琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒大比对

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒（离心柱型）QC标准操作流程1. 实验试剂和耗材1.2 实验试剂1.3 耗材2. 实验操作流程胶回收试剂盒的检测须进行两个实验验证，第一个实验为GelRed染色法，第二个实验为EB染色法。

2.1 GelRed染色法2.1.1 1.5%琼脂糖凝胶的制备（1）准确称取1.5g琼脂糖置于250ml三角锥形瓶中，添加125ml 1×TAE溶液。

（2）轻微混匀后将其置于微波炉中，高火加热6min至溶液沸腾，取出锥形瓶放置室温2min。

（3）添加1×TAE溶液至110ml，再次于微波炉中高火加热3min至溶液沸腾。

（4）室温放置10min后将溶液倒入插有梳子的胶槽内，待胶块凝固后使用。

2.1.2 胶回收实验（1）取6个2ml离心管，依次编号为1-6号，使用分析天平准确称取空离心管的重量。

（2）用干净锋利的手术刀片切下不含核酸染料的1.5%琼脂糖凝胶胶块，放入已称重的2ml离心管中，称取胶块与离心管总重，计算凝胶块的重量。

要求胶块重量不超过200mg 为宜。

（3）添加溶胶液Binding Solution B，要求1、2号管中每100mg琼脂糖凝胶加入200ul Binding Solution B，3、4号管中每100mg琼脂糖凝胶加入300ul Binding Solution B，5、6号管中每100mg琼脂糖凝胶加入400ul Binding Solution B.（4）每管中添加50ul DL2502，混匀后置于60℃水浴5min，期间间断混合，直至凝胶块完全融化。

【注意事项】观察各管内溶胶液溶解胶块的快慢程度。

（5）将上述混合液转移至套放于2ml收集管的GenClean柱中，室温放置2min，10000rpm 室温离心1min，取出GenClean 柱，并倒掉收集管中废液。

（6）将GenClean 柱重新放回收集管中，加入500ul Wash Solution，于12000rpm，室温离心1min，倒掉收集管中废液。

DNA凝胶回收（试剂盒）
1.在紫外灯下切下含有目的DNA的琼脂糖凝胶，用纸巾吸净凝胶表面液体并切碎。

计算凝胶重量。

该重量作为一个凝胶体积。

（提前记录1.5ml离心管重量，100mg等于100ul体积）
2.加入3个凝胶体积的Buffer DE-A,混合均匀后于75℃加热（低熔点琼脂糖凝胶于40℃加
热），间断混匀（每2-3Min），直到凝胶块完全融化。

（约6-8Min）
注意：buffer DE-A为红色。

帮助观察凝胶是否完全融化。

3．加0.5个buffer DE-A体积的Buffer DE-B，混匀。

（当分离的DNA片段小于400bp时，需再加入一个凝胶体积的异丙醇）
注意：加入buffer DE-B 为黄色
4．吸取3中混合液，转移到DNA制备管中（2ml试剂盒内提供的离心管）中，12000g离心1Min，室温放置2Min。

弃滤液。

5．将制备管置于2ml 离心管中，加500ul buffer W1，放置2Min，12000g离心30s 弃滤液。

6．将制备管置于2ml 离心管中，加700ul buffer W2，放置2Min，12000g离心30s 弃滤液。

重复一次，不过时间为1Min。

7．将制备管置于2ml 离心管中，12000g再离心1Min。

8．将制备管置于洁净的1.5ml的离心管中（试剂盒内提供），在制备膜中央加入25-30ul Eluent，室温静置1min，12000g 离心1min 洗脱DNA.可暂放-20冰箱中。

爱思进胶回收说明书
爱思进胶回收试剂盒的使用说明书如下：
1. 制备琼脂糖凝胶电泳：将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，根据Marker 判断PCR产物的大小是否符合要求。

2. 切胶：切下包含目的片段的凝胶，尽量切去上下两端的凝胶，以减少非特异性产物的影响。

3. 胶的融化：将切下的凝胶放入一个离心管中，加入适量的胶融化液，使凝胶完全溶解。

4. 洗涤：将凝胶溶液加入一个离心柱中，离心柱的管底会有一个膜，可以吸附凝胶中的DNA片段。

然后加入洗涤液，将离心柱离心，去除残留的胶融化液。

5. 洗脱：加入适量的洗脱液，离心柱离心，将DNA从膜上洗脱下来。

6. 检测：取洗脱液进行电泳检测，观察电泳结果是否包含目的片段。

以上是爱思进胶回收试剂盒的使用说明书的大致步骤，由于不同版本的产品可能存在差异，因此建议在使用前仔细阅读说明书或咨询专业人士。

北京四正柏生物科技有限公司网站: 客服热线:400-7060-959技术支持:DNA 凝胶回收试剂盒产品编号规格MDN3066-5050次MDN3066-100100次保存条件及效期：常温运输和保存，保质期一年。

产品描述：本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA 反应体系中(如PCR 反应)回收DNA 片段。

试剂盒采用可以高效、专一结合DNA 的硅胶膜和独特的溶胶体系，或DNA 反应体系中回收的单链、双链及环状DNA ，回收效率可达50-90%(跟片段大小相关)。

得到的DNA 可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。

产品组分：使用方法：1.凝胶回收：切取含DNA 片段的琼脂糖凝胶(100mg 左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率)，放入一干净的1.5ml 塑料离心管(自备)中，用移液枪头捣碎，按重量比为1：3到1：5的比例加入通用溶胶液(100mg 琼脂糖凝胶需要加入300μl-500μl 通用溶胶液)。

PCR 产物回收：直接在PCR 反应管中加3-5倍体积的通用溶胶液，混匀，然后跳过第2步、直接从第3步做起。

如果PCR 反应中使用了石蜡，需要预先去除。

2.50℃保温使胶完全溶化(一般需要5分钟)，其间可以振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。

如果片段长度在300bp 成份50次包装100次包装通用溶胶液25ml 50ml 吸附柱活化液25ml 50ml 通用洗柱液50ml 100ml 离心吸附柱50套100套DNA 洗脱液10ml 10ml 说明书1份1份以下，建议不要加热，以免DNA变性，影响回收率。

3.在等待期间，活化离心吸附柱。

在离心吸附柱中加入0.5mL吸附柱活化液，套上收集管后室温放置2分钟，然后12,000rpm离心2分钟，倒弃穿透液，再将吸附柱套上收集管后待用。

活化后的离心吸附柱必须在当天使用。

4.在上柱前，在溶化的胶中加入相当于胶块体积1/2的异丙醇（对100mg胶块，加50uL），快速振荡10秒混匀。

实验七琼脂糖凝胶中DNA片段的回收一．原理从琼脂糖凝胶中回收DNA片段．可得到大小一致的DNA片段。

有多种方法可用于琼脂糖凝胶中DNA片段的回收。

例如低融点琼脂糖法、洗脱法等。

本实验方法是先使凝胶被NaI溶解，然后DNA与玻璃粉结合，再从玻璃粉中洗脱出DNA片段。

二．方法1．在琼脂糖凝胶小电泳分离DNA片段，当DNA片段完全分开后，停止电泳。

2．在长波长紫外灯下观察凝胶，切下含所需的琼脂糖部分。

将胶放人预称重的微离心管中。

3．称含凝胶的离心管重量，每0.1g凝胶加200μl NaI溶液。

4．于50℃温育微离心管，每5min颠倒几次离心管混匀离心管，直到琼脂糖完全融解。

5. 每μg DNA加入5μl玻璃粉悬液。

轻轻颠倒使之混匀，于冰上放置10min，使DNA结合在玻璃粉上。

6．于室温离心5秒，收集结合有DNA的玻璃粉。

7．倒掉上清。

加700μl -20℃预冷的清洗缓冲液，轻轻地抽吸，使玻璃粉重悬浮。

冰上放置5min。

8．重复第6与7步两次，于室温离心10秒，使玻璃粉沉淀下来。

倒掉上清，重复离心，小心除去全部残存液体。

9．加入30～50μ1 TE，轻轻吹打使玻璃粉重悬浮。

于50℃温育10min，将DNA洗脱下来。

10．于室温离心l0秒，使玻璃粉沉淀下来。

将上清转移到另一管中。

小心，不要吸人玻璃粉，因为它可抑制许多酶的活性。

三．试剂1.玻璃粉(1)取30g玻璃粉（Sigma 325目二氧化硅）悬于200ml蒸馏水的烧杯中。

搅拌混匀后，静置9min。

(2)将上清转移到离心管中．于6000⨯g离心10min，沉淀玻璃粉。

(3)倒掉上清，将玻璃粉重悬于50ml 25％硝酸中，室温放置过夜。

(4)于6000⨯g沉淀玻璃，用无菌双蒸水洗涤，沉淀玻璃粉4一6次，直到pH值至中性。

(5)用无菌水重悬沉淀，配成10％的浆液。

(6)将此浆液分装成0.1ml一管．贮存于-70℃。

待用的样品呵贮存于-20℃或4⨯。

2．NaI溶液NaI 90.8gNa2SO3 15gddH2O至 100ml3．乙醇清洗液成分为：100mmol／L NaCIlmmol／L DETA，pH8．O10mmol／L Tris—HLc，pH7.550％乙醇四．说明1．本方法琼脂糖凝胶电泳缓冲液只能使用TAE，回收的DNA片段应在0.8～6kb之中。

DNA凝胶回收方法及常见问题琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、鉴定和纯化核酸和蛋白质片断的标准方法。

聚丙烯酰胺凝胶电泳片段的回收将在以后的文章中介绍，在这里我先介绍一下琼脂糖凝胶电泳片断回收的常用方法，方便大家学习交流。

从琼脂糖凝胶中回收DNA，是一种简单不过的常规实验操作。

但是由于胶回收的质量和数量直接影响后继的一系列实验――比如酶切连接、转化筛选、测序或者PCR扩增、标记乃至显微注射等等，所以这一步的操作也显得非常重要。

胶回收的质量好否直接影响后继实验的成功与否。

现今除了手工回收方法外，许多公司都开发了方便的回收试剂盒系列，但是无论借助何种方式，最基本的评定标准均包括: 回收产物质量：主要指纯度。

常规电泳过程中，普通级别的琼脂糖自带的一些性状不明的多糖，会连同DNA一起从凝胶中抽提出来，强烈抑制后继的连接、酶切、或者标记、扩增等实验。

对于大片断DNA回收，质量还包括产物的完整性；而对于较小片断回收，质量还包括回收产物的浓度；此外，极微量的纯化介质或者是某些试剂混入回收产物中也会对结果产生致命的影响。

回收率：由于上电泳样品量通常都很少，电泳过程本身也会导致样品的分散和损失，因而尽可能多的回收电泳凝胶条带中的目的片断，提高产物得率，对于后继实验来说是非常重要的。

回收率的多少通常和回收产物的大小以及量的多少有关，比如DNA片断越大，和固相基质的结合力越强，就越难洗脱，回收率就低；又如，DNA的量越少，相对损失越大，回收率越低。

因此，根据情况选择不同的方法是很重要的。

其他：操作方面，操作简单，快速，应用方便的方法或产品自然比较受欢迎。

如溶胶的缓冲液中添加指示剂，可以指示溶胶的溶液pH值就是很方便的设计；离心过柱就比离心沉淀要简单方便。

还有要注意载量问题，因为对于纯化柱或者一定量的纯化介质都有一定的吸附限度，过量的产物吸附不了即被损失掉。

以下是我总结的常见问题，希望对大家有所帮助。

Q1：利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段？A1: 可能有以下几个原因：1. 胶块未完全溶解，溶解凝胶时应置于55℃水浴，可适当延长水浴时间，并增加上下颠倒次数,确定胶块完全溶解后再进行下一步骤;2. 胶块体积太大,应使用枪头捣碎，还不能充分溶解，则应先将其切为小块，分多次回收或选用大量型回收试剂盒；3.紫外灯下切胶时间过长，导致DNA部分降解，应尽量把切胶时间控制在30s以内；4. 电泳缓冲液pH太高，硅基质膜在高盐低pH值（pH≤7.5）时可结合DNA，在低盐及高pH 值（pH≥8）条件下洗脱。

磁珠法DNA胶回收试剂盒Mag-MK Gel DNA Purification Kit产品编号：SK8743/SK8744包装规格：50次/100次试剂盒组成组分SK8743，50次SK8744，100次Buffer MB2 30 ml 60 mlPureMag Beads 1.5 ml 3 mlBuffer MGB 30 ml 60 mlBuffer MGW 24 ml 2×24 mlTE Buffer(pH8.0) 5 ml 10 ml操作手册1份1份保存方法及注意事项请将试剂盒中的PureMag Beads置于2~8°C保存，其余试剂室温保存，有效期详见包装。

Buffer MB2中含有刺激性的化合物，操作过程中应穿上实验服，戴好乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，防止吸入口鼻。

沾染皮肤或眼睛后，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医生的帮助。

产品介绍本试剂盒适用于从TAE和TBE琼脂糖凝胶中回收100 bp~30 kb的DNA片段，回收效率可达70%。

该试剂盒中的纳米磁珠能够特异性吸附核酸分子，去除其他杂质，得到高质量的DNA回收产物。

所得到的DNA可直接用于酶切、连接、测序等后续的分子生物学试验。

本试剂盒具有以下特点：1. 适用范围广，回收效率高，对于100 bp~30 kb之间的DNA片段回收效率在70%以上，尤其对于长片段DNA片段的回收，磁珠法比柱式法的回收效率高出20%左右。

2. 操作简单快速，整个回收过程仅须30分钟左右。

3. 无需离心，实现DNA回收的高通量化和自动化。

标准回收步骤自备材料：磁力架、水浴锅、1.5 ml离心管和无水乙醇。

按瓶身标签说明在Buffer MGW中加入相应量的无水乙醇（乙醇终浓度为80%），混匀后在瓶身做好标记。

密封于室温保存。

Buffer MB2在低温下可能产生沉淀，使用前请检查，如有沉淀，请于37°C溶解沉淀，待冷却至室温后使用。

DNA纯化回收试剂盒一、试剂盒内容溶液PC 25ml 100ml平衡液BL 30ml 120ml漂洗液PW 15ml 50ml洗脱缓冲液EB 15ml 30ml吸附柱CB2 50个200个收集管（2ml）50个200个说明书1份1份二、操作步骤（一）、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段1、柱平衡步骤：向吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管）加入500ul 平衡液BL，12000rpm（~13400×g）离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

（请使用当天处理过的柱子）2、将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下（尽量切除多余部分）放入赶紧的离心管中，称取重量。

3、向胶块中加入等倍体积溶液PC（如果凝胶重为0.1g，其体积可视为100ul，则加入100ulPC溶液），50℃水浴放置10分钟左右，其间不断温和地上下翻转离心管，以确保胶块充分溶解。

（若胶块的体积过大，可事先将胶块切成碎块）4、将上一步所得溶液加入到一个吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管中），12000rpm（~13400×g）离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB2放回收集管中。

5、向吸附柱CB2中加入600ul漂洗液PW，12000rpm（~13400×g）离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB2放回收集管中。

6、重复步骤5.7、将吸附柱放入收集管中，12000rpm（~13400×g）离心2分钟，尽量出去漂洗液。

将吸附柱置于室温放置数分钟，彻底晾干。

8、将吸附柱CB2放入一个干净离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加适量的洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟。

12000rpm（~13400×g）离心2分钟，收集DNA溶液。

（二）、从PCR反应液或酶切反应液中回收DNA1、柱平衡步骤：向吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管）加入500ul 平衡液BL，12000rpm（~13400×g）离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

凝胶DNA 回收试剂盒说明书产品组成凝胶DNA回收试剂盒Cat. No. 5次样品200100550次制备2001050250次制备2001250核酸纯化柱2 ml离心管1.5 ml离心管Buffer GBuffer WSBuffer WG（浓缩液）Buffer TE说明书5个5个5个3 ml3 ml2.4 ml0.5 ml1份50个50个50个30 ml30 ml24 ml5 ml1份50个×550个×550个×5150 ml150 ml72 ml ×225 ml1份产品储存与有效期产品如果储存于室温（15~25℃），可在两年内保持使用性能无明显变化；如果将产品储存于2~8℃，可延长产品的有效期至两年以上。

技术支持杭州新景生物试剂开发有限公司研发部：e-mail: *******************,电话：400-0099-857。

产品介绍本试剂盒采用了柱纯化的原理，适合从多至400mg琼脂糖凝胶中回收DNA （70bp-10kb），回收率为70～85%。

溶胶试剂为不含碘化钠的温和溶解液，确保回收的DNA 保持片断完整性和高生物学活性，回收的DNA可直接用于连接、体外转录、PCR扩增、测序、微注射等分子生物学实验。

用户需自备的试剂与物品1．无水乙醇2．1.5ml离心管、移液器及吸头3．一次性手套、纸巾及防护用品4．台式小量离心机（可配离心1.5ml离心管和2ml离心管的转子）使用前准备1）如果离心机有制冷功能，请将温度设置到25℃。

2）根据试剂瓶标签上的指示在Buffer WG中加入无水乙醇，并在标签的方框中打勾作好“乙醇已加”的标记。

3）将水浴锅的温度设置为50°C。

4）可能需要使用3 M 醋酸钠（pH 5.0）及异丙醇。

操作步骤1）在紫外灯下将含有DNA片段的琼脂糖凝胶切下，转移到一个自备的1.5 ml 离心管中。

* 尽量减少多余的凝胶体积，可缩短溶胶时间。

dna 琼脂糖凝胶回收琼脂糖凝胶回收是分子生物学领域中常见的实验技术，它能够有效地提取DNA，是DNA分析的重要一步。

在本文中，我们将详细介绍琼脂糖凝胶回收的整个过程，并提供一些实用的指导。

琼脂糖凝胶回收是一种通过电泳将DNA从琼脂糖凝胶上分离并回收的方法。

首先，在实验开始之前，我们需要制备琼脂糖凝胶，并在其中加入DNA样品。

随后，我们将琼脂糖凝胶与电泳缓冲液一同放置在电泳槽中并施加合适的电压，使DNA样品在琼脂糖凝胶中垂直迁移。

为了使得琼脂糖凝胶回收更加高效，我们需要根据DNA片段的大小调整电泳条件。

一般来说，小分子量的DNA片段迁移速度较快，而大分子量的DNA片段迁移速度较慢。

因此，为了避免DNA片段过度迁移或者导致DNA片段过度聚集，我们需要根据实验需要选择合适的电泳时间和电压。

在DNA片段迁移至所需位置后，我们可以将琼脂糖凝胶从电泳槽中取出。

此时，我们需要注意避免暴露琼脂糖凝胶于紫外线，以免对DNA造成伤害。

在取出琼脂糖凝胶之后，我们需要使用刮胶刀或者专用工具将 DNA 片段从琼脂糖凝胶上切割或刮下。

琼脂糖凝胶回收后的 DNA 片段可以用于各种实验，比如 PCR 扩增、限制性酶切等。

在进行后续实验之前，我们需要将 DNA 片段从琼脂糖凝胶中纯化出来，并去除琼脂糖残留物、电泳缓冲液等杂质。

其中，琼脂糖凝胶纯化技术有多种方法可以选择，例如利用商用纯化试剂盒、硅胶凝胶纯化法等。

总结起来，琼脂糖凝胶回收是一项关键的实验技术，能够高效地提取 DNA 片段。

通过合适的电泳条件和仔细的实验操作，我们可以获得高质量的 DNA样品。

这些 DNA 片段可以被广泛应用于基因克隆、基因组测序等实验中，为我们深入了解生命机制提供了重要的工具。

希望通过本文的介绍，读者们能够更加全面地了解琼脂糖凝胶回收的过程和原理，并在实验操作中获得更好的结果。

DNA凝胶回收试剂盒50TCat#：GV-GX-50本试剂盒可从各种浓度琼脂糖凝胶中回收DNA片段，不含盐、蛋白质、RNA等杂质。

500bp以上片段，回收率80%以上，200bp～500bp回收率70%以上，100bp～200bp回收率60%。

可回收单链、双链DNA 片段以及环状质粒DNA。

本试剂盒采用一种独特的平衡液处理吸附膜，该试剂能够激活硅基质膜，改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性，专一吸附DNA的作用，同时还可消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。

1试剂盒组成、储存、稳定性成分规格注意事项Buffer GA60mlBuffer BL12mlWash buffer13ml使用前加入52ml无水乙醇Elution4ml离心柱50个单个最大吸附量20μg1.5ml离心管50个说明书1份Buffer GA：溶胶液。

室温密闭贮存。

若出现沉淀，应于65℃温浴溶解并冷却至室温后再使用。

Buffer BL：平衡液，平衡液的加入能够激活硅基质膜，改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性，专一吸附DNA的作用，同时还可消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。

Wash buffer：去盐液。

使用前，第一次使用前根据瓶上指定的体积加入无水乙醇，混合均匀，室温密闭贮存。

Elution：10mM Tris-HCl，pH8.0。

室温密闭贮存。

二、注意事项1：将洗脱液或双蒸水加热至65℃，有利于提高洗脱效率2：DNA呈酸性，建议在10mM Tris-HCl，pH8.0洗脱液中保存3：用平衡液处理过的柱子最好当天使用，放置时间过长会影响效果4：在步骤1中，将凝胶切成细小的碎块可大大缩短溶胶时间（线型DNA长时间暴露在高温条件下易水解），从而提高回收率。

勿将含有DNA的凝胶长时间暴露在紫外灯下，减少紫外线对DNA造成的损伤。

三、实验前试剂准备Wash buffer第一次使用前加入52ml无水乙醇。

杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://AidQuick Gel Extraction Kit琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒目录号：DR01❖适用范围：适用于琼脂糖凝胶DNA回收❖试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存50次（DR0101）100次（DR0102）200次（DR0103）平衡液室温5ml 10ml 20ml 溶胶液DD 室温50 ml 50ml×2 200 ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温10 ml 15 ml 15 ml吸附柱EC 室温50个100个200个收集管（2ml）室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

储存事项:1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。

使用前应该恢复到室温。

2.储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃-25℃）进行。

3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

❖产品介绍：在高离序盐存在的情况下，DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。

❖产品特点：1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。

克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。

2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。

3.溶胶液加酚红调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。

4.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。

凝胶DNA回收试剂盒使用说明一、试剂盒组成1.碱性ELUTION缓冲液：用于回收DNA片段。

2.DNA绑定胶柱：用于吸附DNA片段。

3.洗涤缓冲液：用于去除琼脂糖凝胶残渣和其他杂质。

4.电子式试剂盒设备：用于快速洗脱DNA片段。

二、凝胶DNA回收试剂盒使用步骤1.准备工作：a.将碱性ELUTION缓冲液加热至65℃，并保存在试剂盒中。

b.手套和面具是使用过程中必需的，以确保实验环境的干净。

c.严格遵守实验室的安全操作规程。

2.凝胶切割：a. 切割需回收的DNA片段：将琼脂糖凝胶切割为片段大小约为50-5000 bp的目标DNA。

b.将切割好的琼脂糖凝胶片段放入微量离心管中，注意不要弄混不同大小的DNA片段。

c.记录每个DNA片段的位置和大小。

3.DNA回收：a.将切割好的琼脂糖凝胶片段放入DNA绑定胶柱中。

b.将绑定胶柱放入收集管中，通过离心将DNA片段吸附到胶柱上。

c.倒掉废液，并使用洗涤缓冲液洗脱胶柱上的残驻琼脂糖凝胶和其他杂质。

重复此步骤1-2次以确保彻底洗脱。

4.DNA洗脱：a.将洗柱放回空的收集管中。

b.加入预热的碱性ELUTION缓冲液（65℃），封闭试管盖，并放入电子式试剂盒设备中。

c.按照设备操作说明进行启动，并设置相应的洗脱温度和时间。

d.在洗脱完成后，将洗脱液转移到新的离心管中。

可以使用适当的方法（如乙醇沉淀或其他纯化方法）进一步纯化DNA。

5.质量检测：a.使用电泳进行质量检测，以确认回收的DNA片段大小和纯度。

b.如果需要，可以定量将DNA溶液保存在冰箱中以备后续实验使用。

三、注意事项1.使用前确保熟悉试剂盒的组成和使用步骤。

2.使用过程中务必佩戴手套和面具，确保操作环境的洁净。

3.严格按照试剂盒的说明进行操作，并遵循实验室的安全操作规程。

4.需要注意的是，琼脂糖凝胶切割和回收过程极易受到外源DNA污染，因此要确保实验环境的洁净，并尽量避免不必要的接触。

5.回收的DNA片段应尽快进行下一步的实验处理，以避免DNA降解和污染。

琼脂糖凝胶dna回收实验报告1.目的学会从琼脂糖凝胶中回收DNA片断的基本技术。

2.原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后，按分子量大小被分开，排列在琼脂糖凝胶中，可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来，加热或用特殊的试剂熔解凝胶，使DNA溶回到溶液中，再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的DNA酶切片断。

3.器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml微量离心管，双面微量离心管架，台式离心机，琼脂糖凝胶电泳系统，微波炉，水漂，恒温水浴。

4.试剂电泳缓冲液，溴化乙锭溶液，电泳级琼脂糖粉，10x加样缓冲液，DNA分子量标准，DNA凝胶回收试剂盒。

5.实验准备配制TAE电泳缓冲液（10x储存液），1000x溴化乙锭储存液（0.5mg/ml)，10x加样缓冲液，1.5ml离心管装入铝制饭盒（灭菌）、移液器吸头装入相应的吸头盒（灭菌）；6.操作步骤（1）用1xTAE配制1%琼脂糖凝胶。

DNA用合适的酶切。

（2）在胶上选定加样6孔，加入20ulDNA酶切产物，电泳。

（3）电泳结束后用刀片6切下含有少量DNA酶切产物的泳道（一般选择位于凝胶的边缘），EB染色，在紫外灯下找到目的DNA带，用刀片切在带的下上下边缘各切一个小口作为标记。

（4）将做好标记的凝胶条与未染色的凝胶原位对齐，根据小胶条上的标记估计未染色的大胶上DNA酶切产物的位置，用刀片切下大胶中DNA产物所在的凝胶（尽量不要多余的凝胶），转移至一个称量过得干净的1.5ml 微量离心管中。

（5）按照DNA凝胶回收试剂盒的说明书操作，回收DNA酶切产物：使用GENOMED公司提供的Gel Extraction Mini Kit凝胶回收试剂盒，操作步骤如下：1)在紫外灯的照射下，从已电泳15min左右的凝胶上切下目的条带，称得凝胶重量按1：3的比例加入L1溶胶；55-60℃条件下溶胶10min 左右；2)将凝胶已完全溶化的液体移入吸附柱内，室温静置2min，以使DNA片段充分结合到吸附柱上；12,000rpm转速下离心3min，弃废液；3)向吸附柱中加500ulL2，10,000rpm转速下离心1min，以洗掉吸附柱中残留的溶胶液L1，弃废液；4)重复上一步操作；5)12,000rpm离心1min，把吸附柱放入新的EP管中；室温放2-5min，以晾干残留的乙醇；向吸附膜中央滴加30ulddH-O，室温静置2min；6)12.000rpm离心2min，得到DNA片段回收液。