CyAn ADP vs LSR II vs Canto II比较表

1、流式细胞术(英文flow cytometry)是一种生物学技术，用于对悬浮于流体中的微小颗粒进行计数和分选。

这种技术可以用来对流过光学或电子检测器的一个个细胞进行连续的多种参数分析。

目录* 1 原理* 2 流式细胞仪(flow cytometer)* 3 应用* 4 参见原理一束单色光（通常是激光）照到流体力学聚焦的一股流体上。

若干个检测器瞄向流束和激光相交的这个点，其中一个和激光在同一直在线（称作前散射(FSC)），其它几个和激光垂直（旁散射(SSC)和一个或几个荧光监测器）。

当每个悬浮颗粒通过光束时会按某种方式把光散射，同时所带有的荧光化合物被激发并发射出频率低于激发光的荧光。

这些散射光和荧光的组合数据被检测器记录，根据各检测器亮度的波动（每个细胞会显出一个散射或荧光的峰）就能够推算出每个颗粒的物理和化学性质。

前散射与细胞体积相关，而旁散射取决于颗粒的内部复杂程度（比如核的形状、胞质内颗粒的种类或者末的粗糙程度）。

可以检测的参数有：细胞的体积和形态复杂程度、细胞中的色素、DNA（细胞周期分析、细胞动力学、细胞增殖等）、RNA 染色体分析和分选（文库构建、染色体涂染）、蛋白质、细胞表面抗原（CD标记）、胞内抗原（各种细胞因子(cytokine)、次级媒介等）、核抗原、酶活性、pH，胞内离子化的钙、镁，膜电势、膜流动性细胞凋亡(apoptosis)（定量检测DNA降解、线粒体膜电位、通透性变化）、细胞存活能力、监测细胞电通透性、氧爆作用(oxidative burst) 、研究癌细胞中的多重耐药性(multi-drug resistance, MDR) 、谷胱甘肽、各种组合（DNA/表面抗原等等）流式细胞仪(flow cytometer)流式细胞仪又称荧光激活细胞分选器、荧光活化细胞分类计（FACS，Fluorescence Activated Cell Sorter）。

现代的流式细胞仪每秒可以实时检测几千个颗粒，并且可以主动分离具有不同特性的颗粒。

รԫີΕΕBD LSR IIߓอิګຝ։รԫີBD LSR IIੌڤาઽᏚBD LSR IIਢ׈੺Ղรԫ؀ױ಻ໂ؄֭ࡐࡳீᄷऱΕ௛ܐڤሼ୴ऱோՂীੌڤาઽᏚΔ،౨ٵழ։࣫ڍመ10ۥᘛ٠೶ᑇΖႃᨋ੒࣐شΕUVሼ୴Εᑇڗ֏ሽ՗ߓอ࣍ԫߪऱBD LSR IIΔױየߩޓᐖऑऱڍۥੌڤ։࣫Δࠌ൞່Օૻ৫چႃխતԺ࣍ઝᖂઔߒΔۖլਢᓤᠧऱຌ࿏᧯ᖙ܂ΖᏚᕴऱ๻ૠு֨ਢࠡᄅڤᑇۯ֏ᑇᖕ๠෻ߓอΔࠌBD LSR IIګ੡ഄԫటإऱᑇۯ֏ੌڤาઽᏚΖBD LSR IIऱᑇۯ֏ߓอױኔ෼ޢઞᤪ๠෻ԫեᆄڻऱ೏ຒ։࣫ΔٵழᏚᕴ଀ᄅ֏ऱ౧ᓢ๠෻ݾ๬Δຏመ։࣫ॾᇆ౧ᓢऱ૿ᗨΕᐈ৫Δ೴։ኔ᧯ิ៣ᑑءխऱ⊺ຑาઽᆢ᧯Δ່Օ࿓৫چ྇֟೗ၺࢤΔਢኔ᧯ิ៣DNA։࣫ऱึᄕᇞެհሐΙኙࠟጟᘛ٠ॾᇆֺ෷ऱૠጩٍױش࣍ၩᠦ՗ੌ೯ऱᛀྒྷΖBD LSR IIऱ٠ᖄ᧜ፂߓอലޢԫ֭ሼ୴٠ޔતᒔΕ᡹ࡳچႪፋڇ٠ޔݮګ④ᢴՂΔ٦ຏመ④ᢴΔലሼ୴٠ޔދ୴۟ፋྡྷຘᢴՂΖॾᇆگႃߓอ๯๻ૠګԶߡݮඈ٨Δຍጟ๻ૠױ່Օ࿓৫چൕޢԫଡሼ୴ᕴխᛀྒྷ٠ॾᇆΖޢԫଡPMTհছऱ൅ຏៀ٠ׂΔւ๺ش֪ኙࢬᏁگႃऱ٠ᢜᒤ໮೚તาᓳᆏΖط࣍֘୴ֺຘ୴ऱய෷ޓ೏Δࢬאຍጟ๻ૠ༼೏ԱᇠᏚᕴڇڍۥ։࣫ழऱᛀྒྷࢤ౨Ζᨋ੒ࢤΚΚBD LSR IIױ୲౏1۟4 ௅ሼ୴Ζࢬڶሼ୴ᕴຟਢ௛ܐ׊൅ࡐࡳீᄷΔࠀ಻ໂ೯ ᨋ੒ࢤኪᒤ໮ઌᔞΕᚌ။פ౨ऱPMTΖሼ୴ΚΚଈڻ಻ᆜ࣍ோՂীੌڤาઽᏚΔࡐࡳீᄷΔ୲࣐ࠌشΖױൄ๵ش࣍ Indo-1 ྒྷࡳΕ UVሼ୴Ca+ ຏၦΕDAPI ࢨ Hoechst ։࣫੒าઽDNAΖڍۥ։࣫ΚΚᘛ٠਩ᕪᙇᖗᒤ໮ᏺףΖೈԱᑑᄷ 488nm ᖿ࿇ऱᘛ٠਩ᕪհ؆Δᝫڶ UV ᖿ ڍۥ։࣫࿇ऱᘛ٠਩ᕪڕ DAPIΕHoechst 33342ΕIndo-1ΕGFPΙHeNe ᖿ࿇ऱᘛ٠਩ᕪڕ APC ࿛Ζߓอഗء࿨ዌΚΚ1.1 BD LSR IIߓอഗء࿨ዌBD LSR IIาઽ։࣫Ꮪ׌᧯FACSDivaሽᆰՠ܂ీBDੌڤาઽᏚץਔ෈ੌߓอΕ٠ᖂߓอΕࡉሽ՗ߓอΖৱྒྷᑌءխऱาઽᆖ෈ੌߓอႚಬࠉݧچຏመาઽᏚխሼ୴ᅃ୴ऱ೴഑Δาઽ࠹ሼ୴ऱᖿ࿇ขسॾᇆΔ๯ॾᇆ൷گᕴ൷࠹ࠀ࣋ՕΔຍࠄ࣋ՕԱऱॾᇆᆖሽᆰ։࣫๠෻Δࠀאቹ।ऱݮڤऴᨠچ᧩قנࠐΖੌڤาઽᏚขسࠀ։࣫ऱॾᇆ׌૞ڶ٠ཋ୴ॾᇆࡉᘛ٠ॾᇆΖ٠ཋ୴ॾᇆऱൎஇױא֘ਠาઽऱՕ՛Εݮኪ֗ઽᑠឍศ֏ऱ࿓৫࿛Ζࠉᘛ٠ైऱլٵΔشլٵं९ऱ٠ᖿ࿇Δ࿇୴נլٵं९ऱᘛ٠Δױ᧩قլٵऱᠱۥΔڇլٵऱኔ᧭᧯ߓխΔຍࠄᘛ٠ॾᇆ༉ױא֘ਠլٵऱาઽسढᖂ௽ࢤΖาઽᏚ׌᧯LSR IIาઽᏚ׌᧯ΚΚ׌᧯إ૿قრቹBD LSR II׌ᖲิګ։1.2 Fluidics ෈ੌߓอ෈ੌߓอץܶSample injection tube ᑌ঴Ղᑌಾ(SIT)Εflow cell ੌ೯৛Εࠟଡᚏ෈࿟Ε֗ԫߓ٨෈᧯ᙁಬጥᒵΖ෈ੌߓอऱ׌૞פشΔਢലาઽࠉݧಬࠩྒྷၦ೴࠹ᛀΖ1.2.1 ੌ೯৛Flow CellLSR II าઽᏚආشയຨڤ෈ੌߓอΖڼԫߓอऱ෈ੌᚘԺፖᙫ෈ੌੌຒઃ੡଺ᐗቃ๻ΔֹᏁԳ੡ᓳᖞΔਚۖᖙ܂១໢ΖףՂᏚᕴփհሼ୴٠ሁٍ੡଺ᐗቃ٣ᓳ๻Δڂڼᔞش࣍ᜯݩᛀ᧭ፖഗ៕ઝઔΖ܃ലڜᇘᑌ঴ጥڇSIT ՂΔ෈ੌߓอᇙԫଡᚥ௥ᄎףᚘᙫੌᙓ࿟Δ༼ࠎᙫੌࠩੌ೯৛խΖڇຍٵழΔᑌ঴ᇢጥՈ๯ך௛ףᚘΔۖᑌ঴ঁᄎႉထSIT ๯ಬၞੌ೯৛Ζԫ؟ᑌ঴ၞԵੌ೯৛Δาઽࢨศ՗ലݮګԫሁ᜕ၷٻሼ୴٠ޔฝ೯Ζࠐ۞ຍࠄศ՗ऱཋ୴٠ࡉ࿇נऱٺۥᘛ٠ല༼ࠎᣂ࣍،ଚऱ֡՚ΕݮणΕឍศࢤΕࡉس֏س෻௽ࢤऱಛஒΖڇੌ೯ᛀྒྷ৛խΔຘᢴലሼ୴٠ޔፋྡྷڇᑌ঴ੌၗ֨ۯᆜΖሼ୴٠ޔፋྡྷڇᑌ঴ੌՂขس່ࠋऱ٠ॾᇆΖط࣍٠ᖂຏሁࡉᑌ঴ੌၗ֨ऱۯᆜࡐࡳΔࢬאڼጟ່ࠋ֏णኪԫऴঅ਍᡹ࡳΖੌ೯৛ੌ೯৛ଳ૿ቹଳ૿ቹଳ૿ቹΚΚੌ೯৛փךየᙫ෈Δᑌ঴ᇢጥխऱาઽ๯ԫ೏࣍ᖞଡ෈ੌߓอऱᚘԺංԵੌ೯৛խΔݮګԫპาֽሁΔาઽױ࣍ࠡփٻՂཾ೯Ζ៶طੌ᧯೯Ժፋྡྷ଺෻ΰhydrodynamic focusing αΔױࠌᇠֽሁࡐࡳ࣍ੌ೯৛խ؇Δࡌ໮հᙫੌ෈ݮګԫץ๯ֽሁհᙫᓂΔࠌาઽ౨א໢ԫาઽհݮኪΔດԫੌᆖ່ాऱֽሁࠩሒྒྷၦ೴Δۖፖሼ୴٠ٌᄎΖ෈ੌߓอقრቹ1. ሽᄭၲᣂΚሽᄭڇᏚᕴ׳ছՀֱΖ2. Ꮪᕴ૿ࣨΚڇᏚᕴছֱ૿ࣨխ׽ڶ3ଡੌຒ൳ࠫ᝶ΰLO/MED/HIα֗3ଡפ౨൳ࠫ᝶Ζੌຒ൳ࠫΚLOΚᑌ঴ੌຒΚ12 μl /minMEDΚᑌ঴ੌຒΚ35 μl /minHIΚᑌ঴ੌຒΚ60 μl /minੌຒპᓳඝၨΚֱؐհSample Fine Adjust ඝၨױპᓳ෼ڶᑌ঴ੌຒΔൕ50%-200%ΖLOΚᑌ঴ੌຒΚ6 - 24 μl/minMEDΚᑌ঴ੌຒΚ17.5 - 70 μl/minHIΚᑌ঴ੌຒΚ30 - 120 μl/min෈ੌߓอפ౨൳ࠫΚ• RUNΚጸۥழ।قᑌ঴ၲࡨᙁࣹΖΰᖪદۥழ।قᏚᕴլإൄΔᓮᛀ਷ਢܡዥ௛α• STANDBYΚྤᑌ঴ࢨᄊᖲழհإൄۯᆜΔڼழሼ୴פ෷ᄎ۞೯૾܅א࢏९ሼ୴ኂࡎΖ• PRIMEΚPrimeᖙ܂౨ඈೈੌ೯৛փऱ௛ऐΔشֲ࣍ൄൄߠംᠲऱᇞެΖଈ٣ᙫ෈ೖַੌ೯ΔᚘԺ֘ٻലᙫ෈ඈנੌ೯৛ੌԵᐒ෈දΖڇቃ๻ऱԫࡳழၴ৵Δߓอאԫࡳऱຒ৫۞೯ലੌ೯৛ךየᙫ෈ॴַ௛ऐऱݮګΖՂ૪࿓ڤݙګ৵ΔᏚᕴᄎၞԵStandbyᑓڤΖࠌشழᖲڕΚᄅᇘᖲၲᖲΕޓངPBSΕփຝጥሁڶ௛ऐΕ৺ੑᏚᕴࢨ৺ੑၞᑌಾ࿛Ζ3. ᚏ෈ᙓ࿟Κᙫ෈࿟Κᙫ෈ᙓ࿟୲ᗨપ8֒Δאጸۥጥᒵፖ׌ᖲઌຑΖᇘየᙫ෈࿟ΔᏚᕴױאሎ۩Օપ8՛ழΖᙫ෈࿟።Ղڶ८᥆ᛩڬΔঅဳᙫ෈࿟യຨΖᙫੌ෈࿟ڶۭᜤᙫ෈መៀᕴSheath FilterΔ0.22umመៀᕴΔװೈᙫ෈խऱᠧᔆΔঅᢞၞԵੌ೯৛ऱᙫ෈ਢ೓෣ऱΖᓮࣹრ௛ሁ྇ᚘᎺհۯᆜΖຍԫীऱ๻ૠ޲ڶᇘ෈૿ႚტᕴΔࢬאྤऄൕᏚᕴຌ᧯Ղቃवᙫ෈ܛലشݙΖ׽౨ش֫ᄀ೯ᙫ෈࿟ΔᖇૹၦტࠐܒឰΖᐒ෈࿟Κ୲ᗨપ16֒ΔႿᓄޗᔆΔאᖪۥጥᒵፖ׌ᖲઌຑΖ࿟Ղᇘڶ෈૿ტᚨᕴΔᐒ෈ךየழᄎ࿇ᜢᤞܫΖش֪ױאؾီ۷ጩᐒ෈࿟ऱ۾የၦΔࠐංጩᙫ෈ऱໍਲၦΖ4. Ղᑌ঴೴ΚՂᑌ঴೴ਢᑌءጥऱՂᑌۯᆜΖ،ץਔԿଡຝ։Δԫଡਢၞᑌಾ SITΔᝫڶ֭ᐶਮTube Support ArmΕࡉ෈ዠژఎߓอDroplet Containment Module(DCM)Ζ•ၞᑌಾΚਢԫ௅լ᤬ᙓጥΔലาઽൕᑌءಾխܮԵੌ೯৛Ζၞᑌጥ؆ڶԫ୚ጥΔਢ෈ዠঅఎߓอऱԫຝ։Ζ•֭ᐶਮΚ૤ຂඔ೯෈ዠژఎߓอΖ֭ᐶਮۯ࣍ؐೡࢨ׳ೡழඔ೯෈ዠژఎߓอΙ֭ᐶਮڇՂᑌणኪ੡ᣂຨΖ•෈ዠژఎߓอΚߓอط֭ᐶਮΕట़ᚥ௥ࡉ؆୚ጥิګΖᅝ֭ᐶਮۯ࣍ؐೡࢨ׳ೡۯᆜழΔట़ᚥ௥༉ᄎඔ೯Δല෈᧯ൕ؆ጥܮԵᐒ෈࿟փΖՂᑌழΔႊ߰ຒല֭ᐶਮۯ࣍խۯΔאᝩ܍መڍᑌ঴๯ࢼܮࠩᐒ෈࿟փΔᅝ֭ᐶਮۯ࣍խۯΔట़ᚥ௥ೖַՠ܂Ζޓངᑌ঴ழΔᨃᏚᕴঅ਍RUNऱᑓڤΔࠌ൓ၞᑌಾױאܛࠥ֘ޱՂᑌΖඔ೯DCM ᣂຨDCM5. HTS (High Throughput Sampler) ՂᑌߓอBD LSR IIױᙇ಻HTSՂᑌߓอΔگႃ96ࢨ384პ֞ᒌհᛀ᧯Ζڇᇘ಻ڶHTSհᏚᕴՂΔᄎڶԫگ࠷ᑓڤ֊ང᝶(Acquisition Mode Switch)ࠎࠌشृ֊ང໢ጥࢨHTSՂᑌᑓڤΖ!•໢ጥᑓڤΚڇڼᑓڤՀDCMפ౨إൄΖᅝ֭ᐶਮۯ࣍ؐೡࢨ׳ೡۯᆜழΔట़ᚥ௥ᄎඔ೯Δല෈᧯ൕ؆ጥܮԵᐒ෈࿟փΖ•პ֞ᒌՂᑌᑓڤΚڇڼᑓڤՀDCMפ౨ᣂຨΖ֊ང۟ڼᑓڤழΔၞᑌಾᄎڂDCMפ౨ᣂຨۖขسዠֽ෼ွΔዠՀհᙫ෈ᄎ๯Հֱհܮگቾ(adsorbent pad)ܮگΔڼ੡إൄ෼ွΔլᏁᖜ֨ΖޓངHTSറشհၞᑌಾঅᥨ୚ࠀലᛀ᧯ຑ൷ᕴ(sample coupler)ڜᇘݙฅ৵Δዠֽ෼ွܛᄎ௣؈ΖHTSዌທقრቹ:1.3 Optics ٠ᖂߓอBD LSR II ߚᵤ۔Ոܝᅌிవᰃϵ▔Հܝᅌிవ੠ᬊ▊ܝᅌிవ᠔ఈ៤DŽ▔Հܝᅌிవ⚎⌕ࢩՈ௴ྡྷᐊ՚ܝ࿁˗ᬊ▊ܝᅌிవࠛᬊ▊ᕲ௴ྡྷ៪ୖᄤՀߎՈᙦܝֵᔣ៪້ᬷᇘܝDŽ٠ᖂߓอ٠ᖂߓอଳ૿ቹଳ૿ቹଳ૿ቹΚΚ1.3.1 Excitation Optics ᖿ࿇٠ᖂߓอ٠ॾᇆᖿ࿇ߓอطሼ୴ᕴΕ٠ᖄ᧜ፂΕݮګ٠ޔऱᆆᢴࡉԫଡ೏ຘ٠ࢤፋྡྷຘᢴิګΖ٠ᖄ᧜ፂߓอലሼ୴٠ޔતᒔΕ᡹ࡳچႪፋڇ٠ޔݮګᆆᢴՂΔ٦ຏመᆆᢴΔലሼ୴٠ޔދ୴۟ፋྡྷຘᢴՂΔߠՀቹࢬقΖLSR IIሼ୴ΚBD LSR IIᏚᕴࠌش܅פ෷Ε௛ܐڤࡐኪሼ୴ᕴΔຍᑌԫࠐΔᇠᏚᕴ༉լᏁ૞௽௘ሽᄭࡉܐথ๻ໂԱΖሼ୴ं९ं९ΰΰnmα່՛פ෷ΰmWαൄشᘛ٠਩றCoherent R Sapphire TM ࡐኪሼ୴488ΰ៴٠α20 FITC, PE, PE-Texas Red, PerCP,PerCP-Cy5.5, PE-Cy7,PIJDS Uniphase TM HeNe 633ΰદ٠α 17 APC,APC-Cy7Coherent Vioflameࡐኪ405 (࿫٠) 25 Cascade Blue, Alexa 430 Kimmno HeCd 325 (࿫؆٠) 8 Indo-1, DAPI, Hoechst Lightwave X-Cyteࡐኪ355 (࿫؆٠) 20 Indo-1, DAPI, Hoechst1.3.2 Collection Optics گႃ٠ᖂߓอፋྡྷຘᢴߓอঞ֧ᖄሼ୴٠ၞԵੌ೯৛ு֨ऱᑌ঴೯ᒵՂΖא 6-2 ๵௑๻ૠLSR_II੡ࠏΔگႃ٠ᖂץਔࠟଡᛀྒྷᕴೄ٨ΔطڕቹխࢬقऱԫଡԶߡݮࡉԫଡԿߡݮඈ٨ऱ٠ሽጥิګΖԶߡݮᛀྒྷᕴೄ٨ץܶԮଡ٠ሽጥΔ،૤ຂᛀྒྷࠐ۞៴٠ሼ୴ऱॾᇆΖࠡխڶԫଡ٠ሽጥΔ،૤ຂᛀྒྷ90৫ೡֱཋ୴٠ॾᇆΖԿߡݮᛀྒྷᕴೄ٨ץܶࠟଡ٠ሽጥΔ،૤ຂᛀྒྷࠐ۞દ٠ሼ୴ऱॾᇆΖ٠ᖂಛᇆ൷گᕴቹق(ቹ6-2 ๵௑)Κॾᇆگႃߓอ๯๻ૠګԶߡݮࡉԿߡݮऱඈ٨Δຍጟ๻ૠױڶயچൕޢԫଡሼ୴ᕴխᛀྒྷ٠ॾᇆΖࠠ᧯ڕՀΚຏመԫิ९ຏԲ։ᢴLongpass DMΔ٣ലᘛ٠ॾᇆխं९່९ऱႚᙁࠩรԫଡ٠ሽጥΰPMTαՂΔ֘୴ڃࠐऱለ࿍ं९ऱ٠ॾᇆঞٻՀԫଡPMTֱٻ࿇୴ΖޢԫଡPMTհছऱ൅ຏៀ٠ׂbandpassւ๺ኙࢬᏁگႃऱ٠ᢜं९೚તาᓳᆏΖط࣍֘୴ֺຘ୴ऱய෷ޓ೏Δࢬאຍጟ๻ૠ༼೏ԱᇠᏚᕴڇڍۥ։࣫ழऱᛀྒྷࢤ౨ΖڕቹقΔBlue Aΰ750~810 nmαΕBlue Bΰ675~715nmαΕBlue Cΰ650~670nmαΕBlue Dΰ600~620nmαΕBlue E ΰ562~588nmαΕBlue Fΰ515~545nmαΕBlue Gΰ488nmαΖOctagonΚTrigonΚڕቹقΔRed Aΰ770~830 nmαΕBlue Bΰ650~670nmαೈ٠ሽጥᛀྒྷᕴհ؆Δፖሼ୴ؓ۩ֱٻڶ࣋ᆜԫ೏ඕ৫٠ሽԲᄕ᧯photodiodeΔشאگႃൎՕऱছֱཋ୴٠ॾᇆΖຍଡԲᄕ᧯ছֱڶଡᔟ٠ཧΔױא߻ַإٻऴ୴ऱሼ୴٠ၞԵΔ׽൷گ៥୴٠Ζៀׂੌڤาઽ๬խࢬشៀׂڶৰڍጟΔڶ൅ຏៀׂΕ९ंຏៀׂΕ࿍ंຏៀׂΕ९ंຏᠨۥࢤ֘୴ׂΕխࢤៀׂΖ൅ຏៀׂऱᚨشঞإړઌ֘Δ،׽ւ๺ਬԫ௽ࡳं९ऱ٠ᒵຏመΔࠏڕԫ530 nm൅ຏៀׂ׽ւ๺FITC࿇୴ऱ530 nmጸۥᘛ٠ຏመΔۖࠡהं९ऱᘛ٠٤ຝ๯ॴឰΖ९ंຏៀׂ׽ւ๺ਬԫं९אՂऱ٠ᒵຏመۖലڼं९אՀऱ٠ᒵៀൾΔڕ650nm ९ंຏៀׂ׽ւ๺PerCP࿇୴ऱદۥᘛ٠ຏመΔۖ488nmऱᖿ࿇٠֗FITC࿇୴ऱ525nmጸ٠٤ຝ๯ॴΖ९ंຏԲۥࢤ֘୴ᢴ׽ւ๺ਬԫं९אՂऱ٠ᒵຏመۖലڼं९אՀऱ׼ԫ௽ࡳं९ऱ٠ᒵ֘୴Ζࠏڕᨃ620nmאՂऱદ٠ຏመۖല 525nmጸ٠֘୴Δࠡהऱ٠ᒵঞطᢴׂܮگΖխࢤៀׂྤ᙮෷௽ࢤΔ،ኙٺं९ऱ٠ᒵ݁֌ಐ྇Δൄش٠ᒵመൎᏁ૞݁֌ಐ྇ऱچֱΖሼ୴٠ᄭ֗ኙᚨ൷گᕴᘛ٠ं९। ( 4-2-2-2 ๵௑)Κ1.4 Electronics ሽ՗ߓอሽ՗ߓอ૤ຂނ٠՗ॾᇆ᠏֏ګሽ՗ॾᇆΔࠀലհᑇۯ֏੡৵ᥛሽᆰ։࣫܂ᄷໂΖڇԲᄕ᧯ࡉPMTs٠ሽጥࢬขسऱॾᇆΔᄎፖהଚೠྒྷࠩ٠՗ऱᑇၦګإֺΖาઽᏚऱሽ՗ߓอᄎ൷ထৱຍࠄຑᥛሽᚘऱᣊֺॾᇆ࣋ՕΔྥ৵᠏ངګ։ᠦऱᑇڗ֏ᑇଖΖڇॾᇆ࣋Օࡉᑇڗ֏᠏ང৵Δൕ਩ۥาઽศ՗ऱ௽ۥᘛ٠ॾᇆ༉ᄎᆵࠩ௽ࡳऱຏሐΔڂۖւ๺։ᆢ։࣫ΖBD LSR IIሽ՗ߓอຝٙطሽᄭ൳ࠫΕຑ൷ᕴࡉࣨᑒխऱ๠෻ࣨΕࡉ෈ੌߓอ൳ࠫ໢ցΕگ࠷ਐقᗉ࿛ցٙࢬิګΖءີᆏႛ១࿍տฯڇInstrumentᏚᕴီ࿗Laser tab੒଄խΔڶ༓ଡᣂՊሼ୴Εױࠎࠌشृᓳᆏૹ૞೶ᑇΔڕՀቹDelayΕWindow ExtentionΕፖArea Scaling FactorsΙუᛵᇞڶᣂሽ՗ߓอऱݙᖞᇷಛΔױא೶ەπBD LSR II User’s GuideρխऱSignal detectionີᆏΖຍ༓ଡᣂՊሼ୴ऱૹ૞೶ᑇᐙ᥼ᖞଡᏚᕴߓอሎ܂Ζԫ౳ऱس᠔ઔߒش֪լᏁ૞ޓޏLaser DelayፖWindow Extentionࠟႈቃ๻යٙΔᓮ֎ᖐ۞ޓޏΖ׽ڶ֟ᑇൣउՀױאڂᚨ௽௘าઽ؆ীΕ֡՚ΔࠐଥޏFSC Area ScalingΔ܀ᓮڇޢֲᣂᖲছΔᓮބڃDefault ଺ᐗ๻ࡳΔא܍ᐙ᥼הԳऱኔ᧭࿨࣠ΖޢֲᣂᖲழΔຍࠄ೶ᑇᄎ۞೯ᚏژΔሶֲၲᖲழΔঞਢਤֲऱ່ึ๻ࡳΖאՀ១໢տฯᖙ܂଺ঞΔᓮጥ෻୉ီኔᎾᏁ૞۞۩๵ᒤΖ1.4.1 Laser Delay ሼ୴࢏ᙈழ஁੡Ա૾܅լٵሼ୴ၴขسᘛ٠ॾᇆհઌյեឫΔ༼೏ᛀྒྷᨋඕ৫ΔLSR IIආشم᧯़ၴᖿ࿇ߓอΖՈ༉ਢլᄎሼ୴ڇլٵழၴΔፖาઽศ՗ٌᄎΔࢬขسऱॾᇆ٦ნᖞܧ෼Ζڼԫ๻ૠऱᚌរޢԫ֭ሼ୴ࢬگႃᘛ٠ॾᇆΔאᗑمऱ٠᧜ᙁԵΔױ྇܅ઌյեឫΖԫ౳ऱ๻ૠਢא៴٠ᥲ୴੡t0Δࢬא׽ڶદۥΕ࿫ۥΕࡉ࿫؆ሼ୴ڶᏁ૞ᒔᎁሼ୴࢏ᙈழၴΖ1.4.2 Window Extensionףᐈ࿗Window gateψ࿗॰ωਢԫଡॾᇆ౧ᓢ೏࣍ࢳଖऱழၴ࿗ΙۖψWindow Extention (ףᐈ࿗)ωঞז।Ꮪᕴ๠෻౧ᓢॾᇆऱழၴਢܡ࢏९ΖലϙWindow Extentionϙᓳ۟Ϙ0ϙΔױڇ່ాऱழၴ࿗փ஢஦ࠩ౧ᓢ᧢֏Δ܀౒រਢຝٝ౧ᓢآ౏Եᗨ։ΖBD LSR II଺ᐗቃ๻ऱψףᐈ࿗ω੡7პઞΔܛ౧ᓢছ৵ٺ࢏९3.5პઞΔᔞش࣍0.2~12.0პۏՕ՛ऱาઽศ՗Ζԫ౳ऱ୅ࠂᣊ೯ढาઽઃᔞشΖڕᏁྒྷၦՕ࣍20პۏऱาઽศ՗ᓮፖߓอጥ෻୉൷੓Δᔞ৫چ༼೏ψףᐈ࿗ωΖመ৫࣋Օψףᐈ࿗ωᄎࠌॾᇆᅸᐳΰelectronic abortsαऱᖲ෷ᏺףΔࠌᑌءੌຒ࠹ࠩওૻΖ1.4.3 Area scaling factors ᓳᖞ૿ᗨངጩڂ՗๺ڍڂైױ౨ᄎᐙ᥼ᘛ٠ॾᇆऱ૿ᗨAࡉ೏৫HऱઌኙֺଖΔڕาઽՕ՛Εᙫ෈ੌຒ࿛Ζ੡Աᒔঅޢԫଡ౧ᓢॾᇆऱAࡉHऱᑇଖઌᅝΔܛֺଖ࿛࣍1Δױאᓳᖞ૿ᗨངጩڂ՗ΖאFSCॾᇆऱ٠ሽԲᄕ᧯੡ࠏΔᓳᆏ”FSC Voltage”Δࠌᘛ٠პ෺ஆᆵ࣍FSC-Hऴֱቹࠥ৫પ100x1,000๠ΖᨠኘFSC-AፖFSC-Hऴֱቹհᘛ٠ൎ৫Δڕ࣠ઌٵΔঞլᏁᓳᖞ៴٠ሼ୴ऱ૿ᗨངጩڂ՗Ζڕ࣠FSC-AፖFSC-Hᘛ٠ൎ৫լઌٵΔ࣍”Instrument”ီ࿗խរᙇ”Laser”।௑ᓳᇢ”FSC Area Scaling”ΖڕFSC-A՛࣍FSC-Hհᘛ٠ൎ৫Δᓳ೏FSC Scaling FactorΙ֘հঞᓳ܅Ζޢԫ֭ሼ୴ٺڶٺᗑمऱ૿ᗨངጩڂ՗ΔڕڶᏁ૞ױଡܑᓳᖞࢨᒔᎁΖڕՀΖ1.5 BD LSR IIՠ܂ీᇷறऱᛧ࠷ፖ։࣫Δא֗BD LSR IIᏚᕴऱ࿪Օຝ։פ౨Δ݁ਢLSR IIՠ܂ీՂΔطFACSDivaຌ᧯൳ࠫᖙ܂Ζᇠՠ܂ీץਔאՀຝ։ΚBD଺ᐗ๵௑಻ᆜऱPCሽᆰΰܶᄶቕΕ᝶ᒌαЁش࣍ᛧ࠷ᇷறऱՠ܂ీؘႊ಻ᆜڶԫଡPentium R IV ࢨਢޓ೏్ऱ๠෻ᕴΔڶԫଡ۟֟1GB ऱRAMΔԫଡ40GBऱױشऱ࿏጗़ၴΔא֗WindowsXP Professional (US-English)܂ᄐߓอΖ17ٹᘛኟ൑ۥٱ।ᖲBD FACSDiva ຌ᧯version 5.0 or aboveЁᇷறऱᛧ࠷ፖ։࣫Ё෈ੌߓอऱ۞೯ඔ೯Δᣂຨࡉ৺ੑᑓڤBD FACSDiva Data ManagerЁᇷறऱໂٝፖᚏژรԲີΕΕBD LSR IIൄ๵ᖙ܂รԲີᙫੌ෈ᙓ࿟ᙓ࿟2.1ךჄᙫੌ෈৬ᤜޢֲၲ೯ᏚᕴছΔࠉՀ٨ޡᨏךჄᙫੌ෈ᙓ࿟ΚࣈՀףᚘᒵΰ෡ጸᒵαࡉᙫੌ෈ጥΔຏመڇᔞᅝऱ൷ᙰՂऱ८᥆ᚘථՂਊᚘΔࠀࢮದػۥ 1.ຑ൷ᕴΖലᙫ෈ᙓ࿟൅ֽࠩᑒΔࠀࢮದᚘԺຏଅ֞ࠐਜ਼௛23.ඝᠾື።Δ࠷Հື።ΔࠀףԵᔞၦऱFACSFlowᙫੌ෈Ζ࣋ڃື።Δᒔঅࠡ႕ۥቾׂፖᙫ෈ᙓ࿟യٽΔྥ৵ඝጹ።՗ၞۯᆜΖ4.ૹᄅ൷ڃףᚘᒵࡉᙫੌ෈ጥΔط࣍൷ᙰլٵ๵௑Δ෻ᚨլᄎ൷ᙑΖ5.2.2ଙೈᐒ෈୲ᗨપ16֒ΔႿᓄޗᔆΔאᖪۥጥᒵፖ׌ᖲઌຑΖ৬ᤜޢֲၲ೯ᖲᕴছΔࠉՀ٨ޡᨏଙೈᐒ෈Ζش֪ױאؾီ۷ጩᐒ෈࿟ऱ۾የၦΔࠐංጩᙫ෈ऱໍਲၦΖࣈՀᐒ෈ጥᒵΰᖪۥጥᒵαΔຏመڇᔞᅝऱ൷ᙰՂऱ८᥆ᚘථՂਊᚘΔࠀࢮದػۥຑ൷ᕴΖ 1.ඝᠾΔࠀࣈՀᐒ෈ᄨየႚტᤞ໴ᕴΖ2.ലᐒ෈࿟൅ֽࠩᑒΔඝၲ࿟።Δଙೈᐒ෈Ζ3ףપ500 mLዦػֽΖ4.5.ඝڃື።Ζૹᄅ൷ڃᐒ෈ጥᒵࡉᐒ෈ᄨየႚტᤞ໴ᕴΖՂᖲࠩԫתழΔΔךჄᙫੌ෈2.3 Ղᖲࠩԫתழڕ࣠׌ᖲբඔ೯Δ߷شؘ֪ᏁࠉՀ٨ޡᨏךჄᙫੌ෈Δאᝩ܍ጥሁխขس௛ऐΖ׌૞೴ܑڇᏁᒔᎁ׌ᖲڇStandbyणኪΔ׼؆լ૞ࣈՀᙫੌ෈ጥΔࠀڇچࣨՂ଺ۯᖙ܂ΖࣈՀףᚘᒵΖ1.ࢮದᚘԺຏଅ֞ࠐਜ਼௛Ζ2ඝᠾື።Δ࠷Հື።ΔࠀףԵᔞၦऱFACSFlowᙫੌ෈Ζ3.࣋ڃື።Δᒔঅࠡ႕ۥቾׂፖᙫ෈ᙓ࿟യٽΔྥ৵ඝጹ።՗ၞۯᆜΖ4.ૹᄅ൷ڃףᚘᒵΖ5.2.4 ֊ངՂᑌᑓڤ(optional)ൕ໢ጥՂᑌᑓڤ֊ང۟პ֞ᒌՂᑌᑓڤழΔᏁ૞ലHTSറشհၞᑌಾ؆ጥא֗ᛀ᧯ຑ൷ᕴᇘՂΔࠀല֊ང᝶֊ང۟პ֞ᒌᑓڤΖฝၲHTSঅᥨ።Ζ1.ല֭ᐶਮؐฝΔ࠷Հᛀ᧯ጥΖ2.՛֨ඝՀၞᑌಾհ؆୚ጥ(DCM sleeve)Δࠀݔ࿳ᆜ࣋ᝩ܍ᙊ؈Ζ3.ലHTSറشհၞᑌಾঅᥨ୚(SIT protector)՛֨ٻՂ୚ԵΔං۟ືຝࠀ᠙ጹΖ4.൷ՂHTSᛀ᧯ຑ൷ᕴ(sample coupler):5.a. ലᛀ᧯ຑ൷ᕴ՛֨ٻՂංԵΔऴ۟ტࠩॴԺྤऄᥛං੡ַΖb. ᒔᎁᛀ᧯ຑ൷ᕴՀֱጥᒵਢܡڶށڴࢨᚘމΔૉڶΔᓮ՛֨ඈೈΖc. א໢֫ലᛀ᧯ຑ൷ᕴ֭ᐶ۰Δࠀش׼ԫೋ֫ലՂֱհඝၨඝጹΖࣹრ: ᛀ᧯ຑ൷ᕴՂֱፖၞᑌಾঅᥨ୚ࢍጤհၴᚨڶԫ՛੄ၴሶΖڕآᨠኘࠩڼၴሶΔᓮലᛀ᧯ຑ൷ᕴ࠵ՀࠀૹᄅᇘݔΖല֊ངᕴ֊ང۟პ֞ᒌՂᑌᑓڤΖ6.2.5 Ꮪᕴၲᖲ࿓ݧ໢ጥՂᑌᑓڤ2.5.11. ၲඔาઽᏚሽᄭΙၲඔሽᆰΖ2. ᒔᎁᙫੌ෈࿟ڶԶ։የऱFACSFlowΔᒔኔ።ጹΔࠀᒔᎁጥሁຏዃΖ3. ലᐒ෈ଙൾΔڇᐒ෈࿟խףԵપ500 c.c. ዦػֽΖ4. ඈೈ෈ੌመៀᕴխऱ௛᧯Ζ5. ڕ׽ࠌش໢ԫሼ୴ΔᏁᄊᖲԼն։ᤪΙڕࠌشᠨሼ୴ჸ಻દ٠ΔᏁᄊᖲ֥։ᤪΙڕࠌشᠨሼ୴ჸ಻UV٠ΔᏁᄊᖲքԼ։ᤪΖ6. ച۩ PRIME פ౨ࠟڻΖངՂPBSጥΔHIGH RUN ࠟ։ᤪ৵ܛױၲࡨ։࣫ᑌ঴ΖՂᑌᑓڤ2.5.2პ֞ᒌპ֞ᒌՂᑌᑓڤၲඔาઽᏚሽᄭΙၲඔHTSሽᄭΙၲඔሽᆰΖ1.ٵ໢ጥՂᑌᑓڤޡᨏ2-5Ζ2.ച۩ PRIME פ౨ࠟڻΖਊRUN bottonΔࠌߓอ๠࣍ՂᑌणኪΖ3.4. ၲඔ FACSDiva ຌ᧯Ζ5. រᙇՠࠠ٨Ղհ HTS Prime6. ৱ Prime ݙګ৵Δܛױၲࡨ։࣫ᑌ঴Ζ2.6 ඈೈ෈ੌመៀᕴխ௛᧯ԫ౳ۖߢΔᙫ෈መៀᕴᄎڶ௛᧯ڍਢطᙫ෈࿟ၒ೓ࢬᖄીΖຍଡംᠲᄎ֧ದऱฆൄ෼ွΔਢش֪ڇՂᖲழ޲઎ߠٚ۶ॾᇆڇᛧ࠷ᢄቹՂΔլᓵਢشչᏖگႃຒ৫ຟԫᑌΖش֪ؾီᛀ਷ױߠᙫੌ෈ᒵലਢ़ऱΖ٦גา઎࿇෼ᙫ෈መៀᕴᇙՈ޲ڶ෈᧯Ζԫ؟࿇سՂ૪෼ွΔᓮܛࠥല࠷Հᛀ঴ΔངՂDIֽΔࠀല෈ੌߓอ࣋StandbyΖࠉᅃ2.3൸ࢬ૪ޡᨏૹᄅჄየᙫ෈දΖჄየ৵ΔᓮࠉՀ٨ਐقඈೈ௛᧯Ζല෈ੌߓอ࣋RUNΖ1.᎘᎘ࣁؚ෈ੌመៀᕴΔല௛ऐ᎔۟መៀᕴືጤΖ2.3. ਊՀຑ൷࣍෈ੌመៀᕴՂհػۥਜ਼௛ጥືጤၲᣂΔࠌ௛ऐඈנΖലᄨੌऱᙫ෈ژ࣋ࠩᔞᅝ୲ᕴΔ՛֨֎႖ᏴΖ4. ᛀኘ෈ੌጥᒵΖڕڶ௛ऐΔലᏚᕴ׳ೡհ෈ੌጥሁᔚणၲᣂᓳᠾΔࠌ௛ऐፖᄨੌऱᙫ෈ژ࣋ࠩᔞᅝ୲ᕴΔ՛֨֎႖ᏴΖΖ5.ԫ؟ᙫ෈إൄੌ೯ழΔױ࠷Հᑌ঴ጥΔྥ৵ਊHigh ΕਊPrime Ζ6.ૹ៿ޡᨏ57.אإൄֱڤPrime Ζ8. HI RUN ն։ᤪΖ2.7 ᏚᕴᏚᕴᣂᖲᣂᖲᣂᖲ࿓ݧ࿓ݧᣂᖲছؘ૞೯܂Κ৺ੑၞᑌጥፖ؆୚ጥΔ߻ַၞᑌጥങႾΕࢨڶ਩றྲྀఎΖ2.7.1໢ጥՂᑌᑓڤ1. ࠷ 3 c.c. FACSClean Ղᑌ঴Ζ2. ലᑌ঴֭਍ਮؐฝપ1։ᤪΔᨃᏚᕴऱట़ߓอࢼ࠷પ2 c.c. ऱ෈᧯Ζ3. ലᑌ঴֭਍ਮڃإΔਊ HI RUN Δྥ৵ᨃ FACSClean ৺ੑጥሁ 5 ։ᤪΖ4. ࠷ 2 c.c. FACSRinse Ղᑌ঴Δૹ៿Ղ૪ޡᨏ2-3Ζ5. ࠷ 2 c.c. dH2O Ղᑌ঴Δૹ៿Ղ૪ޡᨏ2-3Ζ6. ࣹრ່৵׽ఎપ1 c.c. dH2O ڇᇢጥխΖ7. ֊ང۟ Standby אܐথሼ୴ΔStandby ն։ᤪ৵ᣂຨาઽᏚΖ8. ᓮଙൾᐒ෈ΔࠀڃჄߩജၦऱዦػֽΖ9. ലᙫੌ෈࿟ךჄ۟Զ։የΖ10. ᣂຨ࿓ڤΙᣂຨሽᆰΖ2.7.2პ֞ᒌპ֞ᒌՂᑌᑓڤՂᑌᑓڤ৺ੑጥሁ:1. Choose HTS> Clean2. រᙇDaily Clean-96 well U-bottom template Δរᙇʳˢ˞Ζ3. ຌ᧯נ෼ᒔᎁီ࿗ڕՀΚᓮݙګՀ٨ᄷໂՠ܂Κ3.1 ࣍ 96 well plate ՂΔᓮڇՀ٨ well խ෌ף FACSClean solution ֗ DI water Κ3.2 ലHTS Ղ።ฝၲΔࠀലᄷໂړऱ96 well plate ᆜ࣍ plate holder ՂΖࣹრ: Well A1 ᏁኙᏘ plate holder ׳ՂߡۯᆜΖ3.3 ።ՂHTS Ղ።Δᒔᎁᖲᕴڇ “RUN” ऱᑓڤΖˇˁʳរᙇ O ˞ΖᏚᕴݙګ৺ੑ࿓ݧ৵Δᄎנ෼Հ٨ီ࿗Ζ6. រᙇ O ˞Δᇞೈ৺ੑ࿓ݧΖࣹრ: ڕՂᑌᛀ᧯ܶڶacridine orange (AO) or propidium iodide (PI) ࿛⊺ᆈ৫ለ೏հ਩ᕪΔᓮࠉՀ।ࠉՀ।ᄷໂᄷໂᄷໂʳʳ˗ˡ˔ʳറش৺ੑᒌറش৺ੑᒌΔΔᙇᖗᙇᖗʳʳϘDaily Clean-96 well U-bottom DNA” template ࠉᅃՂ૪ޡᨏ৺ੑጥሁ૪ޡᨏ৺ੑጥሁˍˍWellsSolution Volume (μl)A1-A4BD FACSClean Solution 250 B1-B4BD FACSRinse Solution 250 C1-C4DI Water 250ᣂᖲ࿓ݧΚ11. ਊStandby אܐথሼ୴ΔStandbyն։ᤪ৵ᣂຨาઽᏚΖ12. ᓮଙൾᐒ෈ΔࠀڃჄߩജၦऱዦػֽΖ13. ലᙫੌ෈࿟ךჄ۟Զ։የΖ14. ᣂຨ࿓ڤΙᣂຨሽᆰΖรԿີΕΕᏚᕴ๻ᆜSurface MarkersรԿີڇءີխΔ൞ലᖂ฾ڕ۶ၞ۩քۥ܍੽ᘛ٠։࣫հᏚᕴ๻ᆜΖڇ൞ಖᙕԫଡᑌ঴ऱᇷறհছΔؘႊ٣௅ᖕࢬࠌشऱᑌ঴ᣊীࡉᘛ٠਩றऱլٵΔኙ٠ሽ଍ᏺጥሽᚘଖΔᇖᚍଖࡉࢳଖ๻ᆜၞ۩່ᚌ֏๻ᆜΙᆖመ່ᚌ֏๻ᆜ৵Δլٵᘛ٠೶ᑇՀऱؾᑑาઽຟ౨։܉ڇቹݮࠥ৫ՂΖඔ೯ߓอၞ۩঴ᔆ൳່ࠫᚌ֏๻ᆜಖᙕᇷற։࣫ᇷறᣂຨߓอኙੌڤาઽᏚऱ່ᚌ֏๻ᆜץਔ༓ଡޡᨏΙ1. ࿆ᙕၞԵBD FACSDivaຌ᧯2. ᄅ৬ԫኔ᧭ Experiment3. ᘛ٠೶ᑇᙇᖗ4. ᎅࣔᛧ࠷פ౨᝶5. ່ᚌ֏ੌڤาઽᏚऱ๻ᆜΰܶAutoCompα6. ๻ૠGlobal Sheetᛧ࠷ठ૿7. ಖᙕኔ᧭ᑇᖕ8. ᙁנΕႪԵFCS֮ٙΕໂٝኔ᧭ᚾூءᆏലᙞ૪ڕ۶ܓشϙInstrument Setting (Ꮪᕴ๻ᆜ)ϙפ౨ΔኙLSR IIᏚᕴၞ۩ 6 ۥ։࣫๻ᆜ່ᚌ֏Ζኙ൞ۖߢΔ൞ڇᖙ܂ຍࠄޡᨏழΔᓮጐױ౨ਊᅃႉݧၞ۩Ζ3.1 ࿆ᙕၞԵBD FACSDiviaຌ᧯1ၲඔᏚᕴ׌ሽᄭΖ׌ሽᄭጸۥ᝶ۯ࣍าઽᏚ׳ছֱΖ2ၲඔሽᆰΖோ૿ုםᇆਢAdministratorΔയᒘ࿆ᙕ௃խᙁԵBDISΔਊENTERΖ3ၲඔ BD FACSDiva ຌ᧯Ζڇຌ᧯࿆ᙕ௃խΔᙁԵࠌشृټጠ֗യᒘΖΰಖ൓٣ᇿጥ෻୉عᓮࠩ඄ᦞയᒘαNOTICEΚ܃ऱࢬڶኔ᧭ᇷறຟല๯অఎڇ܃۞աऱ࿏጗़ၴᇙΔࠡהش֪լ౨ၞԵΖ4ᒔࡳຌ᧯ፖาઽᏚݙګຑᒵΖݙګຑᒵ৵ΔڇInstrumentီ࿗Հֱᄎ᧩قInstrument ConnectedΖڕڶؘ૞ΔױរᚰInstrumentΰαီ࿗Δᨠኘຌ᧯ፖาઽᏚਢܡݙګຑᒵΖՠ܂ီ࿗࿗ՠࠠ᥏ՠ܂ီ5ڕڶᏁ૞Δױ໢ᚰՠ܂ီ࿗ՠࠠ᥏Ղऱՠࠠቹقΰαࠐᛵᇞઌᚨऱ໢ցิګΔڕψBrowser (ោᥦᕴ)ωΕψInstrument (Ꮪᕴ)ωΕψInspector (ᇷಛ਷઎)ωΕψWorkseet (ՠ܂ቹ)ωΕࡉψAcquisition DashboardωΖ6ڇຌ᧯խՠ܂ழΔီ࿗ױ౨ᄎឆ៲ΖױࠩViewՀࢮפ౨᥏઎ਢܡࢬڶؘᏁՠࠠઃբၲඔΖڕսآߠ௽ࡳီ࿗ΔױشView>>Reset positionsڃ༚ຌ᧯ቃ๻ီ࿗ۯᆜΖࢨᠨᚰઌᚨီ࿗ᑑ፾Δലᇠီ࿗ฝࠩՂᐋΖ3.2 ᄅ৬ԫኔ᧭Experiment7տฯBrowser (ោᥦᕴ) ऱ໢ցิګΖ܃վ֚ऱኔ᧭ᄎڇោᥦᕴီ࿗شᐋ్ऱݮڤࠐิ៣ΔFolder()>>Experiment()>>Specimen()>>Tube()Ζ೶ەՀቹΖ8૞ขسԫଡFolderΔ٣אᄶቕរᙇោᥦᕴီ࿗փറ᥆܃ऱ࿏጗Δྥ৵រᚰFolderᑑ፾Ζࢨਊᄶቕ׳᝶ᙇNew folderΖ9૞ขسԫଡExperimentΔ٣אᄶቕរᙇ܃ᄅᏺऱFolderΔྥ৵រᚰExperimentᑑ፾ΖࢨൕᘛኟՂֱᙇᖗϘExperiment>>New Experimentϙࠐᄅᏺኔ᧭Ζࠀڇᙟ৵נ෼ऱψExperiment templatesωֱ௃խΔᙇشψBlank Experiment with Sample TubeωΖ10” Blank Experiment with Sample Tube” ᚾ݈աܶڶԫSpecimen_001Δڕ࣠܃ऱኔ᧭ᚾ݈խ޲ڶSpecimenΔរᚰSpecimenᑑ፾ᄅᏺհΖ11ޢଡSpecimenᚨ۟֟ڶԫᇢጥTube_001ΔױរᚰSpecimen_001ছψЀωᇆ୶ၲհΔࠌױߠΔڕՀቹΖޢଡ़ػTubeֱؐڶԫઌኙᚨψਐقᒢᙰωΰαΔ࿛ԫՀ։࣫ᑌ঴ழΔؘႊشᄶቕរᚰΔࠌࠡܧጸۥΰαΔթ౨ၞ۩Ꮪᕴ೶ᑇ๻ᆜΔܡঞ઎լࠩٚ۶Ꮪᕴ೶ᑇΖᏚᕴ೶ᑇ๻ᆜᘛ٠೶ᑇᙇࡳΕΕܔ྇3.3ᘛ٠೶ᑇᙇࡳ12ڇInstrumentᏚᕴီ࿗ᄚΔ໢ᚰ”Parameters”଄૿Ζش֪ױڇParameters଄૿ՂΔܔೈٚ۶܃լࠌشऱ೶ᑇΖຍԫޡኙ૞ࠌش۞೯٠ᖂᇖᚍऱش֪ॺൄૹ૞ΖNOTiCEΚᓮᒔᎁشᄶቕរᚰTube_001ֱؐԫψਐقᒢᙰωΰαΔࠌࠡܧጸۥΰαΔթ౨ၞ۩Ꮪᕴ೶ᑇ๻ᆜΖ13Parameters଄૿ڕՀΖ໢ᚰီ࿗ᄚऱϙAdd or Deleteϙ᝶ࠐᏺףࢨܔೈ೶ᑇΖڕᏁޓޏ೶ᑇΔױរᚰ೶ᑇֱ௑խ׳ೡᒢᙰΔڕFITCױޏګEGFPࢨAlexaʳ488ΖPerCP-Cy5.5ױޏګPerCPΖNOTICEΚݺଚ৬ᤜរᙇFSC-WፖSSC-WΔشࠐඈೈᠨᜤ᧯Ζ14ݺଚڇڼᒭ฾૞شFITCΕPEΕPerCP-Cy5.5ΔPE-Cy7ΔAPCΔAPC-Cy7࿛քଡᘛ٠೶ᑇΖᏚᕴီ࿗ᄚ”Parameters”଄૿ᚨᇠڕՀቹΖ3.4 ᛧ࠷൳ࠫ᝶ᛧ࠷൳ࠫ᝶ΰΰAcquisition Dashboardα15ᛧ࠷ᖙ᜕ิٙץܶᖙ᜕׌ᖲΕၞ۩ᛧ࠷ࡉಖᙕᑇᖕᇷறΖױਊՠ܂़ၴՂՠࠠၨխΰαΔࠐ᧩قᇠิٙΖ׽ڶᅝሽᆰՠ܂ీڶຑ൷ࠩาઽૠᑇᏚழΔᛧ࠷ᖙ᜕ิٙթ౨๯᧩قΖᛧ࠷ᖙ᜕ิٙפ౨ڕՀΚ• Next TubeΚ։࣫Հԫጥᛀ঴Ζࢨᏺףԫጥᛀ঴Ζ• Acquire DataΚᛧ࠷ΔၲࡨڇᘛኟՂ᧩قྒྷၦࠩऱาઽᇷறΙ܀ࠀլಖᙕΖ• Record DataΚಖᙕΔၲࡨࠉਐחಖᙕᇷறګlist mode dataΖಖᙕݙګழΔᑌ঴ጥऱቹقᄎൕΰα᧢ګΰαΖ• RestartΚڇAcquireࢨRecordᑓڤழΔ૞ޣխַૹྒྷΖ• Storage Gate Κᚏژ๻॰Δᄎᒔࡳୌࠄาઽᆢലץܶڇ܃ऱᑇᖕᚾூᇙΖຏൄ܃ᄎუ૞ఎՀ‘AllEvents'ࢬڶࠃٙΙࠌشP1๻॰ঞ׽ᚏژP1าઽᆢΖ• Stopping Gate Κೖַ॰Δუᛧ࠷ԫ௽ࡳᑇၦऱาઽࠅᆢΔױࠌشP1ೖַ॰10Δ000ऱפ౨Δലگႃ٤ຝࠃٙऱᑇᖕऴࠩP1 ሒࠩ10Δ000թೖַΖΖ• Events to display Κຍפ౨ᒔࡳቹՂڇگ࠷ཚၴല਍ᥛ୶قڍ֟ଡࠃٙΖ3.5 ່ᚌ֏Ꮪᕴ๻ᆜ່ᚌ֏Ꮪᕴ๻ᆜΰΰAuto-Compensation αNOTICE Κڕ࣠܃໛ᦟ֫೯ᇖᚍ܃ऱᑌ঴Δױאฃመຍଡ੄ᆵΖ16ࠌش۞೯٠ᖂᇖᚍऱش֪Δ܃Ꮑ૞ᄷໂԫ֭޲਩ۥ़ػኙᅃΕࡉԫิൎ਩ۥऱ໢ۥኙᅃิΔא՛ቕැ֣෺੡ࠏΔܛCD4ΕB220ΕCD3ΕCD8Ε࿛࿛೏।ሒၦݼ଺ᑑಖΖ17װᏚᕴᙇ໢ΔᙇᖗᏚᕴ๻ࡳΔࠀ׊ᙇᖗExperiment > Compensation Setup > Create Compensation Controls Ζ18ڇWorksheet ီ࿗ᇙΔቃᆜ٠ᖂᇖᚍ૿ࣨലנ෼ԫ֭Unstained ़ػኙᅃΕࡉք֭܃ᙇᖗऱ໢ۥኙᅃิΖຍࠄWorksheet ।ࡉݺଚܛലࠌشࠐᛧ൓ᑌ঴ऱGlobal Sheet ९ቝڶࠄլٵΔۖ׊լױૹᒳΖNOTICEΚڕ࣠܃޲ܔೈآࠌشऱ೶ᑇΔ܃ؘႊൕsectionte 3.3ૹᄅၲࡨΧ19ଈ٣࣋Ղ़ػኙᅃิΔᓳᆏFSCࡉSSCሽᚘଖΔࠌ౨ജᔞᅝچ᧩قؾᑑาઽᆢΔ૞រڇࠌڶრᆠऱගᆢ౨ᗑمګᆢΔࠌ౨ڇ৵ᥛഎᙇழ൓ࠩۍ։ۍऱ໢ԫගᆢΰڕቹΔ٤ۨխԿଡػۨ෺าઽᆢαΖݙګ৵Δ٦ਊԫڻAcquire᝶ױխַᛧ࠷Ζ20܃ലᏁ૞ڇཋ୴٠ቹᢜՂނP1 ॰ฝ೯ࠩ܃ऱؾᑑගᆢՂΖฝ೯P1 ॰৵ಖ൓ᄶቕ׳ᚰP1ࠀᙇᖗ‘Apply to all Compensation Tubes'Δױ᠙ࡳP1 ॰ऱᄅஆᑑΖ21෼ڇױאᓳᖞ٠ሽ଍ᏺጥԱΖ໢ᚰ ”Instrumentϙီ࿗խऱϙParameterϙ଄૿Δᓳᖞٺଡ٠ሽ଍ᏺጥऱሽᚘଖΔࠌહནᘛ٠ଖᕣၦ၀२ؐՀߡΔࠀࠌาઽගᆢݙᖞܧ෼Ζݙګ৵Δ٦ڻ໢ᚰϘAcquisition Dashboardϙီ࿗ᇙऱϘAcquireϙ᝶ࠐխַᛧ࠷Ζ22़ػኙᅃᑌءጥFITC-A vs PE-AቹݮΖലອࢤኙᅃऱޢጟᘛ٠೶ᑇॾᇆ݁ᓳᖞڇรԫ్ኙᑇ೴഑փΰڕቹαΔڇڕLSR IIΕFACSCanto࿛ᖲীալٽழࡵΖ23ڇլRecordऱൣݮՀΔດԫՂᑌք֭໢ۥኙᅃΖڕڶᔞᅝچዠࡳݼ᧯ᖺ৫Δ܃ᚨᇠ౨઎ߠԫଡၺࢤ୽Δ،ፖອࢤ୽۟֟૞։ၲԫଡኙᑇ్Ζ24ݺଚ෼ڇաᆖױאᚏژࢬڶኙᅃᇢጥऱ଺ࡨᑇᖕԱΖᒔᎁោᥦᕴխΔጸۥऱᛧ࠷ਐقΰαۯ࣍ϘUnstained ControlϙΖ25ಖᙕࠃٙऱቃ๻ᑇؾਢ5,000Δຍኙ࣍ૠጩ٠ᖂᇖᚍᚨբߩജΖ26ଈ٣SIT࣋Ղ़ػኙᅃิΔ໢ᚰϙAcquisition Dashboardϙီ࿗ᄚऱϙRecordϙ᝶Ζݙګ৵Δຌ᧯ᄎ۞೯խַಖᙕΖ27൷ထ໢ᚰϙAcquisition Dashboardϙီ࿗ᄚऱϙNext Tubeϙ᝶Ζ܃ᄎ઎ࠩԫଡFSC_vs_SSCऱቹΔࡉԫଡڶP2ၴሶ॰ऱऴֱቹΔڕՀΖࠉݧՂᑌFITC໢ۥኙᅃิΔਊRecordΖ28P2 ၴሶ॰ല۞೯װ༈ބ܃ऱၺࢤගᆢΖڕ࣠ڶᏁ૞Δش֪ױאᓳᖞP2 ၴሶ॰ऱᒤ໮Ζ೶ەՀቹΖ29ڇگႃݙԮ֭ኙᅃิᑇᖕΔࠀᒔࡳޢԫଡ໢ۥኙᅃิP2 ၴሶ॰ڶො።ၺࢤගᆢ৵ΔڃࠩExperiment > Compensation SetupᙇᖗCalculate CompensationΖ30ຌ᧯ല૞ޣ܃ኙڼԫ٠ᖂᇖᚍఢೄࡎټΔ৬ᤜࠌشፖ܃ऱኔ᧭ઌٵऱټጠΖ܃ױאᙇᖗLink&Save ୚شڼ٠ᖂᇖᚍଖࠀᚏژאࠎֲ৵ࠌشΔࢨរᙇApply Only໢ొ୚ش࣍ڼڻኔ᧭ՂΖNOTICEΚݙګAutoCompensation٠ᖂᇖᚍ৵Δߓอലլւ๺܃ޏ᧢܃ऱᘛ٠ሽᚘΔլመΔ܃ױאޏ᧢FSC ࡉSSC ሽᚘΖᓳᆏࢳଖ30ԫ౳ش֪ৰࣹ֟რࢳଖऱ๻ᆜΖࢳଖऱ๻ᆜਢ੡ԱඈೈॺؾᑑॾᇆऱեឫΖڕڶᏁ૞ΔױڇՂᑌழΔ໢ᚰ ”Instrument ϙီ࿗խऱϙThreshold ϙ଄૿Δࠀڇڼ๻ࡳFSC ࢳଖΖՀቹխױߠڇլٵࢳଖழΔڶயࠃٙऱֺ෷հլٵΖ31װᏚᕴီ࿗ࠀរᚰ٠ᖂᇖᚍ੒଄Δؾছຍଡኔ᧭ऱ٠ᖂᇖᚍᑇଖലᄎ᧩قڇ߷ᇙΖ NOTICE ΚᓮᒔᎁڶشᄶቕរᚰTube_001ֱؐԫψਐقᒢᙰωΰαΔࠌࠡܧጸۥΰαΔթ౨઎ࠩᏚᕴ೶ᑇΖᒔᎁڶᘅ೯‘Enable Compensation' Ζ32൞բݙګքۥ܍੽։࣫ऱᏚᕴ๻ᆜΖױ٨ٱϙExperiment ϙᚾ݈ՀऱᏚᕴ๻ᆜΖᄶቕ׳᝶໢ᚰኔ᧭݈֮ٙխϙInstr Settings ϙቹقΔࠀڇInpector ီ࿗խΔᙇᖗϘPrint ϙ٨ٱ๻ᆜΔױ၀ࠩኔ᧭࿝ಖءխΖ3.6 ๻ૠGlobal Sheet ᛧ࠷ᒤء33੡܃ܛലၞ۩ऱኔ᧭৬م܃ऱG lobal Sheet ठ૿Δଈ٣រᚰ Worksheet ૿ठؐՂߡհWorksheet֊ང᝶֊ང۟Global Sheet 1Ζ34ڇ़ػ”Global Sheet1”ՂΔ٣ᙇᖗՂֱϙDot Plot ϙՠࠠᙇႈΔࠀڇᛧ࠷ᒤءរᢄ፹ࠟଡཋរቹΖΰ1αFSC-A vs SSC-A ΰ2αFSC-A vs FSC-W ΖNOTICE Κუ૞ࡐࡳՕ՛Δ᎘រԫՀܛױΙٍױشᄶቕٚ۶ືរࠀ׊ࣆ࣋ࠐޏ᧢Օ՛Ζ35ױီኔ᧭Ꮑ૞ףᢄཋរቹΖ36׳᝶໢ᚰቹݮ݄ᑑၗ೶ᑇՂΔױאൕؾᙕխᙇ࠷ࢨଥޏቹݮՂऱ݄ᑑ೶ᑇΖᙇᖗᙇᖗᘛ٠೶ᑇࡉᘛ٠೶ᑇࡉᘛ٠೶ᑇࡉݼ᧯ݼ᧯ݼ᧯ᑑ᧘ᑑ᧘37ࡎټᑌ঴ፖᇢጥټΖቃ๻ᙁנᚾټ੡Specimen_001_Tube_001Ζױࠉڼ଺ঞ੡൞ऱᑌ঴ߓอ֏ࡎټΖ38אᄶቕរᙇSpecimen_001ΔࠀڇInspector ֱ௃խᙁԵᄅټΔڕSample_0831ΔਊEnter Ζ39אᄶቕរᙇTube_001Δࠀᚨشᄶቕ׳᝶ޓټRenameפ౨Δྥ৵ᙁԵᄅټΔڕCD3_CD4_001ΔਊEnterΖࣹრΚDivaຌ᧯լױආش؁រᅝ೶ᑇټࢨᚾூټΖ40ڇϙAcquisition Dashboardϙီ࿗ᄚਊϙNext Tubeϙ᝶Δࢬ൓ऱՀԫᇢጥല๯ࡎټ੡ᇢጥټ _ 002Δྥ৵ᇢጥ _ 003Δ࿛࿛ΖᑑಖLabels41אᄶቕរᙇTube_001ΔࠀInspectorڇϙLable (ᑑಖ)ϙ଄૿ՂΔ੡ٺଡᘛ٠೶ᑇᙁԵᑑಖڗցΖאᄶቕរᙇFITC೶ᑇ௑ΔڇLabel᥏ۯՂ᝶Եᑑق֮ڗΔڕCD3Ζࠉݧലࢬڶऱᘛ٠೶ᑇᑑقࣔػΖNOTICEΝຌ᧯ڇᑑ᧘ټᇙլւ๺ش՛ᑇរΖ42ڇϙAcq. (ᛧ࠷)ϙ଄૿ՂΔױࠉኔ᧭Ꮑޣ۞۩๻ࡳψEvents to recordωΕψStopping gateωΕψStorage geteωΖ܃ٍױڇࢬᏁtubesᄅᏺݙګ৵ΔរᙇExperiment > Experiment Layout ๻ࡳٺጥ೶ᑇټጠፖᛧ࠷යٙΖ੡ؾᑑาઽᆢ੡ؾᑑาઽᆢഎᙇഎᙇഎᙇ๻॰๻॰43ڇFACSDiva խ֧ၞၸᐋڤഎᙇΔቫᇢᨃഎᙇ॰ऱ৬مޓऴᤚΕ࣐ᚩΖլؘቝڇCellQuest ԫᑌ೚ؒࣥڤሎጩऱ॰ΔቝਢR1*R2ΖၸᐋڤഎᙇHierarchical G ating ऱഗء๻ૠΔਢA ஛॰խࢬขנऱ׼ԫ஛॰B ΔױאუګਢA ஛॰ऱԫଡऱ՛৘ΰ՗ႃαΖڇࠌشFACSDiva ຌ᧯ழΔᅝش֪ڇԫଡա๯എᙇࡳᆠመΔڕψ੒ऱาઽωऱቹᢜՂ٦ᒳᢄᄅऱ೴഑ࢨ॰Δຍᄅขנऱ॰۞೯ګ੡ψ੒ऱาઽω॰ऱ՛৘ΰ՗ႃαΖش֪ױאൕPopulation Hierarchial View פ౨խᨠኘࠩ܃ؾছࡳᆠנࠐࢬڶ॰ऱ୮ගᖫݮቹΖڕቹΖHierarchial View խ᧩قנψT cells ωΕψB cells ωΕፖψNK cells ωΔຟਢψlymohocytes ω॰ऱ՛৘ΖࢬאڇኔᎾՂ։ᙇᖙ܂ழΔش֪׽૞شψNK cells ω॰ΔהኔᎾՂਢࡳᆠڇψlymphocytes ٌႃNK cells ωΖ44٣ᒔᎁោᥦᕴխΔጸۥऱᛧ࠷ਐقΰαۯ࣍ϘCD3_CD4_001ϙΙڇϙAcquisition Dashboard ϙီ࿗խΔਊϘAcquire ϙΖ45ڇGlobal Sheet1ՠ܂ቹՂΔᙇᖗڍߡݮഎᙇՠࠠΔࠀڇFSC-A vs SSC-A ቹՂᢄഎנψؾᑑาઽωۯᆜΔݮګψP1॰ωΖψP1॰ωᙇࡳ৵Δ॰փาઽᄎ۞೯ܧۥΖ൞ױאฝ೯،ΔࢨਢࣆڵϘ॰ϙՂऱٚ۶ԫ൳ࠫរΔࠐޏ᧢Ϙ॰ϙऱՕ՛ࡉݮणΖᒭ฾઎઎Ζ46ՀԫଡቹᢜຏൄਢFSC-A_v_FSC-W Δຍଡቹᢜऱ܂شڇՊ೴ܑΕඈೈᠨᜤ᧯Ζشᄶቕ׳᝶໢ᚰᙇխFSC-A_v_FSC-W ቹᢜΔᙇᖗϙShow Population ϙࡎחΙ൷ထᙇᖗϘP1ϙΔڕቹΖຍᑌԫࠐΔࢬڶᙇխऱቹݮՂ༉׽᧩قP1ැ֣าઽᆢ᧯ΖΖ47ՀԫޡਢڇFSC-A_v_FSC-Wቹᢜᢄഎנψ໢ԫาઽωۯᆜΔඈೈᠨᜤ᧯Ζڇ׌૞ऱาઽගᆢࡌ໮ࢮԫ஛॰ΔຍലਢP2ΖڕՀቹΖ48൷ՀࠐΔݺଚუ૞شຍP2॰ࠐኙ٤ຝᘛ٠ቹᢜၞ۩ቹᙇΖਊ۰ϘShiftϙ᝶Δشᄶቕຑᥛរᙇࢬڶᘛ٠೶ᑇཋរቹΖشᄶቕ׳᝶໢ᚰᙇխࠡխԫଡቹݮΔᙇᖗϙShow Population ϙࡎחΙ൷ထᙇᖗϘP2ϙΔڕቹΖຍᑌԫࠐΔࢬڶᙇխऱቹݮՂ༉׽᧩قP2าઽᆢΖ49ڕڶؘ૞ΔױڇڶᘋᔊऱቹݮՂף๻ගᆢ೴഑ΰpopulationsαΕອၺ੺ૻΰmarkerαΕࢨ؄ွૻΰquadrantsαΕ֗ઌᣂอૠ।ΔאঁᨠኘΖڕ࣠უᨠ઎෼ڶऱගᆢၸᐋΔױאൕPopulation>>ᙇᖗShow Population HierarchyΖޢଡගᆢऱټጠױאشRenameפ౨ૹᄅᑑಖΔڕՀቹխCD4, CD8Ζ50ڕ࣠უޏ᧢ٺଡගᆢऱቃ๻ᠱۥΔᠨᚰڇᇠගᆢছֱڶۥֱ௃ױᙇۥΔڕՂቹΖ51ڇPopulation Hierarchyီ࿗ࢬ༼ࠎऱอૠڶΝٺଡගᆢऱᑇၦΕ،ଚ۾׀ئ॰ऱۍ։ֺΕࡉ،ଚ᜔ࠃٙऱۍ։ֺΖڕ࣠უ૞ขנMeanΕCV࿛อૠΔאᄶቕរᚰٚრቹᢜΔࠀڇቹՂ़ػ๠Δ໢ᚰ׳᝶ᙇᖗψCreate statistics ViewωΖ52ڕᏁᒳᙀอૠขנႈؾΔאᄶቕ׳ᚰอૠ।़ػ๠ΔᙇψEdit Statistics ViewωΖ3.7 ಖᙕኔ᧭ᑇᖕ53ലᇘڶ6ۥᘛ٠਩ۥऱSample_001ᑌ঴ጥᇘԵሉᑌകΖڇោᥦᕴխΔᒔᎁጸۥऱᛧ࠷ਐقΰαۯ࣍ϘCD3_CD4_001ϙΖױ٣໢ᚰϙAcquisition Dashboardϙီ࿗ՂऱϙAcquire ϙ᝶ΔৱาઽၲࡨڇቹݮՂנ෼ΔࠀᒔᎁP1/P2ۯᆜإᒔ৵Δ໢ᚰϙAcquisition Dashboardϙီ࿗ՂऱϙRecord ϙ᝶Ζ54ಖᙕݙ10,000ଡาઽ৵Δലᑌ঴ጥൕሉᑌകՂ࠷ՀΖ55ڇϙAcquisition Dashboardϙီ࿗Ղ໢ᚰϙNextϙΔᄅ৬รԲଡϙTubeϙΖࣹრΚڼழᄅ৬ऱϙTubeϙ۞೯๯ࡎټ੡ϘCD3_CD4_002ϙΖ56ڇោᥦᕴխΔᒔᎁጸۥऱᛧ࠷ਐقΰαۯ࣍ϘCD3_CD4_002ϙΖലᇘڶรԲ֭ᑌ঴ጥᇘԵሉᑌകΖױ٣໢ᚰϙAcquisition Dashboardϙီ࿗ՂऱϙAcquire ϙ᝶ΔৱาઽၲࡨڇቹݮՂנ෼ΔࠀᒔᎁP1/P2ۯᆜإᒔ৵Δ٦໢ᚰϙRecord ϙ᝶ၲࡨಖᙕΖ57ૹ៿Ղ૪։࣫ޡᨏΔ۟։࣫ݙࢬڶᛀ঴Ζ֮ٙΕΕໂٝኔ᧭ᚾூ3.8 ᙁנFCS֮ٙ58݈֮ٙփऱᑇᖕᇷறຟ౨ജא“FCS֮ٙ”ऱݮڤᙁנΔຍጟ֮ٙݮڤ౨ജ๯BDຌ᧯ࡉࠡהᚨشຌ᧯ᦰ࠷Ζຍࠄ֮ٙױא“FCS 2.0”ࢨ“FCS 3.0”ठءݮڤᙁנΙՈ༉ਢᎅΔຍࠄᇷற౨ജא1,024ࢨ262,144ࠟጟᇞ࣫৫ᙁנΖڕ࣠൞ݦඨڇBD CellQuestΔBD CellQuest ProࢨModfit LTຌ᧯խૹᄅ։࣫ຍࠄᇷறΔ߷ᬕ൞Ꮑ૞ലᇷறא1,024ऱᇞ࣫৫ΰFCS 2.0αऱ௑ڤᙁנΖNOTICEΚڇBD CellQuest Proຌ᧯խ։࣫ᙁנऱᇷறհছΔଈ٣Ꮑ૞ࠌشBD FACSConvertຌ᧯Δല֮ٙ᠏ངګ౨๯Macintoshሽᆰᦰ࠷ऱ֮ٙ௑ڤΖNOTICEΚڕ࣠൞ᙁנ֮ٙਢ៭ԱڇFACSDivaࢨFlowJoຌ᧯խኙࠡૹᄅၞ۩։࣫Δ߷ᬕ൞ױאᙇᖗ“FCS 3.0”ठءΖࠌشຍጟᇞ࣫৫ࡉ֮ٙठءΔࢬڶऱ೶ᑇຟല๯অఎ଺ࡨᒵࢤ๻ᆜΖڇFACSDivaࢨFlowJoຌ᧯խΔױאലຍࠄॾᇆຏመኙᑇ᠏ངΔ٦אኙᑇݮڤ᧩قڇቹݮխΖ59ڇោᥦᕴխΔᠨរᚰؚၲუᙁנऱኔ᧭݈֮ٙExperiment()Ζ60ᙇᖗ“File>>Export>>Export FCS”ࡎחΖ61ڇ”Export Parameter”࿗Ցխᙇᖗ “FCS 2.0”௑ڤΖࢨ“FCS 3.0”௑ڤΖ62ڕڶؘ૞ΔױᙇNoneࠐᜍ՛ᇷறᚾΖ໢ᚰ“OK”Ζ63ڕڶؘ૞Δױڇؾᙕሁஉ“࿏጗DΚ”ΔףՂᄅ৬ऱ݈֮ٙऱټڗΖ໢ᚰ”Save”ܛױΖ64NOTICEΚ໢ᚰ”Details”Δ൞ױא਷ᔹڶᣂຍࠄᙁנ֮ٙऱᇡาᇷறΖ65൞բᆖګפچലᇷறᙁנ۟“࿏጗DΚ”Ղऱ“BD Export”݈֮ٙխΔ܃ױאشᙟߪ጗ᓤ፹൅ߨΖࢨृ໢ᚰ”Start”Δᙇᖗ“Program >Hewlett-Packard>hp dvd writer>hp dvd writer”Ζᙇᖗ”HP Record Now”ࡎחΔലᇷற᠏ᙕ۟CD٠጗ՂΖร؄ີΕΕᏚᕴ๻ᆜDNA Analysisร؄ີڇءີխΔ൞ലᖂ฾ڕ۶ၞ۩១࣐DNA։࣫հᏚᕴ๻ᆜ່ᚌ֏Ζڇ൞ಖᙕԫଡᑌ঴ऱᇷறհছΔؘႊ٣௅ᖕࢬࠌشऱᑌ঴ᣊীࡉᘛ٠਩றऱլٵΔኙ٠ሽ଍ᏺጥሽᚘଖΔᇖᚍଖࡉࢳଖ๻ᆜၞ۩່ᚌ֏๻ᆜΖᆖመ່ᚌ֏๻ᆜ৵Δլٵᘛ٠೶ᑇՀऱؾᑑาઽຟ౨։܉ڇቹݮࠥ৫ՂΖඔ೯ߓอၞ۩঴ᔆ൳່ࠫᚌ֏๻ᆜಖᙕᇷற։࣫ᇷறᣂຨߓอኙੌڤาઽᏚऱ່ᚌ֏๻ᆜץਔ༓ଡޡᨏΙ࿆ᙕၞԵBD FACSDiviaຌ᧯ᄅ৬ԫኔ᧭ DNA Analysisᘛ٠೶ᑇᙇᖗ๻ૠGlobal Sheetᛧ࠷ᒤء່ᚌ֏ੌڤาઽᏚऱ๻ᆜಖᙕኔ᧭ᑇᖕᙁנFCS֮ٙΔModFit LT։࣫ءᆏലאൕࠃDNA໢ۥ։࣫੡ࠏΔᙞ૪ڕ۶ܓشϙInstrument Setting (Ꮪᕴ๻ᆜ)ϙפ౨ΔኙᇠᏚᕴၞ۩๻ᆜ່ᚌ֏Ζኙ൞ۖߢΔ൞ڇᖙ܂ຍࠄޡᨏழΔؘႊጐױ౨ਊᅃႉݧၞ۩Ζ4.1 ࿆ᙕၞԵBD FACSDiviaຌ᧯1 ၲඔ׌ሽᄭΖ׌ሽᄭጸۥ᝶ۯ࣍าઽᏚ׳ছֱΖ2 ၲඔሽᆰΖோ૿ုםᇆਢAdministratorΔയᒘ࿆ᙕ௃խᙁԵBDISΔਊENTERΖ3 ၲඔ BD FACSDiva ຌ᧯Ζڇຌ᧯࿆ᙕ௃խΔᙁԵࠌشृټጠ֗യᒘΖΰಖ൓٣ᇿጥ෻୉عᓮࠩ඄ᦞയᒘΔࠏڕPIname_YournameαNOTICEΚ܃ऱࢬڶኔ᧭ᇷறຟല๯অఎڇ܃۞աऱ࿏጗़ၴᇙΔࠡהش֪լ౨ၞԵΖ4 ᒔࡳຌ᧯ፖาઽᏚݙګຑᒵΖݙګຑᒵ৵ΔڇInstrumentီ࿗Հֱᄎ᧩قInstrumentConnectedΖڕڶؘ૞ΔױរᚰInstrumentΰαီ࿗Δᨠኘຌ᧯ፖาઽᏚਢܡݙګຑᒵΖ5 ᙇᖗϘInstrument>Instrument ConfigurationϙࡎחΔ਷઎෼ژᏚᕴ಻ᆜΖݺଚڇڼ૞ലDNA։࣫ழᏁᏺף೶ᑇΔڕPIΕDAPIףࠩ෼ڶᏚᕴ಻ᆜխΖᓮ٣DuplicateԫᄅᏚᕴ಻ᆜΕאDNA_001ࢨࠡהזᇆࡎټհΔਊOK৵Ζ6٦ڇParameterֱ௃խΔਊAddᏺף೶ᑇΔ৬ᤜPIشBlue (Laser)ΕC(Detector)ࠐೠྒྷΔڕՀቹΖݙګ৵ΔਊOKΖ4.2 ᄅ৬ԫኔ᧭DNA Analysis7૞ขسԫଡFolderΔ٣אᄶቕរᙇ܃ऱᇷறᑒΔྥ৵រᚰFolderᑑ፾Ζ8૞ขسԫଡExperimentΔ٣אᄶቕរᙇ܃ᄅᏺऱFolderΔྥ৵រᚰExperimentᑑ፾ΖࢨൕᘛኟՂֱᙇᖗϘExperiment>>New Experimentϙࠐᄅᏺኔ᧭Ζࠀڇᙟ৵נ෼ऱψExperiment templatesωֱ௃խΔᙇشψBlank Experiment with Sample TubeωΖ9ޓټפ౨ΖኙFACSDivaຌ᧯ቃ๻ऱᚾ݈ټጠΔઃױૹᄅࡎټΖڇោᥦᕴխᚨشᄶቕរᚰ”Blank Experiment with…” ኔ᧭ᚾ݈Δྥ৵ڇInspectorֱ௃խᙁԵ”DNA_001”ڗցΔਊEnterࠐࡎټڼᄅ৬ऱኔ᧭ᚾ݈Ζ10” DNA_001” ᚾ݈աܶڶԫSpecimen_001Δڕ࣠܃ऱኔ᧭ᚾ݈խ޲ڶSpecimenΔរᚰSpecimenᑑ፾ᄅᏺհΖޢଡSpecimenᚨ۟֟ڶԫᇢጥTube_001ΔױរᚰSpecimen_001ছЀᇆ୶ၲΔࠌױߠΔڕՀቹΖޢଡ़ػTubeֱؐڶԫઌኙᚨψਐقᒢᙰωΔ࿛ԫՀ։࣫ᑌ঴ழΔؘႊشᄶቕរᚰΔࠌࠡܧጸۥΔթ౨ၞ۩Ꮪᕴ೶ᑇ๻ᆜΖ4.3 ᘛ٠೶ᑇᙇᖗ11ڇោᥦᕴխאᄶቕᙇᖗڼ”DNA_001”ᚾ݈Հऱ”InstrSettings” (Ꮪᕴ๻ᆜ)Ζ໢ᚰ”Inspector”ီ࿗ᄚऱ”Parameters”଄૿Ζش֪ױڇParameters଄૿ՂΔװೈڍਲऱ೶ᑇΔݺଚڇڼᒭ฾װೈPerCP-Cy5-5ΔPE-Cy7ΔAPCΔAPC-Cy7࿛؄ଡᘛ٠೶ᑇΔఎՀFITCࡉPEᘛ٠೶ᑇΖ12 Parameters଄૿ڕ׳Ζ໢ᚰီ࿗ᄚऱϙAdd or Deleteϙ᝶ࠐᏺףࢨܔೈ೶ᑇΖڕᏁޓޏ೶ᑇΔױរᚰ೶ᑇֱ௑խ׳ೡᒢᙰΔڕPerCP-Cy5-5ױޏګPerCPࢨPIΖ13ڇڼ๻ࡳPI੡LINܧ෼ֱڤΔࠀᏺףPI-W೶ᑇΔڕՀቹΖ4.4 ๻ૠGlobal Sheetᛧ࠷ᒤء14ڇ़ػ”G lobal Sheet1”ՂΔ٣ᙇᖗϙDot PlotϙՠࠠᙇႈΔࠀڇᛧ࠷ᒤءរᢄ፹ࠟଡཋរቹΖΰ1αFSC-A vs SSC-Aΰ2αPI-W vs PI-AΔᙇᖗϙHistogramϙՠࠠΔࠀڇᒤءរᢄ፹ԫଡཋរቹΰ3αPI-A histogramΖ׳᝶໢ᚰቹݮ݄ᑑၗΔױאଥޏቹݮՂऱ݄ᑑ೶ᑇΖ4.5 ່ᚌ֏Ꮪᕴ๻ᆜ່ᚌ֏Ꮪᕴ๻ᆜΰΰOptimize SettingsαءᆏխΔലຏመאՀնଡޡᨏΔᖂ฾Ꮪᕴऱ່ᚌ֏๻ᆜΖᓳᆏࢳଖΔ๻ᆜPI=5,000੡௽ࡳऱDNAᘛ٠೶ᑇᓳᆏ٠ሽ଍ᏺጥሽᚘଖ੡໢าઽᆢ᧯๻॰ᓳᆏFSCࡉSSC๻ᆜࠡהᘛ٠਩ற೶ᑇᓳᆏ٠ሽ଍ᏺጥሽᚘଖΰoptionalᠨۥαאൕࠃDNAᠨۥ։࣫੡ࠏΔലࠌشאՀᘛ٠਩றኙᅃᑌ঴ጥΚΰ1αUnstimulatedኙᅃΔPI ໢਩Δΰ2αStimulated PositiveኙᅃΔPI໢਩Δΰ3αStimulated PositiveኙᅃΔPI and Anti-H3 FITC ᠨ਩Ζެࡳ๻ࢳ೶ᑇPI15٣ᒔᎁោᥦᕴխΔጸۥऱᛧ࠷ਐقΰαۯ࣍ϘTube_001ϙΙ໢ᚰ ”Instrumentϙီ࿗խऱϙThresholdϙ଄૿Ζڇڼ๻ࡳࢳଖ೶ᑇPIΔࠀᓳᆏPIࢳଖ5,000Ζࢳଖऱ๻ᆜਢ੡ԱඈೈॺؾᑑॾᇆऱიឫΖ16DNA։࣫ආLowੌຒΖ17ലອࢤኙᅃጥᇘԵሉᑌകΖ໢ᚰϙAcquisition Dashboardϙီ࿗ᄚऱϙAcquireϙ᝶Ζڼਐחᄎࠌຌ᧯ܛழܧ෼Ꮪᕴࢬྒྷ൓ऱาઽᇷறΔ܀լ܂ಖᙕΰRecordαΖᓳᆏPIሽᚘଖVoltageΔࠌG0าઽऱPI-Aଖપڇ50ΰX1000αۯᆜΖ੡໢าઽᆢ᧯๻॰18ڇGlobal Sheet1ՠ܂ቹՂΔᙇᖗڍߡݮഎᙇՠࠠΔࠀڇPI-W vs PI-AቹՂᢄഎנψSingle CellsωۯᆜΔݮګψP1॰ωΖψP1॰ωᙇࡳ৵Δ॰փาઽᄎ۞೯ܧۥΖ൞ױאฝ೯،ΔࢨਢࣆڵϘ॰ϙՂऱٚ۶ԫ൳ࠫរΔࠐޏ᧢Ϙ॰ϙऱՕ՛ࡉݮणΖᒭ฾઎઎ΖᓳᖞFSCፖSSCሽᚘ19໢ᚰ ”Instrumentϙီ࿗խऱϙParametersϙ଄૿ΖᓳᆏFSCࡉSSCሽᚘଖΔຏൄ٣ᓳᆏFSCΔ٦ᓳᆏSSCΖᓳᆏFSCࡉSSCሽᚘଖVoltageΔࠌJurkat໢าઽගᆢΰܛદۥาઽᆢα౨ᗑمګᆢΔڕՀቹΖݙګ৵Δ٦ਊԫڻAcquire᝶ױխַᛧ࠷Ζ20شᄶቕរᙇPI-AऴֱቹΖਊᄶቕ׳᝶ᙇᖗϙShow Population ϙࡎחΙ൷ထᙇᖗϘP1ϙΔڕቹΖຍᑌԫࠐΔPI-AऴֱቹݮՂ༉׽᧩قP1 Jurkat໢าઽගᆢΖ21პᓳᆏࢳଖΖ໢ᚰϘAcquisition DashboardϘီ࿗ᇙऱAcquire᝶ΖᏁ૞ழΔ໢ᚰ ”Instrumentϙီ࿗խऱϙThresholdϙ଄૿Ζڇڼᔞᅝچ༼೏PIࢳଖΔאඈೈาઽᅷׂऱեឫΖᓳᆏFITCᘛ٠٠ሽ଍ᏺጥ(optional for FITC/PI)22൞ױאڇሎ۩ψ़ػኙᅃጥωழΔᓳᖞڇϙInstumentϙီ࿗ऱ٠ሽ଍ᏺጥሽᚘଖVoltageΔאᛀ਷FITC۞࿇ᘛ٠Ζല़ػኙᅃጥᇘԵሉᑌകΖ٣ᒔᎁោᥦᕴխΔጸۥऱᛧ࠷ਐقΰαۯ࣍ϘTube_001ϙ໢ᚰϙAcquisition Dashboardϙီ࿗ᄚऱϙAcquireϙ᝶Ζ23Ꮑ૞ழΔ໢ᚰ ”Instrumentϙီ࿗խऱϙParameterϙ଄૿ΖᓳᖞFITC٠ሽ଍ᏺጥऱሽᚘଖΔࠌ൓ອࢤาઽऱFITCᘛ٠೶ᑇॾᇆ᧩قڇรԫ్ኙᑇ೴഑փΰڕቹαΖݙګ৵Δ٦ڻ໢ᚰϘAcquisition Dashboardϙီ࿗ᇙऱϘAcquireϙ᝶ࠐխַᛧ࠷Ζ24൞բݙګ១࣐DNAᠨۥ։࣫ऱᏚᕴ๻ᆜΖױ٨ٱϙExperiment ϙᚾ݈ՀऱᏚᕴ๻ᆜΖ׳᝶໢ᚰኔ᧭݈֮ٙխϙInstr SettingsϙቹقΔࠀڇInpectorီ࿗խΔᙇᖗϘPrintϙ٨ٱ๻ᆜΔױ၀ࠩኔ᧭࿝ಖءխΖ4.6 ಖᙕኔ᧭ᑇᖕᄷໂՠ܂25ࡎټᑌ঴ፖᇢጥټΖቃ๻ᙁנᚾټ੡Specimen_001_Tube_001Ζױࠉڼ଺ঞ੡൞ऱᑌ঴ߓอ֏ࡎټΖאᄶቕរᙇSpecimen_001ΔࠀڇInspectorֱ௃խᙁԵᄅټΔڕSample_0831ΔਊEnterΖ26ٵ෻ΔאᄶቕរᙇTube_001ΔࠀڇInspectorֱ௃խᙁԵᄅNameټΔڕAntiH3_PI_001ΔਊEnterΖࣹრΚDivaຌ᧯լױආش՛ᑇរᅝᚾټΖ27 ᑑಖLabelsΖᙇᖗϘExperiment>Experiment LayoutϙࡎחΖڇϙExperiment Layoutϙီ࿗ՂΔ൞ױא๻ᆜ೶ᑇټጠΔڕՀቹΖຍࠄټጠലנ෼ڇቹݮऱ݄ᑑၗΔא֗ࢬڶอૠ࿨࣠խΖڇϙLable (ᑑಖ)ϙ଄૿ՂΔ੡ٺଡᘛ٠೶ᑇᙁԵᑑಖڗցΖאᄶቕរᙇFITC೶ᑇ௑ΔڇLabel᥏ۯՂ᝶Եᑑق֮ڗΔڕAnti_Histone H3Ζࠉݧലࢬڶऱᘛ٠೶ᑇᑑقࣔػΖ28 ڇϙExperiment Layoutϙီ࿗ᇙϙAcquisition (ᛧ࠷)ϙ଄૿ՂΔ੡ϘCD3_CD4_001ϙආႃጥΔެࡳಖᙕาઽ᜔ᑇΖڇϙEvents to RecordϙऱՀࢮפ౨।խᙇᖗϘ20,000ϙΔࢨ֫ՠ᝶Ե௽ࡳᑇڗ৵Δ໢ᚰϘOKϙΖ29 ڇAcquisitionDashboardီ࿗ΔᒔᎁආشLowੌຒΖࠀࠉኔ᧭Ꮑޣ۞۩ᙇࡳψStoppinggateω֗ψStorage geteωΖၲࡨಖᙕᇷற30ᇷறᛧ࠷መ࿓խΔᓮᨠኘGlobal sheet1խPI-W/PI-AቹݮP1॰എᙇᔞᅝፖܡΖڕڶؘ૞Δױฝ೯P1॰ۯᆜΖ31 ലᇘڶAnti-H3 FITC/PIᘛ٠਩ۥऱSample_001ᑌ঴ጥᇘԵሉᑌകΖڇោᥦᕴխΔᒔᎁጸۥऱᛧ࠷ਐقΰαۯ࣍ϘAntiH3_PI_001ϙΖױ٣໢ᚰϙAcquisition Dashboardϙီ࿗ՂऱϙAcquire ϙ᝶ΔৱาઽၲࡨڇቹݮՂנ෼ΔࠀᒔᎁP1ۯᆜإᒔ৵Δ໢ᚰϙAcquisition Dashboardϙီ࿗ՂऱϙRecord ϙ᝶Ζಖᙕݙ20,000ଡาઽ৵Δലᑌ঴ጥൕሉᑌകՂ࠷ՀΖ32 ۞೯֒ᕨᇢጥټΖڇϙAcquisition Dashboardϙီ࿗Ղ໢ᚰϙNextϙΔᄅ৬รԲଡϙTubeϙΖࣹრΚڼழᄅ৬ऱϙTubeϙ۞೯๯ࡎټ੡ϘAntiH3_PI_002ϙΖڇោᥦᕴխΔᒔᎁጸۥऱᛧ࠷ਐقΰαۯ࣍ϘAntiH3_PI_002ϙΖലรԲଡᑌ঴ጥᇘԵሉᑌകΖױ٣໢ᚰϙAcquisition Dashboardϙီ࿗ՂऱϙAcquire ϙ᝶ΔৱาઽၲࡨڇቹݮՂנ෼ΔࠀᒔᎁP1ۯᆜإᒔ৵Δ٦໢ᚰϙRecord ϙ᝶ၲࡨಖᙕΖ33 ૹ៿Ղ૪։࣫ޡᨏΔ۟։࣫ݙࢬڶᛀ঴Ζ。

肝素抗凝：通常用肝素粉剂（每mg含100—125U）配成1g /L肝素水溶液，即每ml含肝素1mg。

取1ml可使10ml血液不凝固。

EDTA抗凝：EDTA对血液中钙离子有很大的亲和力，能与钙离子络合而使血液抗凝。

每0.8mg可抗凝1ml血液。

除不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外，适用于多种抗凝。

ICSH 、ICTH 推荐使用 3.13% （0.109M与草酸钠相比枸橼酸钠的优越性：首先是Ⅴ因子和Ⅷ因子在枸橼酸钠中更为稳定。

枸橼酸钠抗凝的血浆做 APTT 试验，其对肝素的敏感性远远高于草酸盐抗凝血浆。

草酸盐的缺陷：与钙形成不溶性沉淀物肝素可与 AT- Ⅲ作用并抑制许多凝血反应EDTA 能抑制或干涉纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体聚合，且对因子Ⅴ保护性差，故草酸盐与肝素这二种抗凝剂除血小板试验外，一般不用。

柠檬酸的枸橼酸根与血中钙离子形成难解离的可溶性络合物，使血中钙离子减少，缓解钙离子促使血液凝固的作用而阻止血液凝固。

仅用于体外抗凝血。

常用的血液抗凝剂1、1%肝素溶液0.1ml于试管内，旋转试管，使溶液均匀浸湿试管内壁，放入80～100℃烘箱烤干，每管能使5～10ml血液不凝。

急性血压实验时可在充满生理盐水的动脉套管内注入肝素20～25mg。

体内抗凝：500～1000u/kg。

市售的肝素注射液每1ml含肝素12500u（相当于肝素钠125mg，即1mg相当于100u）。

应置冰箱内保存。

2、枸橼酸钠 3.8%的枸橼酸钠溶液1份可使9份血液不凝，用于红细胞沉降速率的测定。

因其抗凝血作用较弱而碱性较强，不适用于供化验用的血液样品。

做急性血压实验时则用5～7%的枸橼酸钠溶液。

3、草酸钾常用于供检验用血液样品的抗凝。

在试管内加饱和草酸钾溶液2滴（或10%溶液0.2ml），轻轻敲击试管，使溶液分散到管壁四周，置80℃以下的烘箱中烤干（烘烤温度过高，可使草酸钾分解为碳酸钾而失效），每管能使3～5ml血液不凝。

常用橡胶及溶剂的溶解度参数及适用橡胶在橡胶工业中，溶解度参数是用来衡量其中一种溶剂对橡胶的溶解能力的指标。

了解橡胶及溶剂的溶解度参数对于正确选择合适的溶剂以及进行橡胶制品的制造和加工具有重要意义。

下面是几种常用橡胶及其溶解度参数以及适用的橡胶的介绍。

1. 丁苯橡胶（BR）：丁苯橡胶属于不饱和橡胶，具有良好的耐久性和抗拉强度。

它可以溶解于多种溶剂中。

丁苯橡胶的溶解度参数为δ=8.2(Mpa1/2)，适用的溶剂有丙酮、甲乙醇等。

2. 丁腈橡胶（NBR）：丁腈橡胶是一种抗油性橡胶，适用于石油和润滑油等油性环境。

丁腈橡胶的溶解度参数为δ=8.9(Mpa1/2)，适用的溶剂有苯、二甲苯等。

3. 氯丁橡胶（CR）：氯丁橡胶是一种具有良好耐候性和耐油性的橡胶。

它的溶解度参数为δ=9.0(Mpa1/2)，适用的溶剂有甲酮、氯仿等。

4. 丁基橡胶（IIR）：丁基橡胶是一种饱和橡胶，具有优异的耐热性和耐化学品性能。

它的溶解度参数为δ=8.1(Mpa1/2)，适用的溶剂有石油醚、石油醚和石油醚。

5. 乙丙橡胶（EPM）和乙烯丙烯橡胶（EPDM）：乙丙橡胶和乙烯丙烯橡胶是一种具有优异的耐候性和耐化学品性能的橡胶。

它们的溶解度参数分别为δ=8.8(Mpa1/2)和δ=8.9(Mpa1/2)，适用的溶剂有甲苯、二甲苯等。

需要注意的是，虽然这些溶剂在适用橡胶中可以起到溶解的作用，但溶解度参数并不是唯一确定溶剂适用性的指标。

在实际应用中，还需要考虑其他因素，如溶剂对橡胶材料的膨胀性、溶剂的毒性和环境影响等。

另外，不同的橡胶材料具有不同的溶解度参数，可以根据需要选择适合的橡胶材料和溶剂。

正确选择溶剂可以提高橡胶制品的加工效率和质量，并在橡胶工业中起到重要的作用。

所以，在进行橡胶制品制造和加工时，需要仔细研究和选择溶剂，以确保制造出高质量的橡胶制品。

甘蓝型油菜漆酶基因家族成员表达模式及与茎秆抗折力的关联分析目录一、内容概要 (2)1. 研究背景 (2)2. 研究目的与意义 (3)3. 研究方法与实验设计 (4)二、甘蓝型油菜漆酶基因家族成员概述 (5)1. 漆酶基因家族的定义与分类 (7)2. 甘蓝型油菜漆酶基因家族成员的筛选与鉴定 (7)3. 漆酶基因家族成员的基本信息 (9)三、甘蓝型油菜漆酶基因家族成员表达模式分析 (10)1. 表达谱数据获取与处理 (11)2. 表达模式可视化与统计分析 (12)3. 表达模式聚类与功能注释 (14)4. 表达模式在不同组织及发育阶段的比较 (15)四、甘蓝型油菜漆酶基因家族成员与茎秆抗折力的关联分析 (16)1. 材料准备与实验设计 (17)2. 茎秆抗折力测定方法 (18)3. 基因表达量与茎秆抗折力的相关性分析 (18)4. 基因编辑技术验证 (20)五、结论与讨论 (21)1. 甘蓝型油菜漆酶基因家族成员表达模式的比较分析 (23)2. 漆酶基因家族成员与茎秆抗折力的关联机制探讨 (23)3. 研究的创新点与不足之处 (25)六、展望 (26)1. 深入挖掘漆酶基因家族在甘蓝型油菜中的功能与应用 (27)2. 探讨漆酶基因家族与植物其他性状的关联分析 (28)3. 为甘蓝型油菜的高产、抗逆等育种目标提供新的思路与策略..30一、内容概要甘蓝型油菜漆酶基因家族的鉴定与生物信息学分析：通过基因序列比对、生物信息学软件分析等手段，鉴定甘蓝型油菜漆酶基因家族的成员，并对其基因结构、蛋白质特性等进行深入研究。

表达模式分析：利用实时荧光定量PCR等技术，分析不同组织部位、不同发育阶段以及不同环境条件下甘蓝型油菜漆酶基因家族成员的表达情况，探究其表达模式。

茎秆抗折力测定：通过物理测试方法，测定甘蓝型油菜茎秆的抗折力，分析其力学特性。

关联分析：结合表达模式分析结果和茎秆抗折力数据，分析甘蓝型油菜漆酶基因家族成员的表达与茎秆抗折力之间的关联性，探讨其在提高茎秆抗折力方面的作用机制。

不同配位原子配位能力强弱的判断下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!探究配位化学：不同配位原子的配位能力比较与分析在化学领域，配位化合物的形成是基于金属离子与配体之间的配位键。

极性吸附剂：硅胶、氧化铝非极性吸附剂：活性炭对极性物质亲和力强对非极性成分吸附强溶剂极性增强溶剂极性增强?吸附剂对溶质的吸附力降低吸附剂对溶质的吸附力增强溶质可被极性强的溶剂洗脱溶质可被极性弱的溶剂洗脱极性及强弱判断：R-COOH﹥Ar-OH﹥R-OH﹥R-NH-﹥R-CO-NH-﹥R-CHO﹥R-CO-R?﹥R-COO-R?﹥R-O-R?﹥R-X?﹥R-H溶剂：介电常数ε增加?，极性增加?环己烷（1.88）苯（2.29）无水乙醚（4.47）氯仿（5.20）乙酸乙酯（6.11）乙醇（26.0）甲醇（31.2）水（81.0）亲脂性：石油醚>环己烷>苯>氯仿>乙醚>乙酸乙酯>丙酮>乙醇>甲醇>水各种溶剂在聚酰胺柱上的洗脱能力：水<甲醇<乙醇<氢氧化钠水溶液<甲酰胺<二甲基甲酰胺<尿素水溶液单糖结构中反应活泼性顺序：端基C原子>伯C>仲C按苷键原子的不同，酸水解由难到易程度为：C苷>S>O>N苷呋喃糖苷较吡喃糖苷的水解速率大50～100倍酮糖较醛糖易水解吡喃糖苷中，吡喃环C5上的取代基越大越难水解2-去氧糖>2-羟基糖>2-氨基糖易难芳香烃比脂肪烃易水解苷元为小基团者，苷键横键的比苷键竖键的易于水解，因为横键上原子易于质子化苷元为大基团者，苷键竖键的比苷键横键的易于水解，这是由于苷的不稳定性促使水解碱水解反应:速度难易与C7取代基有关：7-OH香豆素<7-OCH3香豆素<香豆素萘醌和蒽醌的苯环上的羟基酸性：β-羟基>α-羟基游离蒽醌的酸性强弱顺序为：含COOH>2个以上β-OH>1个β-OH>2个以上α-OH>1个α-OH1,8>1,4>1,5??答案：E>B>C>A>D>F黄酮类化合物取代基对溶解度的影响：羟基数目越多，水中溶解度增加；羟基甲基化后，在有机溶剂中溶解度增加。

有机试剂极性大小下面这份溶剂极性表列出了常用有机溶剂极性顺序，并有常见溶剂的粘度、沸点、吸收波长等物理参数，在进行薄层色谱柱（TLC）洗脱的时候时很有帮助。

可能有不准确的，希望在留言处给予更正。

化合物名称极性粘度沸点吸收波长i-pentane(异戊烷) 0 - 30 -n-pentane(正戊烷) 0 0.23 36 210 Petroleum ether(石油醚) 0.01 0.3 30～60 210 Hexane(己烷) 0.06 0.33 69 210 Cyclohexane(环己烷) 0.1 1 81 210 Isooctane(异辛烷) 0.1 0.53 99 210 Trifluoroacetic acid(三氟乙酸) 0.1 - 72 - Trimethylpentane(三甲基戊烷) 0.1 0.47 99 215 Cyclopentane(环戊烷) 0.2 0.47 49 210 n-heptane(庚烷) 0.2 0.41 98 200 Butyl chloride(丁基氯; 丁酰氯) 1 0.46 78 220 Trichloroethylene(三氯乙烯; 乙炔化三氯) 1 0.57 87 273 Carbon tetrachloride(四氯化碳) 1.6 0.97 77 265 Trichlorotrifluoroethane(三氯三氟代乙烷) 1.9 0.71 48 231 i-propyl ether(丙基醚; 丙醚) 2.4 0.37 68 220 Toluene(甲苯) 2.4 0.59 111 285 p-xylene(对二甲苯) 2.5 0.65 138 290 Chlorobenzene(氯苯) 2.7 0.8 132 -o-dichlorobenzene(邻二氯苯) 2.7 1.33 180 295 Ethyl ether(二乙醚; 醚) 2.9 0.23 35 220 Benzene(苯) 3 0.65 80 280 Isobutyl alcohol(异丁醇) 3 4.7 108 220 Methylene chloride(二氯甲烷) 3.4 0.44 240 245 Ethylene dichloride(二氯化乙烯) 3.5 0.78 84 228 n-butanol(正丁醇) 3.7 2.95 117 210 n-butyl acetate(醋酸丁酯；乙酸丁酯) 4 - 126 254 n-propanol(丙醇) 4 2.27 98 210 Methyl isobutyl ketone(甲基异丁酮) 4.2 - 119 330 Tetrahydrofuran(四氢呋喃) 4.2 0.55 66 220 Ethyl acetate（乙酸乙酯） 4.30 0.45 77 260 i-propanol(异丙醇) 4.3 2.37 82 210 Chloroform(氯仿) 4.4 0.57 61 245 Methyl ethyl ketone(甲基乙基酮) 4.5 0.43 80 330Dioxane(二恶烷; 二氧六环; 二氧杂环己烷) 4.8 1.54 102 220Pyridine(吡啶) 5.3 0.97 115 305Acetone(丙酮) 5.4 0.32 57 330 Nitromethane(硝基甲烷) 6 0.67 101 330Acetic acid(乙酸) 6.2 1.28 118 230 Acetonitrile(乙腈) 6.2 0.37 82 210Aniline(苯胺) 6.3 4.4 184 -Dimethyl formamide(二甲基甲酰胺) 6.4 0.92 153 270Methanol(甲醇) 6.6 0.6 65 210Ethylene glycol(乙二醇) 6.9 19.9 197 210Dimethyl sulfoxide(二甲亚砜DMSO) 7.2 2.24 189 268Water（水）10.2 1 100 268下图是混合有机溶剂极性顺序（由小到大，括号内表示的是混合比例）一：溶剂极性参数表，方便以下比较展开剂。

几种酶的比较限制性核酸内切酶（以下简称限制酶）：限制酶主要存在于微生物（细菌、霉菌等）中。

一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。

是特异性地切断DNA链中磷酸二酯键的核酸酶（“分子手术刀”）。

发现于原核生物体内，现已分离出100多种，几乎所有的原核生物都含有这种酶。

是重组DNA技术和基因诊断中重要的一类工具酶。

例如，从大肠杆菌中发现的一种限制酶只能识别GAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开。

目前已经发现了200多种限制酶，它们的切点各不相同。

苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因，就能被某种限制酶切割下来。

在基因工程中起作用。

DNA连接酶：主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用，在基因工程中起作用。

DNA聚合酶：主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起做用。

DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。

DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。

因此DNA连接酶不需要模板。

RNA聚合酶（又称RNA复制酶、RNA合成酶）的催化活性：RNA聚合酶以完整的双链DNA为模板，转录时DNA的双链结构部分解开，转录后DNA仍然保持双链的结构。

真核生物RNA聚合酶：真核生物的转录机制要复杂得多，有三种细胞核内的RNA聚合酶：RNA 聚合酶I转录rRNA，RNA聚合酶II转录mRNA，RNA聚合酶III转录tRNA和其它小分子RNA。

在RNA复制和转录中起作用。

反转录酶：RNA指导的DNA聚合酶，具有三种酶活性，即RNA 指导的DNA聚合酶，RNA酶，DNA指导的DNA聚合酶。

在分子生物学技术中，作为重要的工具酶被广泛用于建立基因文库、获得目的基因等工作。