activating factor)结合并活化Apaf-1,活化的Apaf-1再活 它们的高度活性引发脂类、蛋白质和核酸分子 裂解核纤层蛋白,导致细胞核形成凋亡小体; 凋亡小体逐渐为邻近的细胞吞噬并消化 程序性死亡细胞的形态结构变化 程序性死亡细胞的形态结构变化 ◆能够被caspase切割的靶蛋白
凋亡小体的形成 ◆DNA电泳:DNA片段就呈现出梯状条带
物种的寿命与体外培养 时细胞传代次数的关系
1
早老症儿童与正常儿童的比较
2
细胞衰老的特征
◆细胞内水分减少 ◆色素生成和色素颗粒沉积 ◆细胞核 ◆内质网 ◆细胞质膜 ◆线粒体 ◆蛋白质合成的变化
3
◆ 细胞核的变化
●体外培养的二倍体细胞,细胞核随 着细胞分裂次数的增加不断增大
●细胞核的核膜内折(invagination)、 染色质固缩化
·凋亡信号通路 当细胞接受凋亡信号分子(Fas,TNF等)后,凋亡细胞表面信号分子受体相
互聚集并与细胞内的衔接蛋白(Adaptor protein)结合,这些衔接蛋白又募 集Procaspases聚集在受体部位,Procaspase相互活化并产生级联反应,使细胞
凋亡
·下游Caspases活化后,作用底物: 裂解核纤层蛋白,导致细胞核形成凋亡小体; 裂解DNase结合蛋白,使DNase释放,降解DNA形成DNA Ladder; 裂解参与细胞连接或附着的骨架和其他蛋白,使凋亡细胞皱缩、脱落, 便于细胞吞噬; 导致膜脂PS重排,便于吞噬细胞识别并吞噬。
◆彗星电泳法(comet assay) ◆流式细胞分析
根据凋亡细胞DNA断裂和丢失,采用碘化丙啶使DNA 产生激发荧光,用流式细胞仪检出凋亡的亚二倍体细
胞,同时又能观察细胞的周期状态。