补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识

实验九补骨脂素的提取，分离与鉴定实验九补骨脂素的提取，分离与鉴定实验九补骨脂素、异补骨脂素的提取、分离和鉴定补骨脂为豆科植物补骨脂psoraleacorylifolial.的潮湿明朗果实。

具备滋阴助阳、温中化痰之功。

主治肾虚早泄、遗精遗尿及腰膝冷痛，小便频数；外用治身白癫风。

补骨脂中所含数种香豆素和黄酮类成分，主要存有补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂双氢黄酮(补骨脂甲素)、异补骨脂查耳酮(补骨脂乙素)、补骨脂次素等。

药理研究证明，补骨脂甲被誉为显著扩冠促进作用，补骨脂素及异补骨脂素就是具有稀释紫外线性质的光敏性物质，因此就是抗炎白癫风的有效成分，制剂存有祛白素，补骨脂注射液、复方补骨脂酊等。

一、补骨脂中主要成分的物理性质1．补骨脂素(psoralen):c11h603,无色针状结晶(乙醇)，mp189oc,~190oc。

溶于乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。

uvλmaxm(lgε):242sh(4.38),247(4.40),291(4.03),330(3.80)。

irνmaxcm-1:1710,1630,1575,1259。

2．异补骨脂素(isopsoralen):c11h603,无色针状结晶，mp137oc,~138oc。

溶甲醇、乙醇、丙酮、苯、乙醚；微溶水、乙醚，容易溶石油醚。

uvλmaxm(lgε):245(4.38),297(3.96)。

irνmaxcm-1:1724,1709,1613,1513,1370,1330,1266,1250,1055,999,833,747。

3．补骨脂双氢黄酮(补骨脂甲素)(bavachin,corylifolin):c20h2021,无色结晶，mp191oc,~192oc,[α]d为-29.1o（乙醇）。

4.异补骨脂查耳酮(补骨脂乙素)(isobavachalcone,corylifolinin):c20h20o4,黄色针状结晶，mp154oc,~156oc。

补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。

2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。

3．掌握香豆素类化合物的检识方法。

（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。

含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。

其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。

1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。

溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。

2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。

补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。

分子式C20H20O4，分子量324.36。

黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。

4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。

无色针状结晶，mp.191～192℃。

补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。

（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。

铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。

补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。

2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。

3．掌握香豆素类化合物的检识方法。

（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。

含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。

其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。

1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。

溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。

2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。

补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。

分子式C20H20O4，分子量324.36。

黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。

4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。

无色针状结晶，mp.191～192℃。

补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。

（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。

铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。

补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。

2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。

3．掌握香豆素类化合物的检识方法。

（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。

含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。

其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。

1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。

溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。

2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。

补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。

分子式C20H20O4，分子量324.36。

黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。

4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。

无色针状结晶，mp.191～192℃。

补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。

（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。

铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。

补骨脂素和异补骨脂素的提取分离和结构鉴定摘要：补骨脂为中医治疗脾肾阳虚的传统补虚药物，其新型的生物活性已逐渐受到重视并被开发使用，同时对补骨脂所含活性成分的研究也逐步深入，为临床治疗提供新药物提供可靠依据。

本文就有关补骨脂的研究作一综述。

关键词：补骨脂异补骨脂结构提取分离结构鉴定中药补骨脂始载于<开宝本草>，为豆科植物补骨脂的干燥成熟果实，别名破故纸、黑故子、胡故子等，其性温，味辛，具补肾助阳之功效。

在传统的中医临床上主治肾虚冷泻，阳萎，小便频数，腰膝冷痛，虚寒喘咳等病症。

据现代研究表明，补骨脂还具有抗肿瘤，抗菌，抗骨质疏松，雌激素作用以及治疗白癜风等多重药理活性。

补骨脂所具有的这些药理活性与其所含的活性成分有着密切联系。

因此，近年来；国内外学者对补骨脂化学成分的提取分离及相关药理作用进行了多方面的研究，并取得一些新成果，为进一步开发利用补骨脂奠定了基础。

补骨脂的植物来源、品种、科属及分布补骨脂来源为豆科植物补骨脂PsoraleacorylifoliaL.的果实。

属于补骨脂属，蝶形花科，约130种，分布于热带和亚热带地区，我国有补骨脂P.corylifoliaFranch.1种，产西南部，种子入药。

分布于山西、陕西、安徽、浙江、江西、河南、湖北、广东、四川、贵州、云南。

临床应用和药理活性研究概况1药理作用研究进展1.1皮肤药理研究补骨脂素(PSO)口服后,增加皮肤对紫外线的敏感性,经UVA 照射,可与表皮角质层细胞的DNA形成光加合物,抑制DNA合成,减低表皮细胞的过速增生,其用于银屑病治疗的疗效已为临床所肯定。

PSO为一光敏感物质,PSO和8MOP均能促进皮肤黑色素的合成,并使之沉积于皮下。

95%乙醇的补骨脂提取物对酪氨酸酶有明显的激活作用,而酪氨酸酶是人体内黑素合成的关键酶,因此认为补骨脂系通过提高酪氨酸酶的活性使黑色素的生成速度和数量增加。

1.2抗癌活性研究有研究表明补骨脂具有抗癌活性,实验表明补骨脂素对KB细胞、Hela细胞、小鼠肉瘤、艾氏腹水癌等有抑制作用。

从补骨脂中分离鉴定补骨脂素和异补骨脂素一、本文概述本文旨在详细阐述从补骨脂中分离和鉴定补骨脂素和异补骨脂素的过程。

补骨脂，作为一种传统中药材，具有广泛的应用价值，其中补骨脂素和异补骨脂素是其重要的活性成分。

本文首先介绍补骨脂的来源、化学成分及其药理作用，然后重点描述分离纯化补骨脂素和异补骨脂素的方法，包括提取、分离、纯化等步骤，并对每一步的操作原理和注意事项进行详细说明。

接着，本文将对分离得到的化合物进行结构鉴定，利用现代波谱学方法如核磁共振、质谱等对其结构进行确证。

本文还将对分离纯化过程中的问题以及可能的影响因素进行讨论，以期为补骨脂的深入研究和临床应用提供参考。

二、材料与方法本实验所采用的补骨脂原材料，经过严格筛选与鉴定，确保其品质与纯度满足实验需求。

实验中所用试剂均为分析纯，包括甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂，以及硅胶、氧化铝等层析材料。

实验所使用的主要仪器包括旋转蒸发仪、电子天平、高效液相色谱仪（HPLC）、紫外可见分光光度计等。

将补骨脂原料粉碎后，采用适宜的有机溶剂进行浸泡与提取，确保补骨脂素和异补骨脂素的有效溶出。

提取液经过浓缩后，得到初步的提取物。

采用硅胶柱层析、氧化铝柱层析等色谱分离技术，对提取物进行分离纯化。

通过不断调整洗脱剂的种类与比例，实现目标化合物的有效分离。

利用高效液相色谱法（HPLC）对分离得到的化合物进行定性定量分析，同时通过紫外可见分光光度计测定其光谱特性，与标准品进行对比，从而确定其化学结构。

实验数据采用Excel软件进行整理与统计，利用SPSS软件进行数据分析，以图表形式直观展示实验结果，并进行相应的讨论与分析。

通过上述材料与方法的系统运用，本实验旨在从补骨脂中成功分离并鉴定出补骨脂素和异补骨脂素，为后续的药理研究与应用提供有力支持。

三、结果与讨论经过一系列精细的提取和分离步骤，我们成功地从补骨脂中分离出了补骨脂素和异补骨脂素。

通过对比标准品，我们确认了这两种化合物的身份，并通过高效液相色谱（HPLC）和质谱（MS）等手段进行了精确的定量分析。

设计性实验一补骨脂中补骨脂素的提取分离及结构鉴定一、概述补骨脂为豆科补骨脂属植物补骨脂（Psoralea corylifolia L.）的种子。

为温肾壮阳、纳气、止泻药。

用于阳痿遗精、遗尿、尿频、腰膝冷痛、肾虚作喘、五更泄泻；外用治白癜风、斑秃。

补骨脂中主要含有补骨脂素（psoralen）、异补骨脂素（isopsoralen）和黄酮类化合物等。

二、实验目的1. 学习查阅天然药物化学主要文献资料的方法。

2. 学习整理文献资料，撰写综述的方法。

3. 通过分析文献资料，结合所学知识，自己设计并实施提取分离补骨脂素和异补骨脂素的方法，并进行结构鉴定，以提高学生独立思考和解决问题的能力。

4. 学习并初步掌握香豆素类化合物的提取分离和结构鉴定方法。

三、实验安排：1. 查阅文献，撰写综述外文文献：检索SciFinder Scholar，CA光盘数据库，Medline光盘数据等；中文文献：检索中国药学光盘数据库，中国生物医学数据库等。

要求学会系统查阅国内外文献的方法，有详细的查阅记录及资料，撰写综述，其内容如下：补骨脂的植物来源、品种、科属及分布。

补骨脂及补骨脂素和异补骨脂素的临床应用和药理活性研究概况。

补骨脂中主要化合物的名称、熔点、结构、理化性质、提取分离方法，结构鉴定手段。

2. 文献交流，设计实验方案要求对已经撰写的文献进行充分的交流和讨论，在此基础上，以组为单位设计实验方案，其主要内容包括：（1）提取方法，所用提取装置，提取溶剂的种类及用量。

（2）纯化方法，所用装置，使用的溶剂及用量。

（3）分离方法，选用的色谱填料的种类、用量，洗脱剂的种类、比例及用量。

（4）列出所需实验材料，安排实验进度。

3. 实验方案的实施按照自行制定的实验方案，在教师指导下，独立完成实验，要求在规定的时间周期内（如三周）分离纯化得到补骨脂素和异补骨脂素单体化合物，每一单体化合物的质量不低于5mg。

如果实验方案有所调整，应及时通知指导教师，以便提供必要的实验材料，保证实验顺利进行。

中药化学实验指导—实验二补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提讲解实验二补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。

2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。

3．掌握香豆素类化合物的检识方法。

（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。

含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。

其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。

1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C 11H 6O 3，分子量186.16。

无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。

溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。

2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C 11H 6O 3，分子量186.16。

无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。

O O O OOO补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。

分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。

黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。

4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。

无色针状结晶，mp.191～192℃。

CH 3H 3C HO OHO OH O O OHHOCH 3H 3C补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用氧化铝干柱色谱予以分离。

实验九补骨脂素的提取，分离与鉴定实验九补骨脂素的提取，分离与鉴定实验九补骨脂素和异补骨脂素的提取、分离和鉴定补骨脂为豆科植物补骨脂psoraleacorylifolial.的干燥成熟果实。

具有补肾助阳、温中止泻之功。

主治肾虚阳痿、遗精遗尿及腰膝冷痛，小便频数；外用治白癫风。

补骨脂中含有数种香豆素和黄酮类成分，主要有补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂双氢黄酮(补骨脂甲素)、异补骨脂查耳酮(补骨脂乙素)、补骨脂次素等。

药理研究证明，补骨脂甲素有明显扩冠作用，补骨脂素及异补骨脂素是具吸收紫外线性质的光敏性物质，因此是抗白癫风的有效成分，制剂有祛白素，补骨脂注射液、复方补骨脂酊等。

一、补骨脂中主要成分的物理性质补骨脂素：c11h603，无色针状晶体（乙醇），mp189oc，~190oc。

溶于乙醇、苯、氯仿和丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。

uvλmaxm（lgε）：242sh（4.38）、247（4.40）、291（4.03）、330（3.80）2．异补骨脂素(isopsoralen):c11h603,无色针状结晶，mp137oc,~138oc。

溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿；微溶于水、乙醚，难溶于石油醚。

uvλmaxm(lgε):245(4.38),297(3.96)。

irνmaxcm-1:1724,1709,1613,1513,1370,1330,1266,1250,1055,999,833,747。

3.巴伐秦（corylifolin）：c20h2022，无色晶体，mp191oc，~192oc[α]D为-29.1o （乙醇）。

4.异补骨脂查耳酮(补骨脂乙素)(isobavachalcone,corylifolinin):c20h20o4,黄色针状结晶，mp154oc,~156oc。

5.补骨脂素：mp292oc。

2、目的要求1.掌握用溶剂法提取呋喃香豆素类化合物的操作技术。

2.熟悉通过分离补骨脂素和异补骨脂素进行干柱色谱的操作技术。

补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取、分离和检识一、实验目的：在补骨脂药材中提取、分离并检识补骨脂素和异补骨脂素背景：中药补骨脂始载于<开宝本草>，为豆科植物补骨脂的干燥成熟果实，其性温，味辛，具补肾助阳之功效。

在传统的中医临床上主治肾虚冷泻，阳萎，小便频数，腰膝冷痛，虚寒喘咳等病症。

据现代研究表明，补骨脂还具有抗肿瘤，抗菌，抗骨质疏松，雌激素作用以及治疗白癜风等多重药理活性。

补骨脂所具有的这些药理活性与其所含的活性成分脂素和有着密切联系。

其活性成分中香豆素类化合物主要有呋喃香豆素类和拟雌内酯类两种，前者主要含补骨脂素、异补骨脂素等。

二、补骨脂素和异补骨脂素的化学结构与性质：1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。

溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。

2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。

三、实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。

四、实验内容检识鉴定1）.外观：两种方法得到的晶体都呈白色针晶，且在uV灯下显蓝色荧光。

2）.异羟肟酸铁反应：分别取上述晶体各少许，加乙醇1ml溶解．加6d盐酸羟胺的饱和乙醇液混匀后加人6dKoH的饱和乙醇液，水浴加热10rain，冷却，用5HC1使呈酸性(pH6左右)沿壁滴10FeCl3溶液30s后出现紫红色(反应阳性)。

3）mp：50%晶I：136．6～138．6℃50%晶II：162．8～163．8℃75%晶I：136．9～138．8℃75%晶II：l62．8～l64．0℃4）薄层色谱检识：薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：补骨脂素乙醇液异补骨脂素乙醇液对照品：补骨脂素对照品乙醇液异补骨脂素对照品乙醇液展开剂：①石油醚-醋酸乙酯（6∶1）晾干，置254nmUV灯下观察，相同位置的斑点显相同颜色的荧光。

补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。

2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。

3．掌握香豆素类化合物的检识方法。

（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。

含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。

其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。

1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。

溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。

2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。

补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。

分子式C20H20O4，分子量324.36。

黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。

4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。

无色针状结晶，mp.191～192℃。

补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。

（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。

铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。

一种从补骨脂中分离补骨脂素,异补骨脂素和补骨脂酚的方法补骨脂是一种重要的植物性激素，具有促进植物生长和发育的作用。

然而，补骨脂中的成分却有多种不同的类别，如补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚等。

这就需要我们寻找一种有效的方法来分离这些成分，以便更好地研究其功能和应用。

在分离补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚之前，首先需要进行原料的提取。

我们可以选择新鲜的补骨脂植物进行提取，或者使用已经干燥的补骨脂植物。

将提取的补骨脂研磨成细粉末，然后进行溶剂提取。

常用的溶剂包括乙醇、丙酮、二甲基亚砜等。

一种分离补骨脂素的常用方法是层析法。

层析法通过溶液在固体吸附剂上的分配系数的不同来实现分离。

我们可以选择合适的吸附剂，如硅胶、醇醚凝胶等。

将提取物与吸附剂混合，然后将其分装到具有不同亲和性的柱子中。

然后，通过溶液的逐层流动，不同成分会在柱子上停留的时间不同，进而实现它们的分离。

另一种分离补骨脂素的方法是液液分配萃取法。

这种方法利用了补骨脂素在不同溶剂中的溶解度不同的特点。

我们可以选择两种不同的溶剂，将提取物与其混合，并进行充分摇荡。

然后，静置待两种溶剂分层之后，可以将上层液体与下层液体分离。

根据分离体系的选择，补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚可能会分布在不同层中，从而实现它们的分离。

最后一种方法是薄层层析法。

这种方法使用了层析和色谱技术的优点，通过在固定相上进行分离。

我们可以将提取物与涂有固相材料的玻璃或铝箔上，然后将其浸泡在适当的溶剂中，待溶剂从底部上升至一定高度。

各成分会根据其亲和性在固定相上形成独特的斑点，然后通过显色或发光探测器进行分析。

以上这些方法都可以用来分离补骨脂中的补骨脂素、异补骨脂素和补骨脂酚。

在实际操作中，我们可以根据需要选择合适的方法，并结合仪器设备进行分析和监测。

这些分离方法不仅有助于我们更好地了解补骨脂的成分，还可以为植物科研和农业生产提供有力的支持。

补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识欧阳歌谷（2021.02.01）（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。

2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。

3．掌握香豆素类化合物的检识方法。

（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。

含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。

其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。

1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。

溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。

2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。

补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。

分子式C20H20O4，分子量324.36。

黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。

4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。

无色针状结晶，mp.191～192℃。

补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。

（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。

铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。

实验二 补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。

2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。

3．掌握香豆素类化合物的检识方法。

（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂 为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。

含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯 （补骨脂素）、异补骨脂内酯 （异补骨脂素）和补骨脂次素等。

其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。

1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C 11H 6O 3，分子量186.16。

无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。

溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。

2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C 11H 6O 3，分子量186.16。

无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。

O O O OOO补骨脂素 异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。

分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。

黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。

4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。

无色针状结晶，mp.191～192℃。

CH 3H 3C HO OHO OH O O OHHOCH 3H 3C补骨脂乙素 补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用氧化铝干柱色谱予以分离。

（四）实验内容1.提取方法Ⅰ:见书方法Ⅱ:见书2.精制见书3.分离取色谱用中性氧化铝12g，装于直径1.0cm×28cm的干柱用色谱柱中。

补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。

2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。

3．掌握香豆素类化合物的检识方法。

（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。

含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。

其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。

1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。

溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。

2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16。

无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。

补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。

分子式C20H20O4，分子量324.36。

黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。

4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。

无色针状结晶，mp.191～192℃。

补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。

（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。

铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。

补骨子中补骨脂素与异补骨脂素的含量测定原理“补骨脂”为《中国药典》1995年版一部收载品种。

补骨脂的主要化学成分为补骨脂素（Psoralen）与异补骨脂素(Isopsoralen)等[1],本文建立了用薄层色谱扫描法测定补骨脂素（Psoralen）与异补骨脂素(Isopsoralen)含量的方法，供“中国药典”2000年版增订参考，及日常分析研究的需要。

样品、试剂及仪器样品：广州药材店购买对照品：补骨脂素（Psoralen）与异补骨脂素(Isopsoralen)中国药品生物试剂:正已烷, 醋酸乙酯,等（均为分析纯）硅胶G（中国青岛海洋化工集团公司，国家药典委员会监制）硅胶60F254预制板（Merck）（20×10cm）仪器：CAMAG点样器Nanomat III点样器CAMAG双槽展开箱CAMAG薄层扫描仪（SCANNER 3）CAMAG薄层色谱摄像仪（REPROSTAR II）色谱条件薄层板:硅胶60F254预制板（Merck）（20×10cm）与硅胶G手铺板点样：用CAMAG点样器Nanomat III点状点样.展开:以正已烷-醋酸乙酯（8：2）为展开剂，展开约8cm显色:置紫外光灯（254nm或365nm）下观察。

供试液制备取本品粉末约0.5g（通过三号筛），精密称定，置带塞三角瓶中，加入醋酸乙酯50ml，浸泡1小时，超声处理30分钟，滤过，药渣再加入醋酸乙酯30 ml，超声处理20分钟, 滤过, 合并滤液，蒸干，残渣用醋酸乙酯溶解，并定容至5ml，作为供试品溶液。

对照品溶液制备取补骨脂素（Psoralen）与异补骨脂素(Isopsoralen)对照品，加醋酸乙酯制成每1ml各含0.6mg的溶液，作为对照品溶液。

测定光源：氘灯扫描用计算机软件：CAMAG CATS 4.0扫描方式: 反射法吸收扫描，波长： s=300nm。

扫描速度：10mm/S扫描时间：7分钟积分时间：4分钟：自动积分计算：直钱回归，外标法两点校正。

补骨脂中补骨脂素战同补骨脂素的提与分散及审定之阳早格格创做1结构及本量补骨脂素战同补骨脂素属香豆素类化合物.补骨脂素：（补骨脂内酯），C11H6O3，无色针状结晶（乙醇），有挥收性，溶于甲醇，乙醇，苯，氯仿，丙酮；微溶于火，乙醚战石油醚.同补骨脂素：C11H6O3，无色针状结晶（乙醇），有挥收性，溶于甲醇，乙醇，苯，氯仿，丙酮；微溶于火，乙醚；易溶于热石油醚.2 提与要领的采用用50%的乙醇浸提：称与补骨脂细粉50g，用500ml的乙醇热浸提与，过滤，火浴加热，回支乙醇，得浸膏.与浸膏置于烧瓶中，加甲醇50ml战适量活性冰，回流15min，趁热抽滤.浓缩滤液至小体积，搁置重淀，用甲醇淋洗重淀.与色谱用中性氧化铝40g，拆于曲径1.6cm*30cm的色谱柱中.与补骨脂细品甲醇液约1-2ml，加样，以石油醚-乙酸乙酯（1：2）做洗脱剂，洗脱，每20ml为一溜份，各溜份回支溶剂后，用薄层板查看，战尺度品对于比，于紫中光灯下瞅察荧光与颜色.a呈色反应(1)同羟肟酸铁反应：与补骨脂素细品少量，置于试管中，加进7％盐酸羟胺甲醇溶液2～3滴，再加10％氢氧化钾甲醇溶液2～3滴，于火浴上加热数分钟，热却，用盐酸调至pH3～4，加1％三氯化铁试液1～2滴，瞅察溶液颜色. (2)启环关环考查：与样品少许加密氢氧化钠溶液1～2m1，加热，瞅察局面；再加密盐酸试液几滴，瞅察所爆收局面.(3)荧光：与样品少许溶于氯仿中，用毛细管面于滤纸上，于紫中光灯下瞅察荧光与颜色.b薄层色谱审定薄层板：硅胶G-CMC-Na板.面样：补骨脂素细品乙醇液、搞柱色谱分得的二样品乙醇液、补骨脂素对于照品乙醇液及同补骨脂素对于照品乙醇液. 展启剂：石油醚一乙酸乙酯(2：3). 展启办法：上止展启.隐色：正在紫中光灯(365nm)下瞅察荧光乌面.。