共聚焦显微镜使用技巧与心得

激光共聚焦操作步骤激光共聚焦显微镜（Laser Scanning Confocal Microscope，简称LSCM），是一种光学显微镜，利用激光和扫描镜技术，能够对样品进行高分辨、高对比度的三维成像。

下面将介绍激光共聚焦显微镜的操作步骤。

1.准备工作：a.打开显微镜电源，确保仪器处于正常工作状态。

b.打开激光源电源，等待激光系统启动。

c.准备样品，将样品放置在载玻片上，并使用封口膜或密封胶固定。

2.调节孔径光阑：a.打开镜头盖，取下玻璃保护盖。

b.观察显微镜视野，调节孔径光阑的大小，以获得最佳的入射光。

c.用合适的滤光片选择适当激光激发波长。

3.调节激光功率：a.打开激光源的控制面板。

b.选择合适的激光功率，通常初次使用时可选择较低功率。

c.通过目镜观察激光处于合适的位置和方向，避免直接观察激光。

4.调节焦距：a.打开目镜盖，观察样品上的图像。

b.调节目镜的焦距，获得清晰的图像。

c.使用恰当的倍率进行观察，确保所需的细节可见。

5.调节光路：a.打开激光共聚焦显微镜软件，进行光路调节。

b.调节反射镜和聚焦镜，确保激光能够准确地聚焦在样品上。

c.通过调节扫描镜，使激光能够扫描整个样品。

6.设置扫描参数：a.在软件中选择扫描参数，如扫描速度、像素大小等。

b.减至最小的扫描区域，以便首先观察最感兴趣的区域。

c.如有需要，可以进行连续扫描或者多通道扫描的设置。

7.开始扫描：a.点击软件界面上的“开始”按钮，开始扫描。

b.观察扫描时光点在样品上的移动情况，确保图像的获取和处理是正确的。

c.根据需要调整扫描参数，以获得更好的图像质量。

8.界定感兴趣区域（ROI）：a.选择感兴趣的图像区域，用鼠标进行界定。

b.设置参数，如增益、对比度、亮度等，以便获得更好的视觉效果。

c.按下截图按钮，将感兴趣的图像保存下来。

9.分析和处理图像：a.关闭扫描功能，进入图像处理模式。

b.使用软件提供的功能分析和处理图像，如三维重建、图像拼接等。

1．激光共聚焦扫描显微镜的基本原理？与普通显微镜的区别？1.原理：激光共聚焦扫描显微镜利用激光束经光源前方的照明针孔（激发针孔）形成点光源，在物镜焦平面上形成一个轮廓分明的小点，激发出的荧光经原来的入射光路直接反向回到分光镜，并将荧光直接送到探测器前方的探测针孔（共聚焦针孔），通过探测针孔时先聚焦，由探测针孔后的光电倍增管逐点接收，在计算机屏幕上形成清晰的荧光图像。

照明针孔和探测针孔相对于物镜焦平面是共轭（共焦）的，即光点通过一系列的透镜，最终可同时焦聚于照明针孔和探测针孔。

这样，标本上的被照射点发射的荧光在探测针孔处成像，而来自该点以外的任何发射荧光均被探测针孔阻挡。

2.区别：共聚焦显微镜与普通显微镜相比有许多独特的优点，包括：可以控制焦深、照明强度、降低非焦平面光线的噪音干扰，从一定厚度标本中获取光学切片，即显微CT。

最核心的优点是降低噪音干扰：对于物镜焦平面的焦点处发出的光在针孔处可以得到很好地会聚，可以全部通过针孔探测器接收，而在焦平面上下位置发出的光在针孔处会产生直径很大的光斑，对比针孔的直径大小，则只有极少部分的光可以透过针孔被探测器接收。

而随着距离物镜焦平面的的距离越大，杂散光在探测针孔处的弥散斑就越大，能透过针孔的能量就越少，探测器上产生的信号就越小，这样就能有效防止杂质信号。

2．钙指示剂的类别和优缺点：1. 生物发光蛋白优点：不需要荧光激发系统，光毒性小。

缺点：不能通透细胞膜，对技术要求高，效率较低，需要较多的指示剂。

2. 荧光蛋白指示剂优点:比值测定，荧光信号强。

缺点：染料的信号可变度小，对PH值变化敏感。

3. Fura2（比值型）优点：避免实验设备、细胞类型、实验个体的差异，数据具有高度可比性。

缺点：紫外激发，一定的自发荧光，损害细胞的能量代谢。

4. Fluo3（非比值型）优点：激发，自发荧光小，对细胞的损害较小。

缺点：数据直接为荧光强度值，容易受染料浓度、细胞动态变化等因素的影响。

共聚焦显微镜的应用共聚焦显微镜是一种常见且广泛应用于生物学、材料科学和其他领域的先进显微镜技术。

它通过使用一种特殊的激光光束和精确的光学系统，可以获取高分辨率和高对比度的显微图像。

共聚焦显微镜的原理是利用聚焦在样本上的激光光束与样本中的荧光信号进行交互，然后通过成像系统收集并转换这些信号为可视化的图像。

共聚焦显微镜的应用范围非常广泛。

下面，我将从多个角度讨论共聚焦显微镜在不同领域的应用。

1. 生物学中的应用：共聚焦显微镜在生物学研究中具有重要作用。

它可以提供高分辨率的细胞和组织结构图像。

在细胞生物学中，共聚焦显微镜可以用于观察细胞内蛋白质、细胞器和细胞核等结构的分布和运动。

共聚焦显微镜还可以用于观察细胞分裂过程、细胞内信号传导和细胞凋亡等关键生物学过程。

2. 材料科学中的应用：在材料科学领域，共聚焦显微镜被广泛应用于材料的表征和分析。

它可以提供高分辨率的表面形貌和内部结构信息。

在材料表面缺陷分析中，共聚焦显微镜能够观察到微观缺陷的形貌和位置。

共聚焦显微镜还可用于材料的化学成分分析和荧光标记探针的检测。

3. 医学领域中的应用：在医学领域，共聚焦显微镜可用于细胞和组织的诊断和研究。

在癌症研究中，共聚焦显微镜可以观察到癌细胞的形貌和分布，从而帮助医生确定病情和制定治疗方案。

共聚焦显微镜还可以用于血液和生物标本的显微观察，以及对药物在体内的分布和代谢过程的研究。

总结回顾：共聚焦显微镜是一种在生物学、材料科学和医学领域具有广泛应用的先进显微镜技术。

它通过高分辨率和高对比度的显微图像提供了对样本的详细观察。

在生物学中，共聚焦显微镜可以用于观察细胞结构、蛋白质分布和细胞内过程。

在材料科学中，共聚焦显微镜广泛应用于材料的表征和分析。

在医学领域，共聚焦显微镜对癌症诊断和研究具有重要意义。

通过综合利用共聚焦显微镜的特点和功能，我们可以更深入地理解和研究生物、材料和医学等领域的重要问题。

观点和理解：共聚焦显微镜作为一项先进的显微镜技术，为我们提供了探索微观世界的窗口。

科技资讯 SC I EN C E &TE C HN O LO G Y I NF O R MA T IO N 工 业 技 术激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)是随着计算机技术和光电技术的飞跃发展,在20世纪80年代后期发展起来的。

在生命科学研发中, LSCM技术已经成为生物医学中一个标准的研究工具。

目前共聚焦显微镜的功能非常多,好像是一个科研工作站,其应用也大多在生命科学研究领域。

围作为大型贵重精密仪器,LSCM的日常使用的管理需要按照严格的规程来实施,LEICA TCS SP5共聚焦显微镜的使用及管理方法如下。

1 了解仪器的组成所有上机操作的人员必须经过培训,了解仪器组成、工作原理和操作规范方可上机。

1.1仪器的组成LEICA TCS SP5主要由四部分组成:(1)显微镜光学系统。

为倒置显微镜;镜头包括共聚焦专用平场复消色差10×,20×,40×, 63(油镜),100×(油镜)镜头;(2)扫描装置;(3)激光光源。

本机器包含4个激光器:405nm激光,氩离子激光(457,476,488和514nm), 561nm激光,氦氖633nm激光,共四个检测通道;(4)检测系统。

整套仪器由计算机控制,各部件之间的操作切换都可在计算机操作平台界面中方便灵活进行。

由于激光器在工作时散发大量的热,需要风扇降温,突然断电可能烧坏激光器,因此还需要配备稳压电源和不间断供电装备。

1.2工作原理LSCM的工作原理是:照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,激光光源经照明针孔,经由分光镜反射至物镜,并聚焦于样品上,对标本内焦平面上的每一点进行扫描。

然后,激发出的荧光经原来入射光路直接反向回到分光镜,通过探测针孔时先聚焦,聚焦后的光被光电倍增管(PMT)探测收集,并将信号输送到计算机,在这光路中,焦平面以外区域射来的光线在检测小孔平面是离焦的,不能通过小孔,只有在焦平面上的光才能穿过探测针孔被观测到。

共聚焦显微镜平台安全操作及保养规程1. 前言共聚焦显微镜（confocal microscopy）是高级显微技术的一种，可以用来观察细胞和分子级别的细节。

共聚焦显微镜平台的安全操作和保养是使用共聚焦显微镜的基本要求，可以最大程度地保护设备并确保观察结果的准确度和可靠性。

本文列出了一些共聚焦显微镜平台的安全操作和保养规程，以便用户参考并遵守。

2. 安全操作2.1 设备准备在使用共聚焦显微镜之前，需要确保设备处于正确的位置，并且连接好所有的电缆。

检查设备的耗材，例如镜片、滤光片、探头等是否已经清洗并准备好。

2.2 操作之前在操作共聚焦显微镜之前，需要知道所有操作的步骤，并了解如何使用软件进行图像采集、存储和处理。

检查所需的光源是否已经打开，并确保所有必需的设置均已经完成。

2.3 操作时在操作过程中，需要注意以下事项： - 不要在显微镜周围分散存放物品； - 在操作过程中，不要使用酒精或酚酞等溶剂，以防损坏显微镜； - 不要长时间使用显微镜，以防止灯泡过热引起损坏； - 遵循设备操作手册，防止任何操作引起机械损坏。

2.4 操作完成后在使用共聚焦显微镜完成所有操作之后，需要将设备调整到其初始位置。

彻底清洗设备，以防止污染和损坏。

关闭所有灯泡和电源，并将所有电线纠缠在一起并收拾好。

3. 保养规程3.1 每日保养在每次使用共聚焦显微镜之后，需要进行以下保养： - 清洁设备的各部分； - 更换一次使用的滤光片； - 检查设备的光源是否工作正常。

3.2 周期性保养每隔一段时间需要进行以下保养： - 清洗设备的各部分； - 更换已经磨损的设备部件； - 调整设备的各项参数。

3.3 定期保养定期保养需要进行比较复杂的修理与调整。

建议每隔6个月使用专业维修工对设备进行定期保养和检查。

4. 总结共聚焦显微镜是一种非常先进的显微技术，但是它不仅价格昂贵，而且使用起来比较复杂，因此需要注意安全操作和保养规程。

只有正确使用并保养该设备，才能确保共聚焦显微镜的寿命和性能，并获得准确的观察结果。

Leica共聚焦显微镜使用说明Step 1: 打开PC电源——“1”Step 2: 打开汞灯控制开关——“2”Step 3: 打开中控盒——“3”Step 4: 打开计算机主机——“4”，启动计算机。

注：计算机操作系统启动后方可继续开机！！Step 5: 顺序打开激光器电源Scanner—“5”，激光冷却系统LASER Ar/ArKr—“6”★注：须确认冷风开启后方可打开激光电源！！！！！Step 6: 将上图虚线框中激光功率控制旋钮——“6.5”顺时针旋转60°左右。

Step 7: 将上图所示488 nm激光管开关——“7”钥匙沿顺时针旋转约120°至显示灯亮，再将钥匙旋回竖直位置Step 8: 依次将上图所示543/594 nm激光管开关——“8”和633 nm 激光管开关——“9”钥匙沿顺时针旋转约90°至显示灯亮。

Step 9:依次打开半导体激光器电源——“10”和405 nm激光管开关——“11”，（“11”的开启方式同“8”、“9”。

）Leica共聚焦显微镜关机顺序及注意事项Step 1: 关闭软件→拷贝Data→关闭计算机Step 2: 依照开机顺序倒序关闭各个开关，由”11”→”7”, ”5”→”1”。

★注：（1）冷风——”6”不能立即关闭！！须在关闭所有硬件设备30min 后方可关闭，以使激光管完全冷却，延长使用寿命。

（2）PC电源——“1”须在电脑确定关闭后方可关闭！！数据采集Step 1: 实验前扫描样本片观察激光通路是否正常工作。

Step 2: 上样，须轻起轻落科勒照明系统，选择合适倍数物镜，通过FLUO键选择相应荧光通道，调节载物台和焦距，找到合适视野。

Step 3: 点击由Visual→Scan，点击选择扫描模式，如xy, xyz, xyt, xyzt, xyλ etc..点击选择扫描格式（一般为默认值512*512）。

Step 4: 点击打开Beam path setting窗口，对光路和检测器进行设置。

共聚焦显微镜使用技巧与心得（一）之荧光原理篇关键词：共聚焦显微镜心得2014-12-24 09:46 来源：丁香园点击次数：1112工欲善其事必先利其器，想用好共聚焦显微镜光会用操作可不行，那永远不可能成为“共聚焦达人”，要想成为“达人“必先懂得原理，好吧，开始啦。

什么是荧光？荧光：荧光现象是物质在光的照射下所产生的发光现象。

首先荧光是一种光致发光现象，荧光物质必须是在光的照射下才能发光。

否则就是其他的发光现象而不是荧光。

例如夜光物质，夜光表，虽然也需要先用光照射，但离开光照射后它还能继续发光，就不是荧光。

这叫磷光。

另外一个例子是作western blot时用化学发光，也是发光，但不是荧光。

其次，荧光物质发出的荧光与照射光的色彩不同。

准确地说，是荧光物质发光的波长与照射光的波长是不同的。

典型的荧光物质是在紫外线照射下能发出黄绿色的荧光。

例如钱上的的荧光防伪标记，用紫外线照射后能发黄绿色的光。

所以在使用荧光显微镜的照片，观察绿色荧光样品时，你会看到物镜下照射到样品的光是蓝色的光。

观察红色荧光样品时，照射样品的却是绿色的光。

但在目镜里却能分别看到绿色与红色的荧光图像。

在荧光显微镜里，使用蓝色光照射样品后，样品发出的绿色荧光与照射样品的蓝色光混在一起，经过一个滤光片，把蓝色的照射光过滤掉，这样在目镜上就只看到绿色的荧光了。

样品发出的荧光，虽然有一种颜色，但它并不是单色光，而是有一定波长分布范围的混合光。

具体测量出每个波长下的相对光强，作一条光强-波长的关系曲线，这就是荧光光谱了。

或者称之为发射光谱。

它反映了这个物质发射的荧光的色彩成分。

一般情况下，荧光物质的荧光光谱的波长范围并不会太大，所以它会形成某种明显的颜色。

例如绿色或红色或黄绿色。

通常这个波长范围是几十个纳米。

在荧光的光谱分布中，当然会有一个波长对应着最强的荧光强度，这个波长就是我们平时所说的荧光的波长，又叫最大发射光波长，通常荧光染料的参数中的荧光波长就是这个波长。

激光共聚焦显微镜使用中的常见问题及维护分析激光扫描共聚焦显微镜从上世纪八十年代起，被广泛地应用于分子细胞生物学、生物医学、遗传学等研究领域。

但复合软件及多功能操作界面的使用对于初学者来说比较复杂，总结了操作过程中的常见问题，并提出了解决办法。

对激光扫描共聚焦显微镜这项技术的使用具有现实的参考价值。

标签：激光扫描共聚焦显微镜；荧光；图像激光扫描共聚焦显微镜与普通显微镜相比，激光共聚焦采用了能到达最高分辨率及重复性的无色差扫描技术，能产生真正具有三维清晰度的图像，而且还可以处理活的标本并不对标本造成物理化学特性的破坏。

我室引进的Leica TCS SP2型激光共聚焦配有全自动DMIRBE2新型光学显微镜系统；Leica TCS SP2 AOBS扫描头；四通道荧光共焦检测器及一个投射光DIC检测器；八通道AOTF调节器；电脑主机及双屏显示器。

可进行组织和细胞的微分干涉及荧光的断层扫描；多重荧光的断层扫描及重叠；实时动态扫描及其动态构建；组织与细胞的三维动态结构构建；荧光共振能量转移的分析（FRET）；图像漂白后的荧光修复（FRAP）等。

功能强大，性能优良。

但复合软件及多功能操作界面的使用对于初学者来说有些复杂，操作过程中多会出现以下问题。

1 扫描最终图像清晰度不高造成此类问题的原因主要有两个：（1）物镜和ZOOM值选用不正确。

初学使用者大多喜欢选用10X物镜后，再将ZOOM值调到所需要的最大值。

通过ZOOM值的增大确实可以将图像放大，有助于看清图像的细节，但是ZOOM的增大是有限定的，这取决于物镜的倍率。

例如在10X物镜下，ZOOM值超过10就没有意义了，而且ZOOM值的增大属于电子放大，放大倍数越高，清晰度越差。

所以在所观察的样本形态体积较小的情况下，多采用高倍物镜（例如63X水镜或油镜），再适当调整ZOOM值，ZOOM 值以不超过2为佳。

（2）误将Z-Position旋转球的功能和显微镜焦距微调旋转器的功能等同。

激光共聚焦显微镜技术绪论激光共聚焦显微镜技术（Confocal Lasers Scanning Miccruscope CLSM)是将显微镜技术与激光技术有效的结合，对具有荧光标记的物的形态及功能，通过计算机控制可以对其单层面进行快速扫描，也可以对多个层面进行连续光片层扫描。

逐层获得二维光学横断面图像，并可通过计算机三维重组软件支持，获得真三维图像。

激光共聚焦显微镜汇集了激光技术、显微镜技术、免疫荧光技术、计算机及图像处理技术、精密的机械技术等，高、精、尖细胞分析及工程技术于一体的新技术。

使其成为形态学、分子细胞生物学、神经科学、药理学、遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。

我们大家知道，从人类制作的第一台显微镜到现在以有几百年的历史来了，随着人类对生命科学研究的不断深入，各种显微镜应运而生，使得研究细胞的手段以更加精密化和多样化。

共聚焦显微镜的理论是在1957年Marvin Minsky提出的，但共聚焦显微镜作为商品推出是在20世纪80年代初期，早期的激光共聚焦显微镜在技术上很不完善，其应用也受到限制。

至到20世纪80年代末，光学系统设计不断改进，成像的质量和灵敏度都有所提高，进入90年代初，激光共聚焦显微镜系统中逐步引入混合激光和紫外激光技术。

90年代末由美国Meridian公司推出的新型激光共聚焦显微镜系统，已具备完善的光学系统，模块化的仪器设计，灵活的软件和高配置的计算机硬件，从而使共聚焦显微镜系统的功能不断升级，应用的领域不断扩展。

随着生命科学研究的不断深入及荧光探针技术的迅速发展，共聚焦显微镜将推动生命科学研究的迅速发展，同时生命科学研究的进展也将使激光显微镜技术不断改进和完善。

激光共聚焦显微镜是现今最为先进的光学显微镜，其主要优点为：以激光为光源，在相应的荧光探针标记后，对样本进行逐点扫描，逐层获得二维光学横断面图像，具有“细胞CT”的功能，并可通过计算机三维重建软件支持，获得真三维图像，并可以任意角度旋转，观察细胞，组织立体形态和空间关系；可以对活细胞和组织进行无损伤的观察，动态测量细胞内的Ca离子浓度和pH值等活细胞生理信息；可对细胞膜的流动性，细胞间通讯，细胞融合，细胞骨架弹性测量等，可用作“光刀子”完成细胞内“外科手术”。

眼科角膜共聚焦显微镜检查操作技术角膜共聚焦显微镜（CMTF）全称为扫描裂隙角膜共聚焦显微镜，简称共焦显微镜，是近年来发展起来的一种活体显微检查技术。

1955年Minsky发明了第一台用于研究脑神经网络的共焦显微镜，Cavanagh等于1986年将其应用于眼科的动物实验，又于1989年首次用于活体人眼的观察。

此后，共焦显微镜在角膜病的基础研究和临床工作中得到广泛应用，使角膜病的研究和诊断水平向前推进了一大步。

一、基本原理角膜共聚焦显微镜的原理是利用共轭焦点技术，运用光扫描对活体组织进行三维空间的显示和实时的观察，其获得图像的扫描范围为300μm×400μm，厚约5μm，放大倍数1000倍，X、Y、Z轴由三轴机器杆控制，移动范围可精确到小于1μm。

与普通的光学显微镜相比，它具有高分辨率和图像高对比度的特点，能够在细胞水平对活体角膜进行无创伤的动态观察。

临床主要有两种类型：Tandemscanning共焦显微镜和Confoscan裂隙扫描型共焦显微镜。

目前共焦显微镜已由录像系统转化为数码摄像系统，使图像更为清晰、完整，图片摄取速度更快捷，如Confoscan2.0共焦显微镜。

近来，激光角膜共焦显微镜也已用于临床，其图像清晰、分辨率高至1μm、可对角膜病变和角膜缘疾病进行多层次立体及连续动态观察。

我科首次应用激光共焦显微镜（HRTⅡ/RCM）对正常人活体角膜缘和角膜中央组织结构进行了观察，获得了传统光学共焦显微镜无法获得的图像和效果，填补了活体观察角膜缘的空白。

共焦显微镜由三大部分组成：①主机：由一个一维的扫描裂隙装置和一个与图像光路相一致的物体聚集盘组成，在一维的光切面上做三维的点状分层扫描。

②光学传输系统：把连续、同步的光扫描信号传到计算机屏幕和录像机磁带上。

③计算机分析系统：对记录在录像带上的图像进行分析、处理得到较清晰的图片资料。

对角膜的各层细胞数、大小、面积进行统计和数据分析。

二、临床意义（1）快速无创伤地诊断角膜感染、营养不良、变性等角膜疾病。

激光共聚焦显微镜设备安全操作规定1. 前言激光共聚焦显微镜（Laser Scanning Confocal Microscope, LSCM）是一种高分辨率的显微镜技术，广泛应用于细胞学、分子生物学、神经学等多个领域。

然而，LSCM的使用需要注意潜在的危险性，如激光辐射、样品污染、化学品污染等。

故本文为LSCM设备使用者和管理员提供操作规定，以确保安全操作和科学研究的顺利进行。

2. 设备安全2.1 设备安装及操作环境•设备应该放置在稳固、干燥、通风良好的环境下。

•应该远离有潮湿气氛或者有化学气味的区域。

•设备旁应设有紫外线消毒机、紫外线灯等，以保持操作环境的干净和卫生。

•设备应该保持水平安放，禁止晃动或者触碰任何部件以免损坏设备。

2.2 操作者安全•操作者必须在获得专业培训，并按照培训规定进行操作。

•只有经过正常的操作许可才能使用设备。

•操作者必须穿戴防护眼镜防护手套等个人防护用品。

•操作结束后必须彻底清洗试样台、针头等设备，保持设备清洁卫生。

•操作者首先需要关闭LSCM的激光打开电源，并在打开电源后等待一段时间后进行试验操作。

3. 设备使用3.1 LSCM设备的开机•操作人员需要启动激光开关,并确认放置的样品适配平台已经连接。

3.2 打开样品盖•在打开样品盖前应当确认激光是否关闭•在打开样品盖后，确保样品表面形状平整且没有杂物，再打开激光并启动相关的测试等设备3.3 操作针头•操作针头属于平衡针，请注意不要在操作时碰到LSCM的其他配件上。

•操作针头时需遵循操作规范，确保对试样及设备的损害减少至最少。

3.4 关闭设备•在使用完毕，应关闭激光及设备电源，并将样本保存好。

4. 设备维护及紧急处理4.1 设备维护•设备每日应该进行消毒处理，避免因样品等物质的污染对其他样品的影响。

•正确清洗试样台，尤其当使用化学试剂时尤应留意，以避免产生不必要的污染。

•设备需要经常进行调整以保证仪器量測的准确性。

4.2 常规维护及故障处理•操作人员需要定期清洗和检查设备，确保设备正常使用。

激光共聚焦显微镜上机观察前的注意事项下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢！本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注！Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!在使用激光共聚焦显微镜（CLSM）进行观察前，有一些重要的注意事项需要注意。