LC3000液相色谱仪操作规程
1、首先将色谱仪电源打开，让仪器进行预热。
2、进行样品前处理，以及流动相进行过滤和脱气，过滤流动相时使用溶剂过滤器，有机试剂使用有机膜，水使用水系膜。
过滤完后对其进行脱气处理。
注意脱气处理大概需要15-20分钟左右。
3、甲醇处理完后将其接入液路，然后将P3000泵的放空阀打开，并启动泵让甲醇充满液路，并保证没有汽泡，然后关闭放空阀。
也可借助外力（使用洗耳球或注射器）在放空阀处将液体吸过来再启动泵，这样可以省时间。
走30分钟，停止泵，等待泵没有压力。
换10%甲醇水冲洗30分钟以上。
停泵，等待压力降至0左右。
换流动相冲洗，查看管路中有无气泡，保证没有汽泡的情况下，启动泵。
4、双击CXTH-3000色谱工作站→点击CXTH-3000（中文版）→出现提示，关闭即可；→出现色谱数据处理及仪器控制面板界面。
5、在色谱数据处理及仪器控制面板界面中设置所分析样品的色谱条件，如果使用单泵操作时，先确定所用泵是A泵还是B泵。
点开时间程序中查看有无打［√］,如果有［√］；去掉√为［］。
6、设置参数：
6.1在基本控制栏中设置波长（nm) ,然后点击［！］确认。
时间常数、量程切换都为2.［切记开灯不要点］。
6.2设定流速（ml/min): 后点击［！］确认。
6.3设定最小压力为0，最大压力为35，如果数据已经符合，就不要改动。
6.4确定管路有无气泡，如果没有气泡，点击电脑上的第一个绿色图标（启动图标）
7、做样品之前，保证仪器先用色谱甲醇走30分钟，采集基线。
把满屏量程改至100，其他参数不变。
查看基线走直后，停止采集，进样。
8、如果分析的样品流动相中含有酸、盐，必须用甲醇：水（10:90）及（20:80）的甲醇水过渡40分钟左右。
即先用色谱纯甲醇走基线30min，停止泵，换上甲醇水走基线40min,再停止泵，更换为流动相。
注意：没走一步都要先确认管路中有无气泡后，才能启动泵。
9、等待流动相基线走直后方可进样，所进样品必须用0.45μm有机系滤头过滤。
进样之前，需手动停止泵（点击停止采集红色图标），待变成绿色的图标后，把进样阀扳到
LOAD状态，样品匀速推进后，迅速扳下进样阀（INJECT).自动采集数据。
10、等待图谱出完后，基线走直。
停止，保存图谱。
以此类推进样。
11、样品分析结束后，先停止泵，换甲醇水货甲醇冲洗仪器，冲至所做样品前的压力，即可停止泵，关机。
12、梯度程序操作：
12.1打开梯度混合器；
12.2在打开的工作站中的仪器控制面板中，点击时间程序，打开后，在运行时不使用基本控制中的参数，而使用本页的程序前打［√］，总运行时间不变。
12.3设定参数;
时间流速（ml/min) A B C D 波长(nm) 归零量程 0 1.00 50 50 0 0 按标准是 2 12.4设置好后，点击第一绿色图标采集基线，泵即可启动，走30min后，按停所有泵。
换上甲醇水或流动相。
12.5如果分析的样品流动相中含有酸、盐，必须用甲醇：水（10:90）及（20:80）的甲醇水过渡40分钟左右。
即先用色谱纯甲醇走基线30min，停止泵，换上甲
醇水走基线40min,再停止泵，更换为流动相。
12.6设置所分析样品的梯度条件（按照GB标准），设置好后点仪器控制面板中文件，另存设置。
即可保存梯度条件。
如果已存的梯度条件，可打开仪器控制面板中文件，引进设置，即可。
12.7条件设置好后，点击采集基线即可，启动泵。
把满屏量程改至100。
查看基
线，基线走直后，进样。
12.8进样前，先按停止采集（红色图标），变为绿色后，把过滤好的样品进入液相色谱（由LOAD状态，进样后，迅速扳下，到INJECT状态）自动采集图谱。
12.9等待图谱出完后，基线走直，停止采集（点击红色图谱），保存图谱，进入第二针，以此类推。
12.10样品分析完后，冲洗仪器同上（先用甲醇水冲洗40min后，最后用甲醇冲洗至做样前的压力即可。
停所有泵，关机。
13、谱图处理：
13.1做标准曲线：
13.1.1先打开已经做好的谱图，从低浓度到高浓度依次处理。
比如先将8mg/l 的图谱调查→点文件项→点打开→找所存位置的8mg/l的图谱打开→输入最小峰面积［］→点击黄色图标再处理（如有处理不掉的峰，点击对已检测出的峰进行手工取消成恢复）→点击定量计算后→点击定量组分（自动填全部套峰时间），填写组分名称、浓度后→点击定量方法，选择计算校正因子（标准样品）后→点击定量计算后→点击定量结果中当前表存档，提示入档成功，档中现有1档数据，点击确定。
13.1.2以此类推其它浓度，都存档成功后→点击定量方法→点工作曲线，点击计算后，点击显示。
查看标准曲线是否合格。
如合格，点击文件→存为模板，即可。
13.2样品处理：
13.2.1调出样品色谱图，输入最小峰面积→点黄色图标再处理→如有处理不掉的峰，点击对已检测的峰进行手工取消或恢复点击定量计算后→点击定量组分（自动填全部套峰时间），填写组分名称→调出曲线→点定量方法，选择多点校正（基于工作曲线）后→点击定量计算后→点击定量结果，查看样品浓度即可。
代入公式计算。
13.2.2如果不需要标准曲线的，直接打开色谱图，鼠标应在峰中间，右击后点击峰尺寸，点看峰面积，代入公式计算。
14、注意事项：
将色谱工作站CXTH-3000打开，将各项参数设置好（因为本工作是可以反控仪器的，因此仪器的常规操作是可以在工作站上完成的），然后点击采集基线按扭，这时可以看如果基线比较平直了，就可以停止采集基线，这时可以将待测的样品打到进样阀里，（样品必须用0.45um滤头过滤，过滤后方可进样）。
并将进样阀的手柄扳至LOAD位置，把过滤好的标样用进样针匀速推进，扳到INJECT位置。
因为有进样阀有触发线连接工作站，所以扳阀的同时色谱工作站已经进行谱图采集的操作了。
等待图谱出完后，按红色的图标进行手动停止，保存图谱。
在以此类推进样。
1)采样结束后可以对谱图及定量结果进行相关操作，并得出结果。
如果需要打
印可以将谱图数据进行打印。
2)实验结束后，还需要用纯甲醇对整个液中进行冲洗，也就是将流动更换成纯
甲醇，检查管路中有无气泡。
如有气泡，排气。
无气泡直接启动泵，运行30分钟左右。
如果实验过程中流动相配制中含有缓冲盐的话，需要。
先用10%的甲醇水溶液冲洗30分钟以上。
然后再用纯甲醇冲洗。
3)还有需要注意的时，如果实验过程中流动相配制中含有缓冲盐的话，需要准
备一瓶纯水放到试剂盒上，将泵头后冲洗的细管一端接到瓶中，一端接到一个废液瓶中，利用虹吸原理，将泵头柱塞后进行在线冲洗。
如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！。
