实验三 伪狂犬病的诊断
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2017年第07期经济动物犬伪狂犬病也称犬奥耶斯基氏病。
本病是由疱疹病毒科疱疹病毒属的伪狂犬病毒引起的一种急性、热性传染病,除感染犬外也感染其他哺乳动物,如猪、牛、羊等。
临床上主要表现脑脊髓炎和皮肤奇痒。
1流行病学在自然条件下,本病除感染犬外,也能感染牛、羊、猪及鼠类。
鼠类是主要的贮存宿主。
病犬、病畜及带毒动物是传染源。
其中主要是猪和鼠,鼠类动物多呈不显性感染而带毒。
犬和猪吃了病死鼠以后而感染发病。
病猪通过鼻汁、眼分泌物、乳汁、阴道分泌物及尿排出病毒。
因此猪常常是犬的传染源。
病毒通过多种途径感染犬而使其发病。
病毒侵入黏膜或皮下后,由神经途径达到神经中枢,病毒在神经节细胞和神经胶质细胞中繁殖,从而引起神经症状。
2临床症状本病的潜伏期1~8d,长的21d。
犬常因吃了带毒的鼠或死于本病的猪的肉及内脏而感染。
初期精神不振、废食,卷缩而坐。
而后出现兴奋、跳跃等神经症状,疯狂咬痒部。
以后出现麻痹、吞咽困难、流涎、反应迟顿、呼吸困难,病后1~2d死亡。
经外伤感染的犬,最初舐咬皮肤伤处,搔抓和嘶咬伤处,使创面扩大、加深、周围组织肿胀,继发感染溃烂而死亡。
3病理学诊断剖检病死犬,可见皮肤上有损伤,流出血液和组织液,所有脏器充血、出血。
有明显神经症状的病例。
中枢神经系统呈弥漫性、非化脓性脑膜炎和神经节炎。
有明显的血管套及弥漫性局部胶质细胞反应,并有广泛的神经节细胞及胶质细胞坏死。
一般检查时,无脑炎的病例占15%~20%。
4病原学诊断取可疑病犬脑组织1份,加9份肉汤培养基或生理盐水制成悬液,并在1m L中加青霉素、链霉素500~1000I U,放于4℃冰箱12~24h,经1500转/m in离心后取上清液,备用。
养。
取离心的上清液接种于地鼠的肾细胞(维持液量20:1),置于37℃温箱中进行培养,一般在接种后24h细胞出现聚融和萎缩,见到坏死病变。
也可取培养物用电子显微镜观察病毒形态加以确诊。
(2)动物接种。
取病犬脑组织加生理盐水研碎后制成悬液,给小鼠脑内或鼻内接种会出现发痒症状,可持续12h。
基金项目:新疆维吾尔自治区少数民族科技骨干特殊培养计划(XJ2022081);肉牛养殖项目(H001)牛伪狂犬病的诊断与防疫措施吾买尔江·牙合甫1,阿丽米热·买买提1,艾海提.买买提21.新疆农业大学动物医学学院新疆草食动物新药研究与创制重点实验室,新疆乌鲁木齐8300522.哈密市伊州区陶家宫镇人民政府农业(畜牧业)发展服务中心,新疆哈密839000摘 要 伪狂犬病是由伪狂犬病毒(pseudorabiesvirus,PRV)引起的家畜及野生动物的急性传染病,患病牛具有发热、奇痒、脑脊髓炎等典型临床症状。
该病致死率高,传染性强,可对养殖业造成巨大损失。
对伪狂犬病的病原学、临床症状、诊断和预防要点等进行综述,以期为兽医工作人员及养殖户提供参考。
关键词 牛;伪狂犬病;诊断;预防doi:10.19567/j.cnki.1008-0414.2023.05.019 引言伪狂犬病病毒(pseudorabiesvirus,PRV)又叫“奥耶斯基氏病”(aujesky’sdisease,AD),是由猪疱疹病毒Ⅰ型引起的伪狂犬病病毒。
该病发现于1813年,多数家畜动物出现瘙痒、狂躁后死亡现象,1912年该病被设立为独立的一个疾病。
猪一直被认为是唯一的自然宿主和宿主,并且PRV病猪或PRV携带猪是PRV的主要传染源,它能引起家畜、野生动物的急性致死性传染病[1]。
国内外陆续报道有羊、狼、貂、狐狸感染PRV的事件发生,牛养殖场中牛伪狂犬病也时常发生,称“疯痒病”(Maditch),主要表现为狂躁、咽喉麻痹、呼吸困难以及发热、局部痒,脑脊髓炎症状为主要临床特征,感染后病死率高、病程短,致死率高达90%~100%。
病原学伪狂犬病病毒属疱疹病甲亚科,核衣壳直径为105~110nm,病毒粒子呈球形,线状双股DNA病毒,直径在110~150nm。
病毒有囊膜,囊表面有呈放射状排列的纤突,长8~10nm。
病毒可在猪肾、兔肾、牛睾丸、鸡胚成纤维等多细胞中生长繁殖,并形成核内嗜酸性包涵体。
猪伪狂犬病的诊断与防治作者:张鑫来源:《农民致富之友(上半月)》 2019年第5期猪伪狂犬病主要就是由猪伪狂犬病病毒所引起的脑脊髓炎和发热为主要特征的一种传染病,根据不同的猪也会产生不同的临床症状。
比如怀孕母猪产生死胎,仔猪发热并神经抽搐和呕吐等现象都是猪伪狂犬病的症状。
在最近这些年来这种病发病的数量变得越来越多,对养猪业在很大程度上产生了十分严重的影响,所以需要对其进行及时的防止具有十分重要的意义。
一、猪伪狂犬病的临床表现与病变伪狂犬病毒属于疱疹病毒科、猪疱疹病毒属,病毒粒子为圆形,直径150~180nm,核衣壳直径为105~110nm。
病毒粒子的最外层是病毒囊膜,它是由宿主细胞衍生而来的脂质双层结构。
伪狂犬病毒是疱疹病毒科中抵抗力较强的一种。
病猪在发病的时期之所以产生的症状会出现很大的差别,主要就是因为病猪会受到病毒性质和抵抗力以及易染度等因素的影响。
对于刚刚出生的幼崽来说,在这个时期如果感染了猪伪狂犬病,那么主要表现的症状就是出现无法进食,同时也会出现四肢不稳和呕吐腹泻这样的情况,严重的时候还会出现颈部僵硬甚至昏迷死亡,大多数幼崽在发病的时候一般都两天之内死亡。
断乳前后的幼崽,在这个时期感染猪伪狂犬病的几率要比刚出生的时候小很多,在发病的症状方面和刚出生的幼崽也有着很大的不同。
成年猪在感染上猪伪狂犬病的时候,并不会出现明显的发热情况,主要的症状还是表现在呼吸有杂音和咳嗽等呼吸系统方面的病症。
另外也会有一部分病猪会出现食欲不振和体温上升这样的情况,相比于幼猪来说死亡率十分低。
怀孕的母猪在感染了猪伪狂犬病后,最常见的症状就是产下弱胎或是死胎,另外怀孕母猪的流产也是猪伪狂犬病病发的主要原因。
二、猪伪狂犬病的诊断在对猪伪狂犬病进行诊断的时候,现阶段主要有三种方法可以使用。
第一种,取出那些病死猪的扁桃体和淋巴结以及小脑去进行免疫荧光抗体的试验,如果在荧光显微镜下呈现出黄绿色的荧光,那么就说明是阳性。
健康养殖·诊疗84畜牧业环境 2020.05摘 要:猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒引发的一种病毒性疾病,随着近几年社会经济的迅速发展,养猪规模的不断扩大,又出现了一种新型伪狂犬病毒。
而这种伪狂犬病毒最主要的储存宿主就是生猪本身,并且这种病毒的传染范围比较大,很容易传染给其他家畜。
因此,需要养殖户额外注意,生猪一旦感染这种病毒,就要做好隔离和消毒工作,选用紧急接种猪伪狂犬病灭活疫苗进行处理。
关键词:猪伪狂犬病;诊断;治疗猪伪狂犬病毒有着较强的传染性,传染范围比较广泛,它主要引发生猪的脑脊髓炎和发热等症状。
这种病毒在不同生长阶段的生猪产生的临床症状也是截然不同的。
比如:影响母猪繁殖、阻碍配种,妊娠期的母猪会出现流产现象;仔猪出现神经症状以及顽固性腹泻等症状;会降低公猪繁殖机能,出现严重呼吸道感染现象等症状。
据调查表明,近几年这种病变的发生数量持续增加,严重威胁到了生猪养殖户的经济利益,阻碍了生猪养殖业的稳定发展,所以,养殖户在生猪养殖过程中要高度重视对这种病毒的防治。
1 猪伪狂犬病的流行特点猪伪狂犬病在发病时对季节没有任何要求,在春夏秋冬季节都有可能发生,最寒冷的季节也是发病期最频繁的时期,这种病毒有着较快的传播速度,还有散发式流行特点[1]。
并且传播途径比较广泛,其中主要通过消化道感染和呼吸道感染,在猪与猪之间接触时也会传播,其中包括经胎盘感染以及交配感染等;并且在生猪养殖过程中也会通过生猪的饮食进行传染。
这种病毒在仔猪身上极易传染,对于成年生猪和隐性病猪来说有着较慢的发病期,同时在生猪发病期间还会很容易出现病毒传播现象,一旦发生这种情况将很难被彻底清除。
2 病毒诊断在实际的生猪养殖过程中,如果生猪患有猪伪狂犬病时,其诊断主要包括以下三种方法:①兽医可以提取病死猪的淋巴结、扁桃体以及小脑等部位,采用荧光抗体进行实验操作,如果检查人员发现显微镜下出现黄绿色的荧光,则可以判断出这种结果呈阳性;②检查工作人员还可以对以上三个部位采取聚合酶链接反应进行分子生物学检测;③除此之外还可以提取病猪的脑组织以及淋巴等,制定组织悬液进行实验反应,其比例按照1:10 的生理盐水,同时还要添加一定量的青霉素和硫酸链霉素,运用已经配置好的组织悬液对病死猪进行皮下接种或者肌内接种[2]。
猪伪狂犬病表现的临床症状及如何科学诊断和防治?1.临床症状猪伪狂犬病表现有四大症状:(1)妊娠母猪发生流产、产死胎、木乃伊胎,其中以产死胎为主。
(2)伪狂犬病引起新生仔猪大量死亡,主要表现在刚生下的仔猪第1天还很好,从第2天开始发病,3~5天内是死亡高峰期,有的整窝死亡。
死亡初生仔猪的日龄已观察到19日龄。
发病仔猪表现出高热、食欲废绝、明显的神经症状、昏睡、呜叫、流涎、呕吐、拉稀、抑郁震颤,继而出现运动失调、间歇性抽搐、昏迷以至衰竭死亡,一旦发病,1~2天内死亡。
15日龄以内仔猪死亡率可高达100%。
剖检主要是肾脏布满针尖样出血点,有时见到肺水肿、脑膜表面充血、出血。
(3)伪狂犬病病毒引起断奶仔猪发病死亡,发病率在20%~40%,死亡率10%~20%,主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等。
(4)种猪不育症及育肥猪呼吸道疾病。
母猪不发情、配不上种,返情率高达90%,有反复配种数次都屡配不上,耽误了整个配种期。
此外公猪感染伪狂犬病病毒后,表现不育、睾丸肿胀,萎缩,丧失种用能力。
成年猪仅表现增重减慢等轻微温和症状。
育肥猪表现为咳嗽。
反复发病。
僵猪等症状。
2.综合防制目前尚无治疗办法,但高免血清被动免疫适用于最初感染猪群中的哺乳仔猪,母猪的抗体通过初乳传给仔猪,母体源体可持续大约4~6周。
母体被动免疫可以保护仔猪的致命感染。
已发病或检查出伪狂犬病病毒感染阳性的猪场,建议所有的猪都应进行免疫。
(1)灭活疫苗种猪(包括公猪)第1次注射后,间隔4~6周后加强免疫一次,以后每4个月注射一次,产前一个月左右加强免疫一次,可获得非常好的免疫效果,能将哺乳仔猪保护到断奶。
留作种用的断奶仔猪在断奶时注射一次,间隔4~6周后,加强免疫一次,以后按种猪免疫程序进行。
育肥用的断奶仔猪在断奶时注射一次,直到出栏。
(2)弱毒疫苗种猪第1次注射后,间隔4~6周加强免疫一次,以后每隔4个月注射一次。
育肥猪断奶时注射一次,直到出栏。
特别提示:1,请选择水剂疫苗2,选择基因缺失疫苗 3,用量为原来的1.5倍。
伪狂犬检测报告伪狂犬检测报告一例猪伪狂犬病毒病的诊治报告龙源期刊网 .cn一例猪伪狂犬病毒病的诊治报告作者:覃国喜来源:《中国动物保健》2014年第09期猪伪狂犬病的致病源为I型疱疹病毒,是一种急性传染病。
多会引起母猪的繁殖障碍,仔猪的急性死亡,侵害多种组织器官的恶心疾病。
怀孕母猪感染该猪伪狂犬病毒后,可导致母猪流产,临床上常见的流产的胎儿有死胎、木乃伊胎及弱仔等;对已顺利降生、母原抗体不高的仔猪可造成大批急性死亡,临床常见的症状有呕吐、震颤、腹泻及运动失调等临床症状;耐受猪易产生免疫抑制,增加了猪只感染其它疾病的风险,影响仔猪生长发育。
研究表明,发病的猪、潜伏感染排毒的猪为本病重要传染源。
除此之外,实验动物中兔、小鼠、大鼠、豚鼠等也是猪伪狂犬病毒的贮存宿主,引起该病的发生与流行。
笔者将成功治疗的一例猪伪狂犬病诊疗过程记叙如下,旨在为广大兽医工作者提供借鉴。
1 发病情况介绍广西某猪场,存栏猪1 000余头。
4月5日,猪场内出现新生仔猪大量死亡,新生仔猪出生第一天表现正常,第二天开始发病,体温41℃以上,精神极度萎顿,身体发抖,运动不协调,死亡高峰期出现在发病后的3~5 d内。
明显的神经症状是该病的主要临床症状,一旦发病,1~2 d内死亡。
新生仔猪的发病死亡率可达100%。
断奶仔猪也有发病,主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等,死亡率在10%。
怀孕母猪发生流产、产木乃伊胎儿。
2 病例变化及实验室检测对病死猪及濒死猪进行了解剖,眼观病变主要有肾脏有针尖状出血点,脑膜明显充血,有些在肝、脾等脏器常可见灰白色坏死病灶。
脑、脾、肝等器官取样进行实验室的细菌学和猪伪狂犬病毒(PRV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪细小病毒(PPV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)的检测。
无菌采取病料后直接涂片、革兰氏染色、镜检后未发现有细菌;同时对病料在血琼脂平板培养,37℃培养24 h未见有细菌增殖,排除了该病由细菌引起。
实验三伪狂犬病的诊断
一.实验目的:
⒈熟悉伪狂犬病的临诊特点。
⒉熟悉伪狂犬病的诊断方法。
二.实验原理:
利用分离的伪狂犬病毒注射实验兔,病毒在动物机体繁殖一段时间后,会影响实验动物的神经系统,实验兔会出现强烈的痒觉,根据这些症状来判断是否含有伪狂犬病毒。
三.内容及方法
1. 伪狂犬病的临床特点
本病发生于牛、绵羊,犬、猫、鼠及猪。
野生动物亦可发生。
牛、绵羊、犬及猫感染本病后症状很特殊而明显。
主要表现为某部皮肤的强烈痒觉。
常使劲地于墙柱上摩擦,直到皮肤撕碎,仍不断摩擦,病畜像疯狂一样,用力制止亦无效果。
体温可达40℃以上。
常发病后48小时内死亡。
成猪一般为隐性感染,怀孕母猪可发生流产、死胎、木乃伊胎儿。
仔猪,尤于新生仔猪病情极严重,常可发生大批死亡。
主要侵害神经系统,表现为神经症状。
2. 实验室诊断
2.1 病料的采集与处理
分离病毒的材料于发热期最好采取中脑、桥脑及延脑,或采取病总部之水肿液、侵入部神经干及脊髓。
病料用培养液制成1:10组织悬浮液。
2.2 兔体接种试验上述悬液经2000r/min离心1Omin,取上清液1~2ml经腹侧皮下或肌肉接种家兔,通常在36-48h后注射部位出现剧痒,病兔啃咬注射部位皮肤,皮肤脱毛、破皮和出血,继之四肢麻痹,体温下降,卧地不起,最后角弓反张,抽搐死亡。
但这种症状只维持几小时,一般常于夜间死亡,可见死兔口内有接种部位咬下的被毛。
亦可脑内接种小鼠,症状可维持12小时,但其敏感性不如兔。
亦可用细胞培养来分离病毒。
许多种哺乳动物细胞均能繁殖本病毒,但最常用的是猪肾传代细胞。
2.3 兔、猪及牛肾原代细胞培养。
病料接种细胞后最早经18小时出现病变(病毒量大),一般经48小时,病毒量很低时要到96小时。
其典型的病变是出现巨细
胞圆形。
部分病变细胞胞浆内颗粒增多,细胞肿大变圆形,而不相互融合,渐渐萎缩坏死。
当细胞全面出现病变后渐自瓶壁脱落。
自出现病变到整个细胞层破坏约经24–48小时。
3.特异性免疫荧光诊断:对可疑病畜或接种动物的中枢神经系统如中脑、桥脑、延脑或脊髓可作冰冻切片或压片,用免疫荧光直接法检查,阳性病例可见神经节细胞胞浆及核内均有荧光。
感染的组织细胞亦可用此法来确定感染的病毒。
4.病毒中和试验;用一株标准伪狂犬病细胞适应毒,以每0.1ml病毒溶液中含有100TCID50的稀释病毒与连续作2倍稀释的被检血清0.1ml混合,57 培养1.5小时,再接种于细胞培养物上。
每个血清稀释度至少要接种4个细胞培养物,每个培养物接种0.2ml。
恢复猪的血清常有1:8到1:64的中和能力。
复习题与作业
1.伪狂犬病的临诊表现,猪与其他动物有什么不同?
2.伪狂犬病的诊断方法那种最简便而可靠?。