生物免疫分析技术 PPT课件

第四章免疫分析技术免疫分析技术是一种以生物学的免疫反应为基础，利用抗原与抗体的特异性结合来检测、定量和分析特定分子的方法。

免疫分析技术广泛应用于医学、生物学、农业、环境科学等领域，成为重要的实验室技术之一、本章将介绍几种免疫分析技术的原理和应用。

1. 免疫沉淀技术（Immunoprecipitation）免疫沉淀技术是利用抗体与抗原之间的特异性结合，将目标分子从复杂的混合物中沉淀下来。

该技术常用于分离、纯化和检测特定的蛋白质或其他生物分子。

免疫沉淀技术可以结合其他分析方法，如免疫印迹（Western blotting）或质谱分析，实现目标分子的定性和定量分析。

2. 免疫层析技术（Immunochromatography）免疫层析技术是一种简单、快速且易于操作的免疫分析方法。

该技术基于抗原与抗体之间的特异性结合，利用免疫层析柱或免疫层析纸将目标分子与其他分子分离。

例如，免疫层析技术可以用于临床诊断中的快速化验，如妊娠检测、HIV感染检测等。

3. 免疫荧光技术（Immunofluorescence）免疫荧光技术是一种通过利用荧光染料标记的抗体来检测目标分子的技术。

该技术可以在细胞、组织或组织切片中可视化目标分子的分布和定位。

免疫荧光技术广泛应用于生物学研究和医学诊断中，如免疫组织化学和细胞分析等。

4. 免疫酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）ELISA是一种常用的免疫分析方法，可提供定性和定量的分析结果。

ELISA基于抗原与抗体之间的特异性结合，利用酶标记的二抗或底物发生化学反应，产生可测量的信号。

ELISA可以用于检测疾病标志物、药物残留物、激素和分子相互作用等。

免疫分析技术的应用非常广泛。

在医学领域，免疫分析技术可用于疾病的早期诊断、治疗监测和预后评估等。

在生物学研究中，免疫分析技术可以帮助研究者了解生物分子的结构、功能和相互作用。

免疫分析技术基本原理抗原-抗体反应是免疫分析技术的核心。

抗原是指与抗体相互作用并导致特异性抗体产生的物质，可以是病毒、细菌、蛋白质、多肽、糖类以及其它生物大分子。

抗体是由机体产生的免疫细胞淋巴细胞产生的一种特异性蛋白质，与抗原结合形成稳定的抗原-抗体复合物。

免疫分析技术中常使用的抗体有单克隆抗体和多克隆抗体两种。

在免疫分析技术中，常使用的方法有诊断试剂盒、酶联免疫吸附试验（ELISA）、放免分析法（RIA）、免疫印迹（Western Blotting）等。

这些方法中都包含有抗原-抗体反应的步骤，通过将待测样品与标记有抗体的试剂进行反应，形成抗原-抗体复合物。

抗原-抗体复合物的形成会导致一系列信号变化，在不同的免疫分析方法中，这些信号变化可以是光信号、放射性分析信号或荧光信号等。

第二个步骤是检测信号转换。

在免疫分析技术中，需要将抗原-抗体反应的结果转化为可以测量的信号进行定量分析。

这一步骤的关键是加入一种与抗体结合并可以产生可测量信号的分子，常用的有标记酶、放射性同位素、荧光物质等。

这些标记物与抗体结合后，可以通过特定的方法进行定量测量，如酶标仪、荧光分析仪等。

通过测量信号的强度，可以准确地确定待测样品中抗原的含量。

免疫分析技术的优势在于其高度特异性和灵敏度。

由于抗体具有极高的特异性，可以对特定的抗原进行识别和定量，避免了与其它物质的干扰。

同时，免疫分析技术的灵敏度也很高，可以检测到非常低浓度的抗原，使其在临床诊断、生物医学研究等领域有广泛的应用。

总之，免疫分析技术是一种利用抗体识别抗原的方法，通过抗原-抗体反应和检测信号转换实现对待测物质的检测和定量。

其广泛应用于医学、农业、生物技术等领域，为疾病诊断、药物研发和生物学研究等提供了重要的工具。

免疫分析技术基本原理WORD免疫分析技术基本原理利用抗原、抗体之间的特异性结合来测定、分析特定物质的方法抗原：可诱导动物免疫系统产生免疫应答的物质。

按其引起免疫应答的能力分半抗原、抗原、超抗原。

抗体：由动物免疫系统产生，可特异性结合某种物质的免疫球蛋白。

分IgG、IgM、IgE、IgA、IgD五个亚型。

不同亚型针对同一抗原表位的结合位点的结构一样。

不同亚型出现的先后顺序不同，在血清中的含量不同，在机体中出现的地点不同。

抗原抗体反应的特性1可逆性抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡，其反应式为：Ag+Ab→Ag·Ab抗体的亲和力（affinity），可以用平衡常数K表示：K=[Ag·Ab]／[Ag][Ab] ,Ag·Ab的解离程度与K值有关。

高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合，两者结合牢固，不易解离。

解离后的抗原或抗体均能保持原有的结构和活性2特异性抗原抗体的结合产生在抗原的决意簇与抗体的结合位点之间。

化学结构和空间构型互补关系，具有高度的特异性。

测定某一特定的物质，而不需先分离待检物。

3最适比例4敏理性化学比色法的敏感度为mg/ml水平。

酶反应测定法的敏感度约为5-10μg/ml。

免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。

标记的免疫敏感度可提高数千倍，达ng/ml水平。

例如，HBsAg，其敏感度可达0.1ng/ml。

固相免疫测定的原理基础:抗原或抗体的固相化与抗原或抗体的酶标记。

加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，由此进行定性或定量分析。

双抗体夹心法原理此法适用于检验各种卵白质等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP等。

只要获得针对受检抗原的异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。

WORD双抗原夹心法原理用特异性抗原进行包被和制备酶结合物。

此法中受检标本不需稀释，可直接用于测定，因此其敏感度相对高于间接法。