从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序
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从业人员健壮体检沙门氏菌、志贺氏菌检测支配步调之阳早格格创做一、手段本步调用于对付从业人员健壮体检举止沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的要领,以典型支配步调,包管检测数据的灵验性.两、适用范畴:本要领适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分散、审定及死存的梯相闭支配.三、死物仄安央供标本及相映的致病菌支配必须正在BSL-2死物仄安真验室的死物仄安柜中举止.四、试剂及仪器设备采便盒、Cary-Blair运支培植基、亚硒酸删菌液(SF)、改良亚硒酸盐磺绿删菌肉汤(SBG)、沙门志贺培植液、木糖-好氨酸-脱氧胆酸琼脂(XLD)、麦康凯琼脂、沙门隐色培植基、结晶紫沙门培植基(YS)、三糖铁(TSI)、能源-吲哚-尿素培植基(MIU)、沙门氏菌属诊疗血浑、志贺氏菌属诊疗血浑、API20E死化试剂条、磁珠菌种死存管4.2 仪器设备恒温培植箱、微死物审定仪五、采样要领5.1 标本应为新陈的或者变化至Cary-Blair运支培植基的粪便或者肛拭子,最劣标本是变化到Cary-Blair运支培植基的粪便拭子.肛拭子没有是最好标本,仅正在病人无粪便标本时采与.5.2 粪便标本:应支集自然排出的新陈粪便,与密火样、粘血样、脓血样,黏液样部分.衰于浑净、搞燥、无吸火性的无菌容器,预防混进尿液、火战其余物量.标本:若无法赢得粪便(如排便艰易或者婴幼女),也不妨采与肛拭子,即无菌棉拭子用死理盐火干润后,拔出肛门内4-5cm处〈女童约2-3cm),共一目标沉沉转动2-3周.以目测能睹到粪便为准.拔出Cary-Blair运支培植基.5.4 标本支集后坐时支至真验室举止检测,若室温死存,没有克没有及超出1h;如没有克没有及坐时支检,应搁进Cary-Blair运支培植基中热躲条件下24小时内支检.六、考验步调七、支配步调7.1 分别标记表记标帜一个XLD仄板(或者YS仄板、麦康凯仄板)战1管9ml改良亚硒酸盐磺绿删菌肉汤(SBG)(或者SF删菌液或者沙门志贺培植液).7.2 用1个无菌拭子与少量标本(没有要使拭子粘得太多,尽管从可睹血或者黏液的部位支集)交种正在XLD仄板的第一区,交着把拭子搁进SBG删菌液.再灭菌交种环正在XLD仄板的其余区举止划线交种.如果是Cary-Blair运支培植基的粪便拭子,则沉搅混同标本后交种删菌液与仄板.7.3 所有培植基均搁进36℃±1℃培植,SBG的最好删菌时间是16~18h(修议每天下午4~5时交种标本,第两天早上8~10时用删菌液划仄板).7.4 瞅察仄板:与培植后的仄板,瞅察有无可疑菌降.XLD仄板可疑菌降瞅察:志贺菌正在XLD仄板上为粉白或者无色、透明、光润、干润、边沿整齐、圆形菌降,曲径1-2mm,而大部分的大肠杆菌类的菌降为黄色、浑浊、凸起、干润、边沿整齐或者没有准则,曲径2-3mm.大普遍沙门菌正在XLD仄板上核心乌色的透明、光润、干润、边沿整齐、圆形的菌降.(图2)7.4.2YS仄板可疑菌降瞅察:7.4.3麦康凯仄板可疑菌降瞅察:志贺菌正在麦康凯仄板上为无色至浅粉色、半透明、光润、干润、边沿整齐或者没有准则、圆形菌降,曲径2-3mm;大普遍沙门菌为无色菌降,粉白色,戴或者没有戴乌心,伤热沙门菌为无色菌降;而大部分的大肠杆菌类的菌降为粉白或者白色、浑浊、凸起、干润、边沿整齐或者没有准则,曲径3-4mm.7.4.4SBG肉汤删菌:SBG删菌16~18小时后,划线交种XLE仄板或者沙门隐色仄板,搁进36℃±1℃培植18~24h.沙门隐色仄板可疑菌降瞅察:典型的沙门菌正在沙门隐色仄板上为紫色的菌降,曲径2-3mm.修议的发端筛查规划(发端死化特性睹表1):表1沙门菌、伤热沙门菌、志贺菌及罕睹肠讲菌的发端死化特性A:粪便(或者肛拭子)SBG或者SF删菌XLD 分散交种TSI战MIUB:粪便(或者肛拭子)SBG或者SF删菌 YS分散交种TSI战MIUC:粪便(或者肛拭子)SBG或者SF删菌 XLD 战麦康凯分散交种TSI战MIUD:粪便(或者肛拭子)SBG或者SF删菌 YS战沙门隐色分散交种TSI战MIUE:粪便(或者肛拭子)SBG或者SF删菌XLD 战沙门隐色分散交种TSI战MIU7.5 死化发端审定每个仄板挑与3~5个分散较好的单个可疑菌降,分别交种到三糖铁(TSI)战能源-吲哚-尿素培植基(MIU),36℃±1℃培植18~24h.沙门菌战志贺菌的死化特性睹表2.7.6 系统死化考查沙门菌战志贺菌发端审定阳性菌经转种营养琼脂单,与单个菌降举止系统死化审定(不妨使用APE20E或者齐自动死化审定系统举止).志贺菌血浑教考查.1挑与死化反应真筛切合志贺菌的营养琼脂斜里,最先用四种多价血浑搞玻片凝集反应(4种多价包罗:A群1、2型;B群战D群).凝集者则用B群多价、D群战A1、A2、血浑分别凝集..2若多价血浑没有凝集,大概为C群或者A群的3~12型,应举止C群的四种多价战A群另三种多价血浑搞玻片凝集.沙门菌血浑教考查.1挑与死化反应真筛切合沙门菌的营养琼脂斜里,最先用A-F群O多价血浑搞玻片凝集反应..2若凝集可按罕睹O果子检出频次,依照O4→O10→O9→O7→O8→O19→O2→O11程序凝集..3 H抗本凝集所有凝集阳性的菌降,皆要共时用死理盐火搞凝集考查,惟有没有出现自凝时,才不妨报告阳性截止.8 截止报告8.1 正在发端死化审定切合后,不妨先将可疑菌降举止革兰氏染色,末尾概括死化及血浑教截止,不妨报告检出(或者已检出)沙门菌(或者志贺菌).对付于从业人员体检截止已经纳进考验硬件管制的单位,不妨曲交正在考验硬件中录进相映截止.8.3 其余单位不妨安排博门的报告要领反馈给支检单位或者支检科室,考验报告中应起码包罗姓名,性别,年龄,体检编号,检测截止.8.4 检测截止为阳性,不妨报告为已检出肠讲沙门菌战志贺菌;检测截止为阳性,根据检测情况报告简曲的型别.8.5 考验部分该当死存所有受检样品的基础疑息,检测到阳性标本,该当死存仔细的检测记录,根据需要提供给支检单位或者科室,以及上级交易单位.9 菌株的死存对付于死化及血浑教截止切合沙门菌或者志贺菌的菌株用磁珠死存管死存菌种,搁进-20℃或者-70℃死存,依照相闭央供上支菌株.。
沙门氏菌检测操作规程1 原理沙门氏菌的检测需要四个连续的阶段见下图:1.1 用非选择性液体培养基预增菌将试料接种到缓冲蛋白胨水(BPW),在36℃±1℃下培养16~20h。
(样品中可能存在少量的沙门氏菌却含大量的肠杆菌科的其他菌,所以选择性增菌是必须的;为了检测受伤的沙门氏菌,常须进行预增菌。
)1.2 在选择性液体培养基上增菌将1.1中的培养物接种到四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液和亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液中。
于TTB增菌液内42℃±1℃培养18h~24h;SC 增菌液内36℃±1℃培养18h~24h。
1.3 初步筛选将1.2的培养物接种到以下两个选择性培养基:亚硫酸铋(BS)琼脂、木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂,于36℃±1℃分别培养40h~48h(BS 琼脂平板)或18h~24h(XLD 琼脂平板),根据菌落特性,辨别可疑沙门氏菌菌落。
1.4再次筛选挑出1.3中的可疑沙门氏菌菌落,在沙门氏菌显色培养基中培养再次筛选,再用合适的生化和血清学试剂进行鉴定。
2 试剂与仪器2.1所用器具三角烧瓶、玻璃珠、具塞试管、培养皿、1000μL枪头、5mL枪头、称量勺、接种环、接种针2.2 仪器:分析天平、恒温培养箱、微型振荡器、超净工作台、高压灭菌锅2.3 所用试剂和培养基2.3.1缓冲蛋白胨水培养基(BPW)称取BPW培养基20.1g,加入蒸馏水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,以90mL/瓶分装到各锥形瓶,并于121℃灭菌15 min,冷至常温。
2.3.2 四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液取TTB增菌液基础93.6g,加入蒸馏水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装于锥形瓶中,每瓶100mL。
将锥形瓶放入灭菌锅中,121℃灭菌20min;冷至30℃,每100mL基础培养基中加入TTB配套试剂碘液和煌绿各一支(开启前用75%酒精棉消毒西林瓶表面),混合均匀。
2.3.3 亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液取SC培养基23g,加入蒸馏水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装锥形瓶,冷至常温备用。
沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式沙门氏菌是一种常见的细菌引起的食源性疾病,可能会导致严重的胃肠道感染。
为了保障食品安全,确保公众的健康,我们需要进行沙门氏菌的国标检验。
下面是一份生动、全面且有指导意义的文章,详细介绍了沙门氏菌检验的国标检验步骤和接种方式。
第一步:样品准备在进行沙门氏菌检验之前,我们首先需要准备样品。
常见的样品包括食品、水、动物排泄物等,可能携带沙门氏菌。
样品应该收集自具有代表性的地点,并采取无菌采样容器进行收集。
收集样品时要注意避免污染,并确保样品的数量足够进行检验。
第二步:样品处理样品处理的目的是将潜在的沙门氏菌分离出来,并进行后续的检测。
可以采用不同的方法进行样品处理,常见的方法包括富集培养和选择性培养。
富集培养是将样品放入富集培养基中,利用培养基中的营养物质以及特定条件促使沙门氏菌生长。
选择性培养则是利用培养基中的特殊抑制剂抑制其他细菌的生长,从而使沙门氏菌生长出来。
第三步:菌落鉴定在样品处理后,我们需要对培养基上的菌落进行鉴定,确认是否为沙门氏菌。
常见的鉴定方法包括形态学鉴定、生理生化鉴定和分子生物学鉴定。
形态学鉴定主要通过观察菌落的形状、颜色和大小等特征来判断细菌的种类。
生理生化鉴定则是通过检测菌落对特定物质的代谢情况来确定细菌的种类。
分子生物学鉴定是利用特定的DNA序列来识别沙门氏菌的基因,通常使用PCR技术进行检测。
第四步:抗菌药敏试验沙门氏菌的抗菌药敏性检测是为了确定对何种抗生素具有敏感性。
通过抗菌药敏试验,我们可以选择合适的药物来治疗感染。
可以使用各种常见的抗生素盘进行试验,然后观察沙门氏菌对不同抗生素的反应。
根据抗生素的抑菌效果,可确定沙门氏菌的耐药性情况。
第五步:结果分析与报告最后一步是对检验结果进行分析,并撰写检验报告。
检验结果要结合国家标准进行评估,确定样品是否合格。
如果样品中检测到沙门氏菌,还需要评估其数量以及对公众健康可能造成的风险。
在撰写报告时,需要详细记录样品的来源、处理方法、检验步骤和结果,以及相应的建议和措施。
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序(讨论稿)从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序一、目的本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的方法,以规范操作程序,保证检测数据的有效性。
二、适用范围:本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保存的梯相关操作。
三、生物安全要求标本及相应的致病菌操作必须在BSL-2生物安全实验室的生物安全柜中进行。
四、试剂及仪器设备4.1试剂采便盒、Cary-Blair运送培养基、亚硒酸增菌液(SF)、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG)、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂(XLD)、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基(YS)、三糖铁(TSI)、动力-吲哚-尿素培养基(MIU)、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管4.2 仪器设备恒温培养箱、微生物鉴定仪五、采样方法5.1 标本应为新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子,最优标本是转移到Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。
肛拭子不是最佳标本,仅在病人无粪便标本时采用。
5.2 粪便标本:应采集自然排出的新鲜粪便,取稀水样、粘血样、脓血样,黏液样部分。
盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器,避免混入尿液、水和其他物质。
5.3肛拭标本:若无法获得粪便(如排便困难或婴幼儿),也可以采用肛拭子,即无菌棉拭子用生理盐水湿润后,插入肛门内4-5cm 处〈儿童约2-3cm),同一方向轻轻旋转2-3周。
以目测能见到粪便为准。
插入Cary-Blair运送培养基。
5.4 标本采集后立即送至实验室进行检测,若室温保存,不能超过1h;如不能立即送检,应放入Cary-Blair运送培养基中冷藏条件下24小时内送检。
六、检验程序七、操作步骤7.1 分别标记一个XLD平板(或YS平板、麦康凯平板)和1管9ml改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG)(或SF增菌液或沙门志贺培养液)。
沙门氏菌核酸检测标本采集、送检、处理流程1. 引言沙门氏菌是一种常见的食物中毒细菌,其感染可导致急性肠道疾病。
为了准确、及时地检测沙门氏菌感染,核酸检测成为了一种重要的方法。
本文档将介绍沙门氏菌核酸检测的标本采集、送检及处理流程。
2. 标本采集为了确保沙门氏菌核酸的准确检测,标本采集是至关重要的一步。
以下是标本采集的步骤和要求:步骤:1. 手部清洁:操作人员应充分清洁双手,并佩戴一次性手套。
2. 样本选择:根据病情和临床需要,选择适当的标本类型进行采集,如食物、粪便、尿液等。
3. 采集:选择干燥、无菌的作为标本采集。
4. 采集样本:使用一次性取样棒、针管或无菌等工具,采集标本。
5. 标注信息:在采集上标注病人信息、样本类型、采集时间等重要信息。
要求:1. 采集过程要严格遵守无菌操作规范,以避免污染。
2. 避免采集其他细菌的污染,如需采集其他类型的标本,应分别采集。
3. 对于不同类型的标本,采集方法和采样量可能有所不同,需根据实际情况进行调整。
3. 送检标本的送检是确保准确检测的重要环节。
以下是标本送检的步骤和要求:步骤:1. 标本保存:采集后的标本需尽快送至实验室,如不能立即送达,应妥善保存,避免细菌培养。
2. 防护包装:将标本放置在密封的防护袋中,以防止泄漏和污染其他物品。
3. 标注信息:在防护袋上标注病人信息、样本类型、采集时间等重要信息。
要求:1. 标本运送时需遵守相关的规定和卫生要求,确保安全无菌。
2. 标本的运输温度应符合要求,避免温度过高或过低导致样本损坏。
3. 有条件的实验室可直接安排快递公司提供专业的运送服务。
4. 处理流程所送检的标本在实验室内需要进行一系列的处理步骤,以便准确检测沙门氏菌核酸。
以下是处理流程的步骤和要求:步骤:1. 样本接收:实验室接收标本后进行登记、确认信息,并记录进实验室管理系统。
2. 样本处理:根据标本类型和实验需要,进行样本的处理,如离心、溶解、分离等。
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序一、目的本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的方法,以规范操作程序,保证检测数据的有效性。
二、适用范围:本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保存的梯相关操作。
三、生物安全要求标本及相应的致病菌操作必须在BSL-2生物安全实验室的生物安全柜中进行。
四、试剂及仪器设备4.1试剂采便盒、Cary-Blair运送培养基、亚硒酸增菌液(SF)、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG)、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂(XLD)、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基(YS)、三糖铁(TSI)、动力-吲哚-尿素培养基(MIU)、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管4.2 仪器设备恒温培养箱、微生物鉴定仪五、采样方法5.1 标本应为新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子,最优标本是转移到Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。
肛拭子不是最佳标本,仅在病人无粪便标本时采用。
5.2 粪便标本:应采集自然排出的新鲜粪便,取稀水样、粘血样、脓血样,黏液样部分。
盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器,避免混入尿液、水和其他物质。
5.3肛拭标本:若无法获得粪便(如排便困难或婴幼儿),也可以采用肛拭子,即无菌棉拭子用生理盐水湿润后,插入肛门内4-5cm处〈儿童约2-3cm),同一方向轻轻旋转2-3周。
以目测能见到粪便为准。
插入Cary-Blair运送培养基。
5.4 标本采集后立即送至实验室进行检测,若室温保存,不能超过1h;如不能立即送检,应放入Cary-Blair运送培养基中冷藏条件下24小时内送检。
六、检验程序七、操作步骤7.1 分别标记一个XLD平板(或YS平板、麦康凯平板)和1管9ml改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG)(或SF增菌液或沙门志贺培养液)。
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序一、目的本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的方法,以规范操作程序,保证检测数据的有效性。
二、适用范围:本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保存的梯相关操作。
三、生物安全要求标本及相应的致病菌操作必须在BSL-2生物安全实验室的生物安全柜中进行。
四、试剂及仪器设备4.1试剂采便盒、Cary-Blair运送培养基、亚硒酸增菌液(SF)、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG)、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂(XLD)、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基(YS)、三糖铁(TSI)、动力-吲哚-尿素培养基(MIU)、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管4.2 仪器设备恒温培养箱、微生物鉴定仪五、采样方法5.1 标本应为新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子,最优标本是转移到Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。
肛拭子不是最佳标本,仅在病人无粪便标本时采用。
5.2 粪便标本:应采集自然排出的新鲜粪便,取稀水样、粘血样、脓血样,黏液样部分。
盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器,避免混入尿液、水和其他物质。
5.3肛拭标本:若无法获得粪便(如排便困难或婴幼儿),也可以采用肛拭子,即无菌棉拭子用生理盐水湿润后,插入肛门内4-5cm处〈儿童约2-3cm),同一方向轻轻旋转2-3周。
以目测能见到粪便为准。
插入Cary-Blair运送培养基。
5.4 标本采集后立即送至实验室进行检测,若室温保存,不能超过1h;如不能立即送检,应放入Cary-Blair运送培养基中冷藏条件下24小时内送检。
六、检验程序七、操作步骤7.1 分别标记一个XLD平板(或YS平板、麦康凯平板)和1管9ml改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG)(或SF增菌液或沙门志贺培养液)。
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序一、目的本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的方法,以规范操作程序,保证检测数据的有效性。
二、适用范围:本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保存的梯相关操作。
三、生物安全要求标本及相应的致病菌操作必须在BSL-2生物安全实验室的生物安全柜中进行。
四、试剂及仪器设备4.1试剂采便盒、Cary-Blair运送培养基、亚硒酸增菌液(SF)、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG)、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂(XLD)、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基(YS)、三糖铁(TSI)、动力-吲哚-尿素培养基(MIU)、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管4.2仪器设备恒温培养箱、微生物鉴定仪五、采样方法5.1标本应为新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子,最优标本是转移到Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。
肛拭子不是最佳标本,仅在病人无粪便标本时采用。
5.2粪便标本:应采集自然排出的新鲜粪便,取稀水样、粘血样、脓血样,黏液样部分。
盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器,避免混入尿液、水和其他物质。
5.3肛拭标本:若无法获得粪便(如排便困难或婴幼儿),也可以采用肛拭子,即无菌棉拭子用生理盐水湿润后,插入肛门内4-5cm处〈儿童约2-3cm),同一方向轻轻旋转2-3周。
以目测能见到粪便为准。
插入Cary-Blair运送培养基。
5.4标本采集后立即送至实验室进行检测,若室温保存,不能超过1h;如不能立即送检,应放入Cary-Blair运送培养基中冷藏条件下24小时内送检。
六、检验程序七、操作步骤7.1分别标记一个XLD平板(或YS平板、麦康凯平板)和1管9ml改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG)(或SF增菌液或沙门志贺培养液)。
7.2用1个无菌拭子取少量标本(不要使拭子粘得太多,尽量从可见血或黏液的部位收集)接种在XLD平板的第一区,接着把拭子放入SBG增菌液。
健康人群体检中肠道沙门氏菌属和志贺氏菌属的带菌情况常规检测分析发表时间:2017-07-13T17:08:11.573Z 来源:《中国蒙医药》2017年第6期作者:杨柳青[导读] 沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌,它因1885年沙门氏等在霍乱流行时分离到猪霍乱沙门氏菌而命名。
桃江县疾病预防控制中心湖南桃江 413400【摘要】目的通过常规检测分析了解我县健康人群体检中志贺氏菌属以及肠道沙门氏菌属的带菌状况。
方法随机选取2013年1月~2016年12月我县进行体检的38462例健康人群作为受检对象,分别进行志贺氏菌属以及肠道沙门氏菌属的检测,并对检出的两种菌属进一步进行血清分型以及分群的分析。
结果 38462例健康人群中共检出志贺氏菌属+沙门氏菌属共115株,其中沙门氏菌属的数量最多,共检出104株,带菌率0.27%;而志贺氏菌属则检出11株,带菌率0.03%。
其中沙门氏菌属2014年~2017年带菌率分别为0.24%、0.27%、0.30%、0.30%,呈逐年递增发展,而志贺氏菌则相对发展平稳。
104株沙门氏菌分布于A、B、C、D、E共五个血清群的20个血清型中,其中以B血清群分布居多,共有69株占比66.35%,其次为C血清群分布22株(21.15%);11株志贺氏菌分布于A、B、C三个血清群的8个血清型中,其中以B血清群分布居多,共有9株占比72.73%,其次为C血清群分布2株(18.18%)。
结论在我地区的健康人群中,肠道沙门氏菌属和志贺氏菌属普遍存在,尤其是沙门氏菌,且血清型群分布较广,在日常体检中应加强对两种菌属的检测,密切关注并防止阳性带菌者的漏检。
【关键词】健康人群;体检;肠道沙门氏菌;志贺氏菌;带菌情况[Abstract] objective to understand my county health check-up crowd through routine testing analysis of intestinal salmonella species and volunteers hayes bacterial pathogen. Methods randomly selected from January 2013 to December 2016,my county examined 38462 cases of healthy people as tested object,respectively to the intestinal salmonella species and hayes species for regular detection,and the detection of two kinds of bacteria is the analysis of the serotype distribution group. Results checked out of a total of 38462 cases of healthy people salmonella species and hayes species 115 strains,the majority with salmonella is a common detected 104 strains,the carrier rate 0.27%;Hayes bacterial detection 11 strains,the carrier rate of 0.03%. Salmonella is a 2014-2014,the carrier rate were 0.24%,0.27%,0.30%,0.30%,is increasing year by year,and chi hayes bacteria were relatively steady development. 104 strains of salmonella in A,B,C,D,E,A total of five in the group of 20 of the serum type,among them the majority with serogroup B distribution,A total of 69 strains accounted for 66.35%,followed by distribution of serogroup C 22 strains (21.15%);11 strains hayes bacteria in A,B,C three group of eight of the serum type,among them the majority with serogroup B distribution,A total of 9 strains accounted for 72.73%,followed by group C serum distribution of two strains(18.18%). Conclusion the healthy crowd in my region,intestinal salmonella species and hayes species are widespread,especially on salmonella,a wide distribution and serotype group,in daily physical examination should be strengthened for two kinds of bacteria of the genus detection,pay close attention to and prevent the residual positive carrier.[Key words] healthy people;Physical examination;The intestinal salmonella;Will hayes bacteria;The carrier is沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌,它因1885年沙门氏等在霍乱流行时分离到猪霍乱沙门氏菌而命名;志贺氏菌属又称为痢疾杆菌,是人群中最常见的细菌性痢疾病原菌[1]。
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序一、目的本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的方法,以规范操作程序,保证检测数据的有效性。
二、适用范围:本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保存的梯相关操作。
三、生物安全要求标本及相应的致病菌操作必须在BSL-2 生物安全实验室的生物安全柜中进行。
四、试剂及仪器设备4.1试剂采便盒、Cary-Blair运送培养基、亚硒酸增菌液(SF)、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂(XLD、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基(YS、三糖铁(TSI)、动力-吲哚-尿素培养基(MIU)、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管4.2仪器设备恒温培养箱、微生物鉴定仪五、采样方法5.1标本应为新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子,最优标本是转移到Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。
肛拭子不是最佳标本,仅在病人无粪便标本时采用。
5.2粪便标本:应采集自然排出的新鲜粪便,取稀水样、粘血样、脓血样,黏液样部分盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器,避免混入尿液、水和其他物质。
5.3肛拭标本:若无法获得粪便(如排便困难或婴幼儿),也可以采用肛拭子,即无菌棉拭子用生理盐水湿润后,插入肛门内4-5cm处〈儿童约2-3cm),同一方向轻轻旋转2-3 周。
以目测能见到粪便为准。
插入Cary-Blair运送培养基。
5.4标本采集后立即送至实验室进行检测,若室温保存,不能超过1h;如不能立即送检, 应放入Cary-Blair运送培养基中冷藏条件下24小时内送检。
六、检验程序七、操作步骤7.1分别标记一个XLD平板(或YS平板、麦康凯平板)和1管9ml改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG (或SF增菌液或沙门志贺培养液)。
7.2用 1 个无菌拭子取少量标本(不要使拭子粘得太多,尽量从可见血或黏液的部位收集)接种在XLD平板的第一区,接着把拭子放入SBG增菌液。
从业人员健康体检沙门氏菌志贺氏菌检测操作程序沙门氏菌和志贺氏菌是一些常见的细菌,可以引起人类食物中毒和肠道感染等疾病。
因此,对从业人员进行沙门氏菌和志贺氏菌的健康体检是非常重要的。
下面是针对这两种细菌的检测操作程序。
1.提供样本:从业人员需要提供适当的样本,用于沙门氏菌和志贺氏菌的检测。
常见的样本包括粪便、尿液和食物样本等。
样本的收集要求应严格,确保样本的纯净度和完整性。
2.样本处理:提供的样本需要经过处理,以获得纯净的细菌DNA或RNA,用于后续的分子生物学检测。
处理样本的步骤包括样本离心、细胞裂解和DNA/RNA提取。
3.PCR扩增:PCR是一种常见的分子生物学方法,用于扩增特定的DNA或RNA片段。
在沙门氏菌和志贺氏菌检测中,特定的引物被设计用于扩增细菌基因组中的特定片段。
扩增后的DNA片段可以被进一步分析和检测。
4.凝胶电泳:通过凝胶电泳,可以将PCR产物进行分离和检测。
在沙门氏菌和志贺氏菌检测中,特定的DNA片段会显示出特定的凝胶电泳带。
这些带的大小和形状可以被用来确定是否存在沙门氏菌或志贺氏菌。
5.检测结果分析:通过观察凝胶电泳结果,可以确定样本中是否存在沙门氏菌或志贺氏菌。
根据带的大小和形状,可以进一步确定细菌的亚型和毒力。
这些数据将被用于最终的健康体检结果分析。
6.健康体检报告:基于对沙门氏菌和志贺氏菌的检测结果分析,健康体检报告将被生成。
该报告将包含从业人员的健康状况,特别是其是否携带沙门氏菌或志贺氏菌的情况。
这将帮助雇主或相关部门采取适当的措施,以保护从业人员和公众的健康。
以上是沙门氏菌和志贺氏菌检测的操作程序。
这些步骤需要严格的操作和规范,以保证结果的准确性和可靠性。
同时,在操作过程中需要遵守相关安全和卫生规定,确保从业人员和实验室工作人员的安全。
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序一、目的本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的方法,以规范操作程序,保证检测数据的有效性。
二、适用范围:本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保存的梯相关操作。
三、生物安全要求标本及相应的致病菌操作必须在BSL-2生物安全实验室的生物安全柜中进行。
四、试剂及仪器设备4.1试剂采便盒、Cary-Blair运送培养基、亚硒酸增菌液(SF)、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG)、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂(XLD)、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基(YS)、三糖铁(TSI)、动力-吲哚-尿素培养基(MIU)、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管4.2仪器设备恒温培养箱、微生物鉴定仪五、采样方法5.1标本应为新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子,最优标本是转移到Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。
肛拭子不是最佳标本,仅在病人无粪便标本时采用。
5.2粪便标本:应采集自然排出的新鲜粪便,取稀水样、粘血样、脓血样,黏液样部分。
盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器,避免混入尿液、水和其他物质。
5.3肛拭标本:若无法获得粪便(如排便困难或婴幼儿),也可以采用肛拭子,即无菌棉拭子用生理盐水湿润后,插入肛门内4-5cm处〈儿童约2-3cm),同一方向轻轻旋转2-3周。
以目测能见到粪便为准。
插入Cary-Blair运送培养基。
5.4标本采集后立即送至实验室进行检测,若室温保存,不能超过1h;如不能立即送检,应放入Cary-Blair运送培养基中冷藏条件下24小时内送检。
六、检验程序七、操作步骤7.1分别标记一个XLD平板(或YS平板、麦康凯平板)和1管9ml 改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG)(或SF增菌液或沙门志贺培养液)。
7.2用1个无菌拭子取少量标本(不要使拭子粘得太多,尽量从可见血或黏液的部位收集)接种在XLD平板的第一区,接着把拭子放入SBG增菌液。
食源性致病菌检验标准操作程序福建省疾病预防控制中心二〇一二年十一月一、生物样本检验标准操作程序(一)粪便样本的保存、运送和检测表1 粪便样本的保存、运送和检测培养条件培养基目标病原体温度细菌标本保存和运送1. Cary-Blair 所有食源性致病菌室温增菌液 1. 改良磷酸盐缓冲液小肠结肠炎耶尔森氏菌 4 ℃2. mEC增菌肉汤EHEC O157:H7/STEC 37 ℃3. Preston肉汤弯曲菌微需氧42 ℃4. SBG增菌液沙门氏菌37 ℃5. 3%氯化钠碱性蛋白胨水弧菌37 ℃选择性分离平板1. Mac平板EPEC、STEC、ETEC、EIEC、EAEC、志贺氏菌37 ℃2. XLD平板志贺氏菌37 ℃3. mCCD平板弯曲菌微需氧42 ℃4. 耶尔森氏菌选择性平板小肠结肠炎耶尔森氏菌25 ℃5. 科玛嘉O157:H7显色平板EHEC O157:H7 37 ℃6. 科玛嘉沙门氏菌显色平板沙门氏菌37 ℃7. 科玛嘉弧菌显色平板TCBS平板弧菌37 ℃病毒标本 1. 采便盒轮状病毒、诺如病毒、札如病毒、星状病毒、腺病毒-20 ℃以下(二)检验方法与流程3(三)沙门氏菌和志贺氏菌检测操作程序1 范围本程序规定了粪便标本中沙门氏菌(Salmonella)和志贺氏菌(Shigella)的检验方法。
2 检验程序沙门氏菌和志贺氏菌检验程序见图1。
图1 沙门氏菌和志贺氏菌检验程序3 操作步骤3.1 标本收集标本包括新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子。
最优标本是转移至Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。
肛拭子不是最佳标本,仅在病人无粪便标本时采用。
肛拭子收集后应当目测,需要在拭子上明显见到粪便。
所采集的标本尽快检验,放入Cary-Blair运送培养基中的标本应在冷藏条件下24 h内送检。
新鲜的粪便标本置于清洁、干燥、无肥皂或消毒液残留的容器中,冷藏条件下8 h 内送检。
3.2 分离培养3.2.1 直接分离培养新鲜粪便:无菌拭子采集少量粪便,尽量从可见血或黏液的部位收集;新鲜拭子在XLD 和MAC一区划线;以1 µL无菌接种环或接种针划线分离。
志贺氏菌属检验的标准操作程序【目的】指导检验伤寒、副伤寒沙门氏菌。
【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。
【标本的采集】由受检者将采便用已蘸有甘油盐水的棉棒自行插入肛门内,轻轻转动,然后取出,插入带有编号的塑料试管中,交给检验科人员。
【检验程序】采便→立即划线接种SS平板→培养后挑取可疑菌落接种三糖铁斜面及半固体培养基→生化学试验→血清学试验→报告检验结果。
【操作步骤】1. 分离培养采便后立即用采便棒划线接种SS琼脂平板。
36±1℃培养18-24小时,挑取无色半透明的光滑菌落分解乳糖或迟缓分解乳糖的光滑菌落,接种三糖铁斜面及半固体,36±1℃培养18-24小时。
2. 生化学试验凡是三糖铁反应符合志贺氏菌属特征者(斜面产碱或不变色,底层产酸,H2S(—),产气(—),但福氏6型产生少量气体)、无动力、革兰氏阴性杆菌、作V-P试验,苯丙氨酸,赖氨酸,柠檬酸盐,葡萄糖铵试验。
其结果全部阴性者,作血清学试验。
3. 血清学试验挑取三糖铁斜面上的培养物,按下列顺序作玻片凝集试验:四种志贺氏——→福氏————→宋内氏————→志贺氏————→志贺氏多价血清多价血清血清 2型血清 1型血清∣ + ∣ +∣ +∣ +∣—∣↓↓↓↓∣福氏菌宋内氏菌志贺氏2型志贺氏1型↓ 1-6型某型+鲍氏 7-11型某组+:组内分型血清———→鲍氏某型血清: 12-15型全部—:加热破坏K抗原,重做凝集试验16-18型福氏菌的鉴定:凡是与福氏多价血清凝集的菌株,可先用3、4,群6,群7,三种因子血清检查,根据群因子血清反应结果,再用型因子血清检查。
福氏菌抗原成分如下。
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序
一、目的
本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的方法,以规范操作程序,保证检测数据的有效性。
二、适用范围:
本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保存的梯相关操作。
三、生物安全要求
标本及相应的致病菌操作必须在BSL-2生物安全实验室的生物安全柜中进行。
四、试剂及仪器设备
试剂
采便盒、Cary-Blair运送培养基、亚硒酸增菌液(SF)、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG)、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂(XLD)、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基(YS)、三糖铁(TSI)、动力-吲哚-尿素培养基(MIU)、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管
仪器设备
恒温培养箱、微生物鉴定仪
五、采样方法
标本应为新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子,最优标本是转移到Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。
肛拭子不是
最佳标本,仅在病人无粪便标本时采用。
粪便标本:应采集自然排出的新鲜粪便,取稀水样、粘血样、脓血样,黏液样部分。
盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器,避免混入尿液、水和其他物质。
肛拭标本:若无法获得粪便(如排便困难或婴幼儿),也可以采用肛拭子,即无菌棉拭子用生理盐水湿润后,插入肛门内4-5cm处〈儿童约2-3cm),同一方向轻轻旋转2-3周。
以目测能见到粪便为准。
插入Cary-Blair运送培养基。
标本采集后立即送至实验室进行检测,若室温保存,不能超过1h;如不能立即送检,应放入Cary-Blair运送培养基中冷藏条件下24小时内送检。
六、检验程序
七、操作步骤
分别标记一个XLD平板(或YS平板、麦康凯平板)和1管9ml 改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤(SBG)(或SF增菌液或沙门志贺培养液)。
用1个无菌拭子取少量标本(不要使拭子粘得太多,尽量从可见血或黏液的部位收集)接种在XLD平板的第一区,接着把拭子放入SBG增菌液。
再灭菌接种环在XLD平板的其余区进行划线接种。
如果是Cary-Blair运送培养基的粪便拭子,则轻搅混合标本后接种增菌液与平板。
所有培养基均放入36℃±1℃培养,SBG的最佳增菌时间是16~18h(建议每天下午4~5时接种标本,第二天早上8~10时用增菌液划平板)。
观察平板:取培养后的平板,观察有无可疑菌落。
7.4.1 XLD平板可疑菌落观察:志贺菌在XLD平板上为粉红或无色、透明、光滑、湿润、边缘整齐、圆形菌落,直径1-2mm,而大部分的大肠杆菌类的菌落为黄色、混浊、凸起、湿润、边缘整齐或不规则,直径2-3mm。
大多数沙门菌在XLD平板上中心黑色的透明、光滑、湿润、边缘整齐、圆形的菌落。
(图2)
7.4.2YS平板可疑菌落观察:
7.4.3麦康凯平板可疑菌落观察:志贺菌在麦康凯平板上为无色至浅粉色、半透明、光滑、湿润、边缘整齐或不规则、圆形菌落,直径2-3mm;大多数沙门菌为无色菌落,粉红色,带或不带黑心,伤寒沙门菌为无色菌落;而大部分的大肠杆菌类的菌落为粉红或红色、混浊、凸起、湿润、边缘整齐或不规则,直径3-4mm。
7.4.4 SBG肉汤增菌:SBG增菌16~18小时后,划线接种XLE平板或沙门显色平板,放入36℃±1℃培养18~24h。
沙门显色平板可疑菌落观察:典型的沙门菌在沙门显色平板上为紫色的菌落,直径2-3mm。
7.4.4 建议的初步筛查方案(初步生化特征见表1):
表1沙门菌、伤寒沙门菌、志贺菌及常见肠道菌的初步生化特征
A:粪便(或肛拭子)SBG或SF增菌XLD分离接种TSI和MIU
B:粪便(或肛拭子)SBG或SF增菌YS分离接种TSI和MIU
C:粪便(或肛拭子)SBG或SF增菌 XLD和麦康凯分离接种TSI和MIU
D:粪便(或肛拭子)SBG或SF增菌 YS和沙门显色分
离接种TSI和MIU
E:粪便(或肛拭子)SBG或SF增菌 XLD和沙门显色分离接种TSI和MIU
生化初步鉴定
每个平板挑取3~5个分离较好的单个可疑菌落,分别接种到三糖铁(TSI)和动力-吲哚-尿素培养基(MIU),36℃±1℃培养18~24h。
沙门菌和志贺菌的生化特征见表2。
系统生化试验
沙门菌和志贺菌初步鉴定阳性菌经转种营养琼脂单,取单个菌落进行系统生化鉴定(可以使用APE20E或全自动生化鉴定系统进行)。
血清学试验
7.7.1 志贺菌血清学试验
7.7.1.1挑取生化反应实筛符合志贺菌的营养琼脂斜面,首先用四
种多价血清做玻片凝集反应(4种多价包括:A群1、2型;B群和D群)。
凝集者则用B群多价、D群和A1、A2、血清分别凝集。
7.7.1.2若多价血清不凝集,可能为C群或A群的3~12型,应进行C群的四种多价和A群另三种多价血清做玻片凝集。
7.7.2 沙门菌血清学试验
7.7.2.1挑取生化反应实筛符合沙门菌的营养琼脂斜面,首先用A-F群O多价血清做玻片凝集反应。
7.7.2.2若凝集可按常见O因子检出频率,按照O4→O10→O9→O7→O8→O19→O2→O11顺序凝集。
7.7.2.3 H抗原凝集
7.7.3 所有凝集阳性的菌落,都要同时用生理盐水做凝集试验,只有不出现自凝时,才可以报告阳性结果。
8 结果报告
在初步生化鉴定符合后,可以先将可疑菌落进行革兰氏染色,最后综合生化及血清学结果,可以报告检出(或未检出)沙门菌(或志贺菌)。
对于从业人员体检结果已经纳入检验软件管理的单位,可以直接在检验软件中录入相应结果。
其他单位可以设计专门的报告格式反馈给送检单位或送检科室,检验报告中应至少包括姓名,性别,年龄,体检编号,检测结果。
检测结果为阴性,可以报告为未检出肠道沙门菌和志贺菌;检测结果为阳性,根据检测情况报告具体的型别。
检验部门应该保留所有受检样品的基本信息,检测到阳性标本,应该保存详细的检测记录,根据需要提供给送检单位或科室,以及上级业务单位。
9 菌株的保存
对于生化及血清学结果符合沙门菌或志贺菌的菌株用磁珠保存管保存菌种,放入-20℃或-70℃保存,按照相关要求上送菌株。