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苹果多酚的固相萃取纯化研究苹果多酚是一种具有抗氧化和抗炎作用的天然化合物，已被广泛应用于食品、保健品和药物等领域。
然而，苹果多酚的提取和纯化一直是一个挑战，因为它们存在于苹果中的含量很低，且与其他化合物混合在一起。
因此，固相萃取技术被广泛应用于苹果多酚的纯化研究中。
固相萃取是一种基于化学吸附原理的分离技术，它利用固定在固相材料上的化学吸附剂选择性地吸附目标化合物，然后用适当的溶剂洗脱出来。
在苹果多酚的纯化研究中，常用的固相材料包括C18、C8、NH2等，它们具有不同的亲水性和亲油性，可以选择性地吸附苹果多酚和其他杂质。
在固相萃取纯化苹果多酚的过程中，需要考虑以下几个因素：1. 固相材料的选择：不同的固相材料具有不同的亲水性和亲油性，需要根据苹果多酚和其他杂质的性质选择合适的固相材料。
2. 样品的预处理：苹果多酚存在于苹果中的含量很低，需要对样品进行适当的预处理，如酸解、酶解等，以提高苹果多酚的含量和纯度。
3. 萃取条件的优化：萃取条件包括溶剂的选择、萃取时间、萃取温度等，需要根据实验结果进行优化，以提高苹果多酚的回收率和纯度。
4. 纯化方法的选择：固相萃取可以与其他分离技术结合使用，如色谱分离、逆流色谱分离等，以进一步提高苹果多酚的纯度。
固相萃取技术已被广泛应用于苹果多酚的纯化研究中，并取得了一定的成果。
例如，一项研究报道了利用C18固相萃取技术从苹果中纯化得到了高纯度的苹果多酚，其回收率达到了85%以上。
另一项研究利用C8固相萃取技术从苹果汁中纯化得到了高纯度的苹果多酚，其纯度达到了98%以上。
总之，固相萃取技术是一种有效的苹果多酚纯化方法，可以选择性地吸附苹果多酚和其他杂质，从而提高苹果多酚的纯度和回收率。
未来，固相萃取技术还有望在苹果多酚的工业化生产中得到广泛应用。
苹果多酚资料
【英文名称】 Apple fruit extract Polyphenols
【植物来源】本品为蔷薇科植物苹果Malus pumilaMicc.
【提取部位】果实。
【主要成分】主要成分以绿原酸为主的酚羧酸类约25％，儿茶素、表儿茶酸、没食子酸等单体约15％，根皮苷、根皮素、对香豆酸、二氢查耳酮、根皮苷等约占10％，原花色素类（平均相对分子质量2000左右）约占50％，由上述各组分所构成的多酚类物质。
【质量指标】项目标准规定
外观棕红色粉末，有苦涩味和苹果香气。
粒度 80目
含量（UV）苹果多酚10—75%
灰分≤5.0%
重金属≤10ppm
砷盐≤2ppm
溶剂残留≤0.05ppm
细菌数＜1000CFU/gm
霉菌/酵母菌＜100CFU/gm
致病菌不得检出
【产品规格】苹果多酚10—75%
【功效】
1. 美容作用。
通过强抗氧化作用以抑制酪氨酸酶的活性来降低黑色素的形成，
通过抑制过氧化脂质的形成以消除黄褐斑，达到增白美容效果。
2. 抗过敏作用和变异原性。
通过抑制组氨的游离和抑制透明质酸酶的活性，
以对抗变态反应等作用。
3. 预防龋齿作用。
4. 抑制血压上升。
5. 降低血清胆固醇。
【包装】内用双层塑料袋，外用铝箔袋或纸板桶（25公斤/桶）。
【贮存】置于阴凉干燥处。
多酚的组分鉴定及功能特性研究苹果多酚是苹果中富含的一类活性物质，具有显著的抗氧化、抗炎、抗菌等生物活性。
因此，开展苹果多酚的组分鉴定及功能特性研究对于深入了解其生物学作用和开发应用具有重要意义。
本文将概述苹果多酚的组成成分，分析各成分的功能特性，并探讨研究现状与争论焦点。
苹果多酚主要包括儿茶素、黄酮醇、酚酸、花青素等化合物（如图1所示）。
这些化合物具有不同的化学结构和功能特性，如儿茶素具有显著的抗氧化作用，花青素具有抗炎、抗肿瘤等活性。
抗氧化作用：苹果多酚的抗氧化作用主要得益于其儿茶素、黄酮醇等成分。
这些成分能够清除体内的自由基，延缓氧化应激反应，对预防心血管疾病、癌症等具有一定的效果。
抗炎作用：苹果多酚的抗炎作用主要归功于其花青素、酚酸等成分。
这些成分能够抑制炎症介质释放，减轻炎症反应，对治疗关节炎、皮炎等具有一定的疗效。
抗菌作用：苹果多酚具有一定的抗菌作用，能够抑制多种病原菌的生长繁殖，对预防肠道疾病、呼吸道感染等具有一定的作用。
其他作用：苹果多酚还具有抗疲劳、抗衰老、降血糖等多种生物活性。
目前，对于苹果多酚的研究已经涉及多个领域，包括化学合成、生物活性、药理作用等方面。
然而，关于苹果多酚的功能特性的研究仍存在一定的争议。
一方面，一些研究表明苹果多酚具有显著的抗氧化、抗炎、抗菌等作用，对人类健康具有积极的影响。
另一方面，也有研究指出苹果多酚可能对人体健康产生负面影响，如儿茶素等成分可能影响人体对铁的吸收，导致贫血等问题。
由于苹果多酚的化学性质不稳定，其在食品加工和储存过程中的变化和损失也引起了研究者的。
如何保持苹果多酚的稳定性和活性，以及开发高效的苹果多酚提取和纯化技术，是当前研究的热点和难点。
苹果多酚是一类具有显著生物活性的物质，其组成成分和功能特性受到多个因素的影响。
目前，对于苹果多酚的研究已经取得了一定的进展，但仍存在一些争议和问题需要进一步探讨。
未来，需要加强苹果多酚稳定性、提取与纯化技术等方面的研究，为开发高效、稳定的苹果多酚功能性食品和药物提供理论依据和技术支持。
苹果多酚的分离纯化及抗氧化性研究的开题报告
1. 研究背景
苹果含有丰富的多酚化合物，其中包括类黄酮、儿茶素、花青素等多种成分，具有很好的抗氧化性质。
然而，苹果多酚的组成极为复杂，导致其分离纯化难度较大。
因此，为了进一步研究苹果多酚的抗氧化性质以及分离纯化其主要成分，本研究将采取以下研究方向：
2. 研究目的
(1) 建立有效的苹果多酚分离纯化方法，制备出高纯度的苹果多酚样品。
(2) 研究苹果多酚在体外的抗氧化性质，进一步探究其抗氧化机制。
(3) 比较不同溶剂提取苹果多酚的效果，寻求最优的提取方法。
3. 研究内容及方案
(1) 分离纯化苹果多酚
将苹果果皮、果肉等材料用不同的有机溶剂提取多酚化合物。
采用高效液相色谱（HPLC）对提取的样品进行分离纯化，并进一步使用质谱仪对纯化后的成分进行鉴定和定量。
(2) 抗氧化活性测试
使用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）radical、2,2'-联氮双（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）盐酸盐（ABTS+）radical以及还原能力等多个方法测定苹果多酚的抗氧化性能。
同时研究其抗氧化机制。
(3) 比较不同提取方法的效果
将苹果果皮、果肉用不同的有机溶剂进行提取，比较不同溶剂对苹果多酚的提取效果，寻求最优的提取方法。
4. 研究意义
本研究将为苹果多酚的分离纯化提供有效的方法，并深入研究其抗氧化特性，进一步揭示其在预防和治疗多种疾病方面的潜在作用，具有较高的理论和实际应用价值。
苹果多酚的提取技术和应用研究概述苹果多酚是从苹果皮和果肉中提取出来的一种重要的营养成分，具有抗氧化、抗炎、抗癌、增强免疫力等功效。
近年来，随着人们健康意识的增强，苹果多酚的研究和应用也越来越受到关注。
本文将对苹果多酚的提取技术和应用进行探讨。
苹果多酚的提取技术苹果多酚的提取技术主要包括溶剂提取法、超临界流体萃取法、微波辅助萃取法、微生物发酵法和超声波萃取法等。
下面我们分别进行介绍。
溶剂提取法溶剂提取法是目前应用最广泛的一个方法。
该方法主要是利用溶剂对多酚进行提取和分离。
常用的溶剂有乙醇、丙酮、甲醇、醚类、酸类和酯类等。
不同的溶剂对多酚的提取效果有所不同，常用的是乙醇、丙酮和甲醇。
超临界流体萃取法超临界流体萃取法是指将萃取溶剂变成超临界状态，利用其具有类气体和类液体的性质，对多酚进行提取。
超临界流体的主要特点是密度接近液态，粘度接近气态，可大幅提高溶剂的扩散速度和质量转移效率。
超临界流体萃取法可以减少溶剂使用量，提高产品的纯度和品质，但是设备成本较高，操作难度大。
微波辅助萃取法微波辅助萃取法是利用微波加热效应，促进溶剂对多酚的渗透和扩散。
相比于传统的热水浸提法，微波辅助萃取法可以缩短提取时间、节省能源，并使萃取率和萃取效果更好。
微生物发酵法微生物发酵法是利用微生物代谢产生的酶，分解多酚并释放出来。
该方法具有反应速度快、萃取率高、生产成本低等优点，但是较难于控制和稳定。
超声波萃取法超声波萃取法是利用超声波的机械效应，破坏细胞壁和细胞膜，释放出多酚。
与传统的浸提法相比，超声波萃取法可以缩短提取时间、提高萃取率和提取效果。
苹果多酚的应用研究苹果多酚具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗菌、抑制肿瘤、降低血脂、增强免疫力、保护心血管等。
因此，苹果多酚的应用研究涉及到多个领域。
食品领域苹果多酚可以增加食品的营养价值，提高食品的品质和口感。
目前，苹果多酚广泛应用于果汁、果酱、蜜饯、糖果、保健品等食品中。
医药领域苹果多酚具有抗菌、抗炎、抗氧化、抑制肿瘤等作用，可以用于预防和治疗多种疾病。
苹果多酚的提取及抗氧性研究1引言1.1 背景1.1.1苹果多酚的作用及研究意义苹果含有大量的对人体有益的营养成分，其所含的成分比较复杂。
从苹果把所需要的苹果多酚提取出来，在抗氧化性方面进行探究，可知苹果多酚（apple polyphenols,缩写AP)具有较强的还原性，是一种对人体无害的、纯天然的抗氧化剂和自由基清除剂。
然而苹果的诸多作用都是苹果多酚在起作用，其主要原因是苹果多酚主要成分有类黄酮类化合物，且含有多酚类、黄酮类、色素类等多种成分，苹果多酚可以成为食品、药物的添加剂，且苹果多酚具有抗癌、抗氧化、抗病毒等作用，随着市场不断开发，经济不断提升，在近期将对苹果多酚的提取及抗氧化性进行深入的研究。
目前研究表明，苹果多酚在食品类、医疗、化妆品应用广泛，尤其在化妆品领域中极为显著，但是，还有详细的细节方面需要继续探究，有待进一步的开发及应用。
国内外已经对好多酚进行研究，苹果多酚的研究已成为焦点。
对于苹果多酚在商业中的开发，为了让生活更加美好，为减少环境的污染，构建美丽和谐文明的社会，具有深远的社会意义。
1.1.2苹果多酚的提取方法目前，苹果多酚的提取法主要有：有机溶液提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、加压溶剂提取法、超临界流体萃取法。
实验中溶剂的提取主要是用有机溶剂，但是浸提很长时间，浸提率偏低；微波辅助提取法、加压溶剂提取法、超临界流体萃取法这几种提取在技术和设备方面要求较高，所以不宜采用。
而最常用的方法是超声波辅助提取，由查阅的文献资料和有关提取率分析，在本次实验探索中以乙醇溶液作为提取溶剂，利用超声波对苹果多酚进行提取，并且通过设计正交试验探索苹果多酚最佳的提取条件。
1.1.3研究苹果多酚抗氧化性1.1.3.1改变环境探究抗氧化性实验前把苹果多酚进行处理，储存在不同的环境中对抗氧化探究。
把苹果多酚分别在冷藏、加热、室温的环境条件下，在不同的环境中改变放置苹果多酚的方式，对其探索研究苹果多酚随时间变长其抗氧化性不太明显，为进一步探究，采用循环伏安法测定。
苹果多酚的研究概况作者：孙平平来源：《科技创新导报》2011年第07期摘要:苹果中的多酚是一类很强的抗氧化剂,其抗氧化能力等多种生物功能活性是茶多酚的100倍。
苹果多酚除了具有很强的抗氧化作用外还有抗变异原性、防龋齿作用、抑制血压上升等生理功能,因此苹果多酚是一类具有极大开发潜力的物质。
关键词:苹果多酚抗氧化作用分离提纯槲皮素中图分类号:S646 文献标识码:A 文章编号:1674-098X(2011)03(a)-0001-02苹果多酚是苹果中的重要成分。
中医认为苹果性味甘、凉,具有生津、润肺、除烦、解暑、开胃、醒酒等功用。
研究表明,一天能食用苹果110g或更多的人患心脏病的几率要比其他不食用苹果的人低49%;与年龄有关的人类疾病如心脏病、癌症、炎症、关节炎、免疫系统低下、功能紊乱以及白内障等都是由自由基的细胞破坏导致,而我们饮食中的抗氧化剂则对疾病起了很好的预防作用。
1 苹果多酚的组成苹果中的酚酸主要有绿原酸和咖啡酸。
绿原酸是肉桂酸的衍生物(羟基肉桂酸),咖啡酸在苹果中以咖啡奎宁酚酸的形式存在,酯类水解后产生咖啡酸。
苹果中的黄酮类物质主要有儿茶素、表儿茶素、原花青素(B1、B2、C1)、槲皮酮和槲皮苷等。
苹果皮中的多酚(除了绿原酸和表儿茶素外)含量要高于果肉中的多酚含量,研究发现整个苹果果实的46%的酚类物质在果皮中。
果皮中含有较高含量的儿茶素、槲皮素阿拉伯糖苷、槲皮素葡萄糖昔和半乳糖糖苷混合物,苹果果肉中含有较高含量的绿原酸和儿茶素,但没有槲皮苷和槲皮素。
果皮果肉中均含有绿原酸和儿茶素,而槲皮素糖普则只存在于果皮中。
2 苹果多酚的提取与分离2.1 提取工艺从苹果中提取多酚,国内外有许多研究,形成了比较成熟的提取方法,主要如下:(1)苹果去核→切碎→与7%丙酮均质90s→浸提15min→离心(4100r/min,5min) →上清液→浓缩→CAP→LH-20-柱分离→缩合丹宁(CAT)和小分子酚类(2)苹果→破碎→提取→浓缩(减压) →吸附树脂分离→乙酸乙酯纯化萃取→真空干燥→成品2.2 苹果总酚的测定方法对于总酚的测定,1956年,Signeltno首次采用了福林-肖卡(Floin-cicoaeltu)法,以没食子酸为标准酸;Cilliers和Sigleton利用HPLC测定了不同品种苹果酿成的果酒中的咖啡酸和绿原酸的含量,并得出了绿原酸在总酚中所占的比例(6.2～10.7)。
目前测定苹果总酚的方法一般用福林-肖卡法。
2.3 国内外苹果多酚分离提纯的研究Suarez (1949)等人发现用SpheriosrbODS-2柱可以较好地分离黄烷醇和原花青素(C1和四聚体除外),因为这些组分与其他不明香豆酸酯和表儿茶素一齐洗脱下来。
而NoVa-PakC18,柱则可以较好地分离包括黄酮醇苷在内的各种酚类,三聚体C6和四聚体有部分重叠。
而这种方法并不能分离3-半乳糖苷和3-葡萄糖苷(异槲皮酮)。
而且用乙酸乙酯浸提苹果汁中的多酚可以很好的分析黄烷醇和二羚查耳酮,而这种方法并不适合槲皮苷的定量分析。
Tomomasa(1998)等人用Sepabeads sp-850柱分离得到粗多酚(CAP),并用HPLC分析,得到粗多酚中各种成分的含量,用Sephadex LH-20分离得到苹果缩合单宁(CAT);戚向阳用H型树脂吸附,分离物产率达0.1%,原花青素的含量为70.50%。
3 影响苹果多酚组成的因素在苹果生长成熟过程中,多酚组成并不是一成不变的,随着果实的成熟,总酚含量会降低。
苹果多酚组成除了与成熟度有关外,还受到其他因素的制约。
3.1 栽培和生长条件对多酚组成的影响栽培和生长条件对苹果多酚有一定的影响,即不同品种其多酚含量也有所不同。
有研究表明,不同的品种影响果实的总酚含量,而且苹果果肉中的酚类组成由于品种不同而有很大的差异,但果皮中的酚类含量则不会因为品种不同而有变化。
当疏果率提高时(从157个果实附冠到30个果实树冠),单个果实的多酚含量有明显提高,低分子量多酚含量提高38%,高分子量多酚含量提高19%。
3.2 加工和贮藏条件对酚类组成的影响加工工艺也影响多酚的组成,主要决定于苹果浆的存放时间和杀菌以及酶等处理方法。
压榨苹果汁中的总酚含量明显低于浸提的苹果汁中的含量。
有研究者发现苹果果实在冷藏过程中总酚含量相对稳定。
苹果收获后加工贮藏前,主要酚类的含量会急剧下降到一个水平,然后基本保持不变。
Awad发现在1℃超低氧条件下贮藏的苹果中的黄酮类化合物和绿原酸的含量跟常规氧浓度下的没有明显差异,贮藏期间,花色素3-半乳糖苷和槲皮素糖苷的含量相对稳定,而儿茶素、槲皮苷和绿原酸则有微小的变化。
苹果浓缩汁在25℃下贮藏9个月后,产生羟甲基呋喃、肉桂(36%)和槲皮素(50%～60%)以及槲皮素糖苷都有不同程度的降解,原花青素全部损失。
4 苹果多酚生理功能的研究现状4.1 抗氧化作用对苹果多酚的抗氧化性研究起于20世纪90年代。
Tanabe对苹果多酚及其生产方法以及用途进行了专利申请,在其专利中,未成熟“富士”苹果浸提物的抗氧化性比成熟“富士”的苹果浸提物要高。
而Lee发现各种抗氧化剂的抗氧化性顺序如下:槲皮素>表儿茶素>原花青素B2>维生素C>根皮素>绿原酸。
所以,苹果中的槲皮素、表儿茶素和原花青素B2是苹果的主要抗氧化剂,而不是维生素C。
4.2 抗诱变能力Shinohara发现苹果的水透析液可以抑制Salminella typhimuriumAT100和AT80的诱变,试验证明苹果的水透析液的成分就是多酚类物质,所以多酚有抗诱变特性。
4.3 抗过敏功能Tomomasa从未成熟苹果中分离提纯苹果缩合丹宁,并以此为原料研究其对小鼠碱性白血病(RBL-2H3) 细胞中组胺释放的抑制作用,结果发现苹果缩合丹宁可以影响小鼠的早期信号转导包括钙的流动。
4.4 抗龋齿效果龋齿的形成要经历以下三个过程:(1)糖质的摄食;(2)链球菌变种从而形成齿垢;(3)齿垢中菌生成酸,使牙齿的釉质溶解。
其中,使蔗糖转化为不溶性葡聚糖类的酶为葡萄糖转移酶(简称Gtase)。
如果抑制了龋齿形成的第(2)阶段,即抑制了Gtase的活性,可起到有效预防龋齿的效果。
4.5 抑制血压上升作用现已明确血压的上升与血压紧缩素转换酶系密切相关,该酶系中的血管紧缩酶素I转换酶(ACE)可生成有血管收缩作用的血管紧缩素II,而抑制了ACE的活性可起到有效预防高血压的效果。
田边正行发现苹果多酚成分具有很强的ACE抑制效果。
5 待解决的问题1)苹果与其它具有抗氧化性的水果和蔬菜的抗氧化性机理的深入研究2)苹果多酚分离提纯工艺的优化3)苹果品种和果实不同成熟度对苹果总酚含量的影响4)不同的苹果品种中的各种酚类物质在果实成熟过程中含量及其抗氧化性的变化。
6 研究目的和意义Ebehtardr研究发现,100g新鲜苹果的抗氧化能力相当于1500mg的维生素C,而500mg的维生素C在人休内就可以作为前体氧化剂了,所以苹果多酚具有很强的抗氧化性。
苹果多酚主要存在于未成熟果实中,其含量是成熟果实的3～10倍,每年5～7月份,大量的风落果和疏果等苹果未熟果落地,果农不能将其合理利用,作为垃圾置之不理,因此,有必要将这部分未熟果加以合理利用,从中提取、分离苹果多酚,既充分利用未熟果,又增加了果农的收入。
再者,国内的苹果加工厂所用的原料多是残次果,其中有很大一部分是生果、涩果,因此可以对其果渣进行二次利用,从中提取苹果多酚,做到变废为宝,又解决了试验中原料季节性的局限。
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