大学微生物实验复习题
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微生物复习题及答案微生物学是研究微生物的形态、结构、生理、分类、遗传、生态、进化以及与人类关系等方面的科学。
以下是一份微生物复习题及答案,供学习者参考。
一、选择题1. 微生物学研究的最小单位是:A. 细胞B. 病毒C. 孢子D. 基因答案:D2. 细菌的基本结构不包括:A. 细胞壁B. 细胞膜C. 核糖体D. 叶绿体答案:D3. 以下哪种微生物属于真核生物?A. 细菌B. 酵母C. 病毒D. 支原体答案:B4. 微生物的繁殖方式主要是:A. 有性生殖B. 无性生殖C. 孢子生殖D. 以上都是答案:B5. 微生物的分类依据主要包括:A. 形态特征B. 遗传信息C. 生理生化特性D. 以上都是答案:D二、填空题6. 微生物的分类等级包括_______、_______、_______、_______、_______。
答案:界、门、纲、目、种7. 病毒的遗传物质可以是_______或_______。
答案:DNA 或 RNA8. 微生物的培养基通常分为_______和_______两大类。
答案:合成培养基和自然培养基9. 微生物的生理功能包括_______、_______、_______等。
答案:代谢、生长、繁殖10. 微生物在医学上的应用包括_______、_______、_______等。
答案:疾病治疗、疫苗开发、疾病诊断三、简答题11. 简述微生物在生态系统中的作用。
答案:微生物在生态系统中扮演着分解者、生产者和消费者的角色。
它们通过分解有机物质,促进物质循环;作为生产者,某些微生物能够进行光合作用或化学合成;作为消费者,它们参与食物链,为其他生物提供能量。
12. 描述微生物的遗传变异机制。
答案:微生物的遗传变异主要包括基因突变、基因重组和基因转移。
基因突变是基因序列的改变,可以是自发的或由环境因素引起。
基因重组通常发生在有性生殖过程中,通过染色体的交换产生新的基因组合。
基因转移是指基因从一个生物体转移到另一个生物体,这在细菌中尤为常见,通过质粒、转座子等方式实现。
微生物实验室试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 微生物学中,下列哪项不是微生物的特点?A. 体积小B. 繁殖快C. 代谢类型多样D. 需要光合作用答案:D2. 细菌的基本形态包括:A. 球状B. 杆状C. 螺旋状D. 所有以上选项答案:D3. 下列哪项不是真菌的特征?A. 有细胞壁B. 有成形的细胞核C. 能进行光合作用D. 能产生孢子答案:C4. 病毒与细菌的主要区别在于:A. 病毒没有细胞结构B. 病毒比细菌小C. 病毒不能独立生存D. 所有以上选项答案:D5. 微生物实验室中常用的无菌操作技术不包括:A. 无菌接种B. 无菌过滤C. 紫外线消毒D. 高压蒸汽灭菌答案:C6. 微生物的培养基通常包含哪些成分?A. 碳源B. 氮源C. 无机盐D. 所有以上选项答案:D7. 下列哪项不是微生物实验室常用的染色方法?A. 革兰氏染色B. 酸性染色C. 碱性染色D. 荧光染色答案:C8. 微生物的纯种培养通常采用哪种培养基?A. 选择性培养基B. 鉴别培养基C. 富集培养基D. 固体培养基答案:D9. 微生物实验室中常用的微生物计数方法不包括:A. 稀释涂布法B. 比浊法C. 显微镜直接计数法D. 电子计数法答案:D10. 微生物实验室中常用的灭菌方法包括:A. 干热灭菌B. 湿热灭菌C. 化学灭菌D. 所有以上选项答案:D二、填空题(每空1分,共20分)1. 微生物的分类单位从大到小依次为:__________、__________、__________、__________、__________。
答案:界、门、纲、目、种2. 微生物实验室常用的微生物分离方法有__________和__________。
答案:稀释涂布法、平板划线法3. 微生物实验室中,常用的无菌操作技术包括__________、__________和__________。
答案:无菌接种、无菌过滤、无菌操作台4. 微生物实验室中,常用的微生物鉴定方法有__________、__________和__________。
大学微生物试题库及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 微生物学是研究什么的科学?A. 微生物的结构B. 微生物的分类C. 微生物的生理D. 微生物的生态答案:D2. 以下哪种微生物不是细菌?A. 乳酸菌B. 酵母菌C. 霉菌D. 放线菌答案:C3. 微生物在生物分类中属于哪个界?A. 植物界B. 动物界C. 微生物界D. 原生生物界答案:C4. 微生物的最小单位是?A. 细胞B. 染色体C. 基因D. 蛋白质答案:A5. 哪种微生物是引起食物中毒的常见原因?A. 乳酸菌B. 酵母菌C. 沙门氏菌D. 曲霉答案:C6. 微生物的繁殖方式是?A. 有性生殖B. 无性生殖C. 孢子生殖D. 以上都是答案:D7. 以下哪种不是病毒的特点?A. 无细胞结构B. 必须寄生在宿主细胞内C. 可以独立进行代谢活动D. 遗传物质可以是DNA或RNA答案:C8. 哪种微生物是人体肠道中的主要益生菌?A. 大肠杆菌B. 乳酸杆菌C. 金黄色葡萄球菌D. 绿脓杆菌答案:B9. 微生物学研究中常用的染色方法是什么?A. 革兰氏染色B. 酸性染色C. 碱性染色D. 以上都是答案:A10. 微生物在食品工业中的主要作用是什么?A. 产生毒素B. 引起腐败C. 促进发酵D. 以上都是答案:C二、填空题(每空1分,共20分)1. 微生物包括_______、_______、_______和_______等。
答案:细菌、病毒、真菌、原生生物2. 微生物的培养需要_______、_______、_______和_______等条件。
答案:适宜的温度、水分、营养物质、氧气3. 微生物的分类依据包括_______、_______、_______和_______等。
答案:形态特征、生理特性、遗传信息、生态习性4. 微生物在生态系统中的作用包括_______、_______、_______和_______。
答案:分解者、生产者、消费者、调节者5. 微生物的遗传变异可以通过_______、_______、_______和_______等方式实现。
微生物检验试题库及答案1. 单选题:下列哪种微生物属于革兰氏阳性菌?A. 大肠杆菌B. 金黄色葡萄球菌C. 肺炎链球菌D. 铜绿假单胞菌答案:B2. 判断题:所有真菌都属于真核生物。
答案:正确3. 多选题:以下哪些因素会影响微生物的生长?A. 温度B. pH值C. 氧气D. 营养物质答案:A、B、C、D4. 填空题:微生物检验中常用的染色方法有革兰氏染色和_______染色。
答案:酸性5. 简答题:请简述微生物检验中常用的培养基类型及其用途。
答案:微生物检验中常用的培养基包括选择性培养基和鉴别培养基。
选择性培养基用于促进特定微生物的生长,同时抑制其他微生物,例如麦康凯培养基用于分离肠道致病菌。
鉴别培养基则用于区分不同种类的微生物,如糖发酵培养基用于检测微生物的代谢类型。
6. 计算题:在一次微生物计数实验中,通过稀释和平板培养,从1毫升样品中得到100个菌落。
如果样品的原始体积是1000毫升,那么样品中的总菌数是多少?答案:1×10^9 CFU/mL7. 论述题:论述微生物检验在食品安全检测中的重要性及其应用。
答案:微生物检验在食品安全检测中扮演着至关重要的角色。
它能够检测食品中是否存在病原微生物,评估食品的卫生状况,预防食源性疾病的发生。
在食品加工过程中,微生物检验可以监控生产环境和原料的微生物污染情况,确保食品在生产、储存和运输过程中的安全性。
此外,微生物检验还有助于制定和遵守食品安全标准,提高食品质量,保障消费者的健康。
8. 案例分析题:某食品厂生产的一批罐头食品在市场销售后,出现了多起消费者食物中毒事件。
请分析可能的原因,并提出相应的微生物检验方案。
答案:可能的原因包括原料污染、生产过程中的交叉污染、杀菌不彻底或包装密封不良等。
相应的微生物检验方案应包括对原料、生产环境、成品进行微生物检测,特别关注沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等常见食源性病原体。
同时,对生产流程进行审查,确保符合食品安全生产规范,并对包装材料进行检测,防止因包装问题导致的污染。
微生物实验考试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 细菌的基本形态包括哪些?A. 球状、杆状、螺旋状B. 球状、杆状、丝状C. 球状、杆状、棒状D. 球状、螺旋状、棒状答案:A2. 以下哪种微生物属于真核生物?A. 细菌B. 酵母菌C. 病毒D. 支原体答案:B3. 微生物的生长曲线可以分为哪几个阶段?A. 迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期B. 迟缓期、对数期、稳定期、死亡期C. 迟缓期、对数期、衰亡期、死亡期D. 迟缓期、稳定期、衰亡期、死亡期答案:A4. 微生物的培养基中通常需要添加哪种类型的营养物质?A. 碳源、氮源、无机盐B. 碳源、氮源、维生素C. 碳源、氮源、生长因子D. 碳源、氮源、微量元素答案:A5. 以下哪种微生物是厌氧菌?A. 大肠杆菌B. 酵母菌C. 乳酸菌D. 金黄色葡萄球菌答案:C6. 微生物的革兰氏染色法中,染色后呈紫色的细菌属于哪一类?A. 革兰氏阳性菌B. 革兰氏阴性菌C. 螺旋菌D. 杆状菌答案:A7. 微生物的菌落特征包括哪些?A. 形状、大小、颜色、边缘B. 形状、大小、颜色、质地C. 形状、大小、颜色、湿度D. 形状、大小、颜色、透明度答案:B8. 微生物的热敏感性试验中,常用于检测哪种微生物?A. 细菌B. 酵母菌C. 霉菌D. 病毒答案:D9. 微生物的抗生素敏感性试验中,通常使用哪种方法?A. 纸片法B. 琼脂扩散法C. 肉汤稀释法D. 微量稀释法答案:A10. 微生物的基因工程中,常用的转化方法有哪些?A. 电穿孔法、化学转化法B. 电穿孔法、热休克法C. 热休克法、化学转化法D. 热休克法、物理转化法答案:A二、填空题(每空1分,共20分)1. 微生物的细胞壁主要由________和________组成。
答案:肽聚糖、脂多糖2. 微生物的代谢类型包括________、________和________。
答案:异养、自养、兼性营养3. 微生物的遗传物质主要存在于________中。
微生物大学考试题及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1. 微生物学中,下列哪个选项不是微生物的共同特征?A. 体积小,面积大B. 繁殖速度快C. 需要氧气进行呼吸D. 能在极端环境中生存答案:C2. 细菌的基本形态不包括以下哪一项?A. 球状B. 杆状C. 螺旋状D. 多边形答案:D3. 下列哪种微生物不属于原核生物?A. 细菌B. 放线菌C. 酵母菌D. 蓝细菌答案:C4. 微生物的分类依据不包括以下哪一项?A. 细胞结构B. 代谢类型C. 遗传物质D. 感染的宿主答案:D5. 哪种物质不是微生物生长所需的基本营养物质?A. 碳源B. 氮源C. 无机盐D. 抗生素答案:D6. 微生物的发酵过程不包括以下哪一项?A. 酒精发酵B. 乳酸发酵C. 醋酸发酵D. 光合作用答案:D7. 哪种微生物是引起食物腐败的主要原因?A. 细菌B. 病毒C. 真菌D. 原生动物答案:A8. 下列哪种微生物不是通过空气传播的?A. 结核杆菌B. 流感病毒C. 沙门氏菌D. 军团菌答案:C9. 哪种微生物是人体肠道中的主要益生菌?A. 大肠杆菌B. 乳酸菌C. 金黄色葡萄球菌D. 绿脓杆菌答案:B10. 哪种微生物可以引起食物中毒?A. 酵母菌B. 曲霉C. 沙门氏菌D. 醋酸杆菌答案:C二、填空题(每题2分,共20分)1. 微生物的分类单位从大到小依次是__________、__________、__________、__________、__________。
答案:界、门、纲、目、种2. 微生物的细胞壁主要由__________组成,而动物细胞壁主要由__________组成。
答案:肽聚糖、胶原蛋白3. 微生物的__________是其繁殖的主要方式,而__________是其适应环境变化的一种方式。
答案:二分裂、突变4. 微生物的__________是其获取能量的主要途径,而__________是其获取营养的主要方式。
作业3-1单选题1、结核分枝杆菌化学组成中最显著的特点是含有大量的()(5 分)2、在医疗和医学研究中需要对下列物品进行灭菌,但不能采用高压蒸汽灭菌法灭菌的用品是()(5 分)3、可以粘附在消化道和呼吸道上皮的细菌结构是()(5 分)4、在细菌生长中,生物学性状最典型的时期是()(5 分)5、大肠埃希菌分裂一代需要时间大约是()(5 分)6、你所知道的微生物中,有完整细胞核的微生物是()(5 分)7、与细菌耐药性有关的结构是()(5 分)8、小赵在路边踢足球,右脚跟被铁钉刺伤,伤口内外有许多泥土附着。
一位学医的朋友建议他尽快去医院清创和注射TAT。
请问此类处理主要针对的细菌是()(5 分)9、引起流行性脑脊髓膜炎的病原体属于()(5 分)10、细菌“核质以外的遗传物质”是指()(5 分)11、细菌的个体繁殖方式是()(5 分)12、某中学生食用街边“无证”摊位出售的食品后一天,出现腹痛、腹泻和里急后重等症状,并发现有黏液性脓血便。
请问该生最可能感染的病原微生物是()(5 分)13、不属于霍乱弧菌的致病物质()(5 分)14、质粒在细菌间通过性菌毛转移的方式称为()(5 分)15、不属于革兰阴性菌代谢产物的是()(5 分)16、老王因入秋受凉,咳嗽的老毛病又犯了。
他在小区外的药店买了好几种“消炎药”,吃了快一个月了。
最近出现腹泻症状,医院消化科医生诊断为肠道菌群失调症。
请问老王腹泻症状最主要的原因是()(5 分)17、不属于化脓性链球菌致病物质的是()(5 分)18、革兰阳性菌和阴性菌细胞壁共有的成份是()(5 分)19、与耐热抵抗力有关的细菌结构是()(5 分)20、可引起大叶性肺炎的细菌是()(5 分)3-2作业单选题1、病毒垂直传播的主要方式是()(5 分)2、能引起人畜共患病的原核细胞型微生物是()(5 分)3、导致人类沙眼的病原体是()(5 分)4、有关潜伏感染特征的描述,正确的是()(5 分)5、病毒的复制周期不包括()(5 分)6、引起肾综合征出血热的病原体是()(5 分)7、病毒的核衣壳是()(5 分)8、目前实验室病毒分离培养最常用的方法是()(5 分)9、病毒的增殖方式是()(5 分)10、可引起非典型性肺炎的病原体是()(5 分)11、衣原体的生物学特点是()(5 分)12、通过粪-口途径传播的病毒是()(5 分)13、病毒受染的细胞内具有诊断意义的结构是()(5 分)14、引起人类非淋病性尿道炎的重要病原体是()(5 分)15、引起斑疹伤寒的病原体是()(5 分)16、甲型流感病毒最容易发生变异的成分是()(5 分)17、控制病毒遗传变异的病毒成分是()(5 分)18、白喉棒状杆菌最主要的致病物质是()(5 分)19、对病毒生物学性状的描述,不正确的是()(5 分)20、能够引起垂直传播的病原微生物是()(5 分)单选题1、肠道病毒是指经消化道感染和传播的病毒,其核酸类型是()(5 分)2、患者男性,41岁。
1.细菌简单染色的原理是什么?在中性、碱性或弱酸性的溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料电离后,其分子的染色部分带正电荷,因此碱性染料的染色部分易与细菌结合使细菌着色。
2.细菌简单染色的步骤?①涂片②干燥③固定④染色⑤水洗⑥干燥3.革兰氏染色的原理是什么?应该注意哪些事项?革兰氏阳性菌细胞壁主要结构是肽聚糖,在乙醇洗脱时肽聚糖网孔会收缩,结晶紫和碘复合物被留在细胞壁内,呈现紫色;革兰氏阴性菌细胞壁中类脂较多,在乙醇洗脱时类脂溶解,出现较大缝隙,复合物被洗脱,之后再被番红染成红色。
注意事项:①乙醇脱色时间不宜太长,否则容易出现假阴性,也不宜太短,否则会出现假阳性。
②要用活跃生长期的幼培养物作革兰氏染色;涂片不宜过厚,以免脱色不完全造成假阳性;火焰固定不宜过热。
4.如何正确鉴定一株未知菌株的革兰氏染色反应?请简述实验方法。
①找两株已知的而且和未知菌种形态不同的革兰氏阴性菌和革兰氏阴性菌,分别和未知菌株做混合涂片。
干燥。
固定。
②初染。
③媒染。
④脱色。
⑤复染。
⑥镜检。
当已知的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌正确显色时,观察未知菌什么颜色。
5.简述革兰氏染色的实验步骤。
①制片。
取菌种培养物常规涂片、干燥、固定。
②初染。
滴加结晶紫(以刚好将菌膜覆盖为宜)染色1-2min,水洗。
③媒染。
用碘液冲去残水,并用碘液覆盖约1min,水洗。
④脱色。
用滤纸吸去玻片上的残水,将玻片倾斜,在白色背景下,用滴管滴加95%的乙醇脱色,直至流出的乙醇无紫色时,立即水洗。
⑤复染。
用番红染液复染约2min,水洗。
⑥镜检。
干燥后,用油镜观察。
菌体被染成蓝紫色的是革兰氏阳性菌,被染成红色的为革兰氏阴性菌。
6.影响细菌革兰氏染色结果的因素有哪些?实验中常出现假阳性或假阴性的结果。
假阳性主要是由于脱色不完全,可能是由于涂片过厚,或者是结晶紫染色过度,或乙醇洗脱时间太短;油镜镜头不能压到玻片标本;假阴性可能是因为细胞固定过度,造成细胞壁通透性的改变;或者细胞培养时间太长,可能已经有部分细胞发生死亡或者自溶,也导致细胞壁通透性的改变而出现假阴性结果;或者乙醇脱色时间太长。
大学认识微生物实验练习题5套精选
引言
本文档为大学认识微生物实验练题的精选,共包括5套练题。
这些题目旨在帮助学生巩固对微生物实验的理解和运用,提供了丰富的实践机会。
练题1
1. 描述细菌和真菌在实验中的区别和共同点。
2. 解释为什么在培养细菌和真菌时需要使用不同的培养基和条件。
3. 列举常见的细菌和真菌病原体,并描述它们的特征和感染方式。
练题2
1. 解释为什么进行抗生素敏感性测试是诊断细菌感染的重要步骤。
2. 描述传统的抗生素敏感性测试方法和现代的分子生物学方法。
3. 分析常见的细菌耐药机制,并讨论其对抗生素疗效的影响。
练题3
1. 解释PCR的原理和应用场景。
2. 描述PCR实验的步骤和关键操作。
3. 以研究特定细菌的PCR实验为例,详细介绍该实验的设计
和结果解读。
练题4
1. 说明为什么观察细菌的形态和结构对于识别和分类细菌是重
要的。
2. 列举常见的细菌形态和结构特征,并解释它们的功能和意义。
3. 以某一特定细菌的形态和结构为例,描述其特征并解释其与
生存环境的关系。
练题5
1. 解释酸碱指示剂在微生物实验中的应用。
2. 描述常见的酸碱指示剂及其颜色变化规律。
3. 在某一特定实验场景中,分析酸碱指示剂在实验过程中的应用和结果解读。
结论
以上是大学认识微生物实验练习题的5套精选。
希望通过完成这些练习,学生们能够巩固对微生物实验的理论和实践知识,并提升他们在该领域的能力。
这些练习题的多样性和深度将有助于学生们全面了解微生物实验的重要概念和技术。
2014微生物实验复习题一、名词解释:菌苔:如果把大量分散的纯种细胞密集地接种在固体培养基的较大表面上,结果长出的大量“菌落”已相互连成一片,这就是“菌苔”。
菌落:将单个细菌(或其他微生物)细胞或一小堆同种细胞接种到固体培养基表面(有时为内层),当它占有一定的发展空间处于适宜的培养条件下,该细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆,此即菌落。
芽孢:是一些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体,壁厚、透性低、不易着色。
荚膜:是一些细菌细胞外的一层胶状粘液物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽,与染料亲和力低。
细菌:细菌是单细胞原核微生物,基本形态为球状、杆状、螺旋状。
天然培养基:是指一类利用动、植物或微生物体包括用其提取物制成的培养基,这是一类营养成分既复杂又丰富、难以说出其确切化学组成的培养基。
例如:牛肉膏蛋白胨、麦芽汁培养基。
合成培养基:组合培养基又称合成培养基或综合培养基,是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。
例如:高氏一号培养基。
半组合培养基:又称半合成培养基,指一类主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天然成分的培养基。
例如:马铃薯蔗糖培养基。
液体培养基:一类呈液体状态的培养基,在实验室和生产实践中用途广泛,尤其适用于大规模地培养微生物。
固体培养基:一类外观呈固体状态的培养基。
根据固态的性质又可分为:固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基和滤膜。
半固体培养基:是指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态培养基。
例如:“稀琼脂”。
二、理论书内容:1、细菌、放线菌、酵母菌、霉菌各菌落的比较。
菌落特征微生物类别单细胞微生物菌丝状微生物细菌酵母菌放线菌霉菌主要特征菌落含水状态很湿或较湿较湿干燥或较干燥干燥外观形态小而凸起或大而平坦大而凸起小而紧密大而疏松或大而致密细胞相互关系单个分散或有一定排列方式单个分散或假丝状丝状交织丝状交织形态特征小而均匀,个别有芽孢大而分化细而分化粗而分化参考特征菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌落与培养基结合程度不结合不结合牢固结合较牢固结合菌落颜色多样单调,一般呈乳脂或矿烛色,少数红色或黑色十分多样十分多样菌落正反面颜色的差异相同相同一般不同一般不同菌落边缘一般看不到细胞可见球状,卵圆状或假丝状细胞有时可见丝状细胞可见粗丝状细胞细胞生长速度一般很快较快慢一般较快气味一般有臭味多带酒香味常有泥腥味往往有霉味2、根霉、青霉、曲霉形态结构图。
根霉3、培养基种类。
(微生物营养)一、按对培养基成分的了解作分类:1、天然培养基:指一类利用动,植物或微生物包括用其提取物制成的培养基。
如牛肉膏蛋白胨培养基。
2、组合培养基:也叫组合培养基或综合培养基,是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。
例如:高氏一号培养基3、半组合培养基:又称半合成培养基,指一类主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些一类呈天然成分的培养基。
例如:马铃薯蔗糖培养基二、按培养基外观的物理状态作分类1、液体培养基:一类呈液体状态的培养基,在实验室和生产实践中用途广泛,尤其适用于大规模的培养微生物。
2、固体培养基:一类外观呈固体状态的培养基。
可分为固化培养基,非可逆性固化培养基,天然固态培养基和滤膜。
①固化培养基:加有琼脂或明胶或海藻酸钠②非可逆性固化培养基:血清培养基或无机硅胶培养基③天然固态培养基:由天然固态基质直接配制成的培养基④滤膜3、半固体培养基:指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态培养基,一般可在液体培养基中加入0.5%左右的琼脂制成。
例如:“稀琼脂”,“直立柱”4、脱水培养基:指除水以外的一切营养成分的商品培养基,使用时只要加入适量水分并加以灭菌,分装即可,是一类既有成分精确又有使用方便的现代化培养基。
三、按培养基对微生物的功能作分类1、选择性培养基:一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学,物理因素抗性的原理设计的培养基,具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能,广泛应用于菌种筛选等领域。
(选择性培养基包括:①酵母菌富集培养基②Ashby无氮培养基③Martin培养基④含糖酵母菌培养基)2、鉴别性培养基:一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。
EBM培养基。
例如:EMB培养基中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制G+细菌和一些难培养的G-细菌。
一、直接法: 1、侧体积法2、称干重法二、间接法:1、比浊法2、生理指标法例如:测含氮量法。
(1)直接法:①测体积法:它是一种较为粗放的方法,通常用于初步比较用。
例如将待测培养液放在刻度离心管中作自然沉降或进行一定时间的离心,然后观察沉降物的体积。
②称干重法:采用离心法或过滤法测定,一般干重为湿重的10%~20%。
如用离心法,将待测培养液离心,再用清水洗涤离心1~5次后干燥,可用105℃、100℃或红外线烘干,也可在较低的温度(80℃或40℃)下进行真空干燥,然后称干重。
如细菌一个细胞一般重10-12~10-13g。
如为丝状真菌可用滤纸过滤,细菌可用醋酸纤维膜等滤膜进行过滤。
过滤后,细胞可用少量水洗涤,再真空干燥(40℃以下),称干重。
以乳酸菌为例,在液体培养基中,细胞的浓度大约为2×108个/ ml。
100 ml培养物可得10~70mg干重的细胞。
(2)间接法:①比浊法:可用分光光度法对无色的微生物悬浮液进行测定,一般选用450~650nm波段。
若要连续跟踪某一培养物的生长动态,可用带有侧壁的三角烧瓶作原位测定(不必取样)②生理指标法:(a)测定细胞总含氮量来确定细菌浓度,大多数细菌的含氮量为干重的12.5%,酵母菌为7.5%,霉菌为6.0%。
总氮量与细胞粗蛋白的含量(因其中包括了杂环氮和氧化型氮)的关系可用下式计算:粗蛋白总量=含氮量%×6.25含氮量的测定方法有很多,常用凯氏定氮法。
此法适用于细胞浓度较高的样品,同时操作过程也较麻烦,主要用于科学研究中。
(b)含碳量的测定微生物新陈代谢的结果,必然要消耗或产生一定量的物质,以表示微生物的生长量。
一般生长旺盛时消耗的物质就多,或者积累的某种代谢产物也多。
将少量生物材料混入1ml水或无机缓冲液中,用2ml 2%重铬酸钾溶液在100℃下加热30分钟,冷却后,加水稀释至5ml,在580nm波长下测定光密度值(用试剂作空白对照,并用标准样品作标准曲线),即可推算出生长量。
(c)其它磷、DNA、RNA、A TP和 N–乙酰胞壁酸等的含量,以及产酸、产气、产CO2(用标记葡萄糖作基质)、耗氧、粘度和产热等指标,均可用于生长量的测定。
一、固体培养法 1、好氧菌的固体培养 2、厌氧菌的固体培养二、液体培养法 1、好氧菌的液体培养 2、厌氧菌的液体培养(一)固体培养法(1)好氧菌的固体培养:主要用试管斜面,培养皿琼脂平板及较大型的克式扁平,茄子瓶等进行平板培养。
(2)厌氧菌的固体培养:配置特殊的培养基,除了六种营养要素外,还得加入适当的还原剂,必要时加入刃天青等氧化还原电势指示剂。
具体培养方法:高层琼脂柱、厌氧培养皿、亨盖特滚管技术、厌氧罐、厌氧手套箱 (二)液体培养法 (1)好氧菌的液体培养具体培养方法:试管液体培养、三角瓶浅层液体培养、摇瓶培养、台式发酵罐 (2)厌氧菌的液体培养6、灭菌、消毒、防腐概念及高温灭菌种类,实际应用。
一、灭菌:采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。
还可分为:杀菌和溶菌。
二、消毒:消毒就是消除毒害,这里的“毒害”专指传染源或致病菌。
消毒是一种采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物有害的病原菌,而对被消毒的对象基本无害的措施。
例如:一些常用的对皮肤、水果、饮用水进行药剂消毒的方法,对啤酒、牛奶、果汁和酱油等进行的巴氏消毒法。
(1)高层琼脂柱 (2)厌氧培养皿 (3)亨盖特滚管技术 (4)厌氧罐 (5)厌氧手套箱(1)试管液体培养(2)三角瓶浅层液体培养 (3)摇瓶培养 (4)台式发酵罐三、防腐:防腐就是利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖,即通过制菌作用防止食品、生物制品等对象发生霉腐的措施。
①低温:4℃以下②缺氧:抽真空、充氮或二氧化碳、加除氧剂③干燥:晒干、烘干或红外线干燥④高渗:盐腌(15%以上)和糖渍(70%以上)⑤高酸度:泡菜⑥高醇度:用白酒或黄酒。
例如:醉蟹、醉笋⑦加防腐剂:防腐剂、防霉剂高温灭菌的种类:1、干热灭菌法①火焰灼烧法:接种环、接种针的灭菌或带病原体的材料、动物尸体的烧毁。
②烘箱内热空气灭菌法2、湿热灭菌法①常压法a.巴氏消毒法:对牛奶、啤酒、果酒或酱油的低温消毒方法1)低温维持法:用于牛奶消毒只要在63摄氏度下维持30min即可2)高温瞬时法:用于牛奶消毒时只要在72~85摄氏度下保持15s或120~140摄氏度下保持2—4s即可。
b.煮沸消毒法:采用在100摄氏度下煮沸数分钟的方法。
例:日常的饮用水消毒。
c.间歇灭菌法:适用于不耐热培养基的灭菌。
例:培养硫细菌的含硫培养基就可采用此方法。
②加压法a.常规加压蒸汽灭菌法:适用于一切微生物学实验室、医疗保健机构或发酵工厂中对培养基及多种器材或物料的灭菌。
b.连续加压蒸汽灭菌法:仅适用于大型发酵厂的大批培养基灭菌。
7、化学杀菌剂、消毒剂的使用浓度、机制及应用类型名称及使用浓度作用机制应用AgNO3:0.1%~1% 沉淀蛋白质,使其变性皮肤,滴新生儿眼睛重金属盐类CuSO4:0.1%~0.5% 与蛋白质的基结合使失活杀植病真菌与藻类石碳酸:3%~5% 蛋白质变性,损伤细胞膜地面,家具,器皿酚类煤酚皂(来苏尔):2% 蛋白质变性,损伤细胞膜皮肤蛋白质变性,损伤细胞膜,脱醇类乙醇:70%~75%皮肤,器械水,溶解类脂物品消毒,接种箱,接种室的熏醛类甲醛:0.5%~10% 破坏蛋白质氨基或氢键蒸精密仪器等的消毒高锰酸钾:0.1% 氧化蛋白质的活性基团皮肤,尿道,水果,蔬菜氧化剂过氧乙酸:0.2%~0.5% 氧化蛋白质的活性基团皮肤,塑料,玻璃,人造纤维表面活性剂新洁尔灭:0.05%~0.1% 蛋白质变性,破坏膜皮肤,黏膜,手术器械染料龙胆紫:2%~4% 与蛋白质的羧基结合皮肤,伤口最低抑制浓度:评定某化学药物药效强弱的标志,指在一定条件下,某药物毒性完全抑制特定微生物生长的最低浓度。
半致死剂量:是评定某药物毒性强弱的标志,指在一定条件下,某化学药剂能杀死50%试验动物时的剂量。
最低致死剂量:是评定某药物毒性的另一指标,指在一定条件下,某化学药物能引起试验动物群体100%死亡率的最低剂量。
8、用固体培养基分离微生物纯培养的三种方法。