一、小球藻小球藻是单细胞植物,种类较多,多数生活在淡水中,少数生活在海洋里;按植物学分类,小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物,其体型小,直径一般为3~5μm,在显微镜下,需要放大400~600倍才能看到,我们肉眼看到的只不过是含有小球藻的绿色的水;小球藻所含的营养成分很高,其蛋白质含量达到50%~60%相当于花生米的2倍、鸡蛋的5倍,含脂肪10%~30%,还含有多种维生素;小球藻的生物活性物质糖蛋白和多糖体的含量也相当高,这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素和迅速恢复机体损伤等功能;因此,小球藻的培养前景广阔;作为培养原料的小球藻,可以到较清洁的池塘、水坑中采集绿色的水,在显微镜下鉴定,然后再用;也可以向培养它的人索取;1 容器的准备小规模的培养可用瓶、缸等,大规模的培养可用水泥池;首先,要对所使用的容器进行消毒,一般用100mg/L的漂白粉水溶液浸泡,再用水冲刷数次;100mg/L的漂白粉水溶液的配制:①天平称量5g2%漂白粉澄清液;②定量转移至容量瓶中;③加水至1L;④混匀;2%漂白粉上清液的配制法:取漂白粉2克,加少量水搅匀,再加水至100毫升,充分调匀后,待澄清后取上清液使用;2 培养液的准备1BG11液体培养基配方:Stock1 定容100mL 柠檬酸柠檬酸铁胺 EDTANa2Stock2 定容1000mL NaNO3 30g K2HPO4 MgSO4·7H2OStock3 定容100mL CaCl2·2H2OStock4 定容100mL Na2CO3 2gStock5 定容1000mL H3BO3 MnCl2·4H2O ZnSO4·7H2O Na2MnO4·2H2O CuSO4·5H2O CoNO32·6H2OStock1 取用2mL Stock2 取用20mL Stock3 取用2mL Stock4 取用1mL Stock5 取用1mL 总定容 1000mL2购买2000元/套,九种原液各200ml稀释1000倍,10瓶;培养基各取1ml;3 藻种购买:淘宝轮虫小球藻套装;40元/一套4 接种选取生活力强、生长旺盛的藻种,在天气晴朗的上午接种;一般情况下,作为第1级培养,可按藻液与培养液1∶2的比例进行接种;接种的量大,可使藻种迅速成为培养液中的优势种,利用生物间的拮抗作用,减少了污染机会,缩短了小球藻的培养时间;待扩大培养时,可按藻液与培养液1∶4的比例进行接种;5 管理搅拌由于小球藻不能游动,只能浮在水中生活,所以必须对培养液进行搅拌,让藻体不断变换位置,使光照、养料和水温均衡,这样有利于藻体的迅速生长和繁殖;常用的搅拌工具有玻璃棒、竹棒,每天搅拌3次,每次1分钟;光照小球藻的培养要有充分的光照,阴雨天光线不足时,可在培养室内用人工光源进行补充,通常用冷白荧光灯,光照强度为2000~3000Lx;但在光线强烈的夏天,要用遮阳网等进行适当避光;温度及pH 温度保持在25~30℃,最适宜生长温度为26℃;pH保持在6~8;污染的防治在小球藻的培养过程中,要经常观察藻液的颜色是否正常、是否有沉淀和附壁现象、液面是否有菌膜等异常情况;造成藻种污染的多数情况是原生动物及杂藻的生长;如果显微镜下检查有原生动物生活,可用1mg/L的漂白粉灭杀;对付其他杂藻最好的办法是严格控温和经常检查培养液的pH;6 采收当小球藻的培养液变成绿色、用显微镜观察1mL;培养液中大约有100个小球藻时,就可以采收或扩大再培养了;采收时,用%~%的明矾粉溶解在培养液里,约1小时后,小球藻沉在了水底,除去上层的水,就能获得小球藻的浓缩液;二、硅藻1. 储存液:1 金属液每升含EDTA二钠 - g氯化铁晶体 - g五水硫酸铜 - g七水硫酸锌 - g六水氯化钴 - g四水氯化锰 - g二水钼酸钠 - g2 维生素液每升含VB12 - g维生素B5盐酸盐 - g生物素 - g2. 1L培养基配方:硝酸钠 - g二水合磷酸二氢钠 - g金属液 ml维生素液 ml硅酸钠50mg加水至1L;硅藻培养温度在22℃,光照照度在3000lux不要太阳直射以上;大量培养中曾出现过杂藻污染问题,主要是浮游的蓝纤维藻及部分栅藻和小球藻;我们利用藻类比重、悬浮习性不同来排除杂藻;发现杂藻时,停止搅拌数小时,使硅藻下沉,蓝纤维藻等悬浮在水中;然后将上清液倾弃,再将沉淀硅藻用蒸馏水反复清洗几次后,加入新鲜培养基,即可获得纯化;补充:1.藻种培养设施:藻种的培养要在保种室中进行,保种室要求通风条件好,光线条件好,温度可控性好,保种室要配有空调、冰箱、具有人工光源的培养架等;培养中常用培养仪器有显微镜、解剖镜等,容器有三角烧瓶、广口玻璃瓶等;保种室要严格消毒,防止病菌的侵入;2.容器、工具的消毒:进行单细胞藻类的纯培养,容器、工具、培养基都要进行严格灭菌,但一般生产性的单种培养,则只须达到消毒目的就可以了;常用的消毒方法有高温消毒法和化学药品消毒法;高温消毒法是利用高温杀死微生物的方法;不耐高温的容器如塑料和橡胶制品等不能利用高温法消毒;a、直接灼烧消毒接种环、镊子等金属小工具,试管口、瓶口等可以直接在酒精灯火焰上短暂灼烧消毒;载玻片、小刀等则最好先蘸酒精,然后在酒精灯火焰上点燃,等器具上的酒精烧完,也就完成了灭菌操作;b、煮沸消毒把容器、工具放入锅中,加水煮沸消毒,一般煮沸10-20分钟;大型锥形瓶消毒,可在瓶口上放一普通的玻璃漏斗,再在漏斗上放一称量瓶盖,在锥形瓶内加少量淡水,置电炉上加热煮沸5-10分钟,可使整个瓶壁消毒;消毒完毕即用消毒的纸或消毒的纱布包扎瓶口;此法适合消毒小型的容器工具;c、烘箱干燥消毒将玻璃容器、金属工具用清水洗干净后,放入烘箱;关闭烘箱门,打开通气孔,接通电源加热;当温度上升到120℃时,关闭通气孔,停止加热;如果进行纯培养,容器必须灭菌,当温度上升到105℃时,关闭通气孔,继续加热至160℃,保持温度,恒温2小时,然后停止加热;必须要等到温度下降到60℃以下,才能打开烘箱门;有棉塞和纸包扎的容器、工具灭菌,不能超过180℃,以免烘焦;化学药品消毒主要用于生产性大量培养中,大型容器、工具、水泥池等常用化学药剂消毒;a、漂白粉消毒工业用漂白粉一般含有效氯25%~35%,消毒时按万分之1-3的含量配成水溶液,把容器、工具在溶液中浸泡半小时,再用消毒水冲洗3~4次即可;b、酒精消毒酒精消毒常用于中小形容器和工具,方法是用纱布蘸70%酒精在容器、工具的表面涂抹即可;c、高锰酸钾消毒以百分之五的比例配成溶液把要消毒的容器、工具浸泡5分钟,然后取出用消毒水冲洗2~3次,便可达到消毒目的;如果是对玻璃钢水槽、水泥池等消毒,可以用高锰酸钾溶液拨在池壁上,拨洒几遍后刷洗池底,10分钟后再用消毒水冲洗干净;d 石炭酸石炭酸消毒按3%~5%的比例配成消毒液,把要消毒的容器和工具放在其中浸泡半小时,再用消毒水冲洗2~3次;微藻的培养液是在消毒的海水或淡水中加入各种营养盐配制而成;培养液的配制,首先按配方先后称量各种营养物质,可逐一溶解,也可以同时溶解;遇到难溶的含金属的物质可以加热或与NaEDTA一起溶解,配方中的维生素一般等水温降至60℃后再加;生产上为了方便可以将营养盐配方浓缩1000-2000倍配成母液,使用时可以根据培养水体多少量取母液的体积即可;3.培养液的制备和消毒:保种培养液的消毒一般采用加热消毒法,经沉淀、过滤的海水,一般加温至90℃左右维持5分钟或达到沸腾即可;由于海水中的一些对藻类生长有促进作用的有机物在高温时易遭破坏,所以加温时间不宜太长;4.接种:接种就是把作为藻种的藻液接入新配好的培养液中,进行丰富培养;选择无污染、生长旺盛、颜色正常、藻液中无沉淀、细胞无附壁的藻种进行接种;一般来说藻种液和新培养液的比例为1:2;接种的时间最好在上午的8~10时,这个时间是藻类细胞代谢最旺盛的时候;培养条件:保种的条件最好保证在藻种的最适生长条件,要保证藻种不受污染;5.藻种培养:温度保持在25~30℃;pH保持在6~8;6.日常培养管理:1注意保种室的卫生,定时打扫,谢绝无关人员的进入等;2外观检查;检查藻液颜色是否不再浅变浓,或是出现浑浊或沉降等反映藻体生长不正常,处于老化时期受到病虫侵染的现象;3镜检检查是否发生污染,是否老化,以确保试验的顺利进行;4控制温度;通过暖气控温装置控制温度,使试验藻细胞在适宜的温度环境中;5摇瓶;在培养过程中每天摇瓶1-3次,使藻均匀分布;6 调节光强; 保持合适的光强,白天避免阳光直射;7.藻种保藏方法:存藻种时可以根据保种目的和保种条件的不同分别采取不同的保种方法;1固体培养基保存法;保种用的固体培养基的营养浓度应比正常的液体培养液的高,一般增加一倍;琼脂量为%;固体培养基分装灭菌后,冷却待用;将无污染的藻种用喷雾法或划线法接种到固体培养基上;常用固体培养基保种方法有两种,一种通常把藻种接种在固体培养基上,在弱光低温条件下慢慢培养保存,接种一次可以保存半年到一年;另一种方法,接种后首先放在光线充足的地方防止直射光照射,使藻类细胞较快速地繁殖起来,直到培养基上出现颜色,即可放入冰箱或冷库中,一般在5℃左右的低温下保存;每天给藻种几个小时的弱光照;此法保存的时间可长达2至3年;2液体培养基保存法;低温、弱光下培养;一般两个月更换一次培养液;淡水小球藻在国内的培养有几十年的历史,因为培养方式简单,生长速度快,被誉为罐装的太阳,一度被大力推广;小球藻是培育淡水轮虫的有效饵料之一;淡水小球藻的培养,无非几个要素,光照、适宜的温度、营养液;首先说一下光照,一般是大于4500lx,温度以25℃为最佳,在25-30度间都能够很好的生长,每20个小时就能分裂成4个细胞;那么第三个要素是营养液,而营养液无非就是氮源、磷源、碳源及一些微量元素,目前使用较多的营养液配方有BG-11、F/2、SE 培养基等,同时强调一点,实验表明,适当补充尿素是促进小球藻生长的一个很好的方式,同时小球藻可以异养,适当添加葡萄糖可以缩短培养时间;藻种的获得很容易,但是建议用纯种的规范操作的藻种,好的种源是开口的第一步,现在藻种获得可以通过某宝直接搜索小球藻藻种购买,也可以通过向水生所采购,但是那里藻种普遍较贵,差不多1000大洋10ml左右,如果不是科研要求,不建议如此购买,还有就是通过科研院校索要;首先我们要获得小球藻藻种,这个某宝上有出售,也可以向科研院所购买,这个在此就不详述,一般藻种浓度在百万-千万个/ML,接种藻种时,将200-300ml 的藻种倒入到1L 培养液中推荐比例在1:3-5 之间为宜,在瓶口加多层纱布培养,光照大于2000-4500 勒克斯,光强可以加大,温度在25℃-30°为宜;一般我们15 天左右需要继续扩培如果是育苗急用的话,可以每L 水中添加尿素,10g/L 的葡萄糖,光照在4500LX ;其中的营养液可以是BG11、F/2、SE培养基等。
藻类营养检测实验报告
实验报告:藻类营养检测
引言
藻类是一类广泛存在于水体中的生物,对生态系统的稳定性和食物链起着重要的作用。
了解藻类的营养状况可以揭示水质及生态环境的变化情况。
本实验旨在通过藻类的营养检测,分析其所需的主要营养物质以及其对环境的反应。
材料与方法
实验室培养的藻类样品
营养基质(如水、培养基、氮源、磷源等)
光照设备
试管、移液器、显微镜等实验器材
实验步骤:
准备不同组的培养基质,包括正常含有各种营养物质的培养基和去除某些特定营养物质的培养基。
将藻类样品分别接种到不同的培养基中,并在恒定的光照条件下培养一段时间。
观察各组藻类的生长情况,记录生长速率、细胞数量等指标。
利用显微镜观察藻类样品的形态特征,进一步了解其对营养物质的需求和反应。
对结果进行统计分析,并绘制相应的图表以展示实验结果。
结果与讨论
根据实验结果,我们可以得出
藻类在正常的培养基中呈现出良好的生长状态,生长速率稳定,细胞数量逐渐增加。
移除特定的营养物质(如氮源或磷源)将导致藻类生长受到抑制或停止生长。
在不同的培养基条件下,藻类的形态特征可能会发生变化,如细胞大小、形状等。
不同种类的藻类对营养物质的需求有所差异,这也是其在不同环境中分布的原因之一。
这些结果表明,藻类的生长和分布受到环境中营养物质的限制和供应的影响。
通过对藻类的营养检测,我们可以更好地了解生态系统中藻类群落的状态以及水质的变化情况。
结论
本实验通过对藻类的营养检测,揭示了藻类对不同营养物质的需求和反应。
伊乐藻种子种植方法伊乐藻(Spirulina)是一种常见的蓝藻,以其营养丰富而被广泛种植。
以下是伊乐藻种子种植的方法:1. 购买伊乐藻种子:可在农业用品店或在线市场购买伊乐藻种子。
确保选购的种子是高质量、无污染且适合种植的。
2. 准备种植容器:选择适合种植伊乐藻的容器,如浅盘、塑料槽或藻池。
容器应清洁且无杂质。
3. 准备培养基:伊乐藻的培养基可以使用专门的藻类培养基或自制。
自制培养基可以由水、碳酸盐和微量元素混合而成。
4. 添加种子:将伊乐藻种子均匀撒在培养基表面上,确保种子均匀分布。
5. 提供适当的光照:伊乐藻需要充足的光照进行光合作用。
将种植容器放置在阳光较为充足的地方,或使用人工光源(如荧光灯)提供光照。
6. 维持适宜的温度:伊乐藻的最适生长温度为25-35摄氏度。
确保种植容器所处的环境温度适宜,并避免温度波动过大。
7. 维持水质:伊乐藻需要适度的水质来生长。
保持培养基中的水位,并定期更换或添加新的培养基,以避免水质污染。
8. 定期搅拌:伊乐藻在培养基中容易形成浮层,影响光线的透射。
定期用搅拌器或勺子轻轻搅拌培养基,以防止藻类浮层的形成。
9. 收获藻类:当伊乐藻生长到一定程度时,可以开始进行收获。
使用滤网或细网进行过滤,将伊乐藻从培养基中分离出来。
10. 储存和干燥:将收获的伊乐藻放置在通风良好的地方进行干燥,以便储存和后续使用。
注意事项:- 坚持定期检查和维护培养基的水质。
- 避免过度施肥或过度放养种植容器。
- 注意保持种植容器的卫生,避免杂质进入培养基。
- 在种植过程中,注意防止藻类污染其他水体,避免对环境造成不良影响。
一.编号
铜绿微囊藻(FACHB-912)、水华微囊藻(FACHB-1028)、螺旋藻(FACHB-901)
小球藻(FACHB-1028)
二.培养基及培养条件
(1)螺旋藻采用Zarrouk培养基,
藻种纯化:在Zarrouk 培养基中加入 1.5%琼脂粉,制成固体培养基平板,再将待分离纯化的藻液通过划线方法接种在平板上,置于培养箱中,29℃、光照强度2000 Lux下培养7 d。
从平板上挑取单藻落接入250 mL三角瓶中(含100 mL Z氏培养基),于光照培养箱中静置培养,每天摇3 次,7 d 后作为实验备用藻种.
培养条件:温度30℃,光照4000 Lux,光暗比12:12。
(2)铜绿微囊藻、水华微囊藻、小球藻(绿藻)培养采用BG11培养基
培养条件:温度25℃,光照2000 Lux,光暗比12:12。