下载文档原格式
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒（离心柱型）QC标准操作流程1. 实验试剂和耗材1.2 实验试剂1.3 耗材2. 实验操作流程胶回收试剂盒的检测须进行两个实验验证，第一个实验为GelRed染色法，第二个实验为EB染色法。
2.1 GelRed染色法2.1.1 1.5%琼脂糖凝胶的制备（1）准确称取1.5g琼脂糖置于250ml三角锥形瓶中，添加125ml 1×TAE溶液。
（2）轻微混匀后将其置于微波炉中，高火加热6min至溶液沸腾，取出锥形瓶放置室温2min。
（3）添加1×TAE溶液至110ml，再次于微波炉中高火加热3min至溶液沸腾。
（4）室温放置10min后将溶液倒入插有梳子的胶槽内，待胶块凝固后使用。
2.1.2 胶回收实验（1）取6个2ml离心管，依次编号为1-6号，使用分析天平准确称取空离心管的重量。
（2）用干净锋利的手术刀片切下不含核酸染料的1.5%琼脂糖凝胶胶块，放入已称重的2ml离心管中，称取胶块与离心管总重，计算凝胶块的重量。
要求胶块重量不超过200mg 为宜。
（3）添加溶胶液Binding Solution B，要求1、2号管中每100mg琼脂糖凝胶加入200ul Binding Solution B，3、4号管中每100mg琼脂糖凝胶加入300ul Binding Solution B，5、6号管中每100mg琼脂糖凝胶加入400ul Binding Solution B.（4）每管中添加50ul DL2502，混匀后置于60℃水浴5min，期间间断混合，直至凝胶块完全融化。
【注意事项】观察各管内溶胶液溶解胶块的快慢程度。
（5）将上述混合液转移至套放于2ml收集管的GenClean柱中，室温放置2min，10000rpm 室温离心1min，取出GenClean 柱，并倒掉收集管中废液。
（6）将GenClean 柱重新放回收集管中，加入500ul Wash Solution，于12000rpm，室温离心1min，倒掉收集管中废液。
爱思进胶回收说明书
爱思进胶回收试剂盒的使用说明书如下：
1. 制备琼脂糖凝胶电泳：将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，根据Marker 判断PCR产物的大小是否符合要求。
2. 切胶：切下包含目的片段的凝胶，尽量切去上下两端的凝胶，以减少非特异性产物的影响。
3. 胶的融化：将切下的凝胶放入一个离心管中，加入适量的胶融化液，使凝胶完全溶解。
4. 洗涤：将凝胶溶液加入一个离心柱中，离心柱的管底会有一个膜，可以吸附凝胶中的DNA片段。
然后加入洗涤液，将离心柱离心，去除残留的胶融化液。
5. 洗脱：加入适量的洗脱液，离心柱离心，将DNA从膜上洗脱下来。
6. 检测：取洗脱液进行电泳检测，观察电泳结果是否包含目的片段。
以上是爱思进胶回收试剂盒的使用说明书的大致步骤，由于不同版本的产品可能存在差异，因此建议在使用前仔细阅读说明书或咨询专业人士。
北京四正柏生物科技有限公司网站: 客服热线:400-7060-959技术支持:DNA 凝胶回收试剂盒产品编号规格MDN3066-5050次MDN3066-100100次保存条件及效期：常温运输和保存，保质期一年。
产品描述：本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA 反应体系中(如PCR 反应)回收DNA 片段。
试剂盒采用可以高效、专一结合DNA 的硅胶膜和独特的溶胶体系，或DNA 反应体系中回收的单链、双链及环状DNA ，回收效率可达50-90%(跟片段大小相关)。
得到的DNA 可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。
产品组分：使用方法：1.凝胶回收：切取含DNA 片段的琼脂糖凝胶(100mg 左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率)，放入一干净的1.5ml 塑料离心管(自备)中，用移液枪头捣碎，按重量比为1：3到1：5的比例加入通用溶胶液(100mg 琼脂糖凝胶需要加入300μl-500μl 通用溶胶液)。
PCR 产物回收：直接在PCR 反应管中加3-5倍体积的通用溶胶液，混匀，然后跳过第2步、直接从第3步做起。
如果PCR 反应中使用了石蜡，需要预先去除。
2.50℃保温使胶完全溶化(一般需要5分钟)，其间可以振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。
如果片段长度在300bp 成份50次包装100次包装通用溶胶液25ml 50ml 吸附柱活化液25ml 50ml 通用洗柱液50ml 100ml 离心吸附柱50套100套DNA 洗脱液10ml 10ml 说明书1份1份以下，建议不要加热，以免DNA变性，影响回收率。
3.在等待期间，活化离心吸附柱。
在离心吸附柱中加入0.5mL吸附柱活化液，套上收集管后室温放置2分钟，然后12,000rpm离心2分钟，倒弃穿透液，再将吸附柱套上收集管后待用。
活化后的离心吸附柱必须在当天使用。
4.在上柱前，在溶化的胶中加入相当于胶块体积1/2的异丙醇（对100mg胶块，加50uL），快速振荡10秒混匀。
PCR或酶切产物凝胶回收试剂盒说明书
【试剂盒简介】
本试剂盒将可以特异结合DNA的高性能磁性复合微球与独特的溶液系统有机结合在一起，适合从各种电泳凝胶(TAE或TBE)中提取线性DNA（70 bp-10 Kb），回收率在60-90%以上，本试剂盒还可从凝胶中回收质粒。
纯化后的线性DNA保持完整的生物活性，适用于多种用途，如：连接、体外转录、PCR、测序、Southern 杂交、微注射等分子生物学研究。
本试剂盒结合自动化设备，可以实现DNA琼脂糖凝胶回收的高通量、自动化提取。
【试剂盒组成】
Cat. No. YR03009-01YR03009-02YR03009-03
制备次数 50次100次200次
Lysis-Binding Buffer 20mL40mL120mL
Wash Buffer W1 70mL140mL400mL
Magnetic beads 1mL2mL4mL
Elution Buffer 2.5mL5mL10mL
使用说明书1份1份1份
【贮藏与有效期】
所有试剂室温保存，有效期为一年。
【操作步骤】请与我公司联系。
【经销商】深圳市易瑞生物技术有限公司
Shenzhen Bioeasy Biotechnologies Co., Ltd.
地址：深圳市宝安区西乡街道桃花源科技创新园11号研发中心邮编：518102
电话：**************************传真：*************
电子邮件:********************公司主页：。
琼脂糖凝胶回收操作步骤（离心柱型）●快速- - 用<10分钟从琼脂糖凝胶中回收DNA●可靠- - 优化的缓冲液保证了DNA纯度●优质- - 纯化DNA适于任何下游应用●安全- - 无需有机溶剂2．储存条件及稳定性◆自购买之日起，所有BNT胶回收试剂盒组分在22-25C下都能保质至少24个月。
请确保未使用时结合缓冲液瓶盖紧盖。
★如缓冲液中出现沉淀，于37℃温育即可溶解。
3．结合能力■每个HiBind DNA离心柱能结合多至~ 20 μg DNA■纯化次数基于琼脂糖凝胶浓度及DNA片段大小。
一般来说，<100bp的DNA片段或从>2%的琼脂糖凝胶中回收DNA需要附加的结合缓冲液以达到试剂盒预期的使用次数。
（结合缓冲液能单独购买，货号为Binding-200）。
4．开始回收前强烈建议在开始本操作之前熟悉整个操作步骤。
如果所有步骤都严格遵守，BNT胶回收试剂盒是简单、快捷、可靠的回收方法。
5.BNT胶回收操作步骤（离心柱型）使用者自备材料：▼50 - 55C水浴▼至少耐转速10，000g的微量离心管▼无核酸酶的1.5ml离心管▼无菌去离子水（或TE缓冲液）▼无水乙醇（96%-100%乙醇）▼保护性眼罩▼5M醋酸钠pH5.2⑴进行琼脂糖胶/ EB电泳分离不同DNA片段。
可使用所有类型或级别的琼脂糖。
强烈推荐使用新制TAE或TBE缓冲液作为电泳缓冲液。
不要重复使用电泳缓冲液，其pH会升高，降低回收得率。
⑵各条带分离到恰当位置时，用宽的干净锋利手术刀片仔细切下含有目的片段的琼脂糖胶，尽量切除DNA片段周围多余的琼脂糖胶以使凝胶体积最小。
⑶估计凝胶块体积，将其置于1.5ml微量离心管中称重。
假设凝胶密度为1g/ml，凝胶体积如下推算：质量为0.3g的凝胶块体积为0.3ml。
加入与凝胶等体积的结合缓冲液。
将混合物置于50-65℃7min，或直到凝胶完全溶解。
在溶解过程中每2-3min摇振以促进混合。
完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉，请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书一、从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段1. 凝胶融解将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下（尽量切除多余部分，凝胶重量不超過300 mg ）放入干净的离心管中． 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟，其间不断温和地上下翻转离心管，以确保胶块充分溶解．注意：凝胶完全融解后应呈现黄色，即可进行后续操作。
如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色，请使用10 μl 3M 乙酸钠（pH 5.0）将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作．（溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂，当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色，此时DNA 才能够有效的与膜结合，当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色，需要进行调整．）2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中． 待溶液温度降至室温后，将所得溶液加入吸附柱ＤＦＨ中，以14-16,000 ×g 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放入收集管中．3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入400 μl 漂洗液W1，以14-16,000 ×g 离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放入收集管中． 向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱DFH 放入收集管中． 以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除．注意：漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切，PCR 等）实验．4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ，（如果回收的目的片段>5 kb ，则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热），室温放置2分钟． 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液．注意：1. 为了增加DNA 回收率，可将得到的溶液重新加入吸附柱中，室温放置２分钟，以14-16,000×g 离心2 分钟，将DNA 溶液收集到离心管中． 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液，需保证其pH 值≥8.0，pH 值低于8.0会降低洗脱效率．Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉，请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书二、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 (回收DNA进行测序实验)1. 凝胶融解 将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下（尽量切除多余部分，凝胶重量不超過300 mg ）放入干净的离心管中． 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟，其间不断温和地上下翻转离心管，以确保胶块充分溶解．注意：凝胶完全融解后应呈现黄色，即可进行后续操作．如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色，请使用10 μl 3M 乙酸钠（pH 5.0）将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作．（溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂，当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色，此时DNA 才能够有效的与膜结合，当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色，需要进行调整．）2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中． 待溶液温度降至室温后，将所得溶液加入吸附柱DFH 中，以14-16,000 ×g 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放入收集管中．3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱DFH 放入收集管中． 重复向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），以14-16,000 ×g 离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱DFH 放入收集管中，以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除．注意：漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、ＰＣＲ等）实验．4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ，（如果回收的目的片段>5 kb ，则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热），室温放置2分钟． 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液．注意：1. 为了增加DNA 回收率，可将得到的溶液重新加入吸附柱中，室温放置２分钟，以14-16,000×g 离心2 分钟，将DNA 溶液收集到离心管中． 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液，需保证其pH 值≥8.0，pH 值低于8.0会降低洗脱效率．Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉，请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书三、从PCR 反应液或酶切反应液中回收DNA 1. 样品前处理取20-100 μl PCR 反应液或酶切反应液加入1.5 ml 离心管中，向其中加入五倍体积溶液Gel/PCR ，充分混匀（无需去除石蜡油或矿物油）． 注意： 如PCR 反应体系为50 μl （不包括石蜡油体积），则加入250 μl 溶液Gel/PCR ． 樣品混匀后溶液应呈现黄色，即可进行后续操作． 如果溶液的颜色为紫色，请加入10 μl 3M 乙酸钠（pH 5.0）将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作． 2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中． 将上一步所得溶液加入吸附柱DFH 中，以14-16,000 ×g 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放入收集管中． 注意：吸附柱容积为750 μl ，若样品体积大于750 μl 可分批加入．3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），静置1分钟后以14-16,000×g 离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱DFH 放入收集管中． 以14-16,000×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除． 注意：漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切，PCR 等）实验．4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ，（如果回收的目的片段>5 kb ，则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热），室温放置2分钟． 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液．注意：1. 为了增加DNA 回收率，可将得到的溶液重新加入吸附柱中，室温放置２分钟，以14-16,000×g 离心2 分钟，将DNA 溶液收集到离心管中． 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液，需保证其pH 值≥8.0，pH 值低于8.0会降低洗脱效率．Instruction Manual Download。
DNA纯化回收试剂盒一、试剂盒内容溶液PC 25ml 100ml平衡液BL 30ml 120ml漂洗液PW 15ml 50ml洗脱缓冲液EB 15ml 30ml吸附柱CB2 50个200个收集管（2ml）50个200个说明书1份1份二、操作步骤（一）、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段1、柱平衡步骤：向吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管）加入500ul 平衡液BL，12000rpm（~13400×g）离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
（请使用当天处理过的柱子）2、将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下（尽量切除多余部分）放入赶紧的离心管中，称取重量。
3、向胶块中加入等倍体积溶液PC（如果凝胶重为0.1g，其体积可视为100ul，则加入100ulPC溶液），50℃水浴放置10分钟左右，其间不断温和地上下翻转离心管，以确保胶块充分溶解。
（若胶块的体积过大，可事先将胶块切成碎块）4、将上一步所得溶液加入到一个吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管中），12000rpm（~13400×g）离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB2放回收集管中。
5、向吸附柱CB2中加入600ul漂洗液PW，12000rpm（~13400×g）离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB2放回收集管中。
6、重复步骤5.7、将吸附柱放入收集管中，12000rpm（~13400×g）离心2分钟，尽量出去漂洗液。
将吸附柱置于室温放置数分钟，彻底晾干。
8、将吸附柱CB2放入一个干净离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加适量的洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟。
12000rpm（~13400×g）离心2分钟，收集DNA溶液。
（二）、从PCR反应液或酶切反应液中回收DNA1、柱平衡步骤：向吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管）加入500ul 平衡液BL，12000rpm（~13400×g）离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
凝胶DNA 回收试剂盒说明书产品组成凝胶DNA回收试剂盒Cat. No. 5次样品200100550次制备2001050250次制备2001250核酸纯化柱2 ml离心管1.5 ml离心管Buffer GBuffer WSBuffer WG（浓缩液）Buffer TE说明书5个5个5个3 ml3 ml2.4 ml0.5 ml1份50个50个50个30 ml30 ml24 ml5 ml1份50个×550个×550个×5150 ml150 ml72 ml ×225 ml1份产品储存与有效期产品如果储存于室温（15~25℃），可在两年内保持使用性能无明显变化；如果将产品储存于2~8℃，可延长产品的有效期至两年以上。
技术支持杭州新景生物试剂开发有限公司研发部：e-mail: *******************,电话：400-0099-857。
产品介绍本试剂盒采用了柱纯化的原理，适合从多至400mg琼脂糖凝胶中回收DNA （70bp-10kb），回收率为70～85%。
溶胶试剂为不含碘化钠的温和溶解液，确保回收的DNA 保持片断完整性和高生物学活性，回收的DNA可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。
用户需自备的试剂与物品1．无水乙醇2．1.5ml离心管、移液器及吸头3．一次性手套、纸巾及防护用品4．台式小量离心机（可配离心1.5ml离心管和2ml离心管的转子）使用前准备1）如果离心机有制冷功能，请将温度设置到25℃。
2）根据试剂瓶标签上的指示在Buffer WG中加入无水乙醇，并在标签的方框中打勾作好“乙醇已加”的标记。
3）将水浴锅的温度设置为50°C。
4）可能需要使用3 M 醋酸钠（pH 5.0）及异丙醇。
操作步骤1）在紫外灯下将含有DNA片段的琼脂糖凝胶切下，转移到一个自备的1.5 ml 离心管中。
* 尽量减少多余的凝胶体积，可缩短溶胶时间。
操作流程1. 使用TAE缓冲液或TBE缓冲液制作琼脂糖凝胶，然后对目的DNA进行琼脂糖凝胶电泳。
2. 在紫外灯下切出含有目的DNA的琼脂糖凝胶，用纸巾吸尽凝胶表面的液体。
此时应注意尽量切除不含目的DNA部分的凝胶，尽量减小凝胶体积，提高DNA回收率。
胶块超过300 mg时，请使用多个Column进行回收，否则严重影响收率。
注）切胶时请注意不要将DNA 长时间暴露于紫外灯下，以防止DNA损伤。
3. 切碎胶块。
胶块切碎后可以加快操作步骤6的胶块溶解时间，提高DNA回收率。
4. 称量胶块重量，计算胶块体积。
计算胶块体积时，以1 mg=1 μl 进行计算。
5. 向胶块中加入胶块溶解液Buffer GM，Buffer GM的加量如下表：凝胶浓度Buffer GM使用量1.0％3个凝胶体积量1.0％～1.5％4个凝胶体积量1.5％～2.0％5个凝胶体积量6. 均匀混合后室温15-25℃溶解胶块（胶浓度较大或比较难溶时可以在37℃加热）。
此时应间断振荡混合，使胶块充分溶解（约5～10分钟）。
7. 当凝胶完全溶解后，观察溶胶液的颜色，如果溶胶液颜色由黄色变为橙色或粉色，向上述胶块溶解液中加入3 M醋酸钠溶液（pH5.2）10 μl，均匀混合至溶液恢复黄色。
当分离小于400 bp的DNA片段时，应在此溶液中再加入终浓度为20%的异丙醇。
8. 将试剂盒中的Spin Column安置于Collection Tube上。
9. 将上述操作步骤7的溶液转移至Spin Column中，12,000 rpm离心1分钟，弃滤液。
注）如将滤液再加入Spin Column中离心一次，可以提高DNA的回收率。
10. 将700 μl 的Buffer WB加入Spin Column中，室温12,000 rpm离心30秒钟，弃滤液。
注）请确认Buffer WB中已经加入了指定体积的100%乙醇。
11. 重复操作步骤10。
12. 将Spin Column安置于Collection Tube上，室温12,000 rpm离心1分钟。
DNA 凝胶回收试剂盒产品编号 产品名称包装 D0056DNA 凝胶回收试剂盒50次产品简介：碧云天的DNA 凝胶回收试剂盒(DNA Gel Extraction Kit)，是一种用于从DNA 琼脂糖凝胶中回收目的DNA 的试剂盒。
本试剂盒采用了融胶液，可以使琼脂糖凝胶完全融化。
同时采用了一种新型的离子交换柱，在特定条件下，使DNA 能在离心过柱的瞬间，结合到DNA 纯化柱上，在一定条件下又能将DNA 充分洗脱，从而实现DNA 的快速纯化。
无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，通常12个样品只需不足20分钟即可完成。
每个DNA 纯化柱可以结合的DNA 量的上限约为15微克。
适用于从DNA 琼脂糖凝胶(agarose gel)电泳后割取的含有目的DNA 的凝胶块中快速提取DNA 。
该目的DNA 通常为PCR 产物、质粒DNA 酶切出来的DNA 片段、超螺旋质粒DNA 单酶切后的线性化产物和DNA 连接产物等。
本试剂盒适用于纯化100bp-10kb DNA 。
长至30个碱基的引物均可被完全去除。
DNA 回收效率通常为60-90%。
接近100bp 或10kb 的DNA 片段回收效率要略低一些，大于10kb 的DNA 回收效率迅速下降。
另外如果样品中DNA 含量特别低也会导致回收效率下降。
本试剂盒纯化所得DNA 可直接用于酶切，连接，转化细菌，测序，PCR ，杂交等后续操作。
每个试剂盒足够用于50个平均重量不超过400微克的凝胶样品。
包装清单：产品编号 产品名称 包装 D0056-1 溶液I (融胶液) 20mlD0056-2 溶液II (洗涤液) 26ml (第一次使用前加入39ml 无水乙醇)D0056-3 溶液III (洗脱液)3mlD0056-4DNA 纯化柱及废液收集管50套 —说明书1份保存条件：室温保存，一年有效。
注意事项：第一次使用前在溶液II (洗涤液)中加入39ml 无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
