延迟全身亚低温对永久性MCAO大鼠的神经保护作用和对神经元凋亡影响的研究
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血及取材时发现有蛛网膜下腔出血的均剔除。
图２ＭＣＡＯ制作示意图
２．４体温监测
采用恒方牌数字测温仪监测大鼠直肠温度，电子测温仪探头插入肛门内约５ｃｍ，并将探头导线在尾部固定，持续监测体温，以直肠温度代表全身深部体温，根据Ｃａｒｏｌｉｎａ等嗍的研究在直肠温度和脑温之间的关系如图３所示，脑温比直肠温度高Ｏ．２—０．７℃在ＭＣＡＯ的大鼠，因此直肠温度下降就能反映脑温的下降。
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图４ＭＣＡＯ后直肠温度．时间曲线
ＭＣＡＯ前Ａ、Ｂ、Ｃ三组大鼠直肠温度分别为３７．６６±－０．２４℃、３７．６２如．１３℃、３７．６１±０．３１℃，ＭＣＡＯ后体温逐渐下降，ＭＣＡＯ后１ｈ各组直肠温度均明显降低，依次为３６．０５±１．１３℃、３５．５９－！－０．８７℃、３５．８５±１．３６℃，之后逐渐升高。
Ａ组于ＭＣＡＯ后２ｈ时（直肠温度３７．６７±１．５９℃）再次麻醉、置入放有冰袋的饲养笼内后一并放入０。
Ｃ的冰箱，直肠温度在麻醉、低温的条件下半ｈ内降至３３℃左右，并在此后一直维持于３３土０．５℃，直至ＭＣＡＯ后２４ｈ。
Ｂ组ＭＣＡＯ后６ｈ时（直肠温度３９．１８±０．５３℃）再次麻醉、置入放有冰袋的饲养笼内后一并放入０４Ｃ的冰箱，直肠温度在麻醉、低温的条件下半小时内降至３３℃左右，并在此后一直维持于３３±０．５℃，直至ＭＣＡＯ后２４ｈ。
Ｃ组ＭＣＡ０后１ｈ大鼠直肠温度逐渐升高，约在ＭＣＡＯ后６ｈ时达到最高３９．５４ｔ＇－０．５９℃，此后均在３９℃上下波动如图４所示，直至ＭＣＡＯ后２４ｈ仍然达３９．２６：１：１．０１℃。
二、模型制备
３０只大鼠造模在激光多普勒的检测下均达到ＭＣＡＯ的缺血标准口９１，处死前进行Ｌｏｎｇａ评分时都有不同程度神经功能缺损，所有标本ＣＶ染色也都能见到ＣＶ染液不着色的梗塞灶。
大鼠ＭＣＡＯ后缺血程度用缺血后大脑中动脉脑血流（ＣＢＦｐｏｓｔ—ｉｓｃｈｅｍｉａ）如图６所示，与缺血前大脑中动脉脑血流（ＣＢＦｐｒｅ—ｉｓｃｈｅｍｉａ）如图５所示的比值表示。
图５缺血前大脑中动脉脑血流（ＣＢＦｐｍｉｓｃｈ∞ｉａ）为１２９灌注单位（Ｐｕ）
图６缺血前大脑中动脉脑血流（ＣＢＦｐｒｅ－ｉ∞ｈｅｍｉａ）４１ＰＵ
各组大鼠ＭＣＡＯ后的缺血程度如表６，缺血程度的比较如表７所示：
表６各组大鼠缺血程度（％）
均值的９５％置信区间
Ｎ均值标准差标准误下限上限Ａ组１０２７．４２７５２．６８４９８．８４９０７２５．５０６８２９．３４８２
Ｂ组１０２５．６８６２２．００６７１．６３４５８２４．２５０７２７．１２１７Ｃ组１０２７．１５９６２．９９５７６．９４７３４２５．０１６５２９．３０２６总数３０２６．７５７８２．６２２６９．４７８８４２５．７７８４２７．７３７１
表７备组大鼠缺血程度（％）的比较
９５％置信区间（Ｉ）组别（Ｊ）组别均值差（Ｉ－Ｊ）标准误Ｐ值下限上限
Ｃ组Ａ组－．２６７９３１．１６０７６．８１９－２．６４９６２．１１３８
Ｂ组１．４７３３３１．１６０７６．２１５－．９０８４３．８５５０
各组大鼠脑缺血程度：Ａｎ、Ｂ组、ｃ组ＭＣＡＯ后大脑中动脉脑血流与ＭＣＡＯ前大脑中动脉脑血流之比分别为２７．４２％－±２．６７％、２５６９％±２．０１％、２７．１６±３．００％。
三组问相比较Ｐ＞Ｏ．０５，各组大鼠脑缺血程度的差别没有统计学意义。
三、ＭＣＡＯ后２４ｈ死亡情况及神经功能缺损评分
１、ＭＣＡＯ后２４ｈ时Ａ组和Ｂ组实验大鼠全部存活，其中Ｂ组有１只昏迷；ｃ组有３只分别于缺血后１４ｈ、１６ｈ和１７ｈ死亡（解剖未见蛛网膜下腔出血，可见梗塞灶过大，中线结构明显左移），此外还有２只昏迷。
２、ＭＣＡＯ后２４ｈ进行ｋｍｇａ评分，各组评分如图７所示：
＊Ｐ＜Ｏ．ＯＯＯｌＡ组ⅦＣ组。
・＋砌．０５Ｂ组ｖｓＣ组．ＡＰ＝０．０９９Ａ组ｖｓＢ组
ＭＣＡＯ２４ｈ后Ａ、Ｂ、Ｃ各组的Ｌｏｎｇａ｛Ｓｌｚ分依次为１．１０±，０．３２、１．８０－Ｊ：１．１４、３．１４士－０．６９・
Ａ组与Ｃ组相比，Ａ组明显低于ｃ组，Ｐ＜０．０００１，有统计学意义；Ｂ组与Ｃ组相比，
Ｂ组明显低于Ｃ组，Ｐ＜０．０５，有统计学意义；Ａ组与Ｂ组相比，Ａｎ低于Ｂ组，但
Ｐ＝Ｏ．０９９，没有统计学意义。
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四、ＣＶ染色及梗塞灶体积占全脑体积的百分比之间的比较
１．ＣＶ染色效果，如图８所示：
左到右依次为Ａ组、Ｂ组、Ｃ组，白色即为梗塞灶，蓝色为正常脑组织。
２．如下图９中所示从左到右依次为Ａ、Ｂ、ｃ三组ＣＶ染色后ＬＥＩＣＡ图像采集系统的图像采集后照片，颜色减淡发白区域即为梗塞区。
图９中颜色减淡发白区域即为梗塞区，从左到右依次为Ａ、Ｂ、Ｃ三组ＣＶ染色后ｕ舵Ａ图像采集系统所采
集的图像。
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表１１各组间大鼠脑水肿程度（％）的比较
９５％置信区间
ｃ组．１２．０３１８４。
１．６７２１７．００１．１７．３３３５－６．７３０２
Ｃ组Ａ组１２．０３１８４＊１．６７２１７．００１６．７３０２１７．３３３５Ｂ组８．０１２８８’１．９４０９４００５２．５３８０１３．４８７７’．Ｐ＜ｏ．０５．差异显著。
Ａ组与Ｃ组相比，脑水肿程度明显减轻，Ｐ＝０．００１，有统计学意义；Ｂ组与Ｃ组相比，
脑水肿程度减轻也较明显，Ｐ－－０．００５，有统计学意义；Ａ组与Ｂ组相比，脑水肿程度也有减轻，Ｐ＝０．０１：２，有统计学意义。
五、ＴＵＮＥＬ染色结果
ｌ、正常细胞经甲基绿反然后为绿色，凋亡细胞ＴＵＮＥＬ染色阳性细胞为棕黄色，如图１０所示：
圈１０ＴＵＮＥＬ染色ｘ４００倍
图１０是ＴＵＮＥＬ染色ｘ４００倍照片，从左到右依次为Ａ组（①大脑皮质，④纹状体区
⑦丘脑区）、Ｂ组（②大脑皮质，⑤纹状体区，⑧丘脑区）及Ｃ组（③大脑皮质，
⑥纹状体区，⑨丘脑区）大脑皮质、纹状体及丘脑区ＴＵＮＥＬ染色。
