各器官组织切片

【关键字】指导实验一局部血液循环障碍一、〔实验目的〕通过组织切片观察，认识﹑掌握器官组织发生充血、淤血、出血、梗死等病理变化的形态学变化特征，了解其发生原因、机制﹑结局和意义。

二、〔实验材料〕充血、淤血及出血的组织切片三、〔实验内容、方法和步骤〕大体标本充血1. 肺淤血：多见于左心机能不全。

静脉回流受阻，肺体积增大，被膜紧张，色紫红，质地较坚实，切面流出多量暗红色血液。

淤血较久时，则易发生肺水肿，此时肺切面流出多量带泡沫的血样液体。

肺间质增宽，富含水分。

肺组织块投入水中如载重舟。

2. 肝淤血：常见于右心衰竭。

淤血时体积增大，边缘钝圆，色暗紫红色，切面流出多量暗紫红色血液，淤血较久时，小叶中央部充血呈暗红色，小叶边缘则肿胀或脂变呈黄褐色，形成暗红色与黄褐色相间的斑纹，类似中药槟榔的断面故称“槟榔肝”。

3肠淤血：肠壁静脉扩大增粗，充满暗红色血液，形似树枝状。

出血1. 猪肾点状出血：肾表面及切面上有多数针尖至菜籽大小的出血小点。

此标本取至猪瘟病。

2. 心内膜斑状出血：心室内膜下出现黑红色斑点，称淤斑。

3. 马肝被膜下血肿：肝被膜下与实质之间有大的凝固血块，周围结缔组织增生形成包裹。

血肿周围实质受压贫血，呈淡黄褐色。

4. 血管破裂性出血：乳牛产后子宫中动脉破裂出血，患畜死于失血过多。

此标本示血管破裂处。

5. 线状出血：肠粘膜皱壁的顶端出血，呈暗红色的线条，称线状出血。

6. 出血性子宫炎：子宫内膜弥漫性出血，呈暗紫红色。

血栓形成1. 牛肺静脉红色血栓：肺内扩大的静脉内有一血块，其中心红色，边缘淡黄，（这是因形成时间较久，边缘血红蛋白崩解之故）因发生血栓软化，血管与血栓界线不清。

2. 猪心瓣膜上白色血栓：二尖瓣向血流面有一干燥灰白赘生物附着，表面粗糙不平，呈椰菜花样外观。

瓣膜变形、缺损。

此标本取自慢性猪丹毒患猪。

4. 动脉内白色血栓：马前肠系膜动脉根部管腔扩大，管壁肥厚，内膜粗糙不平，内膜上附着干燥灰白片状血栓物质。

组织病理切片的制作流程1．取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。

取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下：(1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。

(2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。

(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。

夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。

(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。

(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。

纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。

(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。

(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。

为此可将组织展平，以尽可能维持原形。

2．固定(1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本和固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。

故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。

组织病理切片的制作流程1．取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。

取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下：(1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。

(2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。

(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。

夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。

(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。

(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。

纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。

(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。

(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。

为此可将组织展平，以尽可能维持原形。

2．固定(1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。

故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。

组胚切⽚（附图）中空器官：循环系统：中动脉（34）：分内膜、中膜、外膜。

内膜内⽪下层较薄，与中膜交界处含内弹性膜；中膜较厚，由多层环⾏平滑肌纤维组成，其间有少量弹性纤维与胶原纤维，与外膜交界处含外弹性膜；外膜由疏松结缔组织构成，含⾎管与神经纤维。

⼤动脉：分内膜、中膜、外膜。

内膜内⽪下层为疏松结缔组织，含胶原纤维与少量平滑肌纤维；中膜很厚，含多层弹性膜与⼤量弹性纤维；外膜较薄，由疏松结缔组织构成，含成纤维细胞。

⼼脏：⼼脏⼼壁分⼼内膜、⼼肌膜、⼼外膜。

⼼内膜由内⽪与内⽪下层组成，内⽪为单层扁平上⽪，内⽪下层由结缔组织构成，含平滑肌、⼩⾎管与神经；⼼肌膜主要由⼼肌纤维构成，可分为内纵、中环、外斜⾏三层；⼼外膜含⾎管、神经与脂肪组织。

此外，⼼内膜向腔内突起可形成薄⽪状⼼瓣膜。

消化管：⾷管（47）：⾷管分为粘膜层，粘膜下层，肌层和外膜。

粘膜层包括上⽪、固有层和粘膜肌层。

上⽪为较厚的未⾓化的复层扁平上⽪，在⾷管与胃贲门交界处，复层扁平上⽪突然变成单层柱状上⽪；固有层为致密结缔组织，内有⾷管腺导管；粘膜肌层由纵⾏肌组成。

粘膜下层为厚的疏松结缔组织构成,内含⾷管腺。

粘膜和粘膜下层形成皱襞。

肌层上1/3段为⾻骼肌，下1/3为平滑肌，中段为⾻骼肌和平滑肌混合组成。

其肌纤维的排列为内环形和外纵形两层。

外膜由疏松的纤维组织构成，含有较⼤的⾎管、淋巴管和神经。

胃（48）：胃壁分为粘膜层，粘膜下层，肌层和外膜。

粘膜层包括上⽪、固有层和粘膜肌层。

上⽪是单层柱状上⽪，上⽪细胞是表⾯粘液细胞，细胞染⾊浅，呈空泡状。

固有层为细密的结缔组织，内含有⼤量的胃底腺。

胃底腺位于胃⼩凹和粘膜肌之间,是单管状腺,腺腔⼩,主要由壁细胞和主细胞组成。

粘膜肌层为平滑肌。

粘膜下层为疏松结缔组织，内含有⼩⾎管，⼩的神经束。

肌层为平滑肌，分内斜、中环、外纵三层。

外膜为浆膜，⼀层结缔组织，最外⾯有⼀层单层扁平上⽪覆盖（间⽪），内可有脂肪组织，神经束，⾎管等。

组织学与胚胎学标本考核名称:骨骼肌光镜下结构特点:纵切面：肌纤维呈带状/长圆柱状；细胞核多个，长椭圆形/杆状，紧贴在肌膜下方；肌纤维上有明暗相间的横纹。

横切面：肌纤维为不规则形或圆形，细胞核1～数个，呈点状，位于周边。

名称:心肌光镜下结构特点:（心脏的心肌纤维排列方向较复杂，在切片中同时看到各种切面。

）纵切面：心肌纤维呈短柱状，有分支相连成网。

细胞核卵圆形，位于中央。

心肌纤维有横纹，但不如骨骼肌明显。

在心肌纤维不定距离上/连接处有染色较深的线条，即为闰盘。

横切面：心肌纤维呈圆形或不规则形，大小不一，细胞核位于中央，有的未切到核。

名称:脊髓（神经元）光镜下结构特点:在前角内可见多极神经元胞体大、形态不规则，胞体发出的突起常被切断。

细胞核位于胞体中央，大而圆形，染色淡，核仁明显。

胞质紫红色，胞质内可见许多大小不等的紫蓝色小块，即尼氏体。

树突内有尼氏体，轴突及轴丘无。

名称:中动脉和中静脉光镜下结构特点:（一）中动脉以内、外弹性膜为界区分内膜、中膜和外膜三层1．内膜很薄，内皮细胞核突向管腔。

（内皮下层为极薄的结缔组织，不易分辨。

）内弹性膜清晰可见，染成亮红色。

内皮似乎紧贴在波浪起伏的内弹性膜之上。

2．中膜最厚，主要为环形平滑肌。

3．外膜较中膜薄些，主要为结缔组织，含有营养小血管及神经。

外弹性膜不如内弹性膜清楚。

（二）中静脉的结构中静脉：管壁三层结构的分界，不如中动脉清楚。

内、外弹性膜均不明显。

中膜薄，平滑肌肌纤维层数少。

外膜较中膜稍厚，无外弹性膜，可见纵行平滑肌束。

名称:皮肤光镜下结构特点:表皮部分由角化的复层扁平上皮组成，其基部与真皮交界处凹凸不平。

从游离面到基底面可分：１. 角质层：厚，深红色２. 透明层：有的不明显３..颗粒层：３-５层梭形细胞，胞质内含有强嗜碱性颗粒４. 棘层：多层多边形细胞组成的。

最深部内有，。

５.基底层：为一层低柱状排列的细胞表皮的深层为真皮，由致密结缔组织组成。

名称:胸腺光镜下结构特点:器官表面覆有结缔组织被膜，其伸入实质形成小叶间隔，把胸腺分成许多不完全的小叶。

介绍大鼠各组织器官石蜡切片制作法山西省中医院（030012）高宝红在科研工作中，实验标本多为动物模型，如大鼠、小鼠及兔等。

大小鼠及兔的组织脏器较人体组织脏器稚嫩柔软，水分含量多。

因此在制作组织切片的过程中，必须根据其组织结构特点，采用不同于人体组织的处理方法，注意各种动物组织在固定、脱水、透明浸蜡、包埋、切片的每个程序中选择最佳的时间方案，才能避免组织块变脆，切片易碎、有裂隙，染色时易脱片等常见不良后果的发生，保证高质量石蜡切片一次成功。

本研究就如何制作优质的大鼠各组织器官石蜡切片作了总结，现从固定、取材、脱水、透明、浸蜡、包埋到切片、烤片、脱蜡、染色的经验介绍如下。

1如何制作优质大鼠各器官石蜡切片1.1标本：大鼠各个脏器———心、肝、脾、肺、肾、大脑、脊髓、胃肠、垂体、胸腺、淋巴结、肾上腺、卵巢、睾丸、子宫、膀胱、附睾。

1.2固定液：中性甲醛溶液，固定时间为24h。

1.3取材：心脏：最大纵断面取1块，厚度为2mm；肝脏：右叶纵断面取1块，厚度为2mm；脾脏：纵断面取1块，厚度为2mm；肺脏：纵断面取1块，厚度为2mm；肾脏：最大面剖开取一半，包括皮质、髓质和肾盂；大脑：最大面剖开取一半；脊髓：横断面剖开取1块，厚度2~3mm；胃：沿大弯侧剪开，纵切一长条，长1cm，宽2mm；肠：横断面切取一段，约2mm；垂体：全包；胸腺：全包；淋巴结：全包；肾上腺：全包；卵巢：全包；子宫：横断面剖开取一段，厚度2mm；睾丸：最大面剖开，取半；附睾：纵断面剖开取半；膀胱：剖开取半。

1.4各个脏器的脱水透明浸蜡时间：见第1024页表1。

1.5包埋：胃肠、子宫、膀胱立埋，其余脏器平埋，蜡温为65~ 70℃。

1.6切片：厚度4μm，摊片水温56℃左右，选取无皱折的4片。

2动物组织石蜡切片苏木素-伊红（HE）染色切片置70℃的烤箱中30min入二甲苯脱蜡20min；入梯度乙醇100%→95%→85%→75%，自来水冲洗2min；入苏木精30min，取出自来水冲洗2min；入盐酸乙醇分化5s，自来水冲洗2min；入伊红5 s，自来水冲洗2min；入梯度乙醇75%→85%→95%Ⅰ→95%Ⅱ→100%→100%；入二甲苯Ⅰ→二甲苯Ⅱ；中性树胶封片。

组织病理切片的制作流程1．取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。

取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下：(1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。

(2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。

(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。

夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。

(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。

(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。

纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。

(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。

(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。

为此可将组织展平，以尽可能维持原形。

2．固定(1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。

故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。

组织病理切片的制作过程1、取材取材的好坏，直接影响切片的质量。

首先要有一把锋利的取材刀，在切割组织时要避免取材刀来回拖拉，切取的组织块厚薄要均匀，一般厚度以0.2 ～0.3cm为适，较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适当厚一点，而脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌瘤等致密的或试剂不易渗入的组织应取薄一些；淋巴结应修掉两侧球冠，并尽量剔除周围的脂肪组织。

在取材中还应十分注意组织内是否有缝线或骨组织，如碰到不可避免的钙化组织，应与技术室讲明，在切取纤维组织、肌肉、组织、胃肠道时，应注意纤维及肌肉的走向，取材时尽可能按与纤维平行走向切取为佳。

具体要求如下：(1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。

(2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。

(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。

夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。

(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。

(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。

纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。

(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。

(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。

为此可将组织展平，以尽可能维持原形。

2．固定(1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。