HBV、HCV和HIV-1感染及其机体的免疫应答
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乙型肝炎病毒 ( Hepatitis B Virus )
HBV感染后血液中指标的出现
乙肝“两对半”
乙肝表面抗原(HBsAg)：最早出现在血液中的病毒抗原 乙肝表面抗体（抗HBs）：中和或保护抗体 乙肝e抗原（HBeAg）：第二个出现在血液中的病毒抗原 乙肝e抗体（抗HBe） 乙肝核心抗体（抗HBc）：最早出现在血液中的抗体（IgM）
HBV携带者
隐匿性HBV感染
HBsAg阴性但在血 循环或肝组织中可 检测到HBV DNA 的患者。抗－HBc 可为阳性亦可为阴 性。
隐匿性HBV感染
HBsAg含量低于所用方法的测定下限之下。 如感染的“窗口期”、急性期后或恢复期、
自限性感染末期的携带者等。
编码HBsAg的HBV S基因的突变。
• 输血安全性。尤其是逃逸突变株流行较广的 地区，在HBV高流行区域，突变株的流行率 也高
• 导致疫苗免疫的失败 。要在进行人群HBV分 子流行病学的基础上，考虑研制针对主要流 行HBsAg变异株的乙肝疫苗，保证免疫的有 效性。
• 临床检测中“两对半”异常模式的出现
HBV DNA 检 测 在 血 液 筛 查 对 HBsAg 检测不具备替代性
HBV、HCV和HIV-1感 染及其机体的免疫应答
李金明 卫生部临床检验中心
亚洲是乙肝病毒肆虐的
重灾区，全球2/3以上 的慢性乙肝患者生活在
亚洲。而根据1992年全 国乙肝血清流行病学调
查的结果，中国的乙肝
病毒携带者近1.3亿人， 平均每10个人中有一个， 感染率更高达57.6%。
?
我国的HBV人群感染率（HBsAg 阳性率7.18%）（中华人民共和国 卫生部．全国人群乙肝血清流行病 学调查结果[R]．北京：卫生部， 2008.）远高于美国（0.3%） （Centers for Disease Control
抗-HIV：病毒特异性的抗体开始出现，针对 p24和病毒表面蛋白（尤其是gp160和gp41）为
机体内最早出现的HIV抗体。
and Prevention. National Health
and Nutrition Examination Survey.
2008 (cited October 20, 2008).
Available at: /nchs/about/m
ajor/ nhanes/nhanes2005-2006/ lab05_06.htm.）
QGTຫໍສະໝຸດ S MAF
P T
T
RT C
122
124
P
P TD
A
K
G
CT CC
N CT C
147 138
G145R、 K141E和 T131I 和 在 122 与 123 位 残基之间
三个氨基 酸的插入， 因为其明 显影响 HBsAg 的 抗原结构
“a”决定簇是主要抗原决定簇，为各亚型所共有，位于高度保守的表面抗原 第 124-147位氨基酸的亲水区。此区富含半胱氨酸并借位于第124，137，139 和147 位间的二硫键形成双环结构，从而维持表面抗原的抗原性。
HBsAg 阳性 HBV DNA为阴性或低水平
Kuhns MC and Busch MP. New strategies for blood donors screening for hepatitis B virus. Mol Diag Ther 2006;10(2):77 (USA)
NAT 漏检
激发HIV抗体的HIV蛋白
膜（env）蛋白：前体膜糖蛋白gp160及其两个 主要亚单位，gp120和gp41
多聚酶（pol）蛋白：逆转录酶p66和核酸内切 酶p31
核心（gag）蛋白：前体蛋白p55及其组成成份 p24，p18和p15。
HIV感染后抗原、抗体的产生
HIV RNA和P24抗原:人感染HIV从几天至几周 （常为4~8周，有报道最短为8天）机体即有活 跃的病毒复制，血浆中含大量病毒以及可测出 的p24抗原。
(ISDR). However, the relevance and importance of this region are still unclear.
HEPATITIS C VIRUS INFECTION GEORG M. LAUER et al. N Engl J Med, 345(1),
表达了可用于检测抗HCV抗体的C100-3 抗原 ，为 C100与SOD的融合蛋白。
1990年美国Ortho和Abbott公司用C100-3抗原生产了 第一代抗HCV ELISA试剂盒，并广泛应用于献血 员的筛检及临床HCV感染的检测。
第二代抗HCV ELISA检测试剂
随着对HCV研究的不断深入，HCV的特异性核 心区抗原P22（C22）和NS3区抗原C33C表达成功， 经与C100-3抗原对比检测发现，C22和C33C抗原的 早期诊断能力均优于C100-3抗原，并提高了检测 的灵敏度和特异性。
抗NS3抗体的出现明显早于其它抗体，与抗NS4和NS5 抗体不同的是 ，其可能是构象依赖性的 ，因为使用 NS3的合成多肽不能检出相应的特异性抗体。
而NS4区则含有至少两个免疫优势序列位点，抗原性 较强，绝大多数HCV感染者能产生针对该区C100－3 的抗体反应。
当HCV感染者抗NS3和抗NS4抗体阴性时，针对NS5区 病毒RNA聚合酶的抗体反应可为阳性。
Figure 1. The HCV Genome and Expressed Polyprotein. HCV, a single-stranded RNA virus of 9.5 kb, consists of a single open reading frame and two untranslated regions (UTRs). It encodes a polyprotein of approximately 3000 amino acids, which is cleaved into single proteins by a host signal peptidase in the structural region and the HCV-encoded proteases in the nonstructural (NS) region. The structural region contains the core protein and two envelope proteins (E1 and E2). Two regions in E2, called hypervariable regions 1 and 2 (HVR 1 and HVR 2), show extreme sequence variability, which is thought to be the result of selective pressure by virus-specific antibodies. E2 also contains the binding site for CD81, the putative HCV receptor or coreceptor. The nonstructural proteins have been assigned functions as proteases (in the case of NS2, NS3, and NS4A), helicase (in the case of NS3), and RNA-dependent RNA polymerase (NS5B). Although the crystal structure of NS3 and NS5 is known,31 the function and properties of the other proteins (such as p7) are less well characterized. A region in NS5A has been linked to the response to interferon alfa therapy and is therefore called the interferon-sensitivity-determining region
于是以包被核心和NS3区抗原为主的第二代抗 HCV ELISA试剂盒应运而生，不同的厂家抗原 的包被模式各有不同，主要有以下二种：（1） C22＋C33C；（2）C22和C200（C100＋C33C）。
第三代抗HCV ELISA试剂
核心抗原比例相对下降，而相 应增加了C33C的比例
发现了NS5区的血清学意义， 增加NS5区抗原作为包被抗原。
在低流行地区，乙肝核心抗体能够用来帮助筛查 那些NAT漏检的低滴度慢性携带者或者隐性感染者。
Kuhns MC and Busch MP. Mol Diag Ther 2006;10(2):77-91.
丙型肝炎病毒
HCV感染后血液中指标的出现
HCV Ag HCV Ag
•图片来自ABBOTT
HCV的5’NCR的保守性最好， 故 RT－PCR检测HCV RNA的 引物 设计多选用该区域。
台湾研究：使用NAT检测HBV献血者都不在急性 窗口期，而是HBV DNA滴度非常低的慢性或隐性 病人，这些人的HBV DNA有可能波动到NAT检测 低限以下，在这次研究中， NAT混合样品测试漏
检了15.8% 的HBV表面抗原阳性携带者。Li L et al.
Transfusion.2008 ;48(6):1198-206.
2001
HCV感染的检测指标
抗-HCV HCV核心抗原 HCV RNA
机体对HCV感染的抗体应答
对非结构蛋白的抗体应答
对衣壳蛋白的抗体应答
对包膜蛋白的抗体应答
（一般认为C区和NS4区蛋白能诱导机体较 强的抗体应答）
对HCV非结构蛋白的抗体应答
