香椿叶总黄酮不同提取方法的比较

郑州轻工业学院本科毕业设计（论文）题目香椿有效成分的提取工艺研究学生姓名林海祥专业班级烟草工程08-1学号 2008030310122院（系）食品与生物工程学院指导教师(职称)李瑞丽（讲师）完成时间 2012年5月28日目录摘要 (Ⅰ)ABSTRACT (Ⅱ)1. 引言 (1)1.1 香椿的概述 (1)1.2 总黄酮的生理活性 (2)1.3 黄酮类化合物的应用 (2)1.3.1 药学方面 (3)1.3.2 食品方面 (3)1.3.3 农药方面 (3)1.4 溶剂提取 (4)1.5 超声波提取 (5)1.5.1 提取原理 (6)1.5.2 提取特点 (6)2 材料、试剂和仪器 (6)2.1 实验材料和试剂 (7)2.2 仪器与设备 (7)3. 试验方法 (7)3.1 原料预处理 (7)3.2 乙醇热回流法提取香椿总黄酮 (8)3.2.1单因素试验 (8)3.2.2 正交试验法优选提取工艺 (8)3.3 超声波辅助提取法提取香椿总黄酮 (9)3.3.1 单因素试验 (9)3.3.2 正交试验 (9)3.4 样品中黄酮含量测定 (9)3.5 乙醇热回流法与超声波辅助提取法的对比 (10)3.5.1 乙醇热回流法最佳工艺条件提取总黄酮 (10)3.5.2超声波辅助提取法最佳工艺条件提取总黄酮 (10)4. 结果与分析 (10)4.1乙醇热回流提取法 (10)4.1.1乙醇浓度对提取率的影响 (10)4.1.2 料液比对提取率的影响 (11)4.1.3 浸提温度对提取率的影响 (11)4.1.4 浸提时间对提取率的影响 (12)4.1.5正交试验结果 (12)4.2 超声波辅助提取法 (13)4.2.1 乙醇浓度对提取率的影响 (14)4.2.2 超声波提取时间对提取率的影响 (14)4.2.3 料液比对提取率的影响 (15)4.2.4 正交试验结果 (15)4.3 乙醇回流与超声波辅助提取法的对比 (16)结论 (17)致谢 (18)参考文献 (19)香椿有效成分的提取工艺研究摘要本实验研究了乙醇热回流提取香椿总黄酮的工艺条件。

太和香椿茎、叶、花中总黄酮含量的比较隋娟娟;刘佩冉;宁伟;杨京霞;郭梦雅【期刊名称】《黑龙江农业科学》【年(卷),期】2016(000)012【摘要】为了充分开发太和香椿资源，利用乙醇超声提取法提取了太和香椿茎、叶、花中的总黄酮，并用酶标仪进行了检测。

结果表明：香椿叶中的总黄酮含量为3．79 mg·g‐1，花中的总黄酮含量为1．24 mg·g‐1，茎中的总黄酮含量为0．88 mg·g‐1，其含量差异达到显著水平。

该结果为进一步开发太和香椿的食用和药用价值提供了理论参考。

【总页数】3页(P92-93,94)【作者】隋娟娟;刘佩冉;宁伟;杨京霞;郭梦雅【作者单位】阜阳师范学院生物与食品工程学院，安徽阜阳236041; 抗衰老中草药安徽省工程技术研究中心，安徽阜阳236041;阜阳师范学院生物与食品工程学院，安徽阜阳236041; 抗衰老中草药安徽省工程技术研究中心，安徽阜阳236041;阜阳师范学院生物与食品工程学院，安徽阜阳236041; 抗衰老中草药安徽省工程技术研究中心，安徽阜阳236041;阜阳师范学院生物与食品工程学院，安徽阜阳236041; 抗衰老中草药安徽省工程技术研究中心，安徽阜阳236041;阜阳师范学院生物与食品工程学院，安徽阜阳236041【正文语种】中文【中图分类】S644.4;R283.3【相关文献】1.HPLC法测定新疆阿尔泰锦鸡儿根、茎、叶、花中3种黄酮类化合物的含量 [J], 迪里木拉提·毛里明;郭玉娟;程煜凤;任丽君;姚军2.太和香椿总黄酮的提取及含量测定 [J], 杨阳;杨京霞;王荣;李文雍3.UPLC-MS/MS同时测定铁皮石斛茎、叶、花中酚类组分的含量 [J], 黄彪;何伟;吴建鸿;王红梅;李巍4.高效液相色谱法同时测定黄芩茎、叶、花中野黄芩苷含量 [J], 王云龙;刘春生;陈立柱;房岐5.铁皮石斛茎、叶、花中黄酮含量及其体外抗氧化活性研究 [J], 李芳;魏云;陈艳杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

包 装 工 程第40卷 第9期 ·36·PACKAGING ENGINEERING 2019年5月收稿日期：2019-03-06基金项目：陈伟（1991—），女，天津科技大学硕士生，主攻天然产物化学。

通信作者：刘常金（1969—），男，博士，天津科技大学副教授，主要研究方向为农产品贮藏与加工。

香椿老叶中黄酮类和皂苷类物质的分离鉴定陈伟，李晨晨，冉浩，李文华，刘常金（天津科技大学 食品工程与生物技术学院食品营养与安全国家重点实验室，天津 300457） 摘要：目的 对香椿老叶中的黄酮类和皂苷类活性物质进行分离鉴定，为进一步开发香椿老叶产品提供理论基础。

方法 使用柱色谱和高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography, HPLC ）对香椿老叶中的物质进行分离纯化，并采用核磁共振（Nuclear Magnetic Resonance, NMR ）和红外光谱（Infrared Spectroscopy, IR ）对分离物质进行测定。

结果 香椿老叶中含有芦丁、表儿茶素、槲皮素、异槲皮素、番石榴苷等。

利用显色反应初步定性鉴定出香椿皂苷中包括甾体皂苷和三萜皂苷。

结论 香椿老叶中含有丰富的黄酮类和皂苷类物质，具有广阔的开发前景。

关键词：香椿老叶；黄酮；皂苷；分离鉴定中图分类号：S644.4 文献标识码：A 文章编号：1001-3563(2019)09-0036-07 DOI ：10.19554/ki.1001-3563.2019.09.006Isolation and Identification of Flavonoids and Saponins in Old Toona Sinensis LeavesCHEN Wei , LI Chen-chen , RAN Hao , LI Wen-hua , LIU Chang-jin(State Key Laboratory of Food Nutrition and Safety, School of Food Engineering and Biotechnology,Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China)ABSTRACT: The paper aims to isolate and identity flavonoids and saponins in old toonasinensis leaves to provide a the-oretical basis for further development of old toonasinensisleaves. Column chromatography and high performance liquid chromatography (HPLC) were used to separate and purify the substances in old toonasinensisleaves.Nuclear magnetic resonance (NMR) and infrared spectroscopy (IR) wereused for todeterminethe isolated substances. The old toonasinen-sisleaves of containrutin, epicatechin, quercetin, isoquercetin, guava glucoside, etc. The steroidal saponins and triterpe-noidsaponins in toonasinensissaponins were identified by chromogenic reaction.Oldtoonasinensis leaves are rich in fla-vonoids and saponins, which have broad development prospects.KEY WORDS: old toonasinensis leaves; flavonoids; saponins; isolation and identification香椿（Toonasinensis ）属于楝科香椿属落叶乔木，在中国种植广泛且面积逐年扩大，在山东、安徽、河南、河北、广西、湖南、四川、山西、陕西和云南等地均有大面积的香椿种植地[1]。

香椿叶中总黄酮的提取方法及药理作用研究进展李宝霞董双涛冀小君蔡翠芳山西生物应用职业技术学院030031【摘要】本文对香椿叶中总黄酮的提取方法及香椿叶的药理作用研究进展做了综述，以备相关研究者参考。

【关键词】香椿，总黄酮，药理作用香椿（Toon sinensis Roem）为楝科香椿属落叶乔木，又名椿、椿芽、椿甜树、椿阳树等[1]。

香椿因其浓郁的香气，柔嫩的质地和独特的口感，深受人们的喜爱，是我国传统的调味蔬菜，同时又是一味多用的良药。

《本草纲目》记载：椿叶、椿皮、椿根性温味微苦，无毒，均可入药。

1 香椿叶中总黄酮的提取方法现有文献报道的关于香椿叶中总黄酮的提取方法主要有以下几种：1.1超临界CO2提取在此方法下，最佳提取工艺：称取50g原料，设定萃取压力30MPa，萃取温度45℃，分离室Ⅰ温度35℃、压力7Mpa；分离室Ⅱ温度35℃、压力与储罐平衡；萃取时间2.5h；夹带剂用量为3mL/g原料：CO2流量35L/h，提取5次,前2次用无水乙醇、后3次用85%乙醇做夹带剂，提取物平均得率0. 5%[2]。

1.2微波辅助提取在此方法下，最佳提取工艺：乙醇浓度50%，料液比1:40(g/mL)，微波作用时间9min，微波功率500w，总黄酮得率4. 285%[3]。

1.3超声波辅助提取在此方法下，最佳提取工艺：乙醇溶液浓度40%、乙醇用量40 mL∕1g粗粉、超声电功率150 W、作用时间40 min、超声频率20 kHz，在这个条件下试验，总黄酮提取率为98. 24%［4］。

1.4酶法辅助提取在此方法下，最佳提取工艺：酶浓度0.20mg/mL，酶解温度45℃，酶解pH 5.0，酶解时间120min，浸提温度90℃，浸提时间120min，料液比1∶40。

总黄酮得率可达2.00%[5]。

1.5半仿生法提取在此方法下，最佳提取工艺：称取香椿叶粉25g，分别以pH=2的盐酸溶液，pH=7.5、pH=8.5的氯化氨-氨水的缓冲溶液作为提取液，料液比1∶12(g/mL)，在80℃条件下，每次提取1h，共提取3次。

总黄酮的提取方法总黄酮是一类在植物中广泛存在的生物活性物质，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗菌等多种生物活性。

总黄酮的提取方法主要分为常规提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、超临界流体提取法等。

下面将详细介绍这些方法的原理和操作步骤。

1. 常规提取法：常规提取法是最常用的总黄酮提取方法之一。

该方法的原理是将植物样品与某种适合的溶剂进行浸提，溶剂中的总黄酮溶解出来，然后通过过滤和浓缩得到黄酮提取物。

操作步骤：(1) 将研磨后的植物样品与适量的溶剂加入烧瓶中，一般常用的溶剂有乙醇、甲醇、乙酸乙酯等。

(2) 将烧瓶放入提取装置中，加热浸提，提取时间一般为1-3小时，提取温度根据溶解度可在25-60之间选择。

(3) 提取结束后，使用滤纸、膜过滤或离心等方式分离固液，将液相收集到锥形瓶中。

(4) 将液相进行浓缩，可采用旋转蒸发、真空浓缩或减压浓缩等方法。

(5) 最后得到的黄酮提取物可在低温下保存或进行进一步的分离和纯化。

2. 超声波辅助提取法：超声波辅助提取法是在常规提取法的基础上结合超声波技术进行提取。

超声波的作用可以通过物理振荡和微压力变化，促使溶剂渗透进入植物细胞中，增加提取效率。

操作步骤：(1) 将样品与适量的溶剂放入超声波提取仪中，超声波输出频率一般在20-100 kHz之间。

(2) 开始超声波处理，提取时间一般较短，通常为10-30分钟。

(3) 提取完成后，进行过滤和浓缩等步骤，得到黄酮提取物。

3. 微波辅助提取法：微波辅助提取法是一种利用微波辐射能量加热样品，从而促进溶质的溶解和渗透的方法。

操作步骤：(1) 将植物样品与适量的溶剂放入微波辅助提取系统中。

(2) 设置合适的微波功率和时间，一般微波功率选取在200-1000 W之间，时间一般为5-20分钟。

(3) 提取完成后，进行过滤和浓缩等步骤，得到黄酮提取物。

4. 超临界流体提取法：超临界流体提取法是在超临界温度和压力条件下利用超临界流体作为溶剂进行提取的方法。

香椿叶中黄酮含量的测定实验方案前言：从香椿中提取黄酮有：热水提取法，碱液提取法，乙醇提取法，丙酮提取法，酶解法，超声波提取法，等多种方法。

其中乙醇提取法为实验室提取黄酮最经济最理想的提取方法。

实验过程中黄酮的提取率受提取温度，提取时间，乙醇的浓度，液料比4个因素的影响。

一．乙醇浓度对提取效果的影响固定乙醇溶液的体积为_50m1，分别用60%，70%，80%的乙醇溶液，对干香椿粉末10g 进行回流提取1小时，将提取液萃取后抽滤，然后定容于_50 ml容量瓶，取5ml测定其吸光度。

实验表明:随着乙醇浓度的增加，吸光度值也随之增加，但乙醇浓度达到太高时吸光度反而减小，当浓度为70%时所测得的吸光度值最高。

二．固液比对提取效果的影响固定乙醇溶液浓度为70%溶液体积为50mI，分别以固液比1:10, 1:25, 1:50,进行回流提取1小时，将前三种提取液离心后抽滤，定容于50mI容量瓶，后两种浓缩后定容至50mI容量瓶，取5 ml定容后的溶液测其吸光度。

实验结果表明:随着溶液量的增加，吸光度也随之增加，但是增加到一定量的时候，再增加溶液量，则吸光度开始减小，当固液比为1:10时，溶液的吸光度较高。

三．提取时间对提取效果的影响固定乙醇溶液的浓度为70 % ,溶液的体积为50mI，固液比为1:50分别提取30min, 60min, 90min,将提取液离心后抽滤，然后定容于50mI容量瓶，取5 ml定容后的溶液测其吸光度。

实验结果表明:随着提取时间的增加，吸光度值也随之增加，但当提取时间超过60分钟后，吸光度值增加的幅度越来越小，从节约能源的角度来看，提取时间定在60min 为宜。

利用控制变量法，分别探究上述4个单因素对黄酮提取率的影响。

通过4因素3水平进行正交实验，可以得出一条提取黄酮的最佳途径。

乙醇的浓度：. 60% , 70% , 80% ,提取温度：60℃，70℃，80℃，提取时间： 0.5h ,1h ,1.5h液料比： 1：10，1：25，1：50由于实验材料香椿叶不够，不能做上述9组对照试验，现选取实验条件为：70%的乙醇，提取温度为60℃，提取时间为1h，液料比为1：10.进行香椿叶中黄酮的粗提取。

江西理工大学本科毕业设计〔论文〕题目：香椿中黄酮类物质提取工艺条件的研究摘要本文以香椿为原料，采用碱提酸析法和微波辅助提取法成功地提取了香椿中的黄酮类物质。

经HCL—镁粉反响和红外光谱鉴定，提取物为黄酮类物质。

另外，利用紫外分光光度法，以芦丁为对照品，NaNO2-Al(NO3)3-NaOH体系为显色剂测定香椿中总黄酮的含量。

并利用L9〔3^4〕正交试验设计，确立了香椿中黄酮的最正确提取条件及其产率。

结果说明，最正确提取工艺条件为硼砂浓度0.5％，料液比1：40，提取30min，温度60℃。

结论：本试验可为香椿进一步研究和资源开发利用提供一定的科学依据。

关键词:香椿；黄酮类物质；提取；测定ABSTRACTIn this paper，flavonids were extracted from Chinese mahogany successfully，by using the method of“dissolved in alkali and separated out in acid〞and microwave—assisted method．Flavonids were identified by reacting with magnesium-hydrochloric acid and IR character- ization．In addition，all the flavonids in Chinese mahogany were determined by UV-spectrophotometry with rutin as the standard，the quantities of flavonoids componentes were measured with at 360 nm.And use L9〔3^4〕orthogonal test design.Result showed that the optimum extracting conditions were determined with 0.5% (M／V) Na2B4O7.10H2O as extractor with the ratio of material to liquid at 1：40，and extracting for 30min／time and the separation temperature is 50℃：This study provided scientific basis for Chinese mahogany，development and utilization of gardenia.Keywords：Chinese mahogany；Flavonids；Extraction；Determination目录前言 (7)第一章文献综述 (8)1.1 香椿的概况 (8)1.2 香椿的研究进展 (8)1.2.1 香椿的产地和品种 (8)1.2.2 香椿的化学成分研究 (8)1.2.3 药理学研究 (9)1.3 香椿的开发前景 (10)1.4 黄酮类化合物的概况 (10)1.4.1 黄酮类化合物分布及其存在形式 (10)1.4.2 黄酮类化合物简介 (11)1.4.3 黄酮类化合物的性质 (11)1.5 黄酮类化合物研究的意义 (11)1.6 黄酮类化合物的研究进展 (12)1.6.1 黄酮类化合物结构及其分类 (12)1.6.2 黄酮类化合物的生理功能与人类健康 (12)1.6.3 黄酮类化合物的提取工艺 (15)1.6.4 黄酮类化合物的定性与定量检测 (16)1.7 黄酮类化合物的开发与应用 (17)1.7.1 市场前景 (17)1.7.2 黄酮资源开发 (18)第二章实验局部 (119)2.1 实验原料与仪器 (119)2.1.1 原料 (119)2.1.2 试剂 (119)2.1.3 仪器 (119)2.2 黄酮含量测定的原理和方法 (19)2.2.1 测定原理 (119)2.2.2 测定方法 (119)2.2.3 香椿中黄酮的单因素提取试验 (21).4 确定香椿中黄酮最正确提取工艺条件的正交试验 (21)2.2.5 黄酮的鉴定 (23)2.2.6 香椿的总黄酮的测定 (25)第三章结果与讨论 (26)3.1 重现性实验 (26)3.2 测定波长的选择 (26)3.3 最正确提取条件的选择 (27)3.3.1 正交实验结果及直观分析 (27)3.3.2 方差分析 (28)第四章结论 (229)参考文献 (30)致谢 (32)外文资料 (33)中文翻译 (42)前言香椿这一天然资源伴随着我国悠久的历史，一直显示着多方面的药用和保健价值。

广东化工2019年第15期·86·第46卷总第401期香椿不同部位总黄酮含量比较及生物活性研究张家俊，刘玉梅*，胡美忠，李家龙，吴浪，郁建生(铜仁职业技术学院国家民委中兽药重点开放实验室，贵州铜仁554300)Comparison of Total Flavonoids Content and Biological Activity in Different Partsof Toona SinensisZhang Jiajun,Liu Yumei,Hu Meizhong,Li Jialong,Wu Lang,Yu Jiansheng(Key Open Laboratory of Chinese Veterinary Medicine of State Ethnic Affairs Commission,Tongren Polyechnic College,Tongren554300,China)Abstract:In this experiment,the total flavonoids in different parts of Toona sinensis from Guizhou Province was tested by ultraviolet-visible spectrophotometry with rutin as the reference substance.We also determined their antimicrobial activity against Staphylococcus aureus and Escherichia coli.The results showed that the order of flavonoid content from high to low was Toona sinensis old leaf＞Toona sinensis seeds＞Toona sinensis root bark＞Toona sinensis stem bark;and different part of Toona sinensis have antibacterial activity.In view of the high yield,high content of total flavonoids and no significant difference in antimicrobial activity of the old leaves of Toona sinensis compared with other parts of Toona sinensis,its application and development prospects are better.Keywords:Toona sinensis；total flavonoids；staphylococcus aureus；escherichia coli香椿Toona sinensis是楝科香椿属多年生落叶乔木，在我国是一种重要的、人们广为喜爱的木本蔬菜。