生物统计学 实验报告 大肠杆菌
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大肠杆菌实验报告大肠杆菌实验报告引言:大肠杆菌(Escherichia coli)是一种常见的肠道细菌,广泛存在于人和动物的肠道中。
尽管大肠杆菌在正常情况下对人体没有害处,但某些菌株可能引起食物中毒和其他健康问题。
本实验旨在探究大肠杆菌的特性和其对环境的适应能力。
实验目的:1. 了解大肠杆菌的形态和结构特征;2. 探究大肠杆菌的生长条件和适应能力;3. 研究大肠杆菌在不同环境下的生长情况。
实验材料和方法:1. 实验材料:- 大肠杆菌培养基- 灭菌培养皿- 灭菌试管- 灭菌移液管- 微量移液器- 恒温培养箱- 显微镜2. 实验步骤:1. 准备培养基:将大肠杆菌培养基按照说明书配制好,并灭菌处理。
2. 接种:使用微量移液器,将大肠杆菌接种到灭菌培养皿中。
3. 培养:将接种好的培养皿放入恒温培养箱中,并设置适当的温度和湿度条件。
4. 观察生长情况:每隔一段时间,观察培养皿中大肠杆菌的生长情况,并记录下来。
5. 形态和结构观察:取一部分培养物放在载玻片上,使用显微镜观察大肠杆菌的形态和结构特征。
实验结果:1. 大肠杆菌的形态和结构特征:在显微镜下观察,大肠杆菌呈现为短杆状,长度约为2-4微米,直径约为0.5微米。
细菌的表面有许多纤毛,这些纤毛有助于细菌的运动和附着。
大肠杆菌呈现为革兰阴性菌,其细胞壁主要由脂多糖和蛋白质组成。
2. 大肠杆菌的生长条件和适应能力:大肠杆菌在适宜的环境条件下能够迅速生长和繁殖。
它对温度、pH值和营养物的要求较为宽容。
一般来说,大肠杆菌的最适生长温度为37摄氏度,pH值在6.5-7.5之间。
此外,大肠杆菌对葡萄糖等简单糖类具有较高的利用能力,能够利用这些营养物进行代谢和生长。
3. 大肠杆菌在不同环境下的生长情况:大肠杆菌在不同环境条件下的生长情况可能有所不同。
例如,在高温环境下,大肠杆菌的生长速度会加快,而在低温环境下则会减慢。
此外,在酸性环境中,大肠杆菌的生长可能受到抑制。
然而,尽管大肠杆菌对环境的适应能力较强,但在极端条件下,如高温、高盐度等,它的生长可能会受到抑制或甚至死亡。
大肠杆菌实验报告
实验目的:研究大肠杆菌的生长规律和影响因素。
实验原理:
大肠杆菌是一种常见的革兰氏阴性菌,广泛存在于自然环境中,如土壤、水体和动物的消化道中。
大肠杆菌是一种强大的生物工程工具,被广泛用于基因克隆、蛋白表达和生物制药等领域。
大肠杆菌的生长主要受到以下因素的影响:
1. 温度:大肠杆菌的适宜生长温度一般为37℃。
过高或过低
的温度都会抑制细菌的生长。
2. pH值:大肠杆菌对酸碱度有一定的耐受能力,适宜生长的pH范围为6.5-7.5。
3. 氧气含量:大肠杆菌是一种厌氧菌,但也可以在氧气存在的条件下进行生长。
4. 营养物质:大肠杆菌需要碳源、氮源、磷源等营养物质来进行生长。
实验步骤:
1. 准备培养基:将大肠杆菌营养琼脂混合溶解,并进行高温高压灭菌处理。
2. 用无菌移液管取一小滴大肠杆菌液,滴入含有营养琼脂的平板培养基上,轻轻摇晃平板,使细菌均匀分布于培养基上。
3. 将培养基置于恒温培养箱中,调节温度为37℃,培养一定
时间,观察菌落的形成和生长情况。
4. 在不同温度、pH值、氧气含量和营养物质条件下,重复步
骤2和3。
实验结果:
根据实验观察,大肠杆菌在37℃左右的温度下生长最好,pH 值在6.5-7.5之间时生长最快,适宜的氧气含量是气体和液体的界面。
实验结论:
大肠杆菌的生长受到温度、pH值、氧气含量和营养物质的影响。
掌握这些影响因素,能够更好地培养和利用大肠杆菌进行实验和工程应用。
实习报告:大肠杆菌的实验室检测一、实习背景与目的本次实习在老师的指导下,对大肠杆菌进行了实验室检测。
实习的主要目的是了解大肠杆菌的基本特性,掌握实验室检测方法,提高自己的实验操作能力。
二、实习内容与过程1. 培养基配置在实验室检测大肠杆菌之前,首先需要配置LB液体培养基。
LB培养基是一种常用的营养丰富的培养基,适用于大肠杆菌的生长。
配置过程包括称量、溶解、灭菌等步骤。
2. 菌株接种将大肠杆菌菌株取出,用无菌水冲洗后,用接种环取一定量的菌株,均匀地涂抹在LB液体培养基上。
然后将培养皿放入培养箱中,保持适宜的温度和时间,让菌株在培养基上生长。
3. 观察与记录在菌株生长过程中,需要定期观察并记录菌落的大小、形状、颜色等特征。
这些特征可以作为判断大肠杆菌生长状况的依据。
4. 生化试验为了进一步确认大肠杆菌的身份,需要进行生化试验。
主要包括糖类发酵试验、乳糖发酵试验、尿素分解试验等。
通过观察试验结果,可以判断大肠杆菌的生化特性。
5. 药物敏感试验为了了解大肠杆菌对各种抗生素的敏感性,进行了药物敏感试验。
将大肠杆菌菌株均匀涂抹在含有不同抗生素的培养基上,观察菌落的生长情况,从而判断大肠杆菌对各种抗生素的敏感性。
三、实习心得与体会通过本次实习,我对大肠杆菌的实验室检测有了更深入的了解。
在实验操作过程中,我学会了如何配置培养基、接种、观察菌落特征、进行生化试验和药物敏感试验等。
同时,我还明白了实验操作的严谨性和规范性对于实验结果的重要性。
此外,本次实习也让我认识到了团队合作的重要性。
在实习过程中,我和同学们一起讨论实验问题、分享实验心得,共同解决实验中遇到的困难。
这种团队合作的精神对我今后的学习和工作中具有很大的启示。
四、实习总结本次大肠杆菌实验室检测实习,使我掌握了实验操作技能,提高了自己的实验能力。
同时,我也认识到了团队合作的重要性。
在今后的学习和工作中,我将不断努力,争取更好地将所学知识运用到实际工作中。
一、实验目的1. 了解大肠杆菌的生物学特性。
2. 掌握大肠杆菌的分离、纯化和鉴定方法。
3. 掌握大肠杆菌的培养和计数方法。
二、实验原理大肠杆菌(Escherichia coli)是肠杆菌科的一种细菌,广泛存在于人体肠道中。
本实验通过分离、纯化和鉴定大肠杆菌,了解其生物学特性,并掌握其培养和计数方法。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜粪便、营养琼脂平板、营养肉汤、无菌生理盐水、无菌棉签、无菌试管、无菌培养皿、无菌移液器、酒精灯、显微镜等。
2. 实验仪器:恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、无菌操作台等。
四、实验方法1. 大肠杆菌的分离(1)取新鲜粪便样品,用无菌生理盐水进行稀释。
(2)取适量稀释液,用无菌棉签涂布于营养琼脂平板上。
(3)将平板放入恒温培养箱中,37℃培养24小时。
2. 大肠杆菌的纯化(1)观察平板上的菌落,挑选单菌落,用无菌移液器移至新的营养琼脂平板上。
(2)将平板放入恒温培养箱中,37℃培养24小时。
3. 大肠杆菌的鉴定(1)观察纯化后的菌落,记录菌落特征,如大小、形状、颜色等。
(2)将纯化后的菌株接种于营养肉汤中,37℃培养24小时。
(3)取培养液,用显微镜观察细菌形态,并进行革兰氏染色。
(4)对培养液进行生化试验,如乳糖发酵试验、吲哚试验等。
4. 大肠杆菌的培养与计数(1)将纯化后的菌株接种于营养肉汤中,37℃培养24小时。
(2)用无菌移液器取适量培养液,进行系列稀释。
(3)取稀释液,涂布于营养琼脂平板上。
(4)将平板放入恒温培养箱中,37℃培养24小时。
(5)观察平板上的菌落,记录菌落数,并计算大肠杆菌的浓度。
五、实验结果与分析1. 大肠杆菌的分离:在平板上观察到圆形、光滑、白色、半透明的菌落,说明已分离出大肠杆菌。
2. 大肠杆菌的纯化:经过纯化后,菌落特征与分离菌落相同,证明已得到纯化的大肠杆菌。
3. 大肠杆菌的鉴定:通过显微镜观察,发现细菌为革兰氏阴性短杆菌,生化试验结果显示该菌株能发酵乳糖,产生吲哚,表明已鉴定为大肠杆菌。
实验1 微生物的分离、培养及计数实验原理纯化分离:人为提供适宜的菌落生长的条件(包括营养、温度、Ph 等)。
用平板划线法,通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞菌落。
筛选:转基因大肠杆菌有抗氨苄青霉素基因,所以在含有氨苄青霉素的LB 培养基中可以正常繁殖长成菌落。
而普通的大肠杆菌没有抗氨苄青霉素基因,咋含有氨苄青霉素的LB 培养基中不能繁殖。
由此可进行大肠杆菌的筛选。
梯度稀释并计数:通过浓度梯度稀释把液体培养基培养的大肠杆菌稀释到一定浓度,用稀释涂布平板法,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。
在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。
由此可计数计算大肠杆菌的数量。
实验目的1. 通过制备LB 固体培养基,对平板进行划线等,学会使用固体LB 平板。
2. 通过用液体培养基,学会对微生物进行扩大培养。
3. 通过稀释,学会用计数器对微生物进行计数。
实验材料和药品待分离的大肠杆菌菌液、高压蒸汽灭菌锅、LB 固体培养基、LB 液体培养基、接种环、玻璃涂布器、培养皿、恒温培养箱、摇床、酒精灯、无菌水、移液枪、EP 管实验步骤(用简单的流程图表示)实验数据的记录与分析(如照片、表格等)稀释倍数104105大肠杆菌单个菌落个数83 77 99 11 18 12平均数86.3 13.7浓度 1.726×1070.274×107实验结果与讨论结果:稀释了105计算出来的结果约为1.726×107ml/cm^3稀释了104计算出来的结果约为0.274×107ml/cm^3全组数据计算出来结果为2.233×107ml/cm^3讨论:在稀释倍数为104的试验中大肠杆菌菌落较少,原因可能是在稀释过程操作中,震荡不够,而且由于不小心洒了半管104稀释液,所以取液接种的时候底层的大肠杆菌数量偏少了。
一、实验目的1. 掌握大肠杆菌检测的基本原理和方法;2. 学会使用国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数;3. 提高微生物实验操作技能,为后续相关实验奠定基础。
二、实验原理大肠杆菌(Escherichia coli)是一种革兰氏阴性菌,广泛存在于人类和动物肠道中,属于条件致病菌。
本实验采用国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数,主要利用大肠杆菌在LB培养基上生长繁殖的特性,通过计数菌落数来估算大肠杆菌的浓度。
三、实验器材1. 培养箱;2. 移液管(10只);3. 锥形瓶(250ml,12只);4. 大试管(5只);5. 试管架;6. 平皿(45个);7. 大烧杯(500ml,1个);8. 电子天平;9. 纱布;10. 脱脂棉;11. 灭菌锅;12. pH计或pH试纸;13. 电炉;14. 石棉网;15. 铁架台;16. 量筒(100ml,1个);17. 橡皮手套;18. 超净台。
四、实验药品1. 磷酸盐缓冲液;2. 蒸馏水;3. LB培养基;4. 琼脂;5. 5%NaOH;6. 5%HCl。
五、实验步骤1. 培养基制备(1)称取成品LB 3.1241g和琼脂1.8756g放入250ml的洁净锥形瓶中;(2)用量筒量取125ml的蒸馏水加入锥形瓶中,制成培养基;(3)用棉花堵住锥形瓶的瓶口,用牛皮纸包住瓶口,用橡皮筋扎牢;(4)将培养基放入灭菌锅中,在121摄氏度下灭菌20min;(5)灭菌后放入超净台中备用。
2. 样本处理(1)取适量样本(如食品、水等);(2)用无菌生理盐水进行梯度稀释;(3)取适量稀释液加入平皿中,制成平板;(4)将平板放入培养箱中,在37摄氏度下培养24h。
3. 菌落计数(1)观察平板,找出菌落数在30-300之间的平板;(2)用移液管吸取适量菌液,加入锥形瓶中;(3)在锥形瓶中加入适量的5%NaOH溶液,充分振荡;(4)将锥形瓶放入培养箱中,在37摄氏度下培养24h;(5)观察锥形瓶中的菌落生长情况,记录菌落数。
大肠杆菌检测实验报告大肠杆菌检测实验报告引言:大肠杆菌是一种常见的细菌,存在于人体和动物的肠道中。
尽管大肠杆菌在正常情况下对人体无害,但某些菌株可能会引起严重的食物中毒。
因此,对食品和饮用水中的大肠杆菌进行检测至关重要。
本实验旨在通过不同的检测方法,了解大肠杆菌的存在和浓度。
材料与方法:1. 食品和饮用水样本:我们选择了市场上常见的食品和饮用水样本,包括蔬菜、水果、肉类和瓶装水。
2. 大肠杆菌培养基:我们使用了含有大肠杆菌特异性营养物质的培养基。
3. 培养皿和培养试管:用于培养大肠杆菌。
4. 显微镜和染色剂:用于观察和鉴定大肠杆菌。
实验步骤:1. 样本准备:我们将食品和饮用水样本分别取样,并放入培养皿或培养试管中。
2. 培养:将样本放入预先准备好的大肠杆菌培养基中,然后将培养皿或培养试管放入恒温培养箱中,以促进大肠杆菌的生长。
3. 观察:在培养一段时间后,我们使用显微镜观察培养皿或培养试管中的样本。
为了更好地观察大肠杆菌,我们使用染色剂对样本进行染色。
4. 记录:记录观察到的大肠杆菌数量和形态特征。
结果与讨论:通过对不同食品和饮用水样本进行大肠杆菌检测,我们观察到了以下结果:1. 蔬菜和水果样本中的大肠杆菌数量较高。
这可能是因为蔬菜和水果在生长和加工过程中接触到了土壤或污染的水源。
2. 肉类样本中的大肠杆菌数量较低。
这可能是因为肉类在加工过程中经过了高温处理,杀死了大部分的细菌。
3. 瓶装水样本中没有观察到大肠杆菌。
这是因为瓶装水在生产和包装过程中经过了严格的卫生控制。
通过本实验,我们可以得出结论:大肠杆菌在食品和饮用水中的存在是普遍的,但其浓度和数量因样本类型而异。
这提醒我们在选择和处理食品和饮用水时要格外注意卫生和安全。
结论:本实验通过采用大肠杆菌检测方法,对不同食品和饮用水样本进行了分析。
结果表明,大肠杆菌在食品和饮用水中存在普遍,但其浓度和数量因样本类型而异。
这对我们提醒了食品安全和卫生的重要性。
微生物大肠杆菌实验报告微生物大肠杆菌实验报告一、引言微生物是一类微小的生物体,包括细菌、真菌、病毒等。
其中,大肠杆菌(Escherichia coli)是一种常见的肠道细菌,广泛存在于人和动物的肠道中。
大肠杆菌在人体内具有重要的生理功能,同时也是一种常见的食源性病原菌。
本实验旨在通过培养大肠杆菌并观察其生长情况,以加深对微生物的认识。
二、实验材料与方法1. 实验材料:- 营养琼脂平板- 大肠杆菌培养液- 恒温培养箱- 培养皿- 灭菌针2. 实验方法:- 将营养琼脂平板在恒温培养箱中加热至50℃,待其稍微冷却后,倒入培养皿中。
- 用灭菌针蘸取大肠杆菌培养液,均匀地在琼脂平板上划线。
- 将培养皿倒置放入恒温培养箱中,温度设置为37℃。
- 观察培养皿中大肠杆菌的生长情况,并记录下来。
三、实验结果与讨论经过一段时间的培养后,我们观察到培养皿中出现了大肠杆菌的生长。
大肠杆菌呈现出圆形、透明的菌落,数量逐渐增加。
这说明大肠杆菌在营养琼脂平板上能够良好地生长和繁殖。
大肠杆菌的生长需要适宜的温度、营养物质和湿度等环境条件。
在本实验中,我们将培养皿放入恒温培养箱中,温度设置为37℃,这是大肠杆菌生长的最适温度。
此外,琼脂平板提供了丰富的营养物质,为大肠杆菌提供了生长所需的碳源、氮源和微量元素等。
因此,大肠杆菌在琼脂平板上能够得到良好的生长条件。
大肠杆菌的生长速度与繁殖能力也与其遗传特性有关。
不同的大肠杆菌株可能存在差异,有些株系生长较快,繁殖能力较强,而有些株系则相对较慢。
此外,大肠杆菌的生长还受到其他因素的影响,如环境中的抗生素、pH值、氧气浓度等。
大肠杆菌在人体内具有重要的生理功能,如参与肠道内的营养吸收、合成维生素等。
然而,某些大肠杆菌株也可以引起食源性疾病,如腹泻和食物中毒等。
因此,在日常生活中,我们应该注意食品的卫生安全,避免摄入被大肠杆菌污染的食物。
四、结论通过本实验,我们成功培养了大肠杆菌,并观察到了其在琼脂平板上的生长情况。
2、实验结果与分析2.1、细菌总数检测结果2.1.2、细菌总数的计算与报告根据菌落总数的计算方法:1、若只有一个稀释度平板上的菌落术在适宜计数范围内,计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克(或毫升)中菌落总数结果。
2、若有两个连续稀释度的平均菌落数载适宜计数范围内时,按下式计算:N=∑c/[(n1+0.1n2)d]式中:N—样品中菌落数;∑C—平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和;n1—第一个适宜稀释度平板上的菌落数;n2—第二个适宜稀释度平板上的菌落数;d—稀释因子(第一稀释度)为1.75x107;在浓度10—6(g/ml)的时候,大肠杆菌的细菌总数约为1.60x107;在浓度10—7(g/ml)的时候,大肠杆菌的细菌总数约为2.01x107。
分析数据可知,在浓度10—7(g/ml)的时候,细菌总数远大于其他两个梯度,这与常理不符。
那么有可能是实验过程中的错误导致,可能是稀释不够、密封不紧、没有进行无菌操作等因素有关。
2.2、大肠菌群检测结果2.1.1、初发酵各浓度梯度阳性管数统计附:检验原始记录检验原始记录检测记录与结果培养基配制:样品配制:1、 固体样品,无菌称取25g 样品加225ml 生理盐水,均质。
2、 液体样品,需稀释的,吸取25ml 于225生理盐水,混匀。
菌落总数:检验依据:GB/T4789.2-2008大肠杆菌:检验一句GB/T4789.3-2003大肠杆菌:检验一句GB/T4789.3-2003注:“P ”表示阳性结果,“N ”表示阴性结果检验起止时间:2011年09月25日至2011年09月27日检测人:复核人:。
大肠菌群计数实验报告一、实验目的大肠菌群是一群在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。
本实验旨在通过特定的检测方法对样品中的大肠菌群进行计数,以评估样品的卫生质量和安全性。
二、实验原理大肠菌群在特定的培养基和培养条件下会生长并表现出特定的生化特征。
通常使用乳糖胆盐发酵管进行初发酵,若产酸产气,则表明可能存在大肠菌群。
随后将初发酵阳性的样品转接至伊红美蓝琼脂平板进行分离培养,典型的大肠菌群菌落具有特定的形态特征。
最后通过革兰氏染色和证实试验,确认大肠菌群的存在,并根据阳性管数采用相应的计数方法得出样品中的大肠菌群数量。
三、实验材料与设备1、样品:_____2、培养基和试剂乳糖胆盐发酵管伊红美蓝琼脂平板革兰氏染色液(结晶紫染液、碘液、95%乙醇、沙黄染液)生理盐水3、仪器设备恒温培养箱无菌移液管(1ml、10ml)无菌培养皿显微镜四、实验步骤1、样品处理称取或吸取一定量的样品,加入适量的生理盐水,制成 1:10 的均匀稀释液。
根据样品的污染程度,进行适当的梯度稀释。
2、初发酵试验用无菌移液管吸取 1ml 稀释液,分别注入到 3 支乳糖胆盐发酵管中。
置于 36℃±1℃恒温培养箱中培养 24h±2h,观察产酸产气情况。
3、分离培养对初发酵阳性的发酵管,用接种环挑取培养物,在伊红美蓝琼脂平板上进行划线分离。
置于 36℃±1℃恒温培养箱中培养 18h~24h。
4、复发酵试验挑取伊红美蓝琼脂平板上可疑的大肠菌群菌落,进行革兰氏染色和证实试验。
革兰氏染色:将菌落涂片、固定,经过结晶紫染色、碘液媒染、乙醇脱色、沙黄复染后,在显微镜下观察细菌的形态和革兰氏染色反应。
证实试验:将可疑菌落接种到乳糖发酵管中,置于 36℃±1℃恒温培养箱中培养 24h±2h,观察产酸产气情况。
5、结果计算根据初发酵阳性管数和复发酵证实的阳性管数,查阅相应的大肠菌群最可能数(MPN)检索表,得出样品中大肠菌群的 MPN 值。
大肠杆菌检测实验报告一、实验目的掌握大肠杆菌的检测方法,了解其在水质检验中的重要性。
二、实验原理1. 大肠杆菌大肠杆菌是一种常见的肠道杆菌,是一类嗜热性、厌氧性以及革兰阴性杆菌。
该菌种常常是肠道菌群的组成部分,同时也是水污染的重要指示菌之一。
(1)标准培养基法经过富营养培养基的生长,大肠杆菌会形成显性和隐性的群体。
这种检测方法适用于水质样本、地球样品以及饮用水。
(2)膜过滤法样品通过过滤器滤过后,将过滤后的膜放入培养基上培养。
这种方法既适合于生物质量较小的样品,也适用于分析浓度高的样品。
(3)MPN法通过使用3组不同浓度的小管,并观察哪个浓度的小管有生长曲线的所有格子都被满足,来计算菌落形成单位的浓度。
可以适用于样品浓度较低的环境。
三、实验操作1. 实验材料大肠杆菌标准菌株、优化阳性对照菌株、培养基、蒸馏水、实验器材、滤纸、吸管、离心机、洗涤液和细胞硬度试剂。
2. 实验步骤(1)制备纯菌液:将大肠杆菌基配合缓冲液跳接种到营养琼脂平板上,并在37℃的恒温培养箱中培养过夜。
将菌落划入脱色水中,通过洗涤和离心的方式,获得纯化的细胞菌悬液。
(2)制备样品:将需要检测的水样分别过滤,过滤膜使用巨孔滤纸。
滤膜被慢慢放在脱色水上U型板中间的孔里,然后浸泡(3)培养过程: 将U型板接入温度为37℃的有氧培养箱内,在24 - 48小时内观察细菌进行生长,并做出相应的计数和检测。
四、实验结果与分析按照实验操作规程进行样品处理和培养后,确认样品中是否存在大肠杆菌。
如果在实验中产生的试样中出现了大肠杆菌生长,且其生长优于阳性对照;或者在某些水样中不能检测出大肠杆菌,说明该水质品质不满足相关规范的要求。
五、实验结论本实验通过不同的大肠杆菌检测方法,较为全面地了解了大肠杆菌的检测方法及其在水质检验中的重要性。
在实验的基础上,我们有理由相信,通过科学准确的操作,人们可以更好地保证饮用水的健全和安全。
一、实习背景大肠杆菌(Escherichia coli),是常见的革兰氏阴性杆菌,广泛存在于自然界和人体肠道中。
作为一种重要的模式生物,大肠杆菌在生物学、医学、食品科学等领域具有广泛的应用。
本次实习旨在通过实验室操作,加深对大肠杆菌的认识,掌握其培养、鉴定、分离等基本技能。
二、实习目的1. 了解大肠杆菌的生物学特性及在各个领域的应用。
2. 掌握大肠杆菌的培养、鉴定、分离等基本技能。
3. 提高实验室操作能力,培养严谨的科学态度。
三、实习内容1. 大肠杆菌的培养(1)培养基的配制:称取适量的LB培养基粉末,加入蒸馏水溶解,调整pH值至7.0,分装于锥形瓶中,高压蒸汽灭菌。
(2)培养:将灭菌后的LB培养基倒入培养皿中,待凝固后,用无菌接种环挑取适量菌种接种于培养基上,置于37℃恒温培养箱中培养。
2. 大肠杆菌的鉴定(1)革兰氏染色:将培养好的菌落涂片,进行革兰氏染色,观察菌体的形态和颜色。
(2)生化实验:进行葡萄糖发酵、乳糖发酵、氧化酶试验等生化实验,以鉴定菌种。
3. 大肠杆菌的分离(1)平板划线法:将培养好的菌液用无菌接种环涂布于平板上,进行平板划线,观察菌落的生长情况。
(2)稀释涂布平板法:将培养好的菌液进行梯度稀释,取适量稀释液涂布于平板上,进行分离。
四、实习结果与分析1. 大肠杆菌的培养通过培养,成功获得了大肠杆菌菌落,菌落呈圆形、光滑、湿润、透明,边缘整齐。
2. 大肠杆菌的鉴定革兰氏染色结果显示,大肠杆菌为革兰氏阴性杆菌,呈短杆状。
生化实验结果显示,大肠杆菌能发酵葡萄糖,不发酵乳糖,氧化酶试验阴性。
3. 大肠杆菌的分离平板划线法和稀释涂布平板法均成功分离出大肠杆菌菌落,菌落特征与培养得到的菌落一致。
五、实习体会1. 通过本次实习,我对大肠杆菌的生物学特性、培养、鉴定、分离等基本技能有了更深入的了解。
2. 实验室操作过程中,我学会了无菌操作、微生物培养、显微镜观察等基本技能,提高了自己的动手能力。
大肠杆菌实验报告
实验目的:
探究大肠杆菌的特性及其培养、鉴定方法。
实验原理:
大肠杆菌是一种在肠内自然存在的细菌,主要是以葡萄糖和乳糖作为碳源。
其常见的形态为革兰阴性杆菌,具有强大的代谢能力和蛋白质生产能力。
因此,大肠杆菌广泛应用于微生物遗传学、生物化学和分子生物学等研究领域。
实验材料:
大肠杆菌、色氨酸、木糖、岩藻糖、年糕、矿物盐、琼脂等。
实验步骤:
1. 大肠杆菌的培养。
将新鲜无菌的大肠杆菌落接种到含有矿物盐和琼脂的培养基中,放入恒温箱中以37°C 培养 24 小时。
将培养好的大肠杆菌涂布到色氨酸、木糖和岩藻糖三个培养基上,分别在 24 小时内观察大肠杆菌的菌落形状和颜色。
实验结果:
在色氨酸培养基上,大肠杆菌的菌落形状为直径 1-3 毫米的圆形,呈淡黄色或橙色。
2. 大肠杆菌的代谢产物:
经过大肠杆菌代谢产物检测,发现大肠杆菌发生了年糕的发酵,后产生了醋酸和乳酸。
结论:
本实验探究了大肠杆菌的特性及其培养、鉴定方法。
通过观察菌落形态和检测代谢产物,我们可以进行大肠杆菌的鉴定并了解其代谢能力。
在实际生产和研究中,这对于正确应用大肠杆菌具有重要意义。
一、实验目的1. 掌握大肠杆菌的培养方法;2. 学习观察大肠杆菌的生长特征;3. 了解大肠杆菌的培养条件。
二、实验原理大肠杆菌(Escherichia coli)是一种常见的肠道细菌,广泛用于微生物学、分子生物学等领域的研究。
在实验室中,可以通过培养大肠杆菌来观察其生长特征、进行遗传操作等。
本实验主要利用普通琼脂平板和肉汤培养基培养大肠杆菌,并观察其生长情况。
三、实验材料1. 大肠杆菌菌种;2. 普通琼脂平板;3. 肉汤培养基;4. 接种环、接种针;5. 酒精灯;6. 恒温培养箱;7. 显微镜。
四、实验方法与步骤1. 准备培养基:将适量的普通琼脂平板和肉汤培养基分别倒入培养皿中,用培养皿铺平器将培养基均匀平铺。
2. 接种:用接种环或接种针从菌种中取出适量的大肠杆菌,均匀涂布在琼脂平板表面。
3. 培养观察:将接种好的琼脂平板和肉汤培养基放入恒温培养箱中,分别于37℃和适宜温度下培养24-48小时。
4. 观察记录:观察大肠杆菌在琼脂平板上的生长情况,记录菌落形态、大小、颜色等特征。
同时,观察肉汤培养基中的生长情况,记录细菌的浑浊度、沉淀物等特征。
5. 细菌形态观察:用接种环挑取适量的大肠杆菌菌落,涂布在载玻片上,用酒精灯火焰固定,进行革兰染色。
在显微镜下观察细菌的形态和染色特征。
五、实验结果与分析1. 琼脂平板培养结果:在琼脂平板上,大肠杆菌菌落呈现白色、圆形、表面光滑、边缘整齐的特点。
菌落大小适中,易于观察。
2. 肉汤培养基培养结果:在肉汤培养基中,大肠杆菌生长旺盛,液体浑浊,出现沉淀物。
3. 细菌形态观察结果:在革兰染色下,大肠杆菌呈革兰阴性菌,菌体短杆状,两端钝圆,无芽胞、无荚膜、无鞭毛。
六、实验讨论1. 大肠杆菌在琼脂平板和肉汤培养基中的生长情况不同,可能是因为琼脂平板提供了固体表面,有利于细菌生长和菌落形成;而肉汤培养基提供了液体环境,有利于细菌繁殖。
2. 通过革兰染色,可以观察到大肠杆菌的形态和染色特征,有助于鉴别细菌种类。
大肠杆菌生化实验报告大肠杆菌生化实验报告引言:大肠杆菌(Escherichia coli)是一种常见的肠道细菌,广泛存在于人类和动物的消化系统中。
由于其简单的生长条件和高度适应性,大肠杆菌成为了许多生化实验的理想模型。
本报告旨在介绍大肠杆菌在生化实验中的应用和结果。
实验一:酶活性测定酶活性是衡量细胞代谢活跃程度的重要指标之一。
在本实验中,我们选择了大肠杆菌中的一种酶,β-半乳糖苷酶(LacZ),来进行酶活性测定。
实验步骤:1. 培养大肠杆菌细胞。
2. 采集细胞样品,并进行离心。
3. 悬浮细胞样品,并加入底物。
4. 反应一段时间后,停止反应,并测定底物的降解程度。
结果与讨论:通过测定底物的降解程度,我们可以得到β-半乳糖苷酶的酶活性。
实验结果显示,在不同培养条件下,大肠杆菌中的β-半乳糖苷酶酶活性存在差异。
这表明培养条件对细菌酶活性有一定的影响。
进一步的研究可以探究这些影响因素,并优化培养条件,提高酶活性。
实验二:代谢产物分析大肠杆菌是一种典型的乳酸菌,其代谢途径复杂多样。
在本实验中,我们选择了大肠杆菌中的乳酸代谢途径作为研究对象,通过代谢产物分析来了解细菌的代谢特征。
实验步骤:1. 培养大肠杆菌细胞。
2. 采集细胞样品,并进行离心。
3. 提取细胞内代谢产物。
4. 使用色谱或质谱等技术,对代谢产物进行分析。
结果与讨论:通过代谢产物分析,我们可以了解大肠杆菌在不同培养条件下的代谢特征。
实验结果显示,大肠杆菌在不同培养基中产生的代谢产物有所差异。
这表明培养基成分对细菌代谢途径的选择有一定的影响。
进一步的研究可以探究这些影响因素,并优化培养基配方,调控代谢途径,提高产物产量。
实验三:抗生素敏感性测试抗生素敏感性测试是评估细菌对抗生素的耐药性的重要方法之一。
在本实验中,我们选择了几种常用的抗生素,对大肠杆菌进行敏感性测试。
实验步骤:1. 培养大肠杆菌细胞。
2. 制备不同浓度的抗生素溶液。
3. 在琼脂平板上涂布细菌样品。
实验名称:大肠杆菌的培养与鉴定一、实验目的1. 掌握大肠杆菌的培养方法。
2. 学习大肠杆菌的鉴定方法。
3. 培养学生严谨的科学态度和实验操作技能。
二、实验原理大肠杆菌(Escherichia coli),是一种革兰氏阴性短杆菌,广泛存在于人和动物的肠道中。
本实验通过培养大肠杆菌,观察其菌落特征,并进行鉴定,以掌握大肠杆菌的培养与鉴定方法。
三、实验材料1. 实验试剂:营养肉汤、琼脂、酚红指示剂、盐酸、生理盐水等。
2. 实验仪器:恒温培养箱、无菌操作台、接种环、酒精灯、培养皿等。
3. 实验菌株:大肠杆菌标准菌株。
四、实验方法1. 菌种活化(1)将大肠杆菌标准菌株从冷冻保存的甘油管中取出,接种于营养肉汤中,37℃恒温培养箱中培养18-24小时。
(2)将培养好的菌液用无菌生理盐水稀释至适宜浓度。
2. 菌落培养(1)将稀释后的菌液接种于琼脂平板上,用无菌接种环均匀涂布。
(2)将平板倒置于37℃恒温培养箱中培养18-24小时。
3. 菌落特征观察(1)观察菌落的大小、形状、颜色、边缘等特征。
(2)记录菌落特征。
4. 鉴定实验(1)将培养好的菌落用无菌接种环挑取,接种于含有酚红指示剂的营养肉汤中。
(2)37℃恒温培养箱中培养24小时,观察酚红指示剂的颜色变化。
(3)若酚红指示剂变为黄色,则说明该菌为产酸菌,可能为大肠杆菌。
五、实验结果1. 菌落特征:菌落呈圆形、光滑、湿润、红色,边缘整齐。
2. 鉴定实验:酚红指示剂变为黄色,说明该菌为产酸菌,可能为大肠杆菌。
六、实验讨论1. 本实验成功培养了大肠杆菌,并观察到了其菌落特征,为后续的鉴定实验奠定了基础。
2. 在菌落培养过程中,无菌操作至关重要,要严格按照无菌操作规程进行,以避免杂菌污染。
3. 鉴定实验中,酚红指示剂的颜色变化可以作为判断菌种的一个依据,但还需结合其他实验结果进行综合判断。
七、实验总结本实验通过培养大肠杆菌,观察其菌落特征,并进行鉴定,使学生掌握了大肠杆菌的培养与鉴定方法。
1. 掌握大肠杆菌的计数方法。
2. 了解大肠杆菌在不同环境下的生长状况。
3. 学习使用标准平板计数法进行微生物计数。
二、实验原理大肠杆菌(Escherichia coli)是一种常见的革兰氏阴性菌,广泛存在于自然界和人类肠道中。
本实验采用标准平板计数法,通过在培养基上接种一定量的样品,观察形成的菌落数量,从而估算样品中大肠杆菌的浓度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 大肠杆菌标准菌株- 琼脂培养基- 蒸馏水- 碘液- 灭菌器材- 移液器- 平板计数器2. 实验仪器:- 高压蒸汽灭菌锅- 灭菌操作台- 电子天平- 烧杯- 玻璃棒- 离心机1. 样品制备:- 称取适量大肠杆菌标准菌株,加入适量的蒸馏水,制成菌悬液。
- 将菌悬液用移液器稀释至适当浓度。
2. 琼脂培养基制备:- 称取适量的琼脂,加入适量的蒸馏水,溶解后加入琼脂培养基。
- 将溶解后的培养基加入高压蒸汽灭菌锅中,在121℃下灭菌20分钟。
3. 接种:- 取适量菌悬液,用移液器接种于琼脂培养基平板上。
- 将平板倒置,放入培养箱中,在适宜的温度下培养24小时。
4. 计数:- 观察平板上形成的菌落,用平板计数器进行计数。
- 根据计数结果,计算样品中大肠杆菌的浓度。
五、实验结果与分析1. 样品制备:- 制备的菌悬液呈均匀浑浊状,未见明显的絮状沉淀。
2. 琼脂培养基制备:- 制备的琼脂培养基呈透明状,未见明显的杂质。
3. 接种:- 接种后的平板在培养箱中培养24小时,平板上形成大量菌落。
4. 计数:- 平板上形成的菌落数为30个,根据计数结果,样品中大肠杆菌的浓度为10^6 CFU/mL。
六、实验讨论1. 本实验采用标准平板计数法进行大肠杆菌计数,操作简单,结果准确可靠。
2. 实验过程中,应注意操作规范,避免污染。
3. 本实验结果与理论值基本一致,说明实验方法可行。
七、实验结论通过本实验,我们掌握了大肠杆菌的计数方法,了解了大肠杆菌在不同环境下的生长状况。
大肠杆菌实验结果与分析大肠杆菌(Escherichia coli)是常见的肠道菌群中的一种细菌,在许多实验室中被用作模式生物来进行研究。
在本篇文章中,我将会对实验结果和分析进行详细描述。
实验目的:本实验的目的是研究大肠杆菌对不同环境条件的生长和生存能力,并分析与这些条件相关的影响因素。
实验材料和方法:1.实验菌种:采用常见的大肠杆菌菌株。
2.实验培养基:采用LB琼脂糖平板培养基。
3.不同环境条件:在不同实验组中设置不同的环境条件,包括:温度、pH值、营养浓度等变量。
4.实验过程:将大肠杆菌接种到LB琼脂糖平板培养基上,按照设定好的条件进行培养,并记录生长情况。
实验结果:根据实验数据,我们得到了以下实验结果:1.温度影响实验:在不同温度条件下培养大肠杆菌,我们观察到以下现象:-在低温条件下(例如4°C),大肠杆菌生长缓慢,呈现抑制状态。
-在适温条件下(例如37°C),大肠杆菌生长繁殖迅速,形成较大的菌落。
-在高温条件下(例如50°C),大肠杆菌生长受到抑制,甚至可能死亡。
2.pH值影响实验:在不同pH值条件下培养大肠杆菌,我们观察到以下现象:-在酸性环境中(pH值低于7),大肠杆菌生长受到一定程度的抑制,菌落变小。
-在碱性环境中(pH值高于7),大肠杆菌生长繁殖迅速,菌落变大。
-在极端酸性或碱性环境中(pH值过低或过高),大肠杆菌生长受到严重抑制甚至死亡。
3.营养浓度影响实验:在不同营养浓度条件下培养大肠杆菌,我们观察到以下现象:-在低营养浓度条件下,大肠杆菌生长缓慢,菌落较小。
-在高营养浓度条件下,大肠杆菌生长迅速,菌落变大。
实验分析:基于以上实验结果1.温度对大肠杆菌的生长有重要影响。
适宜温度范围内,大肠杆菌生长繁殖迅速。
过低或过高温度会对其生长产生不利影响。
这是因为温度影响了大肠杆菌的代谢物质转运速率和酶活性,进而影响它们的生长速度。
2.pH值对大肠杆菌的生长也具有重要影响。
A 题 细胞体内代谢物浓度预测
随着基因组、转录组、蛋白质组等各种“组学”研究计划的蓬勃开展,生命科学进入了“组学”时代。
代谢组学作为系统生物学的重要分支,其研究的重点是细胞内代谢物种类与浓度的定性和定量分析以及代谢网络的构建和模拟。
对代谢物的检测及浓度测定主要采用实验方法,包括核磁共振、气相色谱-质谱联用和液相色谱-质谱联用等技术。
但由于代谢物种类繁多,且大部分浓度较低(μM 数量级),尤其是胞内代谢物提取难度非常大,精确测定其浓度异常困难,而且实验测定需要消耗大量财力物力和人力,因此通过计算机方法对代谢物浓度预测和分析变得越来越重要。
活细胞的代谢物浓度由什么决定?除了一些特定的代谢和酶的作用以外,有没有那种能全局影响浓度值的性质?
试根据附件中的数据完成如下问题:
1 根据不同类型的数据,分析代谢物浓度与其物理化学性质之间的关系。
2 筛选合适的物理化学性质,建立预测代谢物浓度的预测模型,并对此模型进行评价;
1.线性插补法处理缺失数据
原理:用该列数据缺失值前一个数据和后一个数据建立线性插值,然后用缺失点在线性插值函数的函数值填充该缺失值,即:
在于消除不同变量的量纲的影响,而且标准化转化不会改变变量的相关系数。
代谢物浓度:取对数
代谢物理化性质:标准差标准化法
)1,1( m j n i S x x x j j ij ij
≤≤≤≤-=' 式中:.)(11,1121∑∑==--=
=n i j ij j n i ij j x x n S x n x 3.SAS 软件建立多元线性回归方程
回归模型一般形式:
u X b X b X b b Y k k +++++= (22110)
上式表示数据中应变量Y 可以近似地表示为自变量1X ,
2X …k X 的线性函数。
0b 为常数项,1b …k b 为偏回归系数,表示在其它自变量保持不变时,i X 增加或减少一个单位时Y 的平均变化量,u 是去除k 个自变量对Y 影响后的随机误差(残差)。
适用条件:
1、解释变量 Xi 是确定性变量,不是随机变量;
2、解释变量之间互不相关,即无多重共线性。
3、随机误差项不存在序列相关关系
4、随机误差项与解释变量之间不相关
5、随机误差项服从0均值、同方差的正态分布
检验的目的:检验Y 与解释变量1X ,2X ,……k X 之间的线性关系是否显著。
检验的步骤:
第一步,提出假设:
原假设:H 0:b 1=b 2=……b k =0
备择假设:H 1:b i 不全为0 (i=1,2,…,k )
第二步,计算统计量:
)1,( )
1/(/----=k n k F k n SSE k SSR F 第三步,查表,得:)1,(--=k n k F F αα
第四步,做检验:
对大肠杆菌(E.coli) 的建模
首先对各个大肠杆菌代谢物浓度进行数据整理,取各大肠杆菌代谢物浓度的平均值作为大肠杆菌真实代谢物浓度。
用SAS 软件建立回归方程并进行显著性检验,可以得到以下结果:
表1 大肠杆菌代谢物浓度与理化性质回归分析
来源 自由度 平方和 均方和 F 值 Pr>F
样本 17 29.60566 1.74151 6.76 <0.0001
误差 195 50.23727 0.25763
总和 212 79.84294
由方差分析表可知,其F value=6.76,pr>F 的值小于0.0001,远小于0.05,
故拒绝原假设,接受备择假设,认为y1与x1-x17之间具有显著性的线性关系,即大肠杆菌代谢物浓度与其物理化学性质之间有非常显著的线性关系的关系。
参数估计公式:Y X X X B T T ^
1)(-=
大肠杆菌(E.coli) 代谢物浓度的预测模型
回归方程显著性检验:
Variable x6 Entered: R-Square = 0.5534 and C(p) = 7.0551
由方差分析表可知,其F value=494.06,pr>F 的值<0.0001,远小于0.05,故拒绝原假设,接受备择假设,认为y1与筛选后的理化性质之间具有极显著性的线性关系。
参数显著性检验:
由参数估计表可知,在置信水平为85%情况下,对常数检验F 值为F=4.16578,Pr>F 的值<0.0001,远小于0.05,说明截距项通过检验,估计值为
4.16578。
同理可知其余筛选后的变量均通过检验,由上表可建立线性回归方程:
--++++-=138764318945.021380.010880.018029.014304.059655.0x x x x x x y
16578
.420786.019695.010081.0171514+-+x x x。