干扰素抑制大鼠角膜碱烧伤模型新生血管的实验研究【摘要】目的：探讨干扰素对角膜新生血管以及与vegf的表达变化之间可能的相互关系。
方法：28只s-d纯系大鼠单眼碱烧伤制备角膜新生血管模型，随机分为空白组（a）碱烧伤组（b）和治疗组（c）。
碱烧伤后，c组大鼠左眼开始以300万iu干扰素球结膜下注射，隔天一次。
b组球结膜下注射盐水作为对照，隔天一次。
a 组为空白对照。
于1d，4d，7d，检测vegf表达，并且于4d，7d测量鼠角膜新生血管的面积。
结果：vegf表达与空白对照组有显著差异，碱烧伤后vegf表达明显增高；ifn疗效差异有显著性，治疗组新生血管面积明显少于对照组。
结论：局部注射ifn对碱烧伤诱发的角膜新生血管有抑制作用，其机制可能是通过抑制vegf的表达抑制新生血管的形成。
【关键词】血管内皮生长因子（vegf）角膜血管新生（cnv）干扰素（ifn）【中图分类号】r779 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2012）13-0005-01正常角膜组织没有血管，周围血管终止于角膜缘，形成血管网，营养成分由此扩散入角膜。
角膜的无血管化是角膜的主要特征，也是其完全透明的重要因素之一。
虽然角膜新生血管（corneal neovascularization ，cnv）对感染清除、伤口愈合、抑制角膜溶解等有一定作用[1] ，但cnv 可破坏角膜正常微环境，使眼前节相关免疫赦免偏离消失[2]。
1 材料和方法1.1 实验材料1.1.1 成年健康sd大鼠28只，体重200～220g，雌雄不限，广西医科大学实验动物中心提供。
用水合氯醛腹腔注射全身麻醉，裂隙灯检查大鼠角膜无新生血管以及无其他病变，其中24只大鼠均选择左眼，滴1%丁卡因2次表面麻醉，均以3mm单层圆形滤纸浸入1mol/lnaoh溶液20s，沥去多余溶液后将滤纸贴于左眼角膜中央表面30s，取下滤纸后30ml生理盐水冲洗角膜结膜囊，制作大鼠碱烧伤模型。
中文摘要一前一。
～，一言、角膜新生血管（ｃｏｒｎｅａｌｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ，ＣＮＶ）形成是角膜炎、角膜移植排斥反应、角膜化学烧伤等疾病带来的一个难题。
最近，血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）成为与新生血管有关疾病的研究热点，而ＶＥＧＦ在角膜中的表达及在ＣＮＶ形成中的作用尚未明确。
目前关于ＶＥＧＦ的最重要研究进展是发现它的表达受局部氧浓度的影响。
本实验利用ＶＥＧＦ的这一特性，用高压氧对化学烧伤角膜新生血管动物模型进行实验性治疗，研究高压氧对角膜新生血管形成的影响。
～／材料与方法（一）动物模型与分组取Ｗｉｓｔａｒ大白鼠４３只，雄性，２００～２５０克。
随机取３只鼠（６眼）作正常对照，其余鼠在深麻醉下，用自制涂药器蘸取７５％ＡｇＮＯ。
一２５％ＫＮＯ。
固态粉末状混合物，在距鼻侧角膜缘２．５ｍｍ处，把涂药器垂直接触在角膜上约３．５秒。
同法烧伤双眼，随机分成实验组和对照组，每组２０只（４０眼）。
（二）高压氧治疗方案实验组从烧伤当日至伤后第６天，每天行高压氧治疗２次。
治疗时把实验组大鼠放人实验用高压氧舱内，用纯氧洗舱１０分钟，加压２０分钟至０．２ＭＰａ，氧浓度为９９．２％，稳压１小时，中间换气１０分钟，减压２０分钟。
（三）放射自显影方法于角膜烧伤后第１、２…３５７天，每组随机抽取３只鼠（６眼），深麻醉下迅速取鼠角膜标本，从鼻侧向颞侧角膜缘把角膜分成两・】。
半。
半个角膜固定后，待免疫组化染色。
另半个角膜从鼻侧角膜缘至烧伤区剪取一条形角膜组织块，加入含培养液的小瓶中，每毫升培养液中加入氚化胸腺嘧啶核苷（ｔｒｉｔｉａｔｅｄｔｈｙｍｉｄｉｎｅ，Ｈ－－ＴｄＲ）３ｖＣｉ，体外培养２４０分钟，常规制成石蜡切片，脱腊，涂核乳胶，包装封严，暴光２８天后，显影，定影，染色，封片，进行血管内皮细胞标记的计数，算出血管内皮细胞标记指数（１ａｂｅｌｉｎｇｉｎｄｅｘ，ＬＩ）。
激光温热效应治疗角膜新生血管的实验研究中文摘要本课题旨在应用激光温热效应对实验性角膜新生Ｊ由管（Ｃｏｒｎｅａ］ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ，ＣｏＮＹ）进行治疗，探索角膜新生血管安全、有效的治疗新途径。
课题分为两部分：第一部分角膜新生血管模型的建立目的建立缝线诱导的兔角膜新生血管模型，观察其自然演变过程，选择激光温热疗法治疗角膜新生血管的介入时机。
方法１２只新西兰大白兔，其中２只作为正常对照，ｌＯ只均双眼进行角膜缝线，１０天后拆线。
拆线后即刻、３天、２周、１月、２月进行眼前段裂隙灯显微镜观察和荧光血管造影检查，并且在拆线后３天、２周、１月、２月每个时间点随机抽取２只处死，摘除眼球，进行组织学检查。
结果角膜缝线后ｌＯ天，新生血管已长至缝线末端，拆线后即刻，角膜水肿显著，新生血管扩张，充血明显，荧光造影显示新生觑管渗漏明显。
随着时间的延长，角膜水肿逐渐减轻，新生血管逐渐减少。
组织学检查显示新生血管位于角膜前、中基质层，拆线后３天，有明显的炎性细胞浸润，拆线后２周，组织水肿减轻，炎性细胞浸润减少。
结论缝线法可成功诱导角膜新生血管，此类新生血管属于浅、中层新生血管模型，有自行消退的趋势。
拆线后３天和２周可分别作为新生血管活动期和相对静止期的激光介入时间。
关键词：角膜新生血管模型兔’第二部分激光温热效应对实验性角膜新生血管的干预效果目的探讨氩绿激光和ＩＣＧ介导的８１０二极管激光温热效应对实验性角膜新生血管的干预效果，评价其安全性。
方法４８只新西兰大白兔随机分为２组，每组２４只，分别为氩激光二Ｆ预组和ＩＣＧ介导的８１０激光干预组。
在每组中又随机分为早干预组和晚干预组，每组１２只，早于预组为拆线后３天即进行激光干预治疗角膜新生血管，晚干预组为拆线后２周进行激光干预治疗。
均双眼角膜缝线，一眼行激光干预，一眼作对照。
氩激光选用波长为５１４．５ｎｍ的绿光，连续输出模式，治疗功率为０．１－－０．２ｗ；曝光时问６０ｓ，光斑直径５００Ｐ１０００ｕｍ。
