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高效液相色谱快速测定茶叶中儿茶素的含量罗晓明;蒋雪薇【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2003(020)001【摘要】分析了酸的种类及pH对高效液相色谱(HPLC)法测定表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表没食子儿茶素(EGC)、儿茶素(C)和咖啡因的影响,实验表明:酸尤其是乙酸不仅能改善各组分的峰形,而且对保留时间和出峰顺序均有较大的影响.确定了简单、快速分析5种儿茶素及咖啡因的高效液相色谱分析方法.采用C18反相柱,水-甲醇-乙酸(73.0/23.0/2.0)为流动相,在流速为1.0 mL*min-1,柱温30℃,检测波长280 nm时等度洗脱分析样品,分析时间仅为25 min, 线性范围为0.8～90 mg*mL-1(r=0.998～0.999),回收率为98.2%～100.3%,检测限为5～10 ng.【总页数】3页(P46-48)【作者】罗晓明;蒋雪薇【作者单位】长沙电力学院分析测试中心,湖南,长沙,410015;长沙电力学院分析测试中心,湖南,长沙,410015【正文语种】中文【中图分类】TS202;O657.72【相关文献】1.高效液相色谱法测定茶黄酊中儿茶素和表儿茶素的含量 [J], 刘刚;谭生建;姜韧;张华2.高效液相色谱法测定茶叶中儿茶素含量 [J], 林俐莎;葛建;杨晶晶;韩帅玮琦;邓丽娟;韩宝瑜3.反相高效液相色谱法测定青荚叶中表儿茶素含量 [J], 刘利娥;李红萍;吴予明;刘洁;于斐;张洪权4.高效液相色谱法测定茶叶中儿茶素含量的不确定度评定 [J], 罗凡;费学谦;丁明5.高效液相色谱法对"黄金菊"茶中儿茶素和氨基酸组分含量的测定 [J], 江新凤;李琛;石旭平;蔡翔;岳翠男;李文金;杨普香因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
·５０６·ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｍａＩｏｆＭｅｄｉｃｉｎａＩＧｕｉｄｅ２００７Ｖｏｌｕｍｅ９Ｎｏ．６（ＳｅｒｉａｌＮｏ．５３）ＨＰＬＣ法快速测定茶多酚中儿茶素类及咖啡因含量李萌王华燕胡文祥＋刘接卿（首都师范大学化学系，北京１０００３７）【摘要】目的：建立茶多酚中４种儿茶素类成分（ＥＧｃ、ＥＧＣＧ、ＥＣ、ＥＣＧ）和咖啡因的ＩｔＰＬＣ等度洗脱一次进样检测方法。
方法：采用Ｃ１８色谱柱，流动相为水：甲醇：乙酸＝７３：２３：２的等度洗脱反相Ｉ－ＩＰＩ．Ｅ法在１６ｒａｉｎ内完成检测。
结果：样晶分析时，除ＥＧＣＧ的色谱峰分离度＞１外，其它各组分的分离度均＞１．５；各组分的加样回收率在９８．８８％一１０１．８５％之间。
结论：该检测方法准确、稳定、重复性好，可正确定量茶多酚中的５种组分。
【关键词】儿茶素；ＨＰＬＣ；咖啡因ｆ中图分类号】Ｒ４４６．１１＋１【文献标识码】Ａ【文章编号】１００９—０９５９（２０ａｒ７）０６一０５０６—０２ＨＰＬＣＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＣａｔｅｃｈｉｎｓａｎｄＣａｆｆｅｉｎｅｉｎＴｅａＰｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ“Ｍｅｎｇ，ＷａｎｇＨｕａ—ｙａｎ，ＨｕＷｅｎ—ｘｉａｎｇ，ｅｔａ１．（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＣａｐｉｔａｌＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００３７，Ｃｈｉｎａ）【ＡＢ涨Ｃｒ：ｌＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｖｅｌｏｐＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃａｔｅｃｈｉｎｓ（ＥＧＣ，ＥＧＣＧ，Ｅｅ，ＥＣＧ≯ａｎｄｃａｆ－ｆｅｉｎｅｉｎｔｅａｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓａｎｄｔｏｑｕａｎｔｉｆｙｆｉｖｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓｗｉｔｈｉｎｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｅｓｔｕｄｙＷａＳａｃｈｉｅｖｅｄｕｓｉｎｇＣ１８ｃｏｌｕｍｎｗｉｔｈｗａｔｅｒ／ｍｅｔｈａｎｏｌ／ａｃｅｔｉｃａｃｉｄ（７３／２３／２，∥ｖ／ｖ）ｗｉｔｈｉｎ１６ｍｉｎｕｔｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ｎｅｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓｉｎｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅａＨａｂｏｖｅ１．５髓ｃｅｐｔＥＧＣＧ；Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｗｅｒｅ９８．８８％一１０１．８５％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｗａｓａｃｃｕｒａｔｅ，ｓｔａｂｌｅ，ｅｘｃｅｌｌｅｎｔｒｅｐｒｏｄｕｅｉｂｉｌＰｔｙａｎｄｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆｔｅａｐｏｔｙｐｈｅｎｏｌｓ．１１ＫＥＹＷＯＲＤＳ】ｃａｔｅｃｈｉｎｓ；ＨＰＬＣ；ｃａｆｆｅｉｎｅ茶叶含有多种生理活性物质，具有优良的饮用性和独特的药理作用。
关于茶叶中儿茶素类提取方法的探讨作者：徐惠群，魏蔚来源：《现代食品》 2019年第19期徐惠群，魏?蔚（武义县质量技术检验检测中心，浙江?武义?321200）Xu Huiqun, Wei?Wei(Wuyi Quality and Technology Inspection and Testing Center, Wuyi?321200, China)摘?要：2018年新颁布的GB/T 8313-2018《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》规定，一般茶叶中儿茶素类的测定采用HPLC的方法。
在此基础上，本文对样品提取的条件进行改进。
采用甲醇溶解标准品，同时改进提取方法，采用加盖密封、增加提取次数、超声提取等方法对样品进行提取，利用高效液相色谱仪在波长278 nm处进行检测。
流动相采用国家标准方法，分离度＞1.5。
实验结果表明：水浴提取3次，其相对标准偏差为0.06%～1.24%，方法的回收率为83.01%～119.9%，其相对标准偏差均在0.65%～1.76%；采用超声提取的方法，其相对标准偏差为0.60%～1.61%，方法的回收率为83.00%～116.80%，相对标准偏差均在0.57%～4.08%。
关键词：茶叶；儿茶素；高效液相色谱；提取方法Abstract：At present, the test of catechin in tea is generally based on thefirst method of HPLC in GB/T 8313-2018. We improved the conditions of sample extraction. Using methanol to dissolve the standard product, and improve the extraction method. The samples are extracted by sealing the lid, increasing the number of times of extraction and ultrasonic extraction, and effectively improving the recovery rate. High performance liquid chromatograph was used to detect at 278 nm wavelength. The mobile phase adopts the national standard method, and the separation degree can be more than 1.5. The relative standard deviation of 3 timesis 0.06%～1.23%, the recovery rate of the method is 83.01%～119.9%, the relative standard deviation is from 0.65% to 1.76%, the relative standard deviation is0.50%～1.62% with the ultrasonic extraction method, the recovery rate of the method is 83%～116.80, and the relative standard deviation is 0.57% to 4.08%.Key words：Tea; Catechin; HPLC; Determination method中图分类号：TQ914.1茶多酚是茶叶中30多种多酚类物质的总称，过去茶多酚又称茶揉质、茶单宁，因其绝大部分能溶于水，所以又称水溶性的糠质。
茶叶中儿茶素类物质的含量测定方法比较研究茶叶中的儿茶素类物质是茶叶的主要活性成分之一，对人体健康具有多种益处。
因此，准确测定茶叶中儿茶素类物质的含量对于茶叶加工和消费者选择茶叶具有重要意义。
随着科技的发展和科研水平的提高，出现了多种测定茶叶中儿茶素类物质含量的方法。
本文将对其中的方法进行比较研究，以期为茶叶行业提供科学依据和指导。
一、高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是目前广泛应用于儿茶素含量测定的方法之一。
该方法通过将茶叶中的儿茶素类物质溶解并分离后，利用具有高灵敏度的检测器进行测定。
该方法具有准确度高、灵敏度好、分离效果好等优点，能够分析茶叶中多种儿茶素的含量。
然而，该方法的仪器设备较为昂贵，操作复杂，需要较长的分析时间，对于一些小型茶叶生产企业来说可能不太适用。
二、紫外光谱法紫外光谱法也是一种常用的测定茶叶中儿茶素含量的方法。
该方法利用儿茶素类物质在紫外光下的吸收特性，通过测量茶叶浸出液的吸光度来确定儿茶素的含量。
紫外光谱法操作简便，成本相对较低，适用于一些实验室和小型茶叶企业。
然而，该方法只能估测总儿茶素的含量，对于不同种类的儿茶素类物质的分析能力较弱。
三、自动显微镜法自动显微镜法是一种近年来新兴的儿茶素含量测定方法。
该方法通过对茶叶中儿茶素类物质的细胞结构进行显微观察和图像分析，以评估茶叶中儿茶素的含量。
该方法具有非破坏性、快速、简便等优点，能够准确测定茶叶中儿茶素的分布情况。
然而，该方法需要高性能的显微镜和先进的图像处理软件等设备，成本较高，不适用于一些资源有限的茶叶企业。
四、核磁共振法核磁共振法是一种先进的儿茶素含量测定方法，通过测量茶叶中儿茶素类物质在核磁共振谱图上的峰面积或峰高来计算其含量。
该方法具有准确性高、可定量多个成分等特点，能够同时测定茶叶中多种儿茶素类物质的含量。
然而，核磁共振法设备昂贵，对于资源有限的茶叶企业来说不太经济实用。
综上所述，茶叶中儿茶素类物质的含量测定方法主要包括高效液相色谱法、紫外光谱法、自动显微镜法和核磁共振法。
分析检测HPLC法同时测定茶叶中咖啡因和儿茶素胡旭倩1,2，唐销蓉1,2，姚菲菲1,2，骆 灿1,2（1.赞宇科技集团股份有限公司，浙江杭州 310009；2.浙江金正检测有限公司，浙江义乌 322000）摘 要：本文旨在建立HPLC法同时测定茶叶中的5种儿茶素类（EGC、C、EC、EGCG、ECG）及咖啡因（CAF）的方法。
结果表明，5种儿茶素类和咖啡因在0.2～2.0 mg/mL的范围内线性良好，相关系数为0.999 11～0.999 95，RSD为0.24%～0.57%，方法回收率为95.9%～100.6%。
本方法简单、准确、重现性好，可用于茶叶中儿茶素类和咖啡因的定量检测。
关键词：茶叶；HPLC；儿茶素类；咖啡因茶多酚具有抗氧化、抗肿瘤、抗菌、调血脂和降血糖等药理作用,被广泛应用于食品、医药保健品、功能性饮料和化妆品中[1-3]。
儿茶素是茶多酚的主成分，也是其主要的药理活性物质，占茶多酚含量的60%～80%[3-5]。
1 材料和方法1.1 仪器与试剂Agilent 1260超高效液相色谱仪（配紫外检测器）（美国Agilent公司）；超声波振荡器（昆山禾创超声仪器有限公司）；数显恒温水浴锅（常州国华电器有限公司）；涡旋混合仪（上海精科实业有限公司）；纯水净化仪（杭州永洁达净化科技有限公司）；甲醇为色谱纯（美国大地公司）；甲酸为分析纯（上海安谱实验科技股份有限公司）。
1.2 方法1.2.1 流动相的配制①流动相A（0.1%甲酸水）。
1 000 mL水中加入1 mL 的甲酸，超声脱气备用。
②流动相B（0.1%甲酸甲醇）。
1 000 mL甲醇中加入1 mL的甲酸，超声脱气备用。
1.2.2 标准溶液配制（1）标准储备溶液的配制。
准确称取儿茶素（C）、表没食子儿茶素（EGC）、表儿茶素（EC）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、表儿茶素没食子酸酯（ECG）和咖啡因（CAF）0.100 0 g（精确到0.000 1 g）于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成浓度约为2.0 mg/mL的标准储备液。
HPLC法同时检测茶叶中八种儿茶素黑龙江医药HeilongjiangMedicineJournalV o1.24No.52011?681?药品检验?HPLC法同时检测茶叶中八种儿茶素张戎睿,王舒雅,王富济,杨磊,祖元刚,张宝友东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室(哈尔滨150040)摘要建立一种茶叶中多组分儿茶素的HPLC测定方法.将茶叶用80℃热水超声提取20min,提取液离心分离后,采用KromasilCI8(250mmx4.6mm,5m)色谱柱分离,以水一乙腈一磷酸(49.95:50:0.05,V:V)为流动相A,水一乙腈一磷酸(95.45:4.5:0.05,V:V)为流动相B,进行梯度洗脱,流速为0.5mL/min,柱温25℃,紫外检测波长231nm.在给定的浓度范围内,各儿茶素组分的峰面积与其相应浓度呈现良好的线性相关,R>0.9950.添加已知儿茶素含量的回收试验结果显示,各组分儿茶素的平均回收率为94.8%一110.8%,相对标准偏差≤2%.关键词:儿茶素;茶叶;HPLC.中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1006—2882(2011)05—681—03 SimultaneousDeterminationofEightCatechinsinChinese TeabyHighPerformanceLiquidChromatographyZhangRongrui,etalKeyLabm~toryofForestPlantEcology,MinistryofEducation,NortheastForestryUniversit y(Harbin150040,China)Abstract:Ahishperformanceliquidchromatographymethodwasdevelopedforthedetermin ationofmulticomponentcat—eclfinsinChinesetea.Catechinsintheteawereextractedwith80℃hotwaterbysonicationfor20rain.Theextractionsolu? tionwascentrifugedandfiltratedforHPLCanalysis.ItwascarriedonaKromasilC18(250m m×4.6mnl,5Ixm)Columnatthetemperatureof25cCunderUVdetectorwith231nm.Chromatographicseparationwaspe rformedbydeliveringthemobilephase,A:water—acetonitrile—phosphoricacid(49.95:50:0.05,v:v)andB:water—acetonitfile—phosphoricacid(95.45:4.5:O.05,v:v)ataflowrateof0.5mL/min.Therestfltsshowedthattheconcentrationofthecate chinsandtheirpeakareasachievedgoodlinearrelation,R2>O.9950.Therecoverieswerebetween94.8%一110.8%,andtheRSDswerebelow2%.Keywords:catechins;Chinesetea;highperformanceliquidchromatography茶多酚是从茶叶中提取的混合型抗氧化剂,是茶叶中儿茶索类物质的总称,具有明显的抗衰老,消除人体过剩的自由基…,去脂减肥,降低血糖,血脂和胆固醇],预防心血管疾病】,抑制肿瘤等药理功能】,在食品加工,医药,日用化工等领域具有重要的应用』.茶多酚的分离和应用受到国内外广泛关注引,开拓了以农副产物为原料的"绿色技术"和"绿色工程"新领域.本实验建立一种同时测定茶叶中的8种儿茶素的HPLC方法,结果表明,8种儿茶素在同一色谱条件下均得到较好分离,并可进行含量测定,为该商品的质量控制提供依据.1试剂与仪器1.1材料及试剂8种儿茶素单体化合物:儿茶素(catechin,C),表儿茶素(epicatechin,EC),没食子儿茶素(gallocateehin,GC),表没食子儿茶素(epigallocatechin,EGC),儿茶素没食子酸酯(cat—ecltingallate,CG),表儿茶索没食子酸酯(epicatechingallate,ECG),没食子儿茶索没食子酸酯(gaUoeatechingallate,GCG)和表没食子儿茶素没食子酸酯(epigaHocatechingal-late,EGCG),结构式如图1所示,其标准品均购自Sigma公司,纯度98%;乙腈,甲醇,磷酸为色谱纯,购自美国DimaTechndogyInc.公司,去离子水采用Millipore超纯水仪自制;其余试剂均为国产分析纯.龙井产地为杭州龙顶山,碧螺春产地江苏苏州,Ytl~f-J红茶产地为安徽黄山,铁观音产地为福建安溪,普洱茶产地为云南大理,购于哈尔滨茶城.第一作者:张戎睿(1986一),女,黑龙江哈尔滨人,硕士研究生,生药学及健康食品研究工作.王舒雅(1985一),女,内蒙古呼伦贝尔人,硕士研究生,生药学及健康食品研究工作. 通讯作者:祖元刚(1954一)男,教授,博士,博士生导师,植物化学和植物药研发.基金项目:"十一五"国家科技支撑计划(2006BADI8B04)资助682?黑龙江医药HeilongjiangMedicineJournalV oL24No.52011n∞碳t?"删忡∞}舯(EqIJ曲|硇Kx{p嘲时帅?}棚'叼"{氍r幅Gr.1期∞蝴口钟I蜘蹄"唰瞄0ca'g~a蕊∞'图1儿茶素分子结构1.2仪器日本Jasco高效液相色谱仪;Jasco1575型紫外检测器;Ja8eo1580型二元泵;JascoVersion6.1色谱工作站;岛津uV一260紫外分光光度计;KQ一250DB型超声波清洗器(昆山市超声波仪器有限责任公司);3K一30超速离心机(Sigma公司产品);Milli～Q超纯水仪(美国Millipore公司).2色谱条件色谱条件:色谱柱为KromasilCl8(250mill×4.6mm,5txm);检测波长:=231rim;流动相:A为水一?乙腈一磷酸(49.95:50:0.05,V:V),B为水一乙腈一磷酸(95.45:4.5:0.05,V:V),梯度洗脱程序如表1所示;柱温为25cC;流速为0.5mL/min;进样量为10p.L.儿茶素得到较好分离,如图2所示.L上n盛止土LL止L图2儿茶素标准品和茶叶提取物的色谱表l梯度洗脱流程Time(rain)010153050606580流动相A(%)1O102O2O5O5O9O90流动相B(%)9O9O8O8O5O50l01O3方法与结果3.1样品的制备取市售商品茶叶于研钵中研磨粉碎,精密称取0.5g茶叶粉末,用温度为80℃热水超声提取2Omin,取适量上清液以12,000r/min离心10min,然后取上清,用0.45/xm滤膜过滤,待测.3.2标准曲线的绘制精密称取EGCG标准品25mg用色谱甲醇定容至25 mL,制成浓度为1mg/mL标准品储备液.分别精密量取储备液0.5,1.0,2.0,4.0和8.0mL分置10mL容量瓶中,加色谱甲醇稀释至刻度,摇匀,作为标准溶液.以峰面积x对浓度Y(p,g/mL)进行线性回归,回归方程为:Y=0.0654x+ 0.O2o7,R2=0.9989.结果表明,进样浓度在68.8至689.8~.g/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系.用同样的方法得到,其他7种儿茶素的标准曲线和线性范围,如表2所示. 表2儿茶素标准曲线方程和线性范围3.3检测限LOD和定量限LOQ将浓度为0.5p.g/mL的EGCG标准品溶液用色谱甲醇稀释后进样,按信噪比3:1计,EGCG的最低检测限为o.4ng/mL,按信噪比10:1计其最低定量限为3.5ng/mL.同样的方法得到其他7种儿茶素的检测限和定量限,C,EC,GC, EGC,CG,ECG和GCG的最低检测限分别为0.5,1.8,0.5,0.7,2.1,4.6和0.7ng/mL,定量限分别为5.2,12.1,4.9,9.1,23.2,32.7和l2.4ng/mL.3.4精密度试验取标准曲线中线性范围内的低浓度90g/mI和高浓度500trg/mL的标准溶液,在上述色谱条件下,分别连续进样6次,所得到的峰面积的RSD值如表3所示.表3精密度试验及其重复性试验结果3.5回收率试验'以杭州龙井为空白基质,添加已知几茶索含量的标准品,按所述方法进行回收试验,以平均回收率表示方法的准确度,分别平行测定6份,结果如表4所示.表4回收率实验结果C5O.094.81.9100.096.72.0EC5O.O1o6.91.8100.0104.01.3黑龙江医药HeilongiiangMedicineJournalV ok24No.52011?683? EGCG50.0107.2l|2100.0110.81.63.6样品测定取不同产地的市售茶叶按3.1中的方法制备样品,用所建立的方法测定其儿茶索的含量,每个样品重复测定3次,经测定后各样品中儿茶素成份含量结果如表5所示.表5五种茶叶中的儿茶索含量注:ND一未检出4讨论由于茶叶提取液中与儿茶素保留时间相近的物质较多,为了达到基线分离的目的,必须延长保留时间,减小流动相中甲醇的量,最后选用水和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,8种几茶索均得到较好分离,成分互不干扰而且茶叶中的其他成分对儿茶索的测定基本不形成干扰J.将各种对照品溶液及供试品溶液用色谱甲醇适当稀释后,以色谱甲醇为空白,在200～400nm波长范围内扫描,供试I铺溶液及对照品溶液扫描峰形基本一致,在200—250nm 和250—3o0nm波长段有最大吸收.在波长段200—250rml内,色谱峰较多,但是色谱峰较为杂乱,分离度极差;而在波长段250～300nnl内,色谱峰峰数较多,分离度较好,并且大部分酚类组分都有较大的响应值.所以应该在波长段200—250nm内筛选检测波长.通过细致的比较分析后发现,在231nm处检测的色谱图,色谱峰数目较多,各色谱峰响应值较大,并且分离度良好,故选择231rim为检测波长[9.10].对不同品种的茶叶进行了考察,结果表明,不同品种的茶叶中儿茶素含量差别很大,其中杭州龙井中儿茶素含量最高,祁门红茶含量最低.这可能是因为茶叶受生长环境,生长时间及加工条件等因素影响的缘故In].建立了茶叶中儿茶素多组分含量测定的HPLC分析方法.通过线性试验,回收试验,精密度试验以及样品的测定,验证了方法的可行性,本方法灵敏度高,分离度好,测定结果准确可靠,为茶叶及茶饮料质量控制提供科学,有效的检测手段.参考文献[1]CaturlaN,V era—SamperE,VillalainJ,eta1.Therelationshipbe? tw~:ntheantioxidantandtheantibacterialpropertiesofgalloylated catechinsandtheslrnctureofphospholipidmodelmembranes[J].FreeRadicalBiologyangMedicine,2003,34(6):648-662.[2]WangX,SongKs,GuoQX,et以Thegalloylmoietyofgreenteacatechinsisthecriticalstructuralfeaturetoinhibitfatty—acid synthase[j].BiochemicalPharmacology,2003,66:2039—2047.[3]张冬英.邵宛芳.刘仲华,等.普洱茶功能成分单体降糖降脂作用研究[J].茶叶科学,2009,29(1):41-46.[4]ChanD,WangCY,LambertJD,etaLInhibitionofhumanliver catechol-O—-methyltransferasebyteacatechinsandtheirmetab—olites:stn~cture—activityrelationshipandmolecular—modeling studies[J].Bioct~raicalPharmacology,2005,69:1523—1531. [5]McCarthyS,CaporaliA,EnkcmannS,eta1.Greenteacatechins suppresstheDNAsynthesismarkerMCM7intheTRAMPmodel ofprostatecancer[J].Mo~calarOncology,2007,1:196—204. [6]DumareyM,NederkasselAV,DeconinckE,eta1.Explorationof linearmuhivariatecalibrationtechniquestopx~tictthetotalall—tioxidantcapacityofgreenteafromchromatographicfingerprints [J].JournalofChromatographyA,2008,1192:81—88.[7]PalmaM,PineiroZ,BarrosoCGStabilityofphenoliccompounds duringextractionwithsuperheatedsolvents[J].JournalofCh matographyA,2001,921:169—174.[8]吴迪,杨丽珠,仇佩虹,等.茶中儿茶素的分离分析方法研究进展[J].分析科学,2008,24(4):468-472.[9]ChcnH,ZuoYG,DengYSeparationanddeterminationoffla—vonoidsandotherphenoliccompoundsincranberryjulcebyhigh—perfommnceliquidchromatography[J].JournalofChromatog- raphyA,2001,913:387—395.[10]JungIK,SeungBH,KyungH凡Effectofparticlesizeinpro—parativereversed—phasehigh—performanceliquidchromatogra- phyOiltheisolationofepigallocateehingallatefromKoreangreen tea[J].JournalofChromatographyA,2002,949:275-280.[11]EungwanichayapantPD,Poplucchais.Accumulationofcare?chinsinteainrelationtoaccumulationofmRNAfromgenesin—volvedincatechinbiosynthesis[J].PlantPhysiologyandBio- chemistry,2oo9,47:94—97.收稿13期:2011—06—28LmLLL7啪0OO0O吡吡7O499LLLc;52O75蚍mOOO00孤∞麟黜。
儿茶素总量的测定方法儿茶素是一种丰富的抗氧化剂，具有多种生物活性，在食品、药物等领域得到广泛应用。
准确测定儿茶素总量对于产品质量的保证至关重要。
本文将针对儿茶素总量的测定方法进行详细介绍，包括色谱法、分光光度法等几种常用的测定方法，并对其适用范围、操作步骤、优缺点等进行分析，以期为相关研究和生产提供参考。
一、儿茶素总量的测定方法1. 色谱法色谱法是一种常用的儿茶素总量测定方法，包括高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）。
色谱法通过将样品中的儿茶素分离，并以不同的特征参数进行检测和定量，具有较高的测定精度和灵敏度。
2. 分光光度法分光光度法是另一种常用的儿茶素总量测定方法，通过测定儿茶素在特定波长下的吸光度来计算样品中的儿茶素含量。
这种方法操作简单，成本较低，适用于一般实验室条件下的儿茶素总量测定。
3. 其他方法除了色谱法和分光光度法，还有一些其他的测定方法，如电化学法、光化学法等。
这些方法在特定条件下也可以准确测定儿茶素总量，但在实际应用中较少使用。
二、色谱法测定儿茶素总量的操作步骤1. 样品制备将待测样品按照标准操作方法进行制备，包括样品提取、溶解、滤除杂质等步骤，以得到纯净的儿茶素溶液。
2. 色谱条件设置根据样品的特性以及实验要求，确定色谱柱、流动相、检测波长等色谱条件，以保证儿茶素的分离和检测。
3. 样品注射将制备好的样品溶液通过自动进样器引入色谱柱中，进行样品的分离和检测。
4. 儿茶素含量计算通过比对待测样品的色谱峰面积与标准物质的色谱峰面积，计算出儿茶素在样品中的含量，并根据所用标准物质的浓度进行定量计算。
三、色谱法测定儿茶素总量的优缺点1. 优点色谱法测定儿茶素总量具有分离效果好、检测灵敏度高、结果准确可靠等优点，尤其适用于儿茶素样品中多种成分的测定。
2. 缺点色谱法操作复杂，需要高昂的仪器设备和耗材，且对操作人员的技术要求较高，因此成本相对较高，同时需要较长的分析时间。
四、分光光度法测定儿茶素总量的操作步骤1. 样品制备同色谱法，对于待测样品需要进行适当的提取和制备，以保证样品中的儿茶素在适当溶剂中均匀溶解。
一种快速检测茶叶中儿茶素的HPLC方法邓永亮;冯雷;吕才有【摘要】该方法能够同时测定普洱茶中右旋儿茶素(+C)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、没食子儿茶素(GC)、儿茶素没食子酸酯(CG)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)和没食子酸(GA)九种儿茶素组分,各组分获得了理想的分离,且具有良好的线性关系.本方法快速、准确、重复性好,适用于普洱茶中上述9种儿茶素组分的定性及定量分析.%The nine components in tea, including D-catechin ( +C), epicatechin (EC), epigallocatechin( EGC) , epicatechin gallate (ECG) , epigallocatechin gallate ( EGCG) ,gallocatechin(GC) , catechin gallate (CG) , gallocatechin gallate (GCG)and gallic acid(GA) nine components in tea were simultaneously determined by HPLC method. Using the method, the separation of each component was ideal, and with a good linear relationship. The method was rapid, accurate, reproducible and suitable for the qualitative and quantitative analysis of nine components of catechinsin the Puer tea.【期刊名称】《西南农业学报》【年(卷),期】2011(024)003【总页数】4页(P932-935)【关键词】普洱茶；儿茶素；HPLC法；没食子酸【作者】邓永亮;冯雷;吕才有【作者单位】云南农业大学龙润普洱茶学院，云南昆明，650201;云南省产品质量监督检验中心，云南昆明，650223;云南农业大学龙润普洱茶学院，云南昆明，650201【正文语种】中文【中图分类】S571.1茶叶中所含的多酚类物质是一类存在于茶水中的多元酚的混合物。
HPLC法快速测定茶多酚中儿茶素类及咖啡因含量
李萌;王华燕;胡文祥;刘接卿
【期刊名称】《中国医药导刊》
【年(卷),期】2007(9)6
【摘要】目的:建立茶多酚中4种儿茶素类成分(EGc、EGCG、EC、ECG)和咖啡因的HPLC等度洗脱一次进样检测方法.方法:采用C18色谱柱,流动相为水:甲醇:乙酸=73:23:2的等度洗脱反相HPLC法在16min内完成检测.结果:样品分析时,除EGCG的色谱峰分离度＞1外,其它各组分的分离度均＞1.5;各组分的加样回收率在98.88%～101.85%之间.结论:该检测方法准确、稳定、重复性好,可正确定量茶多
酚中的5种组分.
【总页数】2页(P506-507)
【作者】李萌;王华燕;胡文祥;刘接卿
【作者单位】首都师范大学化学系,北京,100037;首都师范大学化学系,北
京,100037;首都师范大学化学系,北京,100037;首都师范大学化学系,北京,100037【正文语种】中文
【中图分类】R446.11
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儿茶素的提取分离和测定方法嘿，咱今儿就来聊聊儿茶素这玩意儿！儿茶素啊，那可是个宝呢！先说说提取儿茶素吧。
这就好比从一堆杂物里找出你最想要的那个宝贝。
一般呢，可以用溶剂提取法，就像用一把神奇的钥匙去打开宝库的门。
把含有儿茶素的原料放进去，再加上合适的溶剂，然后让它们好好地“泡个澡”，儿茶素就会乖乖地跑出来啦！还有其他的方法呢，比如超声波提取法，就像是给儿茶素来一场特别的“音乐会”，让它们兴奋地蹦出来。
提取出来了，接下来就得分离啦！这就像是把一群小伙伴分开，让它们各自找到自己的位置。
可以用层析法呀，让儿茶素们顺着一条“小路”走，不同的儿茶素就会在不同的地方停下来，这不就分开了嘛！还有膜分离法，就好像给儿茶素们设置了不同的“通道”，让它们按照规定好的路线走。
那怎么知道提取和分离得好不好呢？这就得靠测定方法啦！好比给儿茶素们来一场考试，看看它们的“成绩”咋样。
有高效液相色谱法，这可是个厉害的“裁判”呢，能精确地检测出儿茶素的含量。
还有分光光度法，就像是给儿茶素们拍了张特别的照片，从照片里就能看出个大概。
你想想，要是没有这些方法，我们怎么能好好地利用儿茶素呢？咱平时喝的茶里就有不少儿茶素呢，它对我们的身体可有好处啦！能抗氧化，就像给我们的身体穿上了一层保护衣，能让我们更健康呢！那提取分离和测定儿茶素难不难呢？当然不容易啦！这可得需要专业的知识和技术呢。
但咱科学家们厉害呀，他们不断地研究和改进方法，让我们能更好地了解和利用儿茶素。
所以说呀，儿茶素的提取分离和测定方法可真是太重要啦！没有它们，儿茶素就不能好好地为我们服务啦！咱可得好好感谢那些研究这些方法的人呢！你说是不是呀？这就是儿茶素的奇妙世界，充满了挑战和惊喜，等着我们去探索呢！。
HPLC法测定儿茶素(Catechins)
1)试剂
a. 甲醇（色谱纯）
b. 冰醋酸（分析纯）
c.甲酰胺（色谱纯天津科密欧）
d.
纯净水
2)仪器
高效液相色谱仪（Shimadzu）分析天平（1/10000）
超声波清洗仪0.45 μm 微孔过滤器
50 ml 容量瓶带塞小玻璃瓶
3)色谱条件
色谱柱Shim-pack ODS C18 5 μm 4.6⨯150 mm
波长278 nm
流动相A: 水B: 甲酰胺:甲醇:冰醋酸=40:2:1.5（V/V/V）
流速 1.0 mL/min
进样量10 μL
4)样品制备
（1）待测样品精确称取30 mg提取物于50 mL容量瓶中，用水超声溶解，冷却定容，0.45 μm微孔滤膜过滤为供试液。
若为原料，精确称取3.0g原料于椎形瓶中，加入450 mL沸水（蒸馏
水），于水浴锅中煮45 min，每隔10 min摇动一次，用棉花进行粗滤
至500 mL的容量瓶中，冷却定容，用滤纸精滤，0.45 mm微孔滤膜过
滤，取10 μL滤液上HPLC分析。
(2)标样制备精密称取各标准品适量用水溶解，过0.45μm滤膜，置冰箱
贮存，备用。
5)计算
根据各峰峰面积利用外标法计算各种成份的含量。
备注：出峰顺序依次为CAF、EGC、DL-C、EC、EGCG、GCG、ECG。
