特殊染色
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结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色:胶原和网状纤维淡蓝色:软骨、粘液、淀粉样变物质红色:神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色:髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色,显示胶原纤维,A组排列规则1.2.Masson三色染色法绿色:胶原纤维红色:肌纤维橘红色:红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3.显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色:胶原纤维黑色:网状纤维绿色:弹性纤维淡黄色:肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2.Van Gieson〔V.G〕苦味酸-酸性品红法鲜红色:胶原纤维黄色:肌纤维、细胞质、红细胞 蓝褐色:胞核图表 E 2.胶原纤维,Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法 图 心肌堵塞 myocardial infarction :心肌堵塞后2个月,van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替,黄色区域为残留的心肌纤维。
2.1 天狼星红〔Sirius red 〕苦味酸染色法(参照上图)红色:胶原纤维 绿色:细胞核黄色:其他三、网状纤维染色3.1 Gordon-Sweets 银氨染色法 〔梅花开枝图,金色伴树枝〕黑色:网状纤维红色:胞核〔核固红复染〕 黄棕色:胶原纤维淡红色:细胞质〔红液复染〕图表 F 3.Gordon-Sweets 氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori 氏银氨液配制法图表 GGomori 氏银氨液配制法四、弹性纤维染色Gomori 醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最正确图表 H4.GOMORI 醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色:弹性纤维 红色:胶原纤维 黄色:背景图表 I 4.Weigert 间苯二酚法六、肌肉组织染色△ 横纹肌组织染色Mallory 磷钨酸木精染色法〔PTAH 〕蓝色:胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌 黄色或枚红色:胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨 微紫色:粗弹性纤维〔有时〕天狼星红苦味酸染色法:〔偏光显微镜〕 Ⅰ型:强双折光性,呈黄色或红色纤维 Ⅱ型:弱双折光,呈多种色彩疏网状分布 Ⅲ型:弱双折光,呈绿色的细纤维 Ⅳ型:弱双折光的基膜,呈淡黄色紫蓝色或棕黄色:缺血缺氧早期病变的心肌图表 J 6.1.磷钨酸木素法图表 K 6.1.磷钨酸木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法〔1974年〕红色:缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色:正常心肌蓝色:细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色〔光学显微镜, ×200〕2.Poley显示缺氧心肌染色法〔1964年〕红色:缺氧心肌紫色:胞核绿色:其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff〔PAS〕染色法红色:糖原及其他PAS反响阳性物质蓝色:细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质〔黏多糖〕染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫〔ABPAS〕染色法〔1956〕红色:中性黏液物质蓝色:酸性黏液物质紫红色:混合性黏液物质图表 M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表 N 8.1.胃粘膜组织 AB-PAS染色 40×:2.爱先蓝〔PH2.5〕法蓝色:唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色:胞核不着色:强硫酸化黏液物质图表 O 8.2.爱先蓝〔PH2.5〕染色液图表 P 8.2.爱先蓝法图表 Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝〔PH1.0〕法蓝色:含硫酸黏液物质不着色:非硫酸化酸性黏液物质红色:复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色:黑色素及嗜银细胞颗粒红色:胶原纤维浅黄色:背景图表 R9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色:黑色素浅绿或不着色:背景黄色:肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue〔普鲁士蓝〕反响显示三价铁蓝色:含铁血黄素浅红色:其他组织图表 S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞。
结缔组织染色法Mallory三色染色法蓝色:胶原和网状纤维淡蓝色:软骨、粘液、淀粉样变物质红色:神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色:髓鞘、红细胞图表 A 染色,显示胶原纤维,A组排列规则. Masson三色染色法绿色:胶原纤维红色:肌纤维橘红色:红细胞图表 B Mssson三色法图表 C 三色染色胃癌组织中血管平滑肌. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色:胶原纤维黑色:网状纤维绿色:弹性纤维淡黄色:肌肉、红细胞二、胶原纤维染色法. Van Gieson()苦味酸-酸性品红法鲜红色:胶原纤维黄色:肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色:胞核图表 E 2.胶原纤维,Van Gieson.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞 myocardial infarction:心肌梗塞后2个月,van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替,黄色区域为残留的心肌纤维。
天狼星红(Sirius red)苦味酸染色法(参照上图)黄色:其他三、网状纤维染色Gordon-Sweets银氨染色法(梅花开枝图,金色阳光伴树枝)黄棕色:胶原纤维淡红色:细胞质(红液复染)图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法Gomori氏银氨液配制法图表 G Gomori氏银氨液配制法四、弹性纤维染色Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表 H 醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色:弹性纤维红色:胶原纤维黄色:背景六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)蓝色:胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色:胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色:粗弹性纤维(有时)紫蓝色或棕黄色:缺血缺氧早期病变的心肌图表 J .磷钨酸苏木素法图表 K .磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色染色法(1974年)蓝色:细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色(光学显微镜, ×200)显示缺氧心肌染色法(1964年)红色:缺氧心肌紫色:胞核绿色:其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff(PAS)染色法红色:糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色:细胞核图表 L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质(黏多糖)染色阿尔辛蓝过碘酸雪夫(ABPAS)染色法(1956)红色:中性黏液物质蓝色:酸性黏液物质紫红色:混合性黏液物质图表 M 染色结肠粘膜图表 N .胃粘膜组织 AB-PAS染色 40×:2.爱先蓝()法蓝色:唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色:胞核不着色:强硫酸化黏液物质图表 O .爱先蓝()染色液图表 P .爱先蓝法图表 Q .爱先蓝法—3、爱先蓝()法蓝色:含硫酸黏液物质不着色:非硫酸化酸性黏液物质红色:复染后的胞核九、黑色素染色黑色素银浸染色法黑色:黑色素及嗜银细胞颗粒红色:胶原纤维浅黄色:背景图表 R pigment in cells . malignant melanoma, Fontana-Masson stain.亚铁染色法暗绿色:黑色素浅绿或不着色:背景黄色:肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue(普鲁士蓝)反应显示三价铁蓝色:含铁血黄素浅红色:其他组织图表 S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细十一、胆色素染色三氯醋酸染色法绿色:胆色素红色和黄色:其他十四、纤维蛋白染色等MSB染色法*本法的MSB指马休黄猩红蓝法红色:纤维蛋白紫色:陈旧性纤维蛋白蓝色:细胞核黄色:红细胞图表 T 马休黄-酸性品红-苯胺蓝染色液甲紫染色法蓝黑色:纤维蛋白红色:背景十五、淀粉样物质染色1.刚果红染色法红色:淀粉样物质蓝色:细胞核图表 U 15.淀粉染色甲状腺髓样癌淀粉样物质甲紫染色法红色或紫红色:淀粉样物质蓝色:细胞核十六、真菌染色六胺银染色法*真菌均被着色图表 V 16.六胺银染色液2.高碘酸复红染色法(1994年)紫红色:真菌浅黄色:红细胞十七、细菌染色碱性复红结晶紫染色法蓝色:革兰阳性菌红色:革兰阴性菌、细胞核抗酸杆菌染色法红色:抗酸杆菌灰蓝色:背景图表 W . 病理抗酸染色液图表 X . 病理抗酸染色液3.胃幽门螺杆菌Warthin-Starry胃幽门螺杆菌染色法棕黑色或黑色:胃幽门螺杆菌淡黄色:背景十八、螺旋体染色1. 硝酸银染色法染色法蓝—淡紫色:螺旋体、细菌蓝色:细胞质橘黄色:红细胞Ryu碳酸钠碱性复红法红色:螺旋体十九、病毒包涵体染色Macchiavello包涵体染色法图表 Y 19.巨细胞病毒核内出现周围绕有一轮“晕”的大型嗜酸性包涵体。
病理学技术—特殊染色最最全总结病理学技术是医学研究领域中的一个重要分支,它利用各种不同的方法和技术,对组织和细胞进行分析和研究。
其中,特殊染色技术是病理学技术中的一个重要组成部分,通过使用不同的染色剂,有助于观察并区分不同的细胞和组织结构,以辅助诊断和研究。
以下是对特殊染色技术的最全总结。
1. PAS染色(Periodic Acid-Schiff染色):PAS染色可以用于检测细胞和组织中的多糖物质,如糖原、粘多糖和黏多糖等。
PAS染色通过一系列的化学反应,将含有醛基的物质氧化,然后与PAS染料反应生成染色物质。
2. 铁染色:铁染色可用于检测细胞和组织中的铁含量,它可以帮助鉴别铁负荷过多或过少的情况。
常用的铁染色方法包括Perls染色和Prussian blue染色。
3.去脂酸和酶染色:去脂酸和酶染色用于检测细胞和组织中的脂质和酶活性。
去脂酸染色通过将组织切片浸泡在油酸中,然后用溴化黄染色,观察脂质的分布情况。
酶染色通过使用特定的染色剂来观察细胞中的酶活性,如碘化物染色用于检测过氧化物酶活性。
4.免疫组织化学染色:免疫组织化学染色是通过使用特异性抗体来检测细胞和组织中的蛋白质和其他分子。
常见的免疫组织化学染色方法包括免疫荧光染色和酶联免疫组化染色。
这些染色技术可以用于确定特定抗原的存在和定位,从而帮助确定疾病的诊断和预后。
5.组织切片染色:组织切片染色是一种常见的特殊染色技术,它可以用于检测细胞和组织中的结构和细胞器。
常用的组织切片染色方法包括伊红染色、苏木素-伊红染色和单色染色等。
6.核酸染色:核酸染色用于检测细胞和组织中的核酸结构和功能,其中最常用的核酸染色方法是荧光原位杂交(FISH)和DAPI染色。
荧光原位杂交可以用来检测染色体异常和基因重排等。
7.肉眼可见染色:肉眼可见染色是一种用于检测显微镜下不易观察到的细胞和组织结构的染色技术。
常见的肉眼可见染色方法包括钙化染色和淀粉样变染色等。
总结以上所述,特殊染色技术在病理学领域中具有重要的应用意义,通过使用不同的染色剂,可以对细胞和组织进行全面和准确的分析和研究。
特殊染色程序试题及答案一、选择题1. 下列哪项不是特殊染色的目的?A. 区分不同类型的细胞B. 识别细胞内的特定结构C. 增加细胞的美观性D. 帮助诊断某些疾病答案:C2. 特殊染色中常用的染色剂之一是:A. 苏木精B. 伊红C. 刚果红D. 甲基绿答案:C3. 免疫组化染色是一种特殊的染色技术,主要用于:A. 细胞计数B. 细胞形态学观察C. 检测细胞表面抗原D. 检测细胞内蛋白质表达答案:D二、填空题4. 特殊染色技术中的PAS染色主要用于检测_________。
答案:多糖和粘多糖5. 在病理学中,_________染色常用于识别真菌感染。
答案:Gomori甲酚紫6. 阿利新蓝染色可以用于检测_________。
答案:肌肉组织三、简答题7. 描述银染技术的基本原理及其在病理学中的应用。
答:银染技术是一种使用银颗粒对组织或细胞进行染色的方法。
其基本原理是利用银离子与组织中的特定蛋白质或多糖结合,然后通过还原剂将银离子还原为黑色的金属银颗粒,从而在光镜下形成可见的染色。
在病理学中,银染常用于显示神经纤维和网状纤维,有助于研究组织的神经分布和结构。
8. 解释为什么特殊染色在肿瘤学中非常重要。
答:特殊染色在肿瘤学中非常重要,因为它们可以揭示肿瘤细胞的独特特征,帮助病理学家进行更准确的诊断。
例如,免疫组化染色可以检测肿瘤细胞表面的特定抗原,从而确定肿瘤的类型和分级。
此外,一些特殊染色能够突出显示肿瘤细胞的代谢产物或特定酶的活性,这些信息对于了解肿瘤的生物学行为和制定治疗方案至关重要。
四、论述题9. 讨论特殊染色在临床诊断中的作用及其局限性。
答:特殊染色在临床诊断中扮演着重要角色,它们能够提供传统染色技术无法提供的信息。
例如,通过特殊染色可以识别特定的细胞类型、细胞内结构或生物分子,这对于许多疾病的诊断至关重要。
然而,特殊染色也有其局限性,包括成本较高、操作复杂、需要专业的技术人员进行解读等。
此外,某些特殊染色可能存在一定的假阳性或假阴性结果,因此需要结合临床症状和其他检查结果综合判断。
结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色:胶原和网状纤维淡蓝色:软骨、粘液、淀粉样变物质红色:神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色:髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色,显示胶原纤维,A组排列规则1.2. Masson三色染色法绿色:胶原纤维红色:肌纤维橘红色:红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色:胶原纤维黑色:网状纤维绿色:弹性纤维淡黄色:肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2. Van Gieson(V.G)苦味酸-酸性品红法黄色:肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色:胞核图表E 2.胶原纤维,Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞myocardial infarction:心肌梗塞后2个月,van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替,黄色区域为残留的心肌纤维。
2.1 天狼星红(Sirius red)苦味酸染色法(参照上图)绿色:细胞核黄色:其他三、网状纤维染色3.1 Gordon-Sweets银氨染色法(梅花开枝图,金色阳光伴树枝)黑色:网状纤维红色:胞核(核固红复染)黄棕色:胶原纤维淡红色:细胞质(红液复染)图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori氏银氨液配制法图表G Gomori氏银氨液配制法四、弹性纤维染色Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表H 4.GOMORI醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色:弹性纤维红色:胶原纤维黄色:背景图表I 4.Weigert间苯二酚法六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)蓝色:胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色:胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色:粗弹性纤维(有时)紫蓝色或棕黄色:缺血缺氧早期病变的心肌图表J 6.1.磷钨酸苏木素法图表K 6.1.磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法(1974年)红色:缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色:正常心肌蓝色:细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色(光学显微镜, ×200)2.Poley显示缺氧心肌染色法(1964年)红色:缺氧心肌紫色:胞核绿色:其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff(PAS)染色法红色:糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色:细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质(黏多糖)染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫(ABPAS)染色法(1956)红色:中性黏液物质蓝色:酸性黏液物质紫红色:混合性黏液物质图表M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表N 8.1.胃粘膜组织AB-PAS染色40×:2.爱先蓝(PH2.5)法蓝色:唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色:胞核不着色:强硫酸化黏液物质图表O 8.2.爱先蓝(PH2.5)染色液图表P 8.2.爱先蓝法图表Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝(PH1.0)法蓝色:含硫酸黏液物质不着色:非硫酸化酸性黏液物质红色:复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色:黑色素及嗜银细胞颗粒红色:胶原纤维浅黄色:背景图表R 9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色:黑色素浅绿或不着色:背景黄色:肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue(普鲁士蓝)反应显示三价铁蓝色:含铁血黄素浅红色:其他组织图表S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞内。
结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色:胶原和网状纤维淡蓝色:软骨、粘液、淀粉样变物质红色:神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色:髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色,显示胶原纤维,A组排列规则1.2. Masson三色染色法绿色:胶原纤维红色:肌纤维橘红色:红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色:胶原纤维黑色:网状纤维绿色:弹性纤维淡黄色:肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2. Van Gieson(V.G)苦味酸-酸性品红法鲜红色:胶原纤维黄色:肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色:胞核图表E 2.胶原纤维,Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞myocardial infarction:心肌梗塞后2个月,van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替,黄色区域为残留的心肌纤维。
2.1 天狼星红(Sirius red)苦味酸染色法(参照上图) 红色:胶原纤维绿色:细胞核黄色:其他3.1 Gordon-Sweets银氨染色法(梅花开枝图,金色阳光伴树枝)黑色:网状纤维红色:胞核(核固红复染)黄棕色:胶原纤维淡红色:细胞质(红液复染)图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori氏银氨液配制法图表G Gomori氏银氨液配制法Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表H 4.GOMORI醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色:弹性纤维红色:胶原纤维黄色:背景图表I 4.Weigert间苯二酚法六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)蓝色:胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色:胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色:粗弹性纤维(有时)紫蓝色或棕黄色:缺血缺氧早期病变的心肌图表J 6.1.磷钨酸苏木素法图表K 6.1.磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法(1974年)红色:缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色:正常心肌蓝色:细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色(光学显微镜, ×200)2.Poley显示缺氧心肌染色法(1964年)红色:缺氧心肌紫色:胞核绿色:其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff(PAS)染色法红色:糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色:细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质(黏多糖)染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫(ABPAS)染色法(1956)红色:中性黏液物质蓝色:酸性黏液物质紫红色:混合性黏液物质图表M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表N 8.1.胃粘膜组织AB-PAS染色40×:2.爱先蓝(PH2.5)法蓝色:唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色:胞核不着色:强硫酸化黏液物质图表O 8.2.爱先蓝(PH2.5)染色液图表P 8.2.爱先蓝法图表Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝(PH1.0)法蓝色:含硫酸黏液物质不着色:非硫酸化酸性黏液物质红色:复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色:黑色素及嗜银细胞颗粒红色:胶原纤维浅黄色:背景图表R 9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色:黑色素浅绿或不着色:背景黄色:肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue(普鲁士蓝)反应显示三价铁蓝色:含铁血黄素浅红色:其他组织图表S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞内。
(一)过碘酸-希夫氏染色(PAS染色)PAS染色可以显示肾小球内的细胞增生、浸润和系膜基质等,并能很好的显示基底膜,是显示糖原和糖蛋白的基本染色。
1.需要试剂2.具体染色步骤(1)切片常规脱蜡入水。
(2)入1%过碘酸氧化10~15min,水洗。
(3)入schiff氏液染10~30min,水洗。
(4)苏木素染细胞核1~2min,水洗。
(5)入1%盐酸乙醇分化数秒,水洗。
(6)氨水返蓝数秒,水洗。
(7)流水冲洗,镜下观察细胞核成蓝色,基底膜染成粉红色。
(8)梯度乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3.染色结果PAS阳性物质(多糖和糖原)呈红色,核呈蓝色。
4.注意事项(1)组织切片的脱蜡步骤应彻底,否则组织无法着色。
(2)S chiff氏液染色的时间需严格控制。
时间过长标本基底膜着色太深,时间过短标本基底膜着色淡。
(3)入1%盐酸乙醇分化时间要短,时间长容易使标本褪色。
(4)染色后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
(二)六胺银-马松染色(PAM-Masson染色)PAM-Masson染色能更清晰显示基底膜、免疫复合物和胶原纤维,免疫复合物和胶原纤维,免疫复合物的定位更为准确。
1.需要试剂①1%过碘酸;②六胺银液;③苏木素染液;④氨水;⑤Masson液;⑥1%亮绿液。
2.具体操作步骤(1)切片常规脱蜡入水。
(2)入1%过碘酸氧化10~15min,水洗5min。
(3)入六银胺液72℃染30~50分钟,以显微镜下见基底膜呈黑色即可。
(4)加2%氯化金数滴于组织,5%硫代硫酸钠洗。
(5)苏木素染细胞核1~2min,1%盐酸乙醇分化,氨水返蓝。
(6)入Masson液约10min,1%醋酸洗。
(7)入1%亮绿5~8min,1%醋酸洗。
(8)梯度乙醇脱水,二甲苯透明,树胶封片。
3.染色结果基底膜及系膜基质黑色,免疫复合物红色。
3.注意事项(1)组织切片的脱蜡步骤应彻底,否则组织无法着色。
(2)染色时间与室温和切片厚度有关,室温低、切片厚需染色时间长,反则需染色时间短。
病理检验特殊染色的概念病理学是研究疾病的形态学和功能学特征的学科,而病理检验是病理学的重要方法之一。
特殊染色是病理检验中常用的一种技术手段,它可以通过染色剂的特异性选择性染色,帮助病理学家观察和诊断组织或细胞的变化。
下面详细介绍特殊染色的概念和应用。
一、特殊染色的概念特殊染色是相对于常规染色而言的一种染色技术。
常规染色是一种经典的染色方法,如血液常规染色用的是偏碱性染色剂,而肉眼可见的普通病理检验常规染色主要是酸性染剂。
而特殊染色则使用一些特殊的染色剂,能在细胞或组织中有选择性地显色,突出某种特定的组织结构、化学物质或病理变化,以增强观察和诊断的效果。
特殊染色主要有4种类型:细胞化学染色、酶化学染色、嗜铬性染色和免疫组化染色。
其中,细胞化学染色是通过对特定化学物质进行染色以将其在细胞或组织中可视化;酶化学染色是通过对酶活性的染色以显示其存在;嗜铬性染色是通过对典型化学反应的染色以显示化学物质的位置和性质;免疫组化染色则是通过利用抗原与抗体的特异性结合来染色,以检测特定的抗原和相关反应物。
二、特殊染色的应用特殊染色在病理检验中有广泛的应用,以下是主要的几个方面:1. 纳米荧光染色:纳米染色剂的应用使得细胞、组织和生物分子得以可以被可视化,从而可以更好地研究干细胞、生物分子定位以及细胞凋亡、增殖等病理学变化。
2. 酸碱珊瑚蛋白染色:通过红碱珊瑚蛋白和绿碱珊瑚蛋白反应后发色,可以显示出脱氧核糖核酸(DNA)的代谢活性,从而提供细胞分裂指标和肿瘤生长活性的检测。
3. 孔雀绿肽免疫组织化学染色:这是一种新型的特殊染色技术,通过使用孔雀绿肽来检测异常蛋白质沉积,从而提供阿尔茨海默病等神经系统疾病的早期诊断。
4. 免疫组化染色:免疫组化染色是一种使用抗体来检测特定抗原的染色技术。
通过使用特异性抗体,可以在组织中准确定位某些细胞或组织中的特定抗原,从而诊断疾病。
5. 哺乳动物组织检测:特殊染色在哺乳动物组织检测中得到广泛应用。
结缔组织染色法
Mallory三色染色法:胶原和网状纤维蓝色,软骨、淀粉样变物质淡蓝色,神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒红色,髓鞘和红细胞橘红色。
2.Masson三色染色法:胶原纤维绿色,肌纤维红色,红细胞橘红色。
鉴别胶原纤维和肌纤维最宜采用的方法。
3.三联染色法:胶原纤维红色,网状纤维黑色,弹性纤维绿色,肌肉和红细胞淡黄色。
二.胶原纤维染色
1.Van Gieson(V.G)苦味酸-酸性品红法:胶原纤维鲜红色,肌纤维、细胞质和红细胞黄色,胞核蓝褐色。
与胶原纤维染色相比的缺点是:易褪色和对比度差。
2.天狼星红(Sirius Red)苦味酸染色法:胶原纤维红色,细胞核绿色,其他黄色。
在偏光显微镜下可见4种胶原纤维。
三.网状纤维染色:包括:Gomori和James。
Gomori银氨染色法:网状纤维黑色,胶原纤维红色。
鉴别诊断中的应用:1)癌和肉瘤的鉴别。
2)恶性淋巴瘤和组织细胞肉瘤。
3)血管内皮细胞瘤和外皮细胞瘤。
4)黏液纤维瘤和黏液肉瘤。
四.弹性纤维染色:效果最好的固定液是:甲醛生理盐水。
Gomori醛复红染色法:弹力纤维深紫色,黏液紫色(肥大细胞颗粒、胰腺B细胞颗粒、垂体B细胞均能同时着色),背景不同程度的黄色。
1)配制后需在室温静置1-2日。
2)是碱性品红加入三聚乙醛和盐酸配制而成。
3)醛复红所谓的成熟是颜色为深紫色。
3)可使胃主细胞着色。
5)应放置在冰箱内保存。
五.显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法:维多利亚蓝+丽春红S:弹性纤维蓝绿色,胶原纤维红色,背景淡黄色。
六.横纹肌组织染色:Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH):胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、横纹肌等均蓝色;胶原、网状纤维、骨基质及骨黄色或玫瑰红色。
1)要在室温下成熟。
2)可使用高锰酸钾促使PATH成熟。
3)乙醇分化时要保存一定的红色。
4)染色后用无水乙醇快速脱水,冷风稍干燥后封固。
七.糖类染色:过碘酸的作用是氧化。
过碘酸-Schiff(PAS)染色法:糖原及其他PAS反应阳性物质红色,细胞核蓝色。
注意事项:1)糖原固定必须及时。
2)组织要取小块固定。
3)Schiff液配好后,需放在棕色瓶内,冰箱保存。
4)Schiff液使用时由冰箱取出需适应室温在进行染色。
八.黏液物质(黏多糖)染色:Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫(ABPAS)染色法:中性黏液物质(黏多糖)红色,酸性蓝色,混合性紫红色。
中性黏多糖阳性的细胞有甲状腺滤泡上皮细胞、胃黏膜表面上皮细胞、结肠黏膜上皮细胞。
九.黑色素染色:
1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法:黑色素及嗜银细胞颗粒黑色,胶原纤维红色,背景浅黄色。
2.Lillie亚铁染色法:黑色素暗绿色,背景浅绿或不着色,肌纤维和背景黄色。
十.含铁血黄素染色:
Perls blue(普鲁士蓝)反应显示三价铁:含铁血黄素蓝色,其他组织浅红色。
1)组织固定不能使用酸性固定液。
2)显示三价铁。
3)器皿应洁净,操作中避免与铁接触。
4)陈旧标本染色效果不好,必要时可用0.25%高门酸钾处理切片20-60min,再用草酸漂白。
胆色素染色:固定液:中性甲醛液、Bouin、Carnoy,避免使用Helly 或Zenker等含铬固定液。
三氯醋酸染色法:胆色素绿色,其他呈复染的红色和黄色。
纤维蛋白染色:血液中纤维蛋白原分子聚合而成的特殊蛋白质。
1.MSB染色法:纤维蛋白红色,陈旧性纤维蛋白紫色,细胞核蓝色,红细胞黄色。
需注意的问题:1)苏木精染色的细胞核不能深。
2)淀粉样物质可以结合偏光的方法得到良好的效果。
3)观察时应结合HE 切片。
4)使用刚果红进行淀粉样物质染色在偏光显微镜下呈特征性的绿色双折光性。
5)由于无水乙醇有脱色作用,脱水后即用冷风干燥,再透明封固。
2.Gram甲紫染色法:纤维蛋白蓝黑色,背景红色。
十二.淀粉样物质染色:
1.刚果红染色法:淀粉样物质红色,细胞核蓝色。
2.Jurgens甲紫染色法:淀粉样物质红色或紫红色,细胞核蓝色。
十三.真菌染色:
1.Crocott六胺银染色法:真菌黑褐色,细胞核红色,背景淡绿色。
2.高碘酸复红染色法:真菌紫红色,红细胞浅黄色。
十四.细菌染色:
1.Gram碱性复红结晶紫染色法:革兰阳性菌蓝色,阴性菌红色,细胞核红色。
2.Ziehl-Neelsen抗酸杆菌染色法:抗酸杆菌红色,背景灰蓝色。
最基本的染料是:碱性复红。
3.Warthin-starry胃幽门螺杆菌染色法:棕黑色或黑色,背景淡黄色。
十五.螺旋体染色:
1.Gimesa染色法:螺旋体及细菌蓝到淡紫色,细胞质蓝色,红细胞橘黄色。
时间:8-18h或更长。
2.Ryu碳酸钠碱性复红法:螺旋体红色
十六.病毒包涵体染色:
Macchiavello包涵体染色法:包涵体红色,其余组织蓝色。
疱疹病毒核内包涵体和麻疹病毒包涵体必须通过特殊染色方法才能证明。
十七.乙肝表面抗原染色:
1.Shikata地衣红染色法:HBsAg阳性棕色。
地衣红PH:1.2-1.6.
2.醛复红改良染色法:HBsAg阳性紫色,结缔组织红色,红细胞及基质黄色。
3.维多利亚蓝染色法:HBsAg阳性蓝绿色,细胞核红色。
1)需放置3周后使用。
2)储存于暗处可反复使用。
3)核固红染色液使用时不能摇动,用饱和上清液。
4)初次染色,最好使用HBsAg阳性组织切片做对照。
5)在维多利亚蓝染液中需放置12-24h。
十八.神经细胞尼氏小体染色:
1.焦油紫染色法:尼氏小体紫色,胶质细胞淡紫色,背景无色。
2.Einarson棓酸青蓝染色法:尼氏小体黑蓝-紫色,核蓝色,背景浅灰色。
3.甲苯胺蓝染色法:尼氏小体淡蓝色,细胞核深蓝色,背景无色。
十九.神经纤维染色
1.Holmes染色法:神经纤维黑色,背景灰紫色。
2.Bielschowsky染色法:神经纤维黑色,背景紫色。
3.Von Braunmubl神经纤维、扣结、老年斑染色法:神经纤维黑色,老年斑黑色,背景浅灰色。
4.Eagert退变神经纤维染色法:退变神经纤维黑色,背景浅棕色。
二十.神经髓鞘染色:
1.Weigert-Pal染色法:髓鞘黑蓝色,背景浅灰色。
2.Weil染色法:髓鞘蓝黑色,背景浅灰色。
石蜡切片染色中最理想。
3.Kultshitzky染色法:髓鞘蓝黑色,背景浅黄色。
4.Luxol fast blue染色法:髓鞘蓝色,核仁紫色,尼氏小体紫色。
5.变色酸2R-亮绿染色法:髓鞘深红色,轴索和间质绿色,脱髓鞘纤维不着色。
6.Marchi退变髓鞘染色法:退变髓鞘黑色,背景浅棕色。
二一.神经胶质细胞染色:
1.Cajal星形细胞染色法:原浆性及纤维性星形细胞紫黑色。
2.改良的Cajal染色法:星形细胞黑紫色,背景粉红色。
适用于石蜡
切片星形细胞染色。
3.Weil及Davenport小胶质细胞及少突胶质细胞染色法:神经胶质细胞及少突胶质细胞黑色,背景黄棕色。
4.Nao menke及Feigin小胶质细胞石蜡切片染色法:小胶质细胞黑色,背景灰色。
二二.神经内分泌细胞亲银反应:
1.Lillie-Masson二胺银法:亲银颗粒细胞黑色,细胞核红色,背景浅灰黄色。
2.Gomori-Burtner六胺银法:亲银颗粒细胞黑色,背景浅灰红色。
二三.神经内分泌细胞嗜银反应:
1.De Grandi改良硝酸盐反应法:嗜银细胞颗粒棕黑色,细胞核红色。
2.碱性重氮反应法:嗜银细胞颗粒橘红色至红色,细胞核蓝色,胞质黄色。
部位:小肠和类癌。
二四.嗜铬细胞染色
1.Gimesa改良染色法:嗜铬细胞红色至紫红色,皮质细胞蓝色,红细胞粉红色。
2.Wiesel染色法:嗜铬细胞黄绿色,细胞核红色,其他均蓝色。
二五.肥大细胞染色:
甲苯胺蓝改良染色法:肥大细胞颗粒红紫色,细胞核蓝色。
醛复红法:固定:甲醛生理盐水。