DNA凝胶回收(试剂盒)
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天根切胶回收说明书
天根切胶回收试剂盒说明书
一、产品简介
天根切胶回收试剂盒是一种高效的DNA片段回收试剂盒,能够从凝胶中快速、准确地回收目的DNA片段。
该试剂盒采用独特的吸附技术,能够有效地去除凝胶中的杂质,纯化DNA片段。
回收的DNA片段可用于后续的克隆、测序、PCR等实验。
二、产品特点
1. 高效回收:能够从凝胶中快速、准确地回收目的DNA片段,回收率高达90%以上。
2. 纯度高:能够有效去除凝胶中的杂质,纯化DNA片段,提高后续实验的准确性和可靠性。
3. 操作简便:采用独特的吸附技术,无需使用有机溶剂,简化了操作步骤。
4. 稳定性好:试剂盒中的成分稳定,便于长期保存和使用。
三、使用方法
1. 准备凝胶和电泳缓冲液:将凝胶和电泳缓冲液按照要求准备妥当。
2. 切胶:按照实验要求将凝胶切成适当大小的胶块。
3. 洗涤:将切好的胶块放入离心管中,加入适量的洗涤液,充分混匀,洗涤去除凝胶中的杂质。
4. 吸附:将洗涤后的胶块放入吸附柱中,按照说明书要求进行吸附操作。
5. 洗脱:将吸附后的DNA片段进行洗脱,收集洗脱液。
6. 检测:对回收的DNA片段进行检测,如琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计检测。
四、注意事项
1. 使用前请仔细阅读本说明书,确保按照说明书要求正确操作。
2. 本试剂盒仅供实验室使用,请勿用于食品、药品等领域。
3. 使用过程中请注意安全,避免直接接触眼睛、皮肤和衣物等。
如不慎接触到皮肤或眼睛,请立即用清水冲洗,并及时就医。
4. 本试剂盒中的试剂和耗材均为一次性使用,用后请及时处理废弃物。
爱思进胶回收说明书
爱思进胶回收试剂盒的使用说明书如下:
1. 制备琼脂糖凝胶电泳:将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,根据Marker 判断PCR产物的大小是否符合要求。
2. 切胶:切下包含目的片段的凝胶,尽量切去上下两端的凝胶,以减少非特异性产物的影响。
3. 胶的融化:将切下的凝胶放入一个离心管中,加入适量的胶融化液,使凝胶完全溶解。
4. 洗涤:将凝胶溶液加入一个离心柱中,离心柱的管底会有一个膜,可以吸附凝胶中的DNA片段。
然后加入洗涤液,将离心柱离心,去除残留的胶融化液。
5. 洗脱:加入适量的洗脱液,离心柱离心,将DNA从膜上洗脱下来。
6. 检测:取洗脱液进行电泳检测,观察电泳结果是否包含目的片段。
以上是爱思进胶回收试剂盒的使用说明书的大致步骤,由于不同版本的产品可能存在差异,因此建议在使用前仔细阅读说明书或咨询专业人士。
北京四正柏生物科技有限公司网站: 客服热线:400-7060-959技术支持:DNA 凝胶回收试剂盒产品编号规格MDN3066-5050次MDN3066-100100次保存条件及效期:常温运输和保存,保质期一年。
产品描述:本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA 反应体系中(如PCR 反应)回收DNA 片段。
试剂盒采用可以高效、专一结合DNA 的硅胶膜和独特的溶胶体系,或DNA 反应体系中回收的单链、双链及环状DNA ,回收效率可达50-90%(跟片段大小相关)。
得到的DNA 可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。
产品组分:使用方法:1.凝胶回收:切取含DNA 片段的琼脂糖凝胶(100mg 左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入一干净的1.5ml 塑料离心管(自备)中,用移液枪头捣碎,按重量比为1:3到1:5的比例加入通用溶胶液(100mg 琼脂糖凝胶需要加入300μl-500μl 通用溶胶液)。
PCR 产物回收:直接在PCR 反应管中加3-5倍体积的通用溶胶液,混匀,然后跳过第2步、直接从第3步做起。
如果PCR 反应中使用了石蜡,需要预先去除。
2.50℃保温使胶完全溶化(一般需要5分钟),其间可以振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。
如果片段长度在300bp 成份50次包装100次包装通用溶胶液25ml 50ml 吸附柱活化液25ml 50ml 通用洗柱液50ml 100ml 离心吸附柱50套100套DNA 洗脱液10ml 10ml 说明书1份1份以下,建议不要加热,以免DNA变性,影响回收率。
3.在等待期间,活化离心吸附柱。
在离心吸附柱中加入0.5mL吸附柱活化液,套上收集管后室温放置2分钟,然后12,000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。
活化后的离心吸附柱必须在当天使用。
4.在上柱前,在溶化的胶中加入相当于胶块体积1/2的异丙醇(对100mg胶块,加50uL),快速振荡10秒混匀。
胶回收DNA试剂盒的原理和方法一原理首先,将含有目标DNA片段的琼脂糖凝胶切割出来。
这可以通过电泳将DNA片段从DNA混合物中分离出来,然后在紫外灯下观察到DNA片段的迁移带。
然后,将切割的琼脂糖凝胶用试剂盒提供的缓冲液进行均质化处理。
均质化后的琼脂糖凝胶中含有目标DNA片段。
接下来,使用离心机将均质化后的琼脂糖凝胶离心。
离心的目的是将琼脂糖凝胶上的DNA片段分离出来。
DNA片段会沉积到离心管底部的沉淀中。
上清液中则只含有琼脂糖凝胶、缓冲液和其他杂质。
然后,将离心管中的上清液去除。
去除上清液的目的是除去琼脂糖凝胶的残余和其他杂质,以便纯化DNA片段。
最后,向离心管中加入酶切缓冲液和蛋白酶。
酶切缓冲液包含酶切DNA片段所需的盐和缓冲成分,以及一些防止核酸降解的物质。
蛋白酶则会降解琼脂糖和与其结合的蛋白质。
在将酶切缓冲液和蛋白酶加入后,离心管需要在适当的温度下进行酶切反应。
酶切反应的目的是分解凝胶中的琼脂糖和与其结合的蛋白质,从而释放出目标DNA片段。
在酶切反应完成后,离心管需要再次进行离心,以将琼脂糖和其他残留物沉淀到离心管底部。
上清液中则含有纯化后的DNA片段。
最后,将离心管中的上清液转移至干燥消化DNA纯化膜(试剂盒中提供),并根据试剂盒的说明进行后续的DNA回收操作。
根据不同试剂盒的要求,DNA可以通过洗涤、低温离心或其他方法进行最终的回收。
总的来说,胶回收DNA试剂盒的原理是通过离心法和蛋白酶酶解法将凝胶上的目标DNA片段回收,以获得纯化后的DNA样品。
这一方法简单有效,可以应用于分子生物学和生物医学研究中的DNA分析和操作。
DNA凝胶回收方法及常见问题琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、鉴定和纯化核酸和蛋白质片断的标准方法。
聚丙烯酰胺凝胶电泳片段的回收将在以后的文章中介绍,在这里我先介绍一下琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法,方便大家学习交流。
从琼脂糖凝胶中回收DNA,是一种简单不过的常规实验操作。
但是由于胶回收的质量和数量直接影响后继的一系列实验――比如酶切连接、转化筛选、测序或者PCR扩增、标记乃至显微注射等等,所以这一步的操作也显得非常重要。
胶回收的质量好否直接影响后继实验的成功与否。
现今除了手工回收方法外,许多公司都开发了方便的回收试剂盒系列,但是无论借助何种方式,最基本的评定标准均包括: 回收产物质量:主要指纯度。
常规电泳过程中,普通级别的琼脂糖自带的一些性状不明的多糖,会连同DNA一起从凝胶中抽提出来,强烈抑制后继的连接、酶切、或者标记、扩增等实验。
对于大片断DNA回收,质量还包括产物的完整性;而对于较小片断回收,质量还包括回收产物的浓度;此外,极微量的纯化介质或者是某些试剂混入回收产物中也会对结果产生致命的影响。
回收率:由于上电泳样品量通常都很少,电泳过程本身也会导致样品的分散和损失,因而尽可能多的回收电泳凝胶条带中的目的片断,提高产物得率,对于后继实验来说是非常重要的。
回收率的多少通常和回收产物的大小以及量的多少有关,比如DNA片断越大,和固相基质的结合力越强,就越难洗脱,回收率就低;又如,DNA的量越少,相对损失越大,回收率越低。
因此,根据情况选择不同的方法是很重要的。
其他:操作方面,操作简单,快速,应用方便的方法或产品自然比较受欢迎。
如溶胶的缓冲液中添加指示剂,可以指示溶胶的溶液pH值就是很方便的设计;离心过柱就比离心沉淀要简单方便。
还有要注意载量问题,因为对于纯化柱或者一定量的纯化介质都有一定的吸附限度,过量的产物吸附不了即被损失掉。
以下是我总结的常见问题,希望对大家有所帮助。
Q1:利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段?A1: 可能有以下几个原因:1. 胶块未完全溶解,溶解凝胶时应置于55℃水浴,可适当延长水浴时间,并增加上下颠倒次数,确定胶块完全溶解后再进行下一步骤;2. 胶块体积太大,应使用枪头捣碎,还不能充分溶解,则应先将其切为小块,分多次回收或选用大量型回收试剂盒;3.紫外灯下切胶时间过长,导致DNA部分降解,应尽量把切胶时间控制在30s以内;4. 电泳缓冲液pH太高,硅基质膜在高盐低pH值(pH≤7.5)时可结合DNA,在低盐及高pH 值(pH≥8)条件下洗脱。
PCR或酶切产物凝胶回收试剂盒说明书
【试剂盒简介】
本试剂盒将可以特异结合DNA的高性能磁性复合微球与独特的溶液系统有机结合在一起,适合从各种电泳凝胶(TAE或TBE)中提取线性DNA(70 bp-10 Kb),回收率在60-90%以上,本试剂盒还可从凝胶中回收质粒。
纯化后的线性DNA保持完整的生物活性,适用于多种用途,如:连接、体外转录、PCR、测序、Southern 杂交、微注射等分子生物学研究。
本试剂盒结合自动化设备,可以实现DNA琼脂糖凝胶回收的高通量、自动化提取。
【试剂盒组成】
Cat. No. YR03009-01YR03009-02YR03009-03
制备次数 50次100次200次
Lysis-Binding Buffer 20mL40mL120mL
Wash Buffer W1 70mL140mL400mL
Magnetic beads 1mL2mL4mL
Elution Buffer 2.5mL5mL10mL
使用说明书1份1份1份
【贮藏与有效期】
所有试剂室温保存,有效期为一年。
【操作步骤】请与我公司联系。
【经销商】深圳市易瑞生物技术有限公司
Shenzhen Bioeasy Biotechnologies Co., Ltd.
地址:深圳市宝安区西乡街道桃花源科技创新园11号研发中心邮编:518102
电话:**************************传真:*************
电子邮件:********************公司主页:。
胶回收DNA试剂盒的原理和方法一原理胶回收DNA试剂盒是一种常用的分子生物学实验工具,用于从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA的方法。
其原理主要基于琼脂糖凝胶电泳的分离特性和DNA与硅胶膜亲和吸附的原理。
下面将详细介绍胶回收DNA试剂盒的原理和方法。
1.原理:1.1琼脂糖凝胶电泳分离:首先,将DNA样品与琼脂糖混合并加热使其溶解后,将混合物加入琼脂糖凝胶槽中,随后进行电泳。
由于琼脂糖具有分子筛的特性,DNA分子根据大小被分离在凝胶中的不同位置。
1.2硅胶膜吸附:电泳结束后,将琼脂糖凝胶取出,然后将硅胶膜放置在凝胶表面,使其与DNA分子接触。
由于硅胶膜具有强烈的亲和吸附性,它能够有效地吸附DNA分子。
1.3洗脱纯化:在硅胶膜上吸附的DNA分子可以通过洗脱的方式从硅胶膜上释放出来。
一般情况下,通过使用适当的缓冲液可以将DNA洗脱出来,得到纯化的DNA样品。
2.方法:2.1样品制备:将待分离和纯化的DNA样品进行适当的制备处理,如酶切产生的片段、PCR扩增产生的产物等。
根据需要,可以使用酶切缓冲液、PCR停止液等添加剂来优化样品的制备。
2.2琼脂糖电泳:将样品加入琼脂糖凝胶槽中,通过电泳操作进行DNA分离。
根据需要,使用适当的电泳缓冲液和电泳条件来获得所需的分离效果。
2.3硅胶膜吸附:电泳结束后,取出琼脂糖凝胶,将硅胶膜放置在凝胶表面,使其与DNA分子接触。
根据实验要求,可以根据需要对硅胶膜进行预处理,如加热、孵育等。
2.4洗脱纯化:通过使用适当的洗脱缓冲液,将硅胶膜上吸附的DNA 洗脱出来。
通常,洗脱缓冲液中包含盐和其他成分,以提高DNA的纯度和回收率。
2.5最终保存:将洗脱的DNA样品进行适当的保存和处理。
根据实验需求,可以进行浓缩、冻干或直接用于后续实验。
总结:胶回收DNA试剂盒通过利用琼脂糖凝胶电泳分离DNA,并利用硅胶膜的亲和吸附性,实现了从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA的目的。
这种方法简便易行,能够在短时间内获得高质量的DNA样品,广泛应用于分子生物学研究和实验室应用中。
凝胶DNA 回收试剂盒说明书产品组成凝胶DNA回收试剂盒Cat. No. 5次样品200100550次制备2001050250次制备2001250核酸纯化柱2 ml离心管1.5 ml离心管Buffer GBuffer WSBuffer WG(浓缩液)Buffer TE说明书5个5个5个3 ml3 ml2.4 ml0.5 ml1份50个50个50个30 ml30 ml24 ml5 ml1份50个×550个×550个×5150 ml150 ml72 ml ×225 ml1份产品储存与有效期产品如果储存于室温(15~25℃),可在两年内保持使用性能无明显变化;如果将产品储存于2~8℃,可延长产品的有效期至两年以上。
技术支持杭州新景生物试剂开发有限公司研发部:e-mail: *******************,电话:400-0099-857。
产品介绍本试剂盒采用了柱纯化的原理,适合从多至400mg琼脂糖凝胶中回收DNA (70bp-10kb),回收率为70~85%。
溶胶试剂为不含碘化钠的温和溶解液,确保回收的DNA 保持片断完整性和高生物学活性,回收的DNA可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。
用户需自备的试剂与物品1.无水乙醇2.1.5ml离心管、移液器及吸头3.一次性手套、纸巾及防护用品4.台式小量离心机(可配离心1.5ml离心管和2ml离心管的转子)使用前准备1)如果离心机有制冷功能,请将温度设置到25℃。
2)根据试剂瓶标签上的指示在Buffer WG中加入无水乙醇,并在标签的方框中打勾作好“乙醇已加”的标记。
3)将水浴锅的温度设置为50°C。
4)可能需要使用3 M 醋酸钠(pH 5.0)及异丙醇。
操作步骤1)在紫外灯下将含有DNA片段的琼脂糖凝胶切下,转移到一个自备的1.5 ml 离心管中。
* 尽量减少多余的凝胶体积,可缩短溶胶时间。
BioLabs胶回收试剂盒说明书胶回收试剂盒说明书(生工)SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒产品编号:SK8131、SK8132包装规格:50次、100次试剂盒组成组分SK8131,50次SK8132,100次纯化套件(吸附柱+收集管)50套100套Buffer B2 30 ml 60 mlWah Solution 12 ml 24 mlElution Buffer 5 ml 10 ml操作手册1份1份保存方法及注意事项本试剂盒在室温(15,25°C)干燥保存,有效期见包装。
Buffer B2中含有刺激性的化合物,操作过程中应穿上实验服,戴好乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,防止吸入口鼻。
沾染皮肤或眼睛后,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。
产品介绍本试剂盒适用于从TAE和TBE琼脂糖凝胶中回收100 bp,10 kb的DNA片段,回收效率可达80%。
该试剂盒采用特殊的吸附膜,能够有选择性地吸附核酸分子,去除其他杂质,得到高质量的DNA回收产物。
本试剂盒采用的膜结合液中不含有干扰酶活性的碘化钠,所得到的DNA可直接用于酶切、连接、测序等后续的分子生物学试验。
本试剂盒具有以下特点:1、适用范围广,回收效率高,对于100 bp,10 kb之间的DNA片段回收效率在80%以上。
2、操作简单快速,整个回收过程仅须15分钟左右。
3、洗脱效率高,洗脱体积最小可低至15μl。
快速操作流程(胶回收)1、准备工作。
a。
检查Wah Solution 中是否已经加入乙醇。
b。
检查Buffer B2是否出现沉淀。
c。
将水浴锅调至55°C 2、从琼脂糖凝胶中割下含目标片段的胶块,称重。
3、加入胶块重量3-6倍的Buffer B2,50°C 水浴5-10分钟溶胶。
4、(选做)对于 < 500 bp 的片段,加入1、3 Buffer B2体积的异丙醇。
5、将溶胶液移入吸附柱中,8,000 g 离心30秒。
胶回收DNA试剂盒的原理和方法\一原理1、硅胶膜捕获核酸的原理是什么?利用核酸在裂解液下与硅胶膜特异结合,在洗脱液条件下被洗脱的原理。
2、我们一般都用硅胶膜来浓缩DNA片断,尤其是PCR产物,那硅胶膜能对RNA吸附吗?效率有多少?可以,在酸性条件下可以结合,国外公司试剂盒所用大多是此原理。
效率中等。
3、硅胶膜对双链DNA有吸附作用,那对单链DNA有吸附作用吗?对DNA/RNA杂合链能吸附吗?吸附效率分别有多少?对单链DNA有吸附作用。
DNA/RNA杂合链能吸附,但在裂解条件下DNA/RNA可能会解离,可以尝试一下。
另外可以尝试用Desaltfast200快速脱盐试剂盒,对DNA/RNA影响较小,纯化速度快。
二一般试剂盒的用法1 试剂盒的产品包括溶液I(融胶液)溶液II(洗涤液) (第一次使用前按照说明加入无水乙醇)溶液III(洗脱液)DNA纯化柱废液收集管2 使用方法(按照说明,不同公司产品操作方法有差异这里以其中一种为例)a 切胶回收后,称重,将胶切碎或在离心管内用1ml枪头捣碎。
b 加入等体积的溶液I(如胶为100mg,则加100微升溶液I),vortex或颠倒混匀。
c 50-60℃水浴加热约10分钟至胶全融,期间,需vortex或颠倒混匀3-4次,以加速凝胶融解。
果胶碎片较小,3-5分钟即可全融,凝胶碎片较大则需较长时间,胶全融后至少再在50-60℃水浴加热2分钟。
50-60℃间任一温度都适合于本试剂盒。
如果DNA片断大于5kb,宜颠倒混匀。
V ortex容易导致大片断DNA断裂。
d 加入到DNA纯化柱内,室温放置1分钟。
如果体积较大,DNA纯化柱内容纳不下,可以把部分样品加入到纯化柱内,经离心处理后,再加入剩余的样品继续处理。
e 最高速(16000g,约12000-14000rmp左右)离心1分钟,倒弃收集管内的液体。
注意:这一步一定要达到16000g,较低离心速度会导致回收效率下降。
f 在DNA纯化柱内加入700微升溶液II,室温放置1分钟。
产品简介产品简介::本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA 的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAE 或TBE 琼脂糖凝胶上回收DNA 片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。
可回收100 bp–40 kb DNA 片段,回收率可达80%以上(<100 bp 或>10kb 的DNA 片段回收率为30-50%)。
使用本试剂盒回收的DNA 可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR 、测序、文库筛选、连接和转化等实验。
产品特点产品特点::快速快速::整个操作过程快速方便,几十分钟即可完成回收工作。
多样多样::可以回收单链、双链DNA 片段以及环状质粒DNA 。
高效高效::独特的离心柱和精心配制的缓冲液,保证最大量回收到高纯度的目的DNA 。
注意事项注意事项::请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1. 平衡液BL 的加入能够改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。
使用前请先检查平衡液BL 是否出现浑浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。
2. 电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
3. 如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE 电泳缓冲液。
4. 切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA 造成损伤。
5. 如果回收率较低,可在胶充分溶解后检测pH 值,如pH 值大于7.5,可向含有DNA 的胶溶液中加10–30 µl 3 M 醋酸钠(pH5.2)将pH 值调到5–7之间。
6. 回收<100 bp 及>10 kb 的DNA 片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。
7. 回收率与初始DNA 量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越少,回收率越低。
操作步骤操作步骤::第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在15 ml 漂洗液PW 中加入60 ml 无水乙醇! 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
DNA凝胶回收试剂盒50TCat#:GV-GX-50本试剂盒可从各种浓度琼脂糖凝胶中回收DNA片段,不含盐、蛋白质、RNA等杂质。
500bp以上片段,回收率80%以上,200bp~500bp回收率70%以上,100bp~200bp回收率60%。
可回收单链、双链DNA 片段以及环状质粒DNA。
本试剂盒采用一种独特的平衡液处理吸附膜,该试剂能够激活硅基质膜,改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,专一吸附DNA的作用,同时还可消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。
1试剂盒组成、储存、稳定性成分规格注意事项Buffer GA60mlBuffer BL12mlWash buffer13ml使用前加入52ml无水乙醇Elution4ml离心柱50个单个最大吸附量20μg1.5ml离心管50个说明书1份Buffer GA:溶胶液。
室温密闭贮存。
若出现沉淀,应于65℃温浴溶解并冷却至室温后再使用。
Buffer BL:平衡液,平衡液的加入能够激活硅基质膜,改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,专一吸附DNA的作用,同时还可消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。
Wash buffer:去盐液。
使用前,第一次使用前根据瓶上指定的体积加入无水乙醇,混合均匀,室温密闭贮存。
Elution:10mM Tris-HCl,pH8.0。
室温密闭贮存。
二、注意事项1:将洗脱液或双蒸水加热至65℃,有利于提高洗脱效率2:DNA呈酸性,建议在10mM Tris-HCl,pH8.0洗脱液中保存3:用平衡液处理过的柱子最好当天使用,放置时间过长会影响效果4:在步骤1中,将凝胶切成细小的碎块可大大缩短溶胶时间(线型DNA长时间暴露在高温条件下易水解),从而提高回收率。
勿将含有DNA的凝胶长时间暴露在紫外灯下,减少紫外线对DNA造成的损伤。
三、实验前试剂准备Wash buffer第一次使用前加入52ml无水乙醇。
DNA凝胶回收操作流程
1.材料准备
-手套、口罩和实验室衣物等个人防护装备
-手术刀、多通道移液器和微量离心管等实验仪器
-DNA凝胶电泳仪和紫外线照射器等辅助设备
-DNA回收缓冲液(如TE缓冲液)
2.准备凝胶切割
-在凝胶电泳仪中运行所需检测的DNA样品,通过紫外线照射器观察凝胶图像
-使用手术刀在目标DNA片段两侧切割凝胶,避免接触电极或其他混杂的凝胶
-注意不要弄错目标片段的位置,确保准确地切割
3.DNA片段回收
-使用多通道移液器将凝胶片段切割下来,放入含有DNA回收缓冲液的微量离心管中
-注意避开凝胶上颜色较深的区域,因为这些区域可能含有大量有机染料或其他杂质
- 尽量将回收片段的重量控制在100-500ng以内,以避免后续实验中的浓度问题
4.DNA溶解和回收
-将含有凝胶片段的离心管置于高温、高速离心机中,使凝胶片段充分地溶解
-离心后,将上清液转移到一个新的微量离心管中,避开残留的凝胶碎片或杂质
5.DNA测量和纯化
-使用比色法或其他DNA定量方法,对上清液中的DNA样品进行浓度测量
-根据实验需要,可使用DNA纯化试剂盒或其他纯化方法,进一步提纯DNA样品
6.质检和保存
-可使用DNA电泳或PCR等方法,检测纯化后DNA样品的质量和纯度-将DNA样品保存在-20°C或更低温度的冰箱中
在DNA凝胶回收操作中,需要注意以下几个关键点:
-高度的卫生和无菌操作,以避免DNA样品被污染
-确保凝胶切割和DNA回收操作在无菌环境中进行
-尽量减少DNA样品的损失和杂质的干扰,以提高回收率和纯度
-注意一些可能的潜在的问题,如DNA降解、异物污染等,并尽可能做好记录并及时解决。
宁波保税区西区创业大道7号2C-1,315800, 电话:+86-574-86822306 传真:+86-574-26893101, sales@ DNA 凝胶回收试剂盒使用说明书产品编号产品名称 包装 DNAG001 DNA 凝胶回收试剂盒50×包装清单Solution I (溶液I )16 ml Solution Ⅱ(溶液Ⅱ)0.6ml Wash Solution (清洗液)27.5ml Elution Buffer (洗脱液)1ml Instruction (说明书) 1份本试剂盒适用于从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段,而不必采用低熔点的琼脂糖。
回收的DNA 片段纯度高,可以直接应用于DNA 克隆、各种酶促反应等实验。
操作说明:一,回收DNA 片段1. 将空小离心管称重。
将回收的带DNA 片段的凝胶放入其中、再次称重,确定凝胶净重。
2. 将离心管中的凝胶捣碎以助于凝胶溶解。
按胶的重量加入三倍体积的Solution I (1mg 凝胶加3μl solution I )。
3. 加入10μl 的Solution Ⅱ。
4. 55℃恒温加热直到凝胶完全融化(5-15分钟),每隔2-3分钟需将管内混悬液混匀一次。
5. 在室温、6000-13000rpm 离心1 分钟,弃上清液。
6. 加入500μl Wash Solution ,6000-13000rpm 离心1分钟,弃上清液。
7. 重复步骤6一次。
8. 将有白色沉淀的离心管再离心1分钟后,小心去除残留的液体。
9. 打开离心管盖子、室温干燥10分钟。
10. 加入10-20μl 的Elution Buffer ,37℃孵育5分钟,离心回收DNA 样品。
或者按下面操作进行酶连接。
二,连接酶连接DNA 片段1. 加入12.5μl 的Elution Buffer 。
振动样品管使沉淀颗粒完全悬浮。
2. 加1.5μl 的10× DNA 连接酶缓冲液,混匀。
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://AidQuick Gel Extraction Kit琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒目录号:DR01❖适用范围:适用于琼脂糖凝胶DNA回收❖试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次(DR0101)100次(DR0102)200次(DR0103)平衡液室温5ml 10ml 20ml 溶胶液DD 室温50 ml 50ml×2 200 ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温10 ml 15 ml 15 ml吸附柱EC 室温50个100个200个收集管(2ml)室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。
使用前应该恢复到室温。
2.储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
❖产品介绍:在高离序盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。
❖产品特点:1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。
克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.溶胶液加酚红调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
4.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
凝胶DNA回收试剂盒使用说明一、试剂盒组成1.碱性ELUTION缓冲液:用于回收DNA片段。
2.DNA绑定胶柱:用于吸附DNA片段。
3.洗涤缓冲液:用于去除琼脂糖凝胶残渣和其他杂质。
4.电子式试剂盒设备:用于快速洗脱DNA片段。
二、凝胶DNA回收试剂盒使用步骤1.准备工作:a.将碱性ELUTION缓冲液加热至65℃,并保存在试剂盒中。
b.手套和面具是使用过程中必需的,以确保实验环境的干净。
c.严格遵守实验室的安全操作规程。
2.凝胶切割:a. 切割需回收的DNA片段:将琼脂糖凝胶切割为片段大小约为50-5000 bp的目标DNA。
b.将切割好的琼脂糖凝胶片段放入微量离心管中,注意不要弄混不同大小的DNA片段。
c.记录每个DNA片段的位置和大小。
3.DNA回收:a.将切割好的琼脂糖凝胶片段放入DNA绑定胶柱中。
b.将绑定胶柱放入收集管中,通过离心将DNA片段吸附到胶柱上。
c.倒掉废液,并使用洗涤缓冲液洗脱胶柱上的残驻琼脂糖凝胶和其他杂质。
重复此步骤1-2次以确保彻底洗脱。
4.DNA洗脱:a.将洗柱放回空的收集管中。
b.加入预热的碱性ELUTION缓冲液(65℃),封闭试管盖,并放入电子式试剂盒设备中。
c.按照设备操作说明进行启动,并设置相应的洗脱温度和时间。
d.在洗脱完成后,将洗脱液转移到新的离心管中。
可以使用适当的方法(如乙醇沉淀或其他纯化方法)进一步纯化DNA。
5.质量检测:a.使用电泳进行质量检测,以确认回收的DNA片段大小和纯度。
b.如果需要,可以定量将DNA溶液保存在冰箱中以备后续实验使用。
三、注意事项1.使用前确保熟悉试剂盒的组成和使用步骤。
2.使用过程中务必佩戴手套和面具,确保操作环境的洁净。
3.严格按照试剂盒的说明进行操作,并遵循实验室的安全操作规程。
4.需要注意的是,琼脂糖凝胶切割和回收过程极易受到外源DNA污染,因此要确保实验环境的洁净,并尽量避免不必要的接触。
5.回收的DNA片段应尽快进行下一步的实验处理,以避免DNA降解和污染。
产品简介:碧云天2005年底最新推出的DNA凝胶回收试剂盒(DNA Gel Extraction Kit),是世界上最先进的DNA凝胶回收试剂盒之一。
本产品采用了融胶液,可以使琼脂糖凝胶完全融化。
同时采用了一种新型的离子交换柱,在特定条件下,使DNA能在离心过柱的瞬间,结合到DNA纯化柱上,在一定条件下又能将DNA充分洗脱,从而实现DNA的快速纯化。
无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,通常12个样品只需不足20分钟即可完成。
DNA纯化柱的容量约为15微克。
适用于PCR反应后去除引物,酶,矿物油,甘油,盐等杂质;也同样适用于酶切,连接,磷酸化,补平或切平,随机引物等反应后的DNA纯化。
所得的DNA可直接用于酶切,连接,转化细菌,测序,PCR,杂交等后续操作。
本试剂盒适用于纯化100bp-10kb DNA。
长至30个碱基的引物均可被完全去除。
DNA回收效率通常为60-90%。
接近100bp或10kb的DNA片断回收效率要略低一些,大于10kb的DNA回收效率迅速下降。
另外如果样品中DNA含量特别低也会导致回收效率下降。
每个试剂盒足够用于50个平均重量不超过400微克的凝胶样品。
包装清单:保存条件:室温保存,一年有效。
注意事项:第一次使用前在溶液II (洗涤液)中加入39ml无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
溶液I对人体有刺激性,操作时请小心,并注意适当防护。
本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。
所有离心也均在室温进行。
废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:1. 切胶回收后,称重,将胶切碎或在离心管内用1ml枪头捣碎。
2. 加入等体积的溶液I(如胶为100mg,则加100微升溶液I),vortex或颠倒混匀。
3. 50-60℃水浴加热约10分钟至胶全融,期间,需vortex或颠倒混匀3-4次,以加速凝胶融解。
若果胶碎片较小,3-5分钟即可全融;凝胶碎片较大则需较长时间,胶全融后至少再在50-60℃水浴加热2分钟。
DNA凝胶回收(试剂盒)
1.在紫外灯下切下含有目的DNA的琼脂糖凝胶,用纸巾吸净凝胶表面液体并切碎。
计算凝胶重量。
该重量作为一个凝胶体积。
(提前记录1.5ml离心管重量,100mg等于100ul体积)
2.加入3个凝胶体积的Buffer DE-A,混合均匀后于75℃加热(低熔点琼脂糖凝胶于40℃加
热),间断混匀(每2-3Min),直到凝胶块完全融化。
(约6-8Min)
注意:buffer DE-A为红色。
帮助观察凝胶是否完全融化。
3.加0.5个buffer DE-A体积的Buffer DE-B,混匀。
(当分离的DNA片段小于400bp时,需再加入一个凝胶体积的异丙醇)
注意:加入buffer DE-B 为黄色
4.吸取3中混合液,转移到DNA制备管中(2ml试剂盒内提供的离心管)中,12000g离心1Min,室温放置2Min。
弃滤液。
5.将制备管置于2ml 离心管中,加500ul buffer W1,放置2Min,12000g离心30s 弃滤液。
6.将制备管置于2ml 离心管中,加700ul buffer W2,放置2Min,12000g离心30s 弃滤液。
重复一次,不过时间为1Min。
7.将制备管置于2ml 离心管中,12000g再离心1Min。
8.将制备管置于洁净的1.5ml的离心管中(试剂盒内提供),在制备膜中央加入25-30ul Eluent,室温静置1min,12000g 离心1min 洗脱DNA.可暂放-20冰箱中。