热原检查法标准操作规程
目的：
建立热原检查的基本操作，为热原检查人员提供正确的操作规程。
2.依据：
《中华人民共和国药典》2000年版二部。
3.范围：
本标准适用于采用家兔法进行的热原检查的操作。
4.职责：
QC热原检查操作人员对本标准的实施负责。
5. 程序：
5.1.实验材料及用具：
5.1.1. 天平（精度50g，家兔称重用）。
5.1.2.电热干燥箱(50~300±1)℃
5.1.3.保温箱(室温+3~60)℃
5.1.4.智能热原检测仪。
5.1.5.家兔固定盒
5.1.
6.实验用具：注射器、针头、刻度吸管、锥形瓶、硫酸纸、砂轮、洗耳球、金
属直镊、注射器盒、时钟、75%酒精棉球、手术镊。
5.1.7. 稀释剂：灭菌注射用水、氯化钠注射液。
5.2. 供试品溶液的配制：
5.2.1.打开洁净台的风机及照明开关，并用75%酒精棉球擦拭台面消毒。
5.2.2. 用75%酒精棉球擦手消毒。
5.2.3. 取供试品适量，置锥形瓶中，并标明批号。
5.2.4. 加入规定的稀释剂，制成符合规定浓度的供试品溶液，锥形瓶瓶口用经过灭菌的硫酸纸封好，放入保温箱中，温热至约38℃。
5.2.5. 供试品配制完毕后，应在30分钟内注射于家兔体内。
5.3. 实验动物：应符合规定。
见家兔预选操作规程（SOP ZL5001）。
5.4. 实验前的准备：
5.4.1. 智能热原检测仪探头应每月校验一次，见智能热原检测仪使用规程（SOP ZL0058）。
5.4.2. 用具的除热原：所有与药液接触的器具，都必须清洗干净后，置电热干燥箱
中经250℃、30分钟加热除热原。
注射器、针头、手术镊清洗干净后，放入注射器盒内，密闭，放入电热干燥箱中经250℃，30分钟加热除热原。
5.4.3. 实验室的温度：
实验室的温度应在（17-28）℃范围内
实验室与饲养室的温度相差不得大于5℃
试验全过程中，室温变化不得大于3℃
5.5. 检查法：
5.5.1.选符合规定的家兔，停止给饲料和水，称重后置于家兔固定盒中至少1小时。
5.5.2.每隔30分钟测量家兔体温一次，一般测量两次。
两次体温之差不得超过0.2 ℃，以此两次体温的平均值作为该兔的正常体温。
5.5.3.测量体温时，测温探头插入肛门的深度和时间各兔应相同。
深度为6cm，时
间约为1分半钟。
5.5.4. 当日使用的家兔，正常体温应在（38.0-39.6）℃范围内，且各兔间相差不得
超过1℃。
5.5.5. 每个供试品用家兔3只，在测定正常体温后15分钟内给药。
供试品的剂量，
应按各该药项下的规定注射。
注射前，先用75%酒精棉球轻擦家兔耳静脉的注射部位，从耳尖端静脉进针，如进针不利，则顺序向前进行。
5.5.7. 注射完毕，拔出针头时，用75%酒精棉球按压针孔数秒钟，止血，注射时间一般每只家兔不超过3分钟。
5.5.8.每隔30分钟，按前法测家兔体温一次，共测6次。
5.6. 温差计算：
5.6.1.注射药液后，以6次测得体温中最高的一次减去正常体温，为该兔体温的升
高度数，如6次体温均低于正常体温，则升温度数以“0”计。
5.6.2.6次体温中最低的一次，减去正常体温，即为降温值。
5.7. 结果判断：
5.7.1.判断复试：
5.7.1.1 初试3只家兔中仅有1 只体温升高0.6℃或0.6℃以上，或3 只家兔升温均在0.6℃以下，但升温的总数达1.4℃或1.4℃以上，应另取5只家兔复试，检查方法同上。
5.7.1.2. 3只家兔中有一只降温值≥0.6℃，或3只家兔中有2只降温值在0.45~0.55℃,应另取3只家兔复试。
5.7.2. 判断符合规定：
初试3只家兔中，体温升高均在0.6℃以下，并且3只家兔升温的总数在1.4℃以下，可判断为符合规定。
复试5只家兔中，体温升高0.6℃或0.6℃以上的家兔数仅有1 只，并且初复试合并，8只家兔的升温总数为3.5℃或3.5℃以下，可判断为符合规定。
5.7.3. 判断不符合规定：
5.7.3.1. 初试3只家兔中，体温升高0.6℃或0.6℃以上的家兔数，有2只或3只，可判断为不符合规定。
5.7.3.2. 复试的5只家兔中，体温升高0.6℃或0.6℃以上的家兔有2 只或2只以上，可判断为不符合规定。
5.7.3.3. 初复试合并8只家兔的升温总数超过3.5℃，可判断为不符合规定。
注意事项：
5.8.1. 热原实验室内外，均应保持安静，避免强烈直射的日光或灯光及其它刺激。
5.8.2.在试验过程中，避免家兔骚动，保持体温稳定并注意相对湿度保持稳定。
5.8.3.试验过程中，家兔因肛门出血过多，造成升温或降温超过规定时应复试。
6. 本标准引用本公司内部标准：
家兔预选操作规程SOP ZL5001；
温度计校正规程SOP ZL0058。
7. 附：
热原检查记录ZL0083 00。
