抗转铁蛋白受体双价抗体的构建、表达及鉴定

转铁蛋白受体在肝癌细胞上的表达
封江南;史良如
【期刊名称】《单克隆抗体通讯》
【年(卷),期】1989()4
【摘要】作者用抗转铁蛋白受体单克隆抗体抗TfR McAb,(D71)检测17例原发性肝癌患者肿瘤组织。

发现14例肝癌细胞呈现特异性结合,阳性率为82.4％。

其余3例肝癌细胞未检测到转铁蛋白受体(TfR),可能与肝癌细胞的分化程度或分泌程度有关。

同时用抗A-FP单克隆抗体与CD71进行比较,发现肝癌胞细TfR含量高于A-FP含量。

该发现为肝癌的诊断及导向治疗提供了新的较好的载体。

【总页数】2页(P42-43)
【关键词】肝癌细胞;抗转铁蛋白受体;原发性肝癌患者;单克隆抗体抗;McAb;肿瘤组织;分化程度;CD71;A-FP;FfR;特异性;TfR;检测;含量
【作者】封江南;史良如
【作者单位】卫生部武汉生物制品研究所免疫研究室
【正文语种】中文
【中图分类】R735.7;R392.11
【相关文献】
1.NIDDM淋巴细胞白细胞介素-2受体及转铁蛋白受体的表达 [J], 王民登
2.淋巴细胞白介素-2受体及转铁蛋白受体在肝硬化、肝癌患者中的表达 [J], 王民登;王超
3.受体放射分析法定量测定肝癌细胞和正常肝细胞的转铁蛋白受体 [J], 林菊生;李建华
4.肝癌细胞转铁蛋白受体的表达及WuT9单抗对肝癌细胞... [J], 饶益平;李绍白
5.肝癌细胞膜上转铁蛋白受体和去唾液酸糖蛋白受体数量的变化 [J], 谢天培;吴孟超;沈锋;施乐华;刘彦君;王皓;王华菁;钱卫珠;郭亚军
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

国家自然科学基金项目申请书范文【医学领域】国家自然科学基金项目申请书（一）立项依据与研究内容（4000-8000字）：1．项目的立项依据细胞增殖和凋亡(apoptosis)调节失控与肿瘤的发生发展密切相关，以促进肿瘤细胞凋亡为策略的肿瘤生物治疗倍受国内外学者的重视。

1997年Ambrosini等发现survivin基因是一种独特的凋亡抑制基因，表达于几乎所有人类的肿瘤组织，但在分化的正常组织中沉默[1-3]。

Survivin的表达可显著抑制肿瘤细胞凋亡[4]。

由于survivin在肿瘤细胞高表达及促进细胞增殖和抗凋亡的双重作用，设计以survivin为靶点，使其沉默进行抗肿瘤治疗，可促进肿瘤细胞凋亡，同时抑制肿瘤细胞浸润并增强其对放化疗的敏感性。

最近，国外学者及本实验室采用基因阻遏技术如反义技术等抑制survivin的表达，可直接促进白血病细胞及部分实体肿瘤细胞凋亡[5，6]。

而肿瘤细胞的彻底清除最终有赖于机体的特异性免疫应答，由于大多数肿瘤抗原以及凋亡的肿瘤细胞免疫原性较弱，不能诱导机体产生有效的抗肿瘤免疫应答。

故抑制肿瘤细胞增殖与促进肿瘤细胞凋亡的治疗策略均难以彻底清除机体内的肿瘤细胞。

因此，在抑制肿瘤细胞增殖与诱导肿瘤细胞凋亡的同时，如何增强其免疫原性，诱导机体对肿瘤的特异性免疫应答，达到彻底清除残留肿瘤细胞或微小转移病灶是值得探索的课题。

热休克蛋白（HSP）作为分子伴侣与正常的组织细胞肽形成的复合物不引起免疫应答，但可结合各种突变了的肿瘤抗原肽，且能够将其有效的进行提呈，诱导CD8+CTL、CD4+T细胞以及NK细胞反应，杀伤肿瘤细胞[16，17，18]。

最新研究证明，机体可通过非自我天然识别机制（innaterecognition of non-self）如补体、CD14等清除凋亡细胞[7]，或通过改变了的自我吞噬识别机制(phagocyte recognition of altered-self)如巨噬细胞表面受体CD36和氧化低密度脂蛋白受体吞噬清除凋亡细胞[8]，或通过非分离自我吞噬识别机制(phagocyte recognition of non-detaching self)如ICAM3的相互作用吞噬清除凋亡细胞[9]，由此可能诱导反应性T细胞无能而致免疫耐受[10-12]，如以凋亡的肿瘤细胞冲击DC细胞则能激活肿瘤特异性CD8+T细胞，但凋亡的肿瘤细胞冲击巨噬细胞无此功能[13]。

2012-01-10系统性红斑狼疮的相关试题第一篇：2012-01-10系统性红斑狼疮的相关试题系统性红斑狼疮考试题姓名：分数：一.选择题1.SLE好发于（）A老年人B 幼儿C青年男性D 青年女性2.SLE患者正确的皮肤护理方法是（）A每天用肥皂水洗脸B用热水敷红斑处C清洗后可用化妆品D用温水湿敷红斑处E居室定期紫外线消毒3.环磷酰胺的主要不良反应是()A心脏损害B脱发C胃肠道反应D出血性膀胱炎E口腔溃疡4.SLE最常见的死亡原因是（）A心肌炎B颅内高压C尿毒症D上消化道出血E胸膜炎5.SLE是一种（）A感染性疾病B自身免疫性疾病C传染性疾病D遗传性疾病6.有关SLE的临床表现，下列哪项吥符（）A 肾脏损害最常见B晚期大约多有关节畸形C皮肤损害最常见于暴露部位D可发生偏瘫E可有心包炎7.下列哪种自身抗体对诊断SLE的特异性最高（）A抗sm抗体B.ds-DNA抗体C.ANAD.SSA抗体8.下列在SLE中哪项损害最严重（）A肌肉.关节B肾脏C皮肤D 心血管E肺和胸膜9.SLE最长见的皮肤损害部位是（）A腹部 B颈部 C暴露部位 D前胸上部 E下肢10.SLE患者的辅助检查中下列哪项数值可增高（）A.白细胞B红细胞C红细胞沉降率D血小板E补体二.填空题1.SLE的主要病因与（）（）（）有关。

2.目前治疗ＳＬＥ的主要药物首选（）。

3.SLE患者80%有皮肤粘膜损害，典型表现为（）。

SLE以（）为首发症状，且几乎所有的患者均有（）损害.三.简答题SLE2009年新修订的诊断标准？第二篇：系统性红斑狼疮从免疫学角度谈系统性红斑狼疮的发病机制和治疗【摘要】红斑狼疮(sle)是一个累及身体多系统多器官，临床表现复杂，病程迁延反复的自身免疫性疾病。

红斑狼疮可分为系统性红斑狼疮(SLE)和盘状红斑狼疮(DLE)两大类。

系统性红斑狼疮即SLE是一种自身免疫性疾病，其病因和发病机制一直是研究的热点。

导致SLE患者组织损伤的基本原因是致病性自身抗体的产生。

转铁蛋白受体对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制杨克鑫，刘一萌，赵天南，郭丽，张萍青岛大学附属青岛市市立医院妇科，山东青岛266011摘要：目的　探讨转铁蛋白受体（TFRC ）对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭、上皮-间充质转化的影响及可能的作用机制。

方法　慢病毒构建敲低和过表达TFRC 的宫颈癌细胞系，并分为空白对照组、TFRC 敲低阴性对照组、TFRC 敲低组、TFRC 过表达阴性对照组及TFRC 过表达组。

用蛋白印迹分析法检测TFRC 、真核起始因子（EIF4A3）、E -钙黏蛋白（E -cadberin ）、N -钙黏蛋白（N -cadherin ）、波形蛋白（Vimentin ）和锌指转录因子（Snail ）的表达情况，通过平板克隆、细胞划痕和Transwell 侵袭实验检测宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

结果　与空白对照组相比，TFRC 敲低组EIF4A3、N -cadherin 、Vimentin 和Snail 蛋白表达水平下降、E -cadberin 蛋白表达水平升高，细胞克隆数减少、迁移率下降和侵袭细胞数量减少（P 均<0.05）；相反，TFRC 过表达组EIF4A3、N -cadherin 、Vimentin 和Snail 表达量增加、E -cadberin 表达量减少，细胞克隆数增加、迁移迁移率升高和侵袭细胞数量增加（P 均<0.05）。

结论　TFRC 在宫颈癌中呈高表达，通过调节EIF4A3可促进宫颈癌的增殖、迁移、侵袭、上皮-间充质转化；过表达和敲低EIF4A3可相应抵消敲低和过表达TFRC 对宫颈癌细胞恶性生物学行为产生的影响。

关键词：宫颈癌；转铁蛋白受体；真核起始因子；转染；迁移；侵袭；上皮-间充质转化doi ：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.16.005中图分类号：R737.33 文献标志码：A 文章编号：1002-266X （2023）16-0017-05Effect of transferrin receptor on malignant biological behavior of cervical cancer cells and its mechanismYANG Kexin ， LIU Yimeng ， ZHAO Tiannan ， GUO Li ， ZHANG PingGynecology Department ， Qingdao Municipal Hospital Affiliated to Qingdao University ， Qingdao 266000， ChinaAbstract ： Objective To investigate the effects of transferrin receptor （TFRC ） on the proliferation ， migration ， in‐vasion and epithelial -mesenchymal transition （EMT ） of cervical cancer cells and the possible mechanism of action. Meth⁃ods Cervical cancer cell lines with knock -down and overexpression of TFRC were constructed by lentivirus ， and were di‐vided into the blank control group ， TFRC knock -down negative control group ， TFRC knock -down group ， TFRC overexpres‐sion negative control group ， and TFRC overexpression group. The expression of TFRC ， EIF4A3， E -cadberin ， N -cad‐herin ， Vimentin and Snail was detected by Western blotting. The proliferation ， migration and invasion of cervical cancercells were detected by plate cloning ， cell Scratch healing and Transwell invasion assay. Results Compared with the blank control group ， the protein expression levels of EIF4A3， N -cadherin ， Vimentin ， and Snail in cervical cancer cells in TFRC knock -down group decreased ， the protein expression levels of E -cadberin increased ， and the number of cellclones ， migration and invasion cells decreased （all P<0.05）. On the contrary ， the expression levels of EIF4A3， N -cad‐herin ， Vimentin and Snail increased ， the expression levels of E -cadberin decreased ， the number of cell clones in‐creased ， migration rate increased ， and the number of invasive cells increased in the TFRC overexpression group （all P<0.05）. Conclusions TFRC is highly expressed in cervical cancer ， and can promote the proliferation ， migration ， inva‐sion and EMT of cervical cancer by regulating EIF4A3. Overexpression and knock -down of EIF4A3 can counteract the ef‐fects of knock -down and overexpression of TFRC on the malignant biological behavior of cervical cancer cells.Key words ： cervical carcinoma ； transferrin receptor ； eukaryotic initiation factor ； transfection ； migration ； inva‐sion ； epithelial -mesenchymal transition基金项目：青岛市医药卫生科研计划项目（2021-WJZD012）。

・１６９０。

塞旦医蕉鍪盍！ＱＱｚ生！旦筮！堡鲞筮！！翅（鱼型２』呈！堡：丛型：！塑！：！尘：！兰：№：！！（！塑！型量堡型堡！旦！堙２状）钙化１例；２０例病例中６例可见淋巴结转移；２例病灶＜４ｃｍ，平扫呈较均匀稍低密度，增强后呈较为均匀性强化；１例包膜外毛刺征。

病理诊断乳头状腺癌１４例，滤泡状腺癌４例，髓样癌１例，未分化癌１例。

３讨论由于ＣＴ检查具有很高的密度分辨力和空间分辨力，能够清楚显示甲状腺大小、形态、边缘、密度，ＣＴ三期扫描能反映甲状腺含碘变化、血供变化及外膜受侵情况，当甲状腺组织发生肿瘤或其他病变时，贮碘细胞被破坏，甲状腺组织中含碘量下降，可以清楚地显示甲状腺内病灶，形成ｃＴ上的低密度区。

甲状腺癌组织学上分乳头状癌、滤泡癌、未分化癌和髓样癌。

其中，甲状腺乳头状癌占６０％～８０％，本组病例６３％与文献相仿，此肿瘤质硬或囊变，多无包膜或包膜不完整，与正常甲状腺组织分界不清。

切面呈灰白结节状或呈暗褐色，并见胶状物，肿瘤内常见纤维化、钙化，镜下：乳头分支多，乳头中心有纤维血管间质，问质内常见呈同心圆状的钙化小体，即砂粒体；甲状腺滤泡状癌发生率居第２位，约占２３％，本组３例低于文献，此肿瘤多圆形或分叶结节状，有完整包膜；未分化癌、髓样癌较少见，本组发现各１例。

甲状腺癌ＣＴ平扫表现为低于骨骼肌密度的肿块，均质或不均质，边界不清¨。

，在增强扫描时可以轻度强化。

由于甲状腺癌具有恶性肿瘤的生物行为，癌灶与正常甲状腺的边界大多模糊不清，生长的瘤细胞侵入纤维包膜或穿破纤维包膜向周围腺组织呈深度不等的浸润破坏，以及肿瘤血管内的瘤栓造成瘤内不规则坏死与尚存血供的瘤组织交错存在，形成ＣＴ影像的瘤周结节拉１。

综上所述，甲状腺癌ＣＴ特征：肿块形态不规则，边缘模糊不清；密度不均，沙砾样钙化；瘤周呈“强化残圈”征；瘤内残缺网格强化；包膜外缘毛刺征；颈部淋巴结转移。

其中肿块形态不规则，边缘模糊不清、颈部淋巴结转移、包膜外缘毛刺征，对良恶性肿瘤的鉴别诊断具有重要的意义，可作为ＣＴ诊断恶性肿瘤的特征性指标。

转铁蛋白受体的结构及功能作者：文雪来源：《科技视界》2016年第15期【摘要】人体细胞的正常代谢需要铁，其中转铁蛋白受体（TfR）参与铁的吸收和调节。

TfR在所有细胞都呈低表达，在增殖活跃的细胞高表达。

与正常组织相比，肿瘤组织TfR的表达显著增高，因此，TfR成为肿瘤靶向治疗的研究热点。

【关键词】转铁蛋白受体；结构；功能0 前言铁是人体细胞进行代谢不可缺少的重要元素，在运送氧、传递电子、DNA合成等过程中起着非常重要的作用。

细胞内铁的转运主要通过转铁蛋白（Tf）和转铁蛋白受体（TfR）来进行调控。

由于转铁蛋白受体在所有细胞都呈低表达，而在增殖活跃的细胞如肿瘤细胞高表达，使得转铁蛋白受体在临床和药物转运上得到越来越广泛的研究。

本文主要对转铁蛋白受体的结构及功能进行综述。

1 转铁蛋白受体的结构转铁蛋白受体是由两个大小约为90KDa的亚单位通过两条二硫键交联而成的一种II型跨膜糖蛋白[1]。

每个亚单位包括一个胞外C端区域，一个单跨膜区域和一个N端区域。

C端区域也称外功能区，又分为蛋白酶样区、顶区和螺旋区[2]，其中包含Tf的结合位点。

TfR对不同的Tf均有较高的亲和力。

科学家通过X线晶体衍射发现Tf通过其C片段和N片段与TfR 的螺旋区和蛋白酶样区相互作用从而导致Tf和TfR的结合。

此外，Tf与铁结合的饱和度对Tf 识别TfR也有明显影响[3]。

TfR共有两个家族成员，分别是TfR1和TfR2。

与TfR1不同，TfR2没有铁反应元件，其表达不受胞内铁水平的调节，而且对Tf的亲和力很低，起作用还不是很清楚，可能与调节和维持铁在内环境的稳定有关[4]。

2 转铁蛋白受体的表达TfR在机体的所有细胞中低表达，在增殖活跃的细胞高表达。

尤其是肿瘤细胞，由于肿瘤细胞中铁代谢发生了很多改变，导致TfR表达显著增高，尤其是TfR1的表达增高。

肿瘤细胞为更加快速的摄取铁因此高表达TfR1，其高表达与肿瘤细胞快速增殖相关。

人可溶性转铁蛋白受体（sTfR）酶联免疫(ELISA)分析试剂盒使用说明书樊克生物专业供应本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：48T 25 ng/L -800 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本可溶性转铁蛋白受体（sTfR）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人可溶性转铁蛋白受体（sTfR）水平。

用纯化的人可溶性转铁蛋白受体（sTfR）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入可溶性转铁蛋白受体（sTfR），再与HRP标记的可溶性转铁蛋白受体（sTfR）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的可溶性转铁蛋白受体（sTfR）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人可溶性转铁蛋白受体（sTfR）浓度。

试剂盒组成1 20倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液3ml×1瓶2 酶标试剂3ml×1瓶 8 标准品（1600ng/L）0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×4条9 标准品稀释液1.5ml×1瓶4 样品稀释液3ml×1瓶 10 说明书1份5 显色剂A液3ml×1瓶 11 封板膜2张6 显色剂B液3ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

800 ng/L 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液400 ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液200 ng/L l 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液100 ng/L 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液50 ng/L 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

转铁蛋白受体1在胃癌中表达的意义尹小菲;冯艳艳;康文全【摘要】目的探讨转铁蛋白受体1(transferrin receptor 1,TfR1)在慢性浅表性胃炎,多阶段胃癌前病变(慢性萎缩性胃炎、肠化生、不典型增生)和胃癌中的表达情况及临床意义.方法用免疫组织化学法检测TfR1在31例慢性浅表性胃炎,32例萎缩性胃炎、30例肠化生、26例非典型增生及64例胃癌中表达的变化情况,并分析TfR1表达与临床资料的关系.结果 TfR1在胃癌组织中呈高表达,且主要表达于胃癌细胞的胞膜,胞膜邻近的胞浆也有表达.在非癌组织(慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠化生和非典型增生)中TfR1表达的阳性率低于胃癌组(P<0. 05).TfR1的阳性表达与胃癌的浸润深度及是否有淋巴结转移有关(P<0. 05),与胃癌患者的性别,年龄,分化程度无关(P>0. 05).结论 TfR1在胃癌组织中表达升高,且与胃癌的转移有一定的相关性. TfR1可作为胃癌诊断和治疗的新靶点.%Objective To explore the expression and clinical significance of transferrin receptor 1( TfR1) in tissues of human chronic superficial gastritis, multi stage gastric precancerous lesions including chronic atrophic gastritis, intestinal metaplasia, atypical hyperplasia and gastric carcinoma. Methods The changes of TfR1 protein expression were detected by immunohistochemistry in 31 cases chronic superficial gastritis, 32 cases chronic atrophic gastritis, 30 cases intestinal metaplasia, 26 cases atypical hyperplasia, and 64 cases gastric carcinoma. The relationship between TfR1 protein expression and the clinical data was analyzed. Results TfR1 was highly expressed in gastric carcinoma tissues,and TfR1 was mainly located in the cell membrane of gastric cancer cell and cytoplasm adjacent to cellmembrane. The positive rate of TfR1 expressions in non-cancerous tissues including chronic superficial gastritis, chronic atrophic gastritis, intestinal metaplasia and atypical hyperplasia was significantly lower than that in gastric carcinoma tissues (P<0. 05). The expression of TfR1 was correlated with invasion depth of gastric carcinoma and lymph node metastasis (P<0.05),however,which was not correlated with patient's sex and age as well as the differentiation degree of tumor (P>0. 05). Conclusion The expression levels of TfR1 are increased in gastric cancer tissues,which are correlated with the metastasis of gastric carcinoma at some extent, therefor, TfR1 can be regarded as an new target in diagnosis and treatment of gastric cancer.【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2018(040)014【总页数】3页(P2206-2208)【关键词】胃癌;转铁蛋白受体1;免疫组化【作者】尹小菲;冯艳艳;康文全【作者单位】518052 广东医学院附属南山医院(深圳市南山区人民医院);518052 广东医学院附属南山医院(深圳市南山区人民医院);518052 广东医学院附属南山医院(深圳市南山区人民医院)【正文语种】中文【中图分类】R735.2胃癌是一类高发的恶性肿瘤，胃癌发病率在所有恶性肿瘤中居第四位，病死率居第2位[1]，目前普遍认为胃癌的发生是一个多步骤的过程，在多种致病因素的作用下，胃黏膜经历从慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎、肠型化生、不典型增生至胃癌的一系列形态学变化。

基于转铁蛋白受体(TfR1)的肿瘤与脑部疾病靶向治疗研究进展本文档格式为WORD,感谢你的阅读。

摘要：人转铁蛋白受体（TfR1)在不同组织器官中普遍表达，其主要功能是协助转铁蛋白在细胞和血脑屏障内外转运，维持细胞铁平衡。

在肿瘤细胞中以及血脑屏障中，TfR1的表达水平明显高于正常细胞组织，因此，TfR1被认为是肿瘤靶向治疗和脑部疾病靶向治疗的重要靶点。

基于TfR1靶向治疗的药物载体主要有转铁蛋白（Tf）、抗TfR1抗体、TfR1结合肽，这些生物大分子能与TfR1特异性结合，结合之后可以通过受体介导的跨胞转运机制进入细胞或穿过血脑屏障。

将小分子药与这些载体偶联可以促进许多亲水性的化疗药物或神经治疗药物进入肿瘤细胞或血脑屏障，而许多中枢神经治疗性大分子则主要通过融合蛋白的方式与抗TfR1抗体连接转运进入中枢神经系统。

关键词：转铁蛋白受体；肿瘤靶向治疗；脑靶向给药Based on the Transferrin Receptor (TfR1) of the Tumor and Brain Disease Progress in Targeted Therapy SHAO Ming,LIU Yu(College of Life Science and Technology,China Pharmaceutical University,Nanjing210009,Jiangsu,China)Abstract：Human TfR1 was universally expressed in different tissues. The major function of TfR1 was to facilitate delivery of transferrin across cells and blood-brain barrier(BBB). As a result, iron homo-stasis was maintained. TfR1 was recognised as a critical target for tumor and brain disease therapy due to its over expression in tumor cells and BBB. In recent years, drug carriers based on TfR1 recognition were developed such as Transferrin (Tf）, anti-TfR1 antibody and TfR1 binding peptide. These carriers bind to TfR1 specifically and enter into cell or BBB through receptor mediated endocytosis. Chemicals conjugated with these carriers can be facilitated to enter into tumor cells and brain tissue. Therapeutic proteins can be engineered to fused with anti-TfR1 antibody and transported across BBB.Key words： TfR1; Tumor target therapy;Brain directed delivery1转铁蛋白受体（TfR1)简介转铁蛋白受体（TfR1)是一种在不同组织和细胞系中普遍表达的糖蛋白。

中图分类号:S 852.723　文献标识码:A 文章编号:167324696(2008)0120020205柔嫩艾美球虫免疫与鸡盲肠扁桃体TNF 2α基因表达动态的关系王彩霞,徐　赓,王黎霞,安　健3(北京农学院动物科学技术系,北京　102206) 摘要:根据GenBank 上鸡β2actin 、TN F 2α的基因序列设计引物,应用逆转录2聚合酶链式反应(R T 2PCR )技术克隆获得了β2actin 和TN F 2α基因,采用β2actin 为内参的半定量方法检测TN F 2αmRNA 在鸡柔嫩艾美球虫免疫前后不同时间的表达情况,以探讨TN F 2α基因的表达动态与柔嫩艾美球虫免疫的关系。

结果显示,TN F 2α基因在两次免疫期间的表达量整体上呈现双峰模式,首免后第9d 达到一个高峰,二免后第7d 达到另一个高峰。

结果表明,TN F 2α在抗球虫感染中有一定的作用。

关键词:β2actin 基因;柔嫩艾美球虫;盲肠扁桃体;R T 2PCR ;TN F 2α基因R elationship bet w een Eimeria tenella immunity and kineticexpression of TNF 2αgene in chicken cecal tonsil WAN G Cai 2xia ,XU Geng ,WAN G Li 2xia ,AN Jian(De partment of A ni mal S cience and Technolog y ,B ei j ing College of A g riculture ,B ei j ing 102206,China ) Abstract :According to chicken β2actin and TN F 2αgene sequences in GenBank ,primers were de 2signed ,and t he gene sequences were amplified by reverse t ranscriptase 2polymerase chain reaction (R T 2PCR )f rom t he cecal tonsil of chicken experimentally immunized wit h Ei meri a tenell a .The exp ression le 2vel of TN F 2αmRNA at different time after immunization was detected by semi 2quantitative R T 2PCR wit h β2actin gene as internal reference to st udy t he relationship between E.tenell a immunizatio n and t he kineticexpression of TN F 2αgene in chicken cecal tonsil.The result s showed t hat t he level of expression of TN F 2αgene reached 1st peak on day 9po st 21st 2immunization ,and reached 2nd peak on day 7post 2booster 2immunization.It was concluded t hat TN F 2αhad some effect against E.tenell a infection.K ey w ords :β2actin gene ;Ei meri a tenell a ;cecal tonsil ;R T 2PCR ;t umor necrosis factor 2αgene 鸡球虫病是由艾美属球虫寄生于鸡小肠和盲肠上皮细胞引起的一类原虫病,对养鸡业的危害相当严重。

转铁蛋白受体的结构作者：文雪来源：《科技视界》2018年第25期【摘要】高度增殖的细胞对铁的需求显着增加，导致转铁蛋白受体（TFR）数量增加。

这种现象使得这些细胞上的转铁蛋白受体成为靶向治疗的极好候选者，大量研究证实TFR可作为将各种治疗剂转运并递送至细胞内部的重要靶标。

该综述主要探讨TFR 的结构，为TFR-药物偶联物的方法提供了一些指导。

【关键词】肿瘤；转铁蛋白受体；化疗中图分类号： R730.2 文献标识码： A 文章编号： 2095-2457（2018）25-0107-001DOI：10.19694/ki.issn2095-2457.2018.25.048【Abstract】The demand for iron in highly proliferating cells is significantly increased，resulting in an increased in the number of transferrin receptors（TFRs）.This phenomenon makes the TFR on these cells an excellent candidate for targeted therapy，and numerous studies have demonstrated that TFR can serve as an important target for transporting and delivering various therapeutic agents to the interior of cells. This review focuses on the structure of TFR and provides some guidance for the TFR-drug conjugate approach.【Key words】Tumor；Transferrin receptor；Chemotherapy转铁蛋白（Tf）受体，称为TfR1（也称为CD71），普遍低表达于正常人体组织中。

（一）立项依据与研究内容（4000-8000字）：1．项目的立项依据细胞增殖和凋亡(apoptosis)调节失控与肿瘤的发生发展密切相关，以促进肿瘤细胞凋亡为策略的肿瘤生物治疗倍受国内外学者的重视。

1997年Ambrosini等发现survivin基因是一种独特的凋亡抑制基因，表达于几乎所有人类的肿瘤组织，但在分化的正常组织中沉默[1-3]。

Survivin 的表达可显著抑制肿瘤细胞凋亡[4]。

由于survivin在肿瘤细胞高表达及促进细胞增殖和抗凋亡的双重作用，设计以survivin为靶点，使其沉默进行抗肿瘤治疗，可促进肿瘤细胞凋亡，同时抑制肿瘤细胞浸润并增强其对放化疗的敏感性。

最近，国外学者及本实验室采用基因阻遏技术如反义技术等抑制survivin的表达，可直接促进白血病细胞及部分实体肿瘤细胞凋亡[5，6]。

而肿瘤细胞的彻底清除最终有赖于机体的特异性免疫应答，由于大多数肿瘤抗原以及凋亡的肿瘤细胞免疫原性较弱，不能诱导机体产生有效的抗肿瘤免疫应答。

故抑制肿瘤细胞增殖与促进肿瘤细胞凋亡的治疗策略均难以彻底清除机体内的肿瘤细胞。

因此，在抑制肿瘤细胞增殖与诱导肿瘤细胞凋亡的同时，如何增强其免疫原性，诱导机体对肿瘤的特异性免疫应答，达到彻底清除残留肿瘤细胞或微小转移病灶是值得探索的课题。

热休克蛋白（HSP）作为分子伴侣与正常的组织细胞肽形成的复合物不引起免疫应答，但可结合各种突变了的肿瘤抗原肽，且能够将其有效的进行提呈，诱导CD8+CTL、CD4+T细胞以及NK细胞反应，杀伤肿瘤细胞[16，17，18]。

最新研究证明，机体可通过非自我天然识别机制（innate recognition of non-self）如补体、CD14等清除凋亡细胞[7]，或通过改变了的自我吞噬识别机制(phagocyte recognition of altered-self)如巨噬细胞表面受体CD36和氧化低密度脂蛋白受体吞噬清除凋亡细胞[8]，或通过非分离自我吞噬识别机制(phagocyte recognition of non-detaching self)如ICAM3的相互作用吞噬清除凋亡细胞[9]，由此可能诱导反应性T细胞无能而致免疫耐受[10-12]，如以凋亡的肿瘤细胞冲击DC细胞则能激活肿瘤特异性CD8+T细胞，但凋亡的肿瘤细胞冲击巨噬细胞无此功能[13]。

铁蛋白基因Fth1的克隆及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达刘伟;朱修良;李清海【摘要】旨在构建编码大鼠铁蛋白重链多肽1(ferritin heavy chain 1,Fth1)的慢病毒,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞(RMSC)中的表达.PCR扩增大鼠Fth1基因,克隆至pLenti-GFP-C慢病毒表达载体,包装慢病毒,感染RMSC细胞.荧光显微镜观察细胞内GFP荧光情况,Western blot检测Fth1的表达情况,WST-1试剂检测Fth1慢病毒感染组(RMSC-Fth1)和空载体组(RMSC-GFP)的细胞增殖活性.DNA 测序结果表明,pLenti-GFP-C-Fth1慢病毒载体构建成功.包装慢病毒感染RMSC 细胞后,荧光显微镜下可见明显绿色荧光,表明感染成功.Western blot结果显示,实验组细胞裂解液中可检测到特异的Fth1表达条带.细胞增殖实验显示,与空载体组相比,过表达Fth1并不影响RMSC细胞生长.成功构建并包装携带大鼠Fth1基因的慢病毒,其能够成功感染RMSC细胞并表达Fth1蛋白,且对细胞增殖无明显影响.%Aims are to construct a lentivirus encoding rat ferritin heavy chain 1 (Fth1) and to detect its expression in rat bone mesenchymal stem cells (RMSCs).The rat Fthl gene was amplified by PCR and cloned into the lentivirus expression vector pLenti-GFP-C.The lentivirus carrying pLenti-GFP-C-Fth1 or empty vector was then packaged in HEK 293T cells,by which the RMSCs were infected.GFP expression was observed under a fluorescence microscope.Fthl expression was detected by Westernblot.WST-1 reagent was used to analyze the proliferation of infected cells (RMSC-Fth1) and empty vector (RMSC-GFP).Results of DNA sequencing showed that the pLenti-GFP-C-Fth1 lentivirus expression vector wassuccessfully constructed.After RMSCs were infected by the packaged lentivirus,GFP was observed under a fluorescence microscope,indicating the infection was achieved.A specific band of Fth1 in the lysate of Fth1-lentivirus infected cells (RMSC-Fth1) was detected by Western blot.Cell proliferation assay showed that the growth of RMSC was not affected by overexpressing Fth1 compared with RMSC-GFP.As conclusion,the recombinant lentivirus vector carrying rat Fth1 gene was successfully constructed,infected RMSC as expected,and expressed FTH1 protein even without significant impacts on the cell proliferation.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2017(033)002【总页数】6页(P179-184)【关键词】Fth1;磁共振报告基因;慢病毒载体;大鼠骨髓间充质干细胞【作者】刘伟;朱修良;李清海【作者单位】浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所,杭州310021;浙江大学医学院附属第二医院放射科,杭州310009;浙江大学医学院附属第二医院放射科,杭州310009【正文语种】中文核磁共振成像（MRI）由于具有很高的空间分辨率和软组织对比，能够灵活、无创地观察被MR，对比剂标记的目标细胞在体内的迁移、分化及增殖情况［1-5］，已成为当前活体检测和干细胞移植监测研究的热点。

转铁蛋白受体在肿瘤靶向治疗中的研究进展转铁蛋白受体（Transferrin receptor，TfR）是参与体内铁代谢过程的重要蛋白质。

研究表明，TfR在肿瘤细胞表面高度表达，因此以其作为靶点与药物结合可应用于肿瘤治疗。

现对TfR的结构功能以及在肿瘤靶向治疗中的研究进展进行概述。

标签：转铁蛋白受体；肿瘤铁是细胞增殖和能量代谢的重要元素，与氧气运输和呼吸链电子传递过程有着密切关系。

TfR是体内铁代谢所必需的重要蛋白成分，在其介导下，机体的铁代谢、免疫功能和细胞调节得以正常运行。

因此，TfR对于快速增殖的肿瘤细胞的代谢活动有一定作用，与肿瘤疾病的发生存在一定关系，可与相关药物结合应用于肿瘤疾病的靶向治疗。

1 转铁蛋白受体转铁蛋白受体（Transferrin receptor，TfR）是跨膜糖蛋白，是由双同源二聚体的亚基通过二硫键交联形成。

每个单体由一个大的胞外C端区域，一个短的N 端区域和一个单跨膜区域组成[1]。

C端区域包含与Tf结合的位点，是外功能区。

TfR与Tf互相作用介导体内铁的摄取吸收。

增殖加快的肿瘤细胞对Fe的需量大，其表面TfR呈高密度分布。

目前已经发现两种TfR，TfR1和TfR2。

TfR1在一般细胞中均可表达，可以根据机体PH的变化而改变其构象，并凭借构象改变来改变与转铁蛋白的亲和性。

TfR2常在肝细胞内表达，调控并维持机体内的铁离子动态平衡[2]。

2 转铁蛋白受体的功能2.1 参与铁离子转运大部分TfR在血清中与Tf结合形成复合体。

细胞表面的TfR优先选择有两个铁离子的Tf结合，TfR-Tf复合体通过内吞方式进入细胞，PH下降促使Tf构象改变，Tf释放Fe2+，提高了TfR对脱铁转铁蛋白（apo Tf）的亲和性。

Tf的346组氨基酸残基与TfR的641位色氨酸和760位苯丙氨酸的残基之间的相互作用，导致构象改变进而使Fe2+从C端释放。

在正常生理PH下，带有两个Fe2+的Tf对TfR的亲和性通常是apo Tf的10～100倍。

转铁蛋白受体动力学及其与细胞受体的相互作用文雪【摘要】转铁蛋白受体(TFR)高表达于大量恶性肿瘤细胞表面,因而使其成为肿瘤治疗的重要靶点.在这方面,至关重要的是要在分子水平上准确理解TFR如何与其配体hTF相互作用.该综述主要探讨TFR动力学及其与细胞受体的相互作用,为未来hTF-药物偶联物的方法提供了一些指导.【期刊名称】《科技视界》【年(卷),期】2018(000)024【总页数】2页(P102,86)【关键词】肿瘤;转铁蛋白受体;化疗【作者】文雪【作者单位】湖北职业技术学院护理学院基础医学教研室,湖北孝感 432000【正文语种】中文【中图分类】R730.5鉴于Fe2+/Fe3+对的氧化还原性质可能产生有害影响，从饮食中获得的铁一旦进入体内就会受到严格控制。

具体来讲，利用人血清转铁蛋白（hTF）可以使铁，尤其是Fe3+铁在铁结合和转运蛋白的每个裂缝内隔离，从而保护Fe3+形式的铁，避免接触血液的含水环境。

从肝脏分泌到血液中的80kDa双叶糖蛋白，hTF非常紧密地结合 Fe3+（Kd10-22M）[1]，但其结合是可逆的。

由于hTF可以结合任一或两个肺中的铁，因此四种不同的hTF种类（仅铁含量不同）在血液中循环：二聚体（Fe2hTF），单铁质N-叶hTF（FeNhTF），单铁质C-叶hTF（FeChTF）和无铁 hTF（apohTF）。

在血清的 pH值（7.4），Fe2hTF以最高的亲和力（Kd4nM）与位于所有活跃分裂细胞的细胞表面的特异性转铁蛋白受体（TFR）结合。

两个单铁质 hTF（FeNhTF和 FeChTF）也与 TFR形成稳定的高亲和力复合物（分别为Kd 36 nM和Kd 32 nM）[2]。

相反，在中性pH下，apohTF结合非常弱。

在网格蛋白介导的hTF/TFR复合物内吞作用后[3]，当内体处于较低的pH （5.6），当其与盐和尚未鉴定的螯合剂一起，将刺激hTF释放铁及其活化。