甲硝唑残留的胶体金试纸条的研制

引言概述：胶体金试纸条是一种常用的分析试剂，广泛应用于生化分析、环境监测等领域。

它以胶体金作为指示剂的主要成分，结合纸条的吸附性能，通过改变颜色来检测目标物质的存在。

本文将详细介绍胶体金试纸条的制备方法和其在分析应用中的优势。

正文内容：一、胶体金试纸条的制备方法1.胶体金的制备1.1还原法制备胶体金1.2化学合成法制备胶体金1.3生物法制备胶体金2.纸条的处理2.1选用合适的纸质材料2.2纸条的预处理2.3纸条的涂覆二、胶体金试纸条的特点和优势1.高灵敏度1.1胶体金的特殊光学性质1.2微米级纳米颗粒的高表面积1.3足够的反应时间2.简单易用2.1操作步骤简单2.2结果直观可见2.3不需要专业设备3.高选择性3.1可调控的颗粒大小和形状3.2可调控的胶体金表面性质3.3可选择性修饰纸条反应区域4.低成本4.1胶体金制备成本低4.2纸条材料成本低4.3适用于大规模生产5.广泛应用5.1生化分析5.2环境监测5.3食品安全检测5.4临床诊断三、胶体金试纸条在生化分析中的应用案例1.蛋白质分析1.1检测蛋白质的存在及浓度1.2快速筛选蛋白质结构1.3监测酶活性变化2.DNA分析2.1单核苷酸多态性检测2.2基因突变检测2.3DNA序列鉴定3.药物检测3.1药物快速筛选3.2药物代谢产物检测3.3药物治疗监测四、胶体金试纸条在环境监测中的应用案例1.水质监测1.1水中重金属离子检测1.2水中有机物污染物检测1.3水中微生物检测2.大气监测2.1空气中有害气体检测2.2空气中颗粒物检测2.3气候变化指示剂监测3.土壤监测3.1土壤中有害物质检测3.2土壤中养分成分检测3.3土壤微生物检测五、结合与总结胶体金试纸条作为一种快速、简便、低成本的分析工具，在生化分析和环境监测等领域具有广泛的应用前景。

它不仅可以满足快速检测的需要，还能提供定量和定性的分析结果。

未来随着技术的不断创新和进步，胶体金试纸条将在更多领域展现其优势和应用价值。

专利名称：一种甲硝唑胶体金免疫检测试纸
专利类型：实用新型专利
发明人：孙远明,雷红涛,王弘,肖治理,吴青,沈玉栋,杨金易,黄晓钰
申请号：CN200620062037.8
申请日：20060725
公开号：CN201004064Y
公开日：
20080109
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本实用新型公开了一种甲硝唑胶体金免疫检测试纸条，它是由样液吸收层、胶体金标记层、检测反应层及吸水层依次设置在背衬上组成。

该快速检测试纸条特异性强，能够实现半定量检测，4－40℃都可使用，3min以后便可观察结果，适合于卫生、质监、海关、家畜养殖场等单位或个人对动物尿液、肉类等样品中的甲硝唑进行快速检测。

申请人：华南农业大学
地址：510642 广东省广州市天河区五山华南农业大学
国籍：CN
代理机构：广州粤高专利代理有限公司
代理人：陈卫
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基于上转换荧光纳米材料免疫层析法快速检测甲硝唑的研究作者：朱凡君韦何雯郭跃平费建枫来源：《食品安全导刊》2022年第11期摘要：為方便现场检测农产品中抗生素残留情况以及解决实验室检测样本量多时导致检测耗时长等问题，本文结合免疫层析技术和上转换发光纳米材料研制了一种可快速定量检测豆芽中甲硝唑残留量的试纸。

通过对抗体偶联pH值优化，标记颗粒粒径筛选，包被浓度的确定，在最优条件下制备了上转换发光免疫层析试纸，该技术的方法检测限可达1.01 ng·mL-1，加标回收率为90.6%～99.7%，变异系数为3.5%～19.4%，检测时间为10 min。

关键词：上转换荧光纳米材料；免疫层析；甲硝唑Rapid Detection of Metronidazole by Immunochromatography with Upconversion Nanoparticles ZHU Fanjun1， WEI Hewen1， GUO Yueping1， FEI Jianfeng2（1.Jinhua Institute for Food and Drug Control， Jinhua 321000， China; 2.Hangzhou New-Test Biotech Co.， Ltd.， Hangzhou 310000， China）Abstract： In order to facilitate the on-site detection of antibiotic residues in agricultural products and solve the problem of time-consuming detection caused by large sample size in laboratory， this paper developed a fast and quantitative test paper for metronidazole residues in bean sprouts by combining immunochromatography technology and up-conversion materials. By optimizing the pH value of antibody conjugation， screening the particle size of labeled particles anddetermining the coating concentration， upconversion immunochromatography test paper was prepared under the optimal conditions. The detection limit of this technology was 1.01 ng·mL-1， the recovery rate was 90.6%～99.7%， the coefficient of variation was 3.5%～19.4%， and the detection time was 10 min.Keywords： up-conversion materials; immunochromatography; metronidazole甲硝唑（Metronidazole，MNZ），又名灭滴灵，属于硝基咪唑类抗生素，能快速杀灭厌氧细菌和抑制感染，在1978年被世界卫生组织定为抗厌氧菌首选药[1]。

论文题目：有机磷农药胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制学科专业：生物化学与分子生物学学位申请人：刘莹指导教师：魏新林（副教授）摘要有机磷农药目前仍在世界范围内广泛使用，其检出率高、超标严重、毒性大，对消费者的身体健康造成了极大的危害。

加大有机磷农药的监控力度，开发快速检测技术成为有机磷农药残留检测的研究趋势，是事关国计民生的重大食品安全问题。

本研究基于免疫分析原理，利用胶体金标记技术，研制了一种胶体金免疫层析试纸条，为有机磷农药的现场监控提供了可能，并为农药小分子的胶体金免疫层析试纸条的制作提供了理论依据。

本实验的主要研究内容和结果如下：1 通过重氮化法合成了一种有机磷人工抗原。

先将合成的有机磷半抗原产物通过质谱分析和核磁共振鉴定，确定半抗原合成成功。

偶联后的全抗原经紫外扫描和红外光谱鉴定，确定半抗原与载体蛋白偶联成功。

经浓度测定，有机磷人工抗原产物的蛋白含量为 4.32mg/ml。

通过紫外吸收法测得半抗原和载体蛋白的偶联比为7.61：1。

2 制备了有机磷单克隆抗体胶体金标记探针，确定胶体金标记的最佳pH为8.0，最适蛋白量为24 µg/ml。

通过斑点金免疫渗滤实验和免疫层析实验，鉴定制备的金标抗体探针具有免疫活性。

3 以有机磷人工合成抗原为包被抗原固定于硝酸纤维素膜的检测线位置，以羊抗鼠IgG包被于硝酸纤维素膜的控制线位置，组装了胶体金免疫层析试纸条。

对试纸条的各个组分进行了研究，确定了硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫等膜材料的使用型号，对各种膜的浸泡处理液的配方进行了优化选择，对免疫层析反应的溶液系统进行了筛选，并对包被抗原、羊抗鼠二抗及金标抗体的浓度和喷量进行了调试和确定。

最后对制备的胶体金试纸条进行了灵敏度、特异性、稳定性和重复性等各项质量性能指标测试。

结果表明，该胶体金试纸条可检出杀螟硫磷、甲基对硫磷、对硫磷等9种有机磷农药，最低检出浓度可达0.25 mg/kg，可用于多种有机磷农药的初筛。

烟草中甲霜灵残留快速检测试纸条研制袁光宇;龚维瑶;罗维超;徐明慧;贾玲玲;谢体波;钟新敏;程茹【摘要】为开发快速检测烟草(Nicotiana tabacum L.)中的甲霜灵残留方法,以自制抗原、抗体为材料,研制一种胶体金免疫层析检测试纸条,并以甲霜灵原料合成半抗原,进一步制备抗原免疫后制备甲霜灵单克隆抗体.结果表明,纸条检测限对干烟草为1.5 mg/kg,鲜烟叶为1.0 mg/kg,与其他药物无交叉反应,且与色谱法比较符合率为98％,假阳性率为2.3％.甲霜灵残留试纸条检测烟草时样品处理简单、检测时间短、无需专业人员、经济适用等特点,能够实现烟草快速、准确、批量检测,可为烟草中甲霜灵残留检测提供技术支持.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2019(058)002【总页数】4页(P107-110)【关键词】烟草(Nicotiana tabacum L.);甲霜灵;试纸条;快速检测【作者】袁光宇;龚维瑶;罗维超;徐明慧;贾玲玲;谢体波;钟新敏;程茹【作者单位】贵州勤邦食品安全科学技术有限公司,贵阳 550009;贵州勤邦食品安全科学技术有限公司,贵阳 550009;贵州勤邦食品安全科学技术有限公司,贵阳550009;贵州勤邦食品安全科学技术有限公司,贵阳 550009;贵州勤邦食品安全科学技术有限公司,贵阳 550009;贵州勤邦食品安全科学技术有限公司,贵阳 550009;贵州勤邦食品安全科学技术有限公司,贵阳 550009;贵州勤邦食品安全科学技术有限公司,贵阳 550009【正文语种】中文【中图分类】TS207.5中国烟草（Nicotiana tabacum L．）种植历史悠久，烟草需求量随着经济的发展也越来越大。

烟草在种植过程中常出现黑胫病、青枯病、根腐病等［1-3］，施药后农药残留情况不可避免。

因此，烟草农药残留安全问题成为人们关注的焦点之一。

甲霜灵属N-苯基酰胺类高效内吸性杀菌剂化合物，对由真菌引起的黑胫病具有特异杀菌效果［4］。

广东烟区黄瓜花叶病毒胶体金检测试纸条的研制及应用近年来，农作物病毒病害给农业生产带来了严重的威胁，特别是在烟草产区黄瓜的病毒病害更是给农民造成了极大的经济损失。

针对广东烟区黄瓜花叶病毒的检测问题，科研人员利用纳米技术和生物检测技术研制出了一种新型的检测方法——胶体金检测试纸条。

该检测试纸条具有快速、简单、灵敏、经济的特点，可以在病毒侵染的初期及时对黄瓜花叶病毒进行检测，为预防和控制病毒病害提供了一种新的手段。

一、检测试纸条的研制1. 胶体金制备技术胶体金是一种颜色鲜艳的纳米颗粒，具有良好的生物相容性、高比表面积和光学性质，适合用于生物检测。

科研人员利用还原法制备了一种稳定的胶体金水溶液，保证了纳米颗粒的分散性和均一性。

2. 抗体标记技术将针对黄瓜花叶病毒的特异性抗体与胶体金颗粒进行共价结合，形成稳定的抗体-胶体金复合物。

这样的复合物具有对病毒蛋白的高度特异性识别能力，可以在检测过程中对病毒进行高效的捕获和识别。

3. 纸基材料的选择研究人员选用了高吸水性、低背景干扰的纸基材料作为检测试纸条的载体。

该纸基材料具有优良的润湿性和流变性能，有利于样品和试剂的迅速扩散和反应，保证了检测试纸的检测灵敏度和准确性。

4. 检测原理将黄瓜花叶病毒的样品滴于检测试纸条上，经过几分钟的孵育，如果样品中含有黄瓜花叶病毒，则病毒与胶体金复合物发生特异性的抗原-抗体反应，形成可见的红色线条。

通过观察纸条上的线条数量和颜色深浅可以判断样品中是否存在黄瓜花叶病毒。

1. 田间快速检测使用检测试纸条可以在田间快速对黄瓜花叶病毒进行检测，无需专业的实验室设备，只需将样品和试剂滴于纸条上，经过简单的操作就可以得到检测结果。

这对于农民来说是一种方便快捷的检测工具，可以在病毒侵染的初期及时采取控制措施，避免病害的扩散。

2. 病害监测和防控通过定期对烟区黄瓜进行检测，可以及时了解病毒病害的发生情况和分布范围，为制定科学的防控措施提供重要参考。

一种新冠胶体金抗体检测试纸条及其制备
方法
以下是一种新冠胶体金抗体检测试纸条及其制备方法的简要介绍：
该测试纸条主要包括纸基、检测线和负对照线，检测线和负对照线上分别固定有新冠病毒抗原和兔抗IgG抗体。

制备方法包括以下步骤：
1.准备纸基，将其涂上样品吸附剂。

2.在纸基上涂布含有新冠病毒抗原的检测线和含有兔抗IgG抗体
的负对照线。

3.干燥并切割纸条，制成测试纸条。

4.将制成的测试纸条包装好，存放于密封袋中。

使用时，将待检测样品滴到样品吸附剂处，样品会被纸基吸附并沿着纸条流动，如果样品中存在新冠病毒抗体，则会与检测线上的新冠病毒抗原结合，形成红色线条，从而显示检测结果为阳性；如果样品中不存在新冠病毒抗体，则只会显示负对照线，检测结果为阴性。

需要注意的是，该测试纸条仅供参考，具体操作时需要根据实际情况进行调整和验证。

分析与检测Oct 2020 CHINA FOOD SAFETY43甲氨基阿维菌素是从发酵产品阿维菌素B 1开始合成的一种新型高效半合成抗生素杀虫剂，溶于丙酮和甲醇、微溶于水、不溶于己烷。

因其具有超高效、低毒、低残留、无公害等生物农药的特点，故被广泛应用于蔬菜、果树、棉花等农作物中以防治多种害虫。

但是，该药物具有神经毒性和发育毒性，脂溶性强，在动物体内分布广泛且代谢周期长，容易造成药物残留，进而通过食物链危害人体健康。

因此，对食品中的甲氨基阿维菌素残留量进行检测十分必要。

目前，用于检测甲氨基阿维菌素残留量的方法大多为仪器方法，但仪器采购成本高、检测时间长、操作复杂，不符合基层实验室高效、便捷的检测要求。

因此，本文制备出一种甲氨基阿维菌素的单克隆抗体，并将其应用于胶体金免疫层析试纸条，使其能够满足基层实验室的检测需求，有利于丰富监管手段和提高监督水平。

1 材料与方法1.1 材料与仪器甲氨基阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素等标准品（纯度≥95%），购自北京标准物质研究中心；氯金酸（HAuCl 4•3H 2O）、牛血清白蛋白（BSA）、卵清蛋白（OVA），购自美国Sigma 公司；柠檬酸三钠、碳酸钾，购自北京百欣试剂公司；样本提取剂、样本复溶液、胶体金分析仪，由北京勤邦生物技术有限公司提供；涡旋仪、均质器，购自湖南湘立科学仪器有限公司。

1.2 试验方法1.2.1 甲氨基阿维菌素半抗原的制备取0.886g 甲氨基阿维菌素，加乙腈70mL 溶解，加0.91g 氨基丙酸的水溶液2mL，充分搅拌后加入37%甲醛0.32mL 与三氯乙酸0.77g，加热，于60℃反应12h，反应停止后加水80mL 与乙酸乙酯100mL，萃取分离，减压蒸干，上硅胶柱，石油醚/乙酸乙酯体积比5：1洗脱分离，得到丙酸甲氨基阿维菌素半抗原0.76g，收率为77%。

1.2.2 免疫原的制备——甲氨基阿维菌素半抗原与牛血清白蛋白（BSA）偶联物合成一种甲氨基阿维菌素胶体金免疫快速检测试纸条的研制□ 吴广 贾芳芳 冯才伟 崔娜 崔海峰 北京勤邦生物技术有限公司 北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心□ 杨筑稀 贵州民族大学社会学与公共管理学院本文通过制备甲氨基阿维菌素半抗原，研制出一种能够检测蔬菜、水果中甲氨基阿维菌素的胶体金免疫层析试纸条，检测限为5μg/kg，检测时间为15min，假阳性率和假阴性率均为零，符合《农残办技术材料要求及审查程序》要求。