手足口病样本采集运送
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手足口病样品的采集
一、样品采集生物安全的要求
手足口病采样器采样中避免污染对于人员和标本都是至关重要的,应采用防护措施,注意安全操作。
基本的安全要求如下:
采样戴手套
采样中尽可能穿防护服
污染的材料应先消毒后清洗或消毒后废弃
使用口罩、用于防止有传染力的可吸入病原
二、手足口病采样器材的要求:
拭子:应使用头部为合成纤维的拭子(例如,聚酯纤维),用铝或塑料做杆。
不能使用棉拭子收集标本。
标本采集管应包含3毫升病毒运输液
采样管:外螺旋口、耐-70℃冻存
采样液:无菌病毒保存液
三、手足口病采集的样品
核酸检验应在发病初期和急性期采样,因为此时病毒在体内大量繁殖,检出率高,病毒分类标本最好在发病1~2天内采取。
1.脑脊液、咽拭子、粪便或肛拭子或疱疹液内的粪便标本,用于病原检测。
粪便标本采集量5~8g/份,采集后立即放入无菌采便管内,4℃暂存立即(12h内)送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
2.血清学检验
病人血清中特异性IgM抗体阳性,或急性期与恢复期血清IgG抗体有4倍以上的升高。
三、样品的储存和运送
所有呼吸道标本应保存在4℃,并尽快放置在-70℃。
如果没有-70℃度冰箱,标本应保存在4℃,但不应超过4天
手足口病病人样品采集、保存标准一览表
(1)采集新发或新入院病人的相关标本;
(2)样品采集时,如果标本需分装或分地检测,注意适当增加单份样品采集量;(3)采样时,做好样品登记工作,详细记录病人姓名、性别、年龄、发病时间、采样时间、主要临床表现、是否用药等信息,并注意和个案调查资料相匹配。
标本采集运输接收及保管制度一、引言在医疗行业中,标本采集运输接收及保管是非常重要的环节。
正确的标本采集、准确的运输方式、规范的接收及妥善的保管是确保医疗工作顺利进行的基础。
本制度的制定旨在规范标本采集、运输接收及保管流程,确保标本完整性、准确性和可追溯性,为医疗工作提供可靠的数据支持,减少工作风险,提高工作效率。
二、标本采集1.医务人员应经过严格的培训并持有相应的执业资格才能进行标本采集工作。
2.标本采集前应对患者进行相应的告知,包括标本采集的目的、过程和可能的不适感等。
3.医务人员应佩戴防护用品,包括口罩、手套和护目镜等,以防止交叉感染。
4.采集器械应为一次性器械,不得重复使用,采集器械的选择应根据标本类型进行。
5.采集过程中需要注意标本采集区域的清洁,避免污染。
6.采集完成后,应立即将标本进行正确的包装和标记,确保标本完整,并填写相应的标本采集记录。
三、标本运输1.标本运输应尽量选择专门的运输车辆,保证及时到达目的地。
2.运输车辆应具备稳定的温度和湿度控制装置,以保证标本的稳定性。
3.标本应以密封的容器进行运输,以防止泄漏和破损。
4.标本运输过程中需要注意防震措施,避免标本在运输过程中发生破损。
5.运输过程中需记录标本的运输情况,包括起运时间、到达时间等,以便追溯标本的运输历史。
6.运输车辆上应配备相应的急救设备和处理突发情况的人员。
四、标本接收1.标本接收人员应经过相应的培训,并持有相应的执业资格。
2.接收人员在接收标本之前应确认标本的完整性和准确性,并进行记录。
3.接收时需要核对标本相关信息,包括标本袋上的患者信息和标本类型等。
4.接收人员需要根据标本种类和要求将标本进行妥善的分类和保存。
5.接收完成后,应及时将接收情况填写至接收记录表,并交由相关部门进行后续处理。
五、标本保管1.标本应存放在专门的标本保管室中,禁止将标本放置于其他非相关区域。
2.标本保管室应具备相应的温度和湿度控制装置,以保证标本的稳定性。
标本采集、运送、保存成序1.目的规范标本采集程序,保证实验室检测前标本质量。
2. 范围微生物标本。
3. 职责3.1 医护人员和检验人员负责指导病人如何正确留取标本。
3.2 标本运输人员负责收取标本和运输标本至微生物室。
4. 程序4.1 采集标本前,采样人员根据检验申请单检验项目的要求,确认采样计划并进行适当的准备工作,包括核对遗嘱、打印条形码、选择合适的标本容器、粘贴条形码及指导病人做好采样前的准备工作等。
4.2 认真核对病人、标本容器和检验申请单是否一致,严防差错。
4.3 标本送到微生物室,标本运输人员必须与微生物室标本接收人员对标本进行核收登记并签名4.4 所有标本必须记录采样时间并立即送检,一般不得超过2h.5 采集方法5.1 血液及骨髓5.1.1 血液5.1.1.1采血时间:①在抗菌药物治疗前;②尽可能在患者寒战开始时、发热高峰前30-60分钟内采血;③如患者已经应用抗菌药物进行治疗,应在下一次用药之前采血培养;④同时或短时间内完成几套血培养采集,除非怀疑存在持续性菌血症时(如亚急性感染性心内膜炎1-2小时从不同部位采集3套标本)5.1.1.2采血量:成人一次采血5~10ml,儿童2~5 ml婴幼儿为1~2ml。
(附注:儿童的采血量不能超过其总血容量的1%)。
5.1.1.3采血方法:①成年病人,推荐同时在不同部位采集2~3套(每套包括一瓶需氧瓶、一瓶厌氧瓶);对于感染性心内膜炎和真菌血症则应多次采集;对于婴幼儿病人,推荐同时在不同部位采集2~3瓶。
因为儿童患者很少见厌氧菌感染,因此推荐仅使用需氧瓶而不常规推荐同时做厌氧培养。
②采血量充足时,应先注入厌氧瓶,后注入需氧瓶;采血量不足时,应先注入需氧瓶,后注入厌氧瓶。
5.1.2 骨髓标本用骨髓穿刺针从髂骨采集。
5.1.3 标本保存:采集标本后立即送到实验室,不能及时送检可置于室温,切勿放入冰箱。
冬季血培养瓶在送检过程中应采取一定的保暖措施。
5.2 脑脊液标本:由临床医师以无菌要求做腰椎穿刺,抽取脑脊液2~3ml,盛于无菌容器中送检。
传染病样本采集运送接收储存流程1.样本采集样本的采集是诊断传染病的第一步,需要按照传染病的特点和采集标准进行。
常见的传染病样本包括血液、尿液、咽拭子、咳嗽样本等。
采集时需要穿戴一次性手套和口罩,并使用无菌棉签或吸管采集样本。
采集过程需要进行适当记录,包括患者信息、采集时间等。
2.样本运送采集完成后,样本需要尽快送到实验室进行检测。
在运送过程中,需要注意以下几点:-选择适当的容器:根据样本的性质选择适当的容器,如血液样本通常用抗凝剂管,尿液样本通常用无菌容器。
-包装和标记:样本需要进行适当的包装,并在容器上标明患者的信息,包括姓名、年龄、性别、住院号等。
-运送温度:根据不同样本的要求,选择合适的温度进行运送,如有些样本需要冷藏,有些则需要常温。
3.样本接收实验室收到样本后,需要进行以下处理:-首先检查包装:检查包装是否完好无损,并核对标记上的信息是否与样本一致。
-登记样本:将样本信息登记在实验室的系统中,包括患者信息、送样时间、送样人员等。
-处理样本:根据所需检测项目,对样本进行适当的处理,如离心分离血浆、提取核酸等。
4.样本储存在检测完成后,未使用的样本需要储存起来,以备后续可能的检测或检测验证使用。
样本储存需要满足以下要求:-选择适当的储存方式:根据样本的性质和要求,选择适当的储存方式,如低温冷冻、冻干、阴凉干燥等。
-标记完整:在样本容器上标明详细的信息,包括患者信息、储存日期、储存条件等。
-安全存放:确保样本的安全存放,避免交叉污染和损坏。
总结起来,传染病样本采集、运送、接收、储存流程是一个前后衔接的过程。
在每个环节都需要严格遵守相应的操作规范,以确保样本的质量和安全,从而保证检测结果的准确性和可靠性。
手足口病标本采集技术方案标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]手足口病标本采集技术方案一、采集标本的种类、保存和运输(一)粪便标本。
采集病人发病 3 日内的粪便标本,用于病原检测。
粪便标本采集量 5-8g/份,采集后立即放入无菌采便管内,外表贴上带有唯一识别号码的标签,4℃暂存 12 小时内送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
(二)咽拭子标本。
采集病人发病 3 日内的咽拭子标本,用于病原检测。
用专用采样棉签,适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位,应避免触及舌部;迅速将棉签放入装有 3-5ml 保存液(含5%牛血清维持液或生理盐水,推荐使用维持液)15ml 外螺旋盖采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封,以防干燥,外表贴上带有唯一识别号码的标签。
4℃暂存在 12 小时内送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
(三)血清标本。
各省(区、市)在手足口病流行年份中均应采集 EV71 和 CVA16感染的手足口病患儿的双份血清。
采集急性期(发病 0-7d)和恢复期(发病 14-30d)双份配对血清用于阐明和分析 EV71 和 CVA16 感染后 IgG 和 IgM 抗体的动态变化,评价血清学抗体试剂盒的敏感性和特异性。
静脉采集 3-5ml 全血,于真空无菌采血管中,自凝后,分离血清,将血清移到 2ml 外螺旋的血清保存管中,外表贴上带有唯一识别号码的标签。
将血清于-20℃以下冰箱中冷冻保存。
(四)疱疹液。
在手足口病的实验室诊断中,从疱疹液中分离到病毒即可确诊该病毒为病因,可同时采集多个疱疹作为一份标本。
先用 75%的酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒,然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液,迅速将棉签放入内装有 3-5ml 保存液(含 5%牛血清维持液或生理盐水,推荐使用维持液)的采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封,采样管外表贴上带有唯一识别号码的标签。
病毒样本采集、运送、接收、储存流程---
1. 采集样本
- 选择合适的采集场所,确保环境清洁、无污染。
- 首先准备所需的采集工具和材料,包括手套、口罩、消毒剂等。
- 按照操作规程,正确采集病毒样本,避免交叉污染。
- 将采集样本放入适当的中,确保密闭。
2. 运送样本
- 采集完成后,将样本封装好,并贴上相应的标签,包括样本标识、采集时间等信息。
- 样本的运送过程中需要注意温度控制,确保样本的稳定性。
- 根据运输距离和时间,选择合适的运输方式,如专用运输车辆、干冰等。
- 在运送过程中,保持样本的密封性,避免外界污染。
3. 接收样本
- 在接收样本前,要核对样本标签上的信息,确保与运送单据
一致。
- 接收到样本后,及时将其储存到指定的储存设备或地点。
- 如果样本需要进行分析或检测,要及时进行样本提取和处理。
4. 储存样本
- 样本储存过程中要注意温度和湿度的控制,确保样本的稳定
性和可靠性。
- 对于需要长期储存的样本,应选择合适的冷冻设备或冷冻液
进行储存。
- 对于高风险的样本,应采取相应的安全措施,如使用防护设备、选择专用储存场所等。
以上为病毒样本采集、运送、接收、储存的流程简要介绍。
在
进行相关操作时,注意遵守相关法规和标准,确保操作的安全性和
可靠性。
手足口病标本采集技术方案一、采集标本的种类、保存和运输(一)粪便标本。
采集病人发病 3 日内的粪便标本,用于病原检测。
粪便标本采集量 5-8g/份,采集后立即放入无菌采便管内,外表贴上带有唯一识别号码的标签,4℃暂存 12 小时内送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
(二)咽拭子标本。
采集病人发病 3 日内的咽拭子标本,用于病原检测。
用专用采样棉签,适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位,应避免触及舌部;迅速将棉签放入装有 3-5ml 保存液(含 5%牛血清维持液或生理盐水,推荐使用维持液)15ml 外螺旋盖采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封,以防干燥,外表贴上带有唯一识别号码的标签。
4℃暂存在 12 小时内送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
(三)血清标本。
各省(区、市)在手足口病流行年份中均应采集 EV71 和 CVA16感染的手足口病患儿的双份血清。
采集急性期(发病 0-7d)和恢复期(发病 14-30d)双份配对血清用于阐明和分析 EV71 和 CVA16 感染后 IgG 和 IgM 抗体的动态变化,评价血清学抗体试剂盒的敏感性和特异性。
静脉采集 3-5ml 全血,于真空无菌采血管中,自凝后,分离血清,将血清移到 2ml 外螺旋的血清保存管中,外表贴上带有唯一识别号码的标签。
将血清于-20℃以下冰箱中冷冻保存。
(四)疱疹液。
在手足口病的实验室诊断中,从疱疹液中分离到病毒即可确诊该病毒为病因,可同时采集多个疱疹作为一份标本。
先用 75%的酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒,然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液,迅速将棉签放入内装有 3-5ml 保存液(含 5%牛血清维持液或生理盐水,推荐使用维持液)的采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封,采样管外表贴上带有唯一识别号码的标签。
所采集标本 4℃暂存立即(12h 内)送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
附件1手足口病标本采集及检测技术方案一、采集标本的种类、保存和运输(一)粪便标本。
采集病人发病3日内的粪便标本,用于病原检测。
粪便标本采集量5-8g/份,采集后立即放入无菌采便管内,外表贴上带有唯一识别号码的标签,4℃暂存12小时内送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
(二)咽拭子标本。
采集病人发病3日内的咽拭子标本,用于病原检测。
用专用采样棉签,适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位,应避免触及舌部;迅速将棉签放入装有3-5ml保存液(含5%牛血清维持液或生理盐水,推荐使用维持液)的15ml外螺旋盖采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封,以防干燥,外表贴上带有唯一识别号码的标签。
4℃暂存并在12小时内送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
(三)血清标本。
各省(区、市)在手足口病流行年份中均应采集EV71 和CVA16感染的手足口病患儿的双份血清。
采集急性期(发病0-7d)和恢复期(发病14-30d)双份配对血清用于阐明和分析EV71和CVA16感染后IgG和IgM抗体的动态变化,评价血清学抗体试剂盒的敏感性和特异性。
静脉采集3-5ml全血,置于真空无菌采血管中,自凝后,分离血清,将血清移到2ml外螺旋的血清保存管中,外表贴上带有唯一识别号码的标签。
将血清置于-20℃以下冰箱中冷冻保存。
(四)疱疹液。
在手足口病的实验室诊断中,从疱疹液中分离到病毒即可确诊该病毒为病因,可同时采集多个疱疹作为一份标本。
先用75%的酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒,然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液,迅速将棉签放入内装有3-5ml保存液(含5%牛血清维持液或生理盐水,推荐使用维持液)的采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封,采样管外表贴上带有唯一识别号码的标签。
所采集标本4℃暂存立即(12h内)送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
附件1手足口病标本采集及检测技术方案一、采集标本的种类、保存和运输(一)粪便标本。
采集病人发病3日内的粪便标本,用于病原检测。
粪便标本采集量5-8g/份,采集后立即放入无菌采便管内,外表贴上带有唯一识别号码的标签,4℃暂存12小时内送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
(二)咽拭子标本。
采集病人发病3日内的咽拭子标本,用于病原检测。
用专用采样棉签,适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位,应避免触及舌部;迅速将棉签放入装有3-5ml保存液(含5%牛血清维持液或生理盐水,推荐使用维持液)的15ml外螺旋盖采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封,以防干燥,外表贴上带有唯一识别号码的标签。
4℃暂存并在12小时内送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
(三)血清标本。
各省(区、市)在手足口病流行年份中均应采集EV71 和CVA16感染的手足口病患儿的双份血清。
采集急性期(发病0-7d)和恢复期(发病14-30d)双份配对血清用于阐明和分析EV71和CVA16感染后IgG和IgM抗体的动态变化,评价血清学抗体试剂盒的敏感性和特异性。
静脉采集3-5ml全血,置于真空无菌采血管中,自凝后,分离血清,将血清移到2ml外螺旋的血清保存管中,外表贴上带有唯一识别号码的标签。
将血清置于-20℃以下冰箱中冷冻保存。
(四)疱疹液。
在手足口病的实验室诊断中,从疱疹液中分离到病毒即可确诊该病毒为病因,可同时采集多个疱疹作为一份标本。
先用75%的酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒,然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液,迅速将棉签放入内装有3-5ml保存液(含5%牛血清维持液或生理盐水,推荐使用维持液)的采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封,采样管外表贴上带有唯一识别号码的标签。
所采集标本4℃暂存立即(12h内)送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
附件3手足口病实验室检测方案(试行)为规范手足口病的标本采集、运送及实验室检测操作程序,提高检测准确性,从而为手足口病的明确诊断和相关实验研究提供可靠的依据,特制定本方案。
手足口病的实验室检测原则和程序手足口病的诊断一般是通过采集适当的临床标本后进行病毒分离和病毒鉴定,如果没有采到合适的临床标本,或无法进行病毒分离,也可以通过血清学检测(如中和实验)来检测血清中的中和抗体,或直接从临床标本中检测病毒的核酸来诊断(见下图:手足口病的实验室诊断流程图)。
一般是由省级病毒实验室进行病毒的分离,爆发疫情范围较大时,国家参比实验室也可以提供技术支持。
病毒分离成功后,送至国家参比实验室进行鉴定或复核,同时对全国手足口病的病原进行病毒学监测。
国家参比实验室接到标本后,在30日内将结果反馈给省级实验室。
很多血清型的肠道病毒能引起手足口病,不同细胞系对不同病毒的敏感性是有所不同的,而不同时期肠道病毒的流行株也不同。
通常用于肠道病毒分离的细胞系为RD细胞(对CA16和EV71敏感)、HEp-2细胞(对某些柯萨奇B组病毒敏感)等,联合使用上述两种或更多细胞(如Vero细胞)有助于分离到更多的肠道病毒。
使用血清型特异性的中和抗血清进行的中和实验是肠道病毒鉴定的基本方法,如果使用了适当的抗血清,实验结果是比较可靠的。
因为肠道病毒包括若干个血清型,通常使用组合抗血清进行鉴定,有些组合抗血清已经商品化。
当无法进行病毒分离或得不到适用于病毒分离用的标本时,血清学检测可以为肠道病毒的感染提供一个间接的证据。
一般用急性期血清与恢复期血清的检测结果进行比较,抗体滴度呈四倍或以上增高证明有急性感染。
但是,无症状的肠道病毒感染也是常见的,所以对检测结果的解释要慎重一些。
为了提高检测速度,也为了辅助中和实验法进行毒株鉴定,最近很多实验室都使用分子生物学方法。
目前,用分子生物学方法对肠道病毒进行定型还没有统一的标准,而且要根据检测目的选择使用适用的方法。
附件3 标本采集和运送方法一、标本采集(一)血标本。
1.采集病例出疹后28日内静脉血2~3ml,加入到无菌试管中,标明采集日期和病例姓名、编号。
2.有条件地区可用1500rpm/20分钟离心机分离血清。
如果没有离心机,在室温下凝固分离血清,或冷藏条件下放置,直到血清完全析出。
3.在无菌条件下,将血清移至外螺旋盖带垫圈的无菌管中,避免吸到红血球。
4.血清标本运送前应在2~8℃保存,如果7日内不能运送的,应置-20℃以下保存,避免反复冻融。
全血标本不能冻结。
5.填写完整的标本送检表,送检表上要注明病例编号。
6.出疹后3日内采集的血标本检测麻疹、风疹IgM抗体均为阴性,且无病原学标本核酸检测结果的,应在出疹后4~28日采集第2份血标本进行检测。
注:合格血标本的基本要求是:出疹后28日内采集,血清量不少于0.5ml,无溶血,无污染;2~8℃条件下保存、运送。
(二)病原学标本。
咽拭子病原学标本的采集方法如下:(1)出疹当日至出疹后5日采集。
(2)使用的棉拭子和试管等应灭菌。
(3)用无菌棉拭子适度用力在咽喉部擦拭,获得上皮细胞。
(4)把拭子放入有外螺旋盖并装有2ml病毒运输液的冻存管中。
(5)病毒运输液有商业成品可用。
常用的病毒运输液包括:pH 7.4~7.6的Hank’s液:在90ml蒸馏水中加入10mlHank’s,然后加入10ml牛血清和0.2ml 0.4%酚红溶液,过滤消毒。
加1ml青/链霉素溶液。
分装到无菌管中,于4℃储存备用。
组织培养液:DMEM液加入青/链霉素使其终末浓度分别为500~1000IU/ml 和500~1000ug/ml,加入胎牛血清使其终末浓度为2%,加入谷氨酰胺至浓度为1%;加入7.5%的NaHCO调节pH至7.4~7.6。
3注:合格病原学标本的基本要求:出疹后5日内采集,冷藏运送,-70℃以下保存。
二、标本运送(一)血标本。
1.标本采集后按照监测方案要求送到实验室,严防标本污染或容器渗漏。