当前位置：文档之家 › 免疫分析法PPT课件

免疫分析法PPT课件

  • 格式：pptx
  • 大小：593.58 KB
  • 文档页数：144

下载文档原格式

  / 144

合集下载

临床检验中的发光免疫分析讲解课件

临床检验中的发光免疫分析讲解课件

对甲低的诊断价值依次为：FT4=TSH＞TT4＞FT3＞TT3
但FT3 、 FT4灵敏度要求高，且易受干扰 发光法提高了灵敏度，使得其临床应用普遍性超过TT4和TT3
第一代（放免）
第二代
第三代
两步法 操作时间长
灵敏度差 准确性差
类似物法 操作时间短 灵敏度较好 准确性较好
反向竞争法 （标记抗体） 操作时间短 灵敏度更好 准确性更好
发光强度（X）
单光子计数式发光检测仪
单光子计数器
样品运动/定位装置 原位注射泵
计数/贮存器 打 印 机
程控高压
计
算
控制器
机
程控自动门锁及检测装置 发光仪执行模块
发光仪控制模块
光生物学技术的应用范围
军事侦测 公安稽查 卫生检疫 药物筛查 医学诊断 环境检测 航天遥感 生命科学
……
第三代 TSH检测试剂盒
第四代 TSH检测试剂盒
以TSH(促甲状腺素)为例
目前商品化发光免疫分析产品的几个特点
大多采用全自动工作方式，部分采用微孔板半自动方式 多采用磁性或非磁性微粒包被，以增加表面积，使反应时间缩短 使用内建标准曲线加校正的办法产生工作曲线 部分产品采用流动池测定方式(适合于闪光型发光或电化学发光)
发光时间在数十分钟以上，如： HRP-Luminol系统 AP-AMPPD系统 黄嘌呤氧化酶系统
无须原位进样、 以速率法测量。
闪光与辉光及其测量方式的差别
闪光尖峰 发光信号
积分法测量
辉光坪区
原位进样
速率法测量
时间
商业化产品中常见的化学发光系统（一）
鲁米诺及其衍生物的增敏化学发光系统
O
H2O2+

化学发光免疫分析技术【检验科】--ppt课件

化学发光免疫分析技术【检验科】--ppt课件

是目前世界公认先进的标记免疫测定技术，化学发光
免疫分析技术具有高度的准确性和特异性，成为检验方法 中最为重要的技术之一。化学发光免疫分析技术作为疾病 诊断的主要手段已被广泛用于机体免疫功能、传染性疾病 、内分泌功能、肿瘤标志物、性激素、甲状腺功能等方面 的体外诊断实验中。
化学发光免疫分析的优势
• 灵敏度高
• 参考范围： FT3：2.3—4.0pg/mL FT4：0.6—1.2ng/dL
• 临床意义：
血清FT3和FT4升高：⑴甲亢；⑵低T3综合征，由于5’脱碘酶受抑制，T4外 周脱碘作用障碍使FT4升高；⑶甲状腺素不敏感综合征， FT3和FT4升 高，而无甲亢表现；⑷某些药物，胺碘酮、肝素等可使FT4升高；FT3 适合于甲亢和左旋甲状腺素治疗中药物是否过量的判断。
电化学发光免疫分析示意图
电化学发光免疫测定示意图
标记磁颗粒在电场中发光工作示意图
目前我院最新引进的迈瑞CL-2000i 全自动化学发光免疫分析系统 主要以化学发光酶免疫分析为主。拥有国内完全自主知识产权，它的 酶促化学发光是目前免疫诊断中最灵敏的化学发光体系之一，其核心 性能达到了国际同类产品先进水平。
• 化学发光免疫分析仪是通过检测患者血清内待测物质从而 对人体进行免疫分析的医学检验仪器。将定量的患者血清 和辣根过氧化物（HRP）加入到固相包被有抗体的白色不 透明微孔板中，血清中的待测分子与辣根过氧化物酶的结 合物和固相载体上的抗体特异性结合。分离洗涤未反应的 游离成分。然后，加入鲁米诺Luminol发光底液 ，利用化 学反应释放的自由能激发中间体，从基态回到激发态，能 量以光子的形式释放。此时，将微孔板置入分析仪内，通 过仪器内部的三维传动系统，依次由光子计数器读出各孔 的光子数。样品中的待测分子浓度根据标准品建立的数学 模型进行定量分析。最后，打印数据报告，以辅助临床诊 断。

免疫检测法PPT课件

免疫检测法PPT课件
质。
缺点
01
02
03
04
交叉反应
有时会出现交叉反应，导致假 阳性结果。
抗体依赖
免疫检测法依赖于抗体的质量 和特异性，因此抗体制备的难
度和成本较高。
样品处理要求高
对于某些生物样品，需要进行 复杂的预处理才能进行检测。
检测时间较长
相对于一些快速检测方法，免 疫检测法可能需要更长时间才
能获得结果。
改进方向
分类
根据检测原理和应用领域，免疫 检测法可分为酶联免疫吸附试验 、放射免疫分析、荧光免疫分析 、化学发光免疫分析等。
免疫检测法的应用领域
01
02
03
医学诊断
用于检测人体内的肿瘤标 志物、激素、病毒抗原、 药物残留等，辅助医生进 行疾病诊断和病情监测。
食品安全
用于检测食品中的农药残 留、兽药残留、毒素等有 害物质，保障食品安全。
情监测。
激素水平检测
性激素检测
通过检测性激素水平，有助于评估男性和女性的生殖健康状况，如 睾酮、雌二醇、孕酮等激素的检测。
甲状腺激素检测
甲状腺激素对人体的新陈代谢和生长发育具有重要作用，通过检测 甲状腺激素水平，有助于甲状腺功能亢进和减退的诊断和治疗。
肾上腺激素检测
肾上腺激素与人体应激反应、免疫功能等方面密切相关，通过检测肾 上腺激素水平，有助于相关疾病的诊断和治疗。Fra bibliotek传染病检测
结核病检测
性病检测
通过检测结核病抗体，有助于早期发 现和诊断结核病，为预防和治疗提供 依据。
免疫检测法在性病检测中发挥着重要 作用，如梅毒、淋病、尖锐湿疣等， 通过检测相关抗体和抗原，及时发现 和治疗性病。
肝炎检测

免疫分析法ppt

免疫分析法ppt

酶联免疫分析法——应用2
2、放射免疫分析法(RIA)
• 简介
1959 年美国的 Yalow 和 Berson 首先使用放射性核 素标记胰岛素从而创立了放射免疫分析法 (radioimmunoassay，RIA)。
• 定义:把放射性核素测定与抗原、抗体间的免疫
化学反应两种方法巧妙地结合起来所形成的一种 超微量物质的测定方法。
兴奋剂检测的主要方法有气相色谱、高
效液相色谱、气相色谱－质谱联用、液相 色谱－质谱联用、免疫分析法、流动注射 电化学发光、高效毛细管电泳、毛细管电 泳－离子阱质谱等方法。
二、免疫分析法
免疫分析法是利用抗原与抗体的特异 性免疫反应来实现对禁用药物的检测的 方法。
特点：快速、高灵敏度、高特异性。 应用：主要被应用于类固醇类兴奋剂 和激素类兴奋剂的检测。
免疫分析法ppt
兴奋剂的检测方法
之免疫分析法
一、兴奋剂的概念 二、免疫分析法
（1）酶联免疫分析法 （2）放射64年，国际运动医学会的国际兴奋剂 会议将兴奋剂的概念定义为: 参加竞赛的 运动员使用任何异体物质，或以不正常的 量和不正常的进入机体的途径使用生理物 质，试图人为地以不正当方式提高其竞赛 成绩的行为。
抽干。
4、结果
γ一记数 仪记数， 并自动计 算尿中MA
浓度 (ng·ml-1)
3、化学发光免疫分析法（CLIA）
1977年Halman将化学反应系统与免疫系统相 结合，创建了化学发光免疫测定法(CLIA )，以检 测抗原或抗体。CLIA是建立放射免疫分析技术 (RIA)基础上的免疫分析技术，既有免疫反应的 特异性，更兼有发光反应的高敏感。
1、酶联免疫分析法(ELISA)
酶联免疫分析法——原理

免疫算法介绍PPT课件

免疫算法介绍PPT课件
离散和连续的优化问题。
应用领域
免疫算法在多个领域得到广泛应用，如组 合优化、机器学习、数据挖掘、电力系统、 生产调度等。
研究现状
目前，免疫算法的研究已经取得了一定的 成果，但仍存在一些挑战和问题，如算法 的收敛速度和稳定性等。
研究展望
理论完善
未来研究将进一步完善免疫 算法的理论基础，包括免疫 系统的数学模型、算法的收 敛性和稳定性分析等。
缺点分析
计算量大
参数设置复杂
免疫算法需要进行大量的迭代和计算，尤 其在处理大规模优化问题时，计算量会变 得非常大，导致算法的运行时间较长。
免疫算法涉及的参数较多，参数设置对算 法的性能影响较大，如果参数设置不当， 可能导致算法的性能下降甚至无法收敛。
对初始解敏感
适用性问题
免疫算法对初始解有较强的依赖性，如果 初始解的质量较差，可能会导致算法陷入 局部最优解或无法收敛。
新方法探索
跨领域应用
针对免疫算法的改进和变种， 未来研究将探索新的免疫算 法，如基于免疫遗传算法、 免疫粒子群算法等。
随着大数据、人工智能等技 术的快速发展，免疫算法有 望在更多领域得到应用，如 医疗诊断、金融风控等。
与其他算法融合
未来研究将探索免疫算法与 其他优化算法的融合，如混 合算法、协同进化等，以提 高算法的性能和适应性。
控制系统
优化控制系统的参数，提高系 统的性能和稳定性。
02
免疫算法的基本原理
生物免疫系统概述
生物免疫系统是生物体内一套复杂的防御机制，用于识别和清除外来物质，维持内 环境稳定。
免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子组成，具有高度的组织结构和功能分化。
免疫应答是免疫系统对外来抗原的识别、记忆和清除过程，分为非特异性免疫和特 异性免疫两类。

免疫分析法

免疫分析法
（一）半抗原和载体结合的化学反应 1、多肽类激素
（1）活化蛋白质或多肽的游离羧基形成肽键的结合剂 碳化二亚胺类（EDC） 异唑盐类 烷基氯甲酸类
（一）半抗原和载体结合的化学反应
（2）连接氨基的结合剂 二异腈酸类 二亚胺酯 卤代硝基苯
（一）半抗原和载体结合的化学反应
2、甾体
甾体激素不能直接和载体蛋白形成有效的共 价键，因此需要先制备甾体的衍生物（含游离的 羧基），然后再与载体蛋白连接，制成全抗原。 （1）甾体衍生物的制备 琥珀酸衍生物 肟衍生物 （2）甾体衍生物和蛋白质的结合反应
腹水制备法：常规是先腹腔注射0.5ml 液体石蜡（主要是 为了防止动物的排斥反应）于小鼠，1～2周后腹腔注射 1×106个杂交瘤细胞，接种细胞7～10天后可产生腹水， 密切观察动物的健康状况与腹水征象，待腹水尽可能多， 而小鼠死亡之前，处死小鼠，用滴管或注射器将腹水吸入 试管中，一般一只小鼠可获5～10mL腹水。腹水中单克隆 抗体含量可达到0.5～5mg/mL，这是目前最常用的方法。
去掉福氏完全佐剂中的卡介苗即为不完全佐剂。
一、全抗原和半抗原
3、药物分子的抗原特异性
1）实践中，当药物分子和蛋白质载体结合后，诱导 机体产生的抗体通常为不均一抗体。即：有多个 不同的抗体，各抗体的特异性略不相同；
2）和蛋白质的结合还可能导致药物分子原有抗原特 异性的改变—抗原决定簇改变。
二、人工抗原的合成
抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答 的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
四、抗体的制备
免疫分析中，常用到的两类抗体为抗血清 （多克隆抗体）和单克隆抗体。 1、抗血清 抗血清，通常指由抗原直接免疫动物后所制成 的多克隆抗体，它是免疫分析中的重要工具。 抗血清也称免疫血清，要获得一种质量好的抗 血清，主要有免疫原的制备、动物免疫、放血、 抗血清分离及抗血清的分析鉴定等步骤。

《酶联免疫分析法》课件

酶联免疫分析法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点。
酶联免疫分析法广泛应用于医学、生物学、环境科学等领域。
分类：直接法、间接法、双抗体夹心法、竞争法等 应用：临床诊断、药物研发、食品安全检测、环境监测等领域 优点：灵敏度高、特异性强、操作简便、成本低等 局限性：存在假阳性和假阴性结果，需要标准化操作和严格的质量控制
汇报人：PPT
PPT,a click to unlimited possibilities
汇报人：PPT
CONTENTS
PART ONE
PART TWO
酶联免疫分析法（ELISA）是一种免疫学检测方法，用于检测样品中的抗原或抗体。
原理：利用抗原-抗体特异性结合的原理，通过酶催化底物产生颜色反应，从而定量或定性检测样品中的抗原或 抗体。
优点：灵敏度高，特异性强，检测速度快，操作简便 缺点：成本较高，需要专业人员操作，容易受到环境因素影响
PART THREE
抗原选择：选择合适的抗原，如蛋 白质、多肽等
抗原标记：将抗原与酶或荧光素等 标记物结合
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
抗原纯化：通过离心、层析等方法 纯化抗原
抗原保存：将标记好的抗原保存在 适当的条件下，如低温、避光等
检测水中有机污染物：如农药、多 环芳烃等
检测土壤中的污染物：如重金属、 有机氯农药等
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
检测空气中的污染物：如二氧化硫、 氮氧化物等
检测生物体内的污染物：如农药残 留、重金属等
蛋白质定量分析：通过酶联免疫分析法检测蛋白质的浓度 抗体检测：通过酶联免疫分析法检测抗体的存在和浓度 细胞因子检测：通过酶联免疫分析法检测细胞因子的存在和浓度 基因表达分析：通过酶联免疫分析法检测基因的表达水平和调控机制

免疫分析法


（1）半抗原和载体结合的化学反应
多肽类激素：活化蛋白质或多肽的游离羧基 形成肽键；与蛋白质或多肽的游离羧基缩合 形成肽键。 甾体：通过含游离羧基的甾体衍生物与载体 蛋白相连。 抗生素：ß-内酰胺环在偏碱性条件下可以与 蛋白质的自由氨基以酰胺键的形式共价结合； 氨基糖苷类抗生素用碳化二亚胺为连接剂实 现药物和载体蛋白的连接。
免疫原的制备
免疫原由质量好的抗原与佐剂制成。通常有 免疫原水剂、福氏完全佐剂和福氏不完全佐 剂。 水剂由无菌生理盐水将抗原制成一定浓度的 免疫原。 弗氏佐剂是由一定量的羊毛脂和石蜡油，以 及一定浓度的分支杆菌混合而成，经研磨达 到油包水的程度。 不完全福氏佐剂即不含有分支杆菌。
动物免疫
通常的免疫动物为家兔和羊。 免疫的部位多采用脚掌、腹股沟淋巴结、大 腿肌肉、皮下多点、静脉。 免疫抗原量通常为1~10mg或50~100mg。
试血及效价测定
家兔的试血通常可由耳缘静脉取血，取血量 0.5ml。 不同稀释度的抗血清和1%的血细胞悬液按 1:1混合，37℃保温2h后观测血细胞的凝聚情 况，即可测得免疫血清的效价。
免疫分析法
一、抗原
1、药物分子的抗原性 大多数的药物分子通常都是半抗原； 一些蛋白类药物、多肽类药物、激素类药物 也是完全抗原。 2、药物分子的抗原特异性 药物分子和蛋白质载体结合后，抗原特异性 可能会发生改变。
一、抗原ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
3、药物分析中，为了得到高效价的抗血清， 通常会与蛋白质载体合成人工抗原进行试验。 常用载体：牛血清白蛋白（BSA）、卵清白 蛋白（OA）、破伤风类毒素（TT）、钥孔蛋 白（KLH）等。
（2）半抗原和载体的选择原则
半抗原：最好含有芳香结构；应考虑抗原抗 体反应的微环境；合理利用分子类似物之间 的交叉反应。 载体：载体对监测系统的影响；载体效应在 免疫过程中的影响。

体内药物分析：免疫分析法


④琥珀酸酐法 该法是利用琥珀酸酐在无水吡 啶中与半抗原分子中的羟基反应，首先生成带 有羧基的半抗原琥珀酸衍生物，然后再与蛋白 质的氨基结合，形成肽键。
⑤重氮化的对氨基苯甲酸法 该法是利用重氮 化的对氨基苯甲酸（重氮化合物）先与带酚羟 基的半抗原反应，生成带有羧基的半抗原，然 后再与蛋白质结合
3. 人工抗原的鉴定
三种试剂的作用分别是： 1. 抗体是作为标记药物和非标记药物竞争结合 的蛋白； 2. 标记药物提供可检测的信号（响应值）； 3. 非标记药物在标准曲线制备时是药物标准品， 在样品中则为被测药物。它用于建立被测药物 量（浓度）与响应值之间的函数关系，是样品 中药物浓度计算的依据。
Ag Ab K1 Ag Ab
从图中可见，抗血清A的滴度及它和标记抗 原的亲和力较小，质量最差；B的滴度虽高， 但亲和力不够高；C质量最佳，选其结合率 50%稀释度，建立放射免疫分析方法最适宜。
（2）活度（Avidity）
活度是指抗体与相应抗原的亲和力 （Affinity)。它可反映出抗原与抗体结合的牢 固程度。活度高，表明形成抗原-抗体结合物的 速度快而解离小。抗体活度高低与免疫分析方 法的灵敏度密切相关，它主要表现在剂量反应 曲线的斜率上，斜率越陡，表明活度越高，测 定效果越好。
4. 标准抗原（Standard antigen）
标准抗原是指在免疫测定中用来 制作标准曲线或制备标记抗原用的药 物标准品。标准抗原是免疫分析法的 定量依据。
（二）特异抗体的制备及鉴定
1. 特异抗体（Specific Antibody）
特异抗体是指抗原（免疫原）作用于机体 产生免疫反应，在血清中产生的能与该抗原特 异性结合的免疫球蛋白。抗体具有高度的特异 性，一般只能与相应的抗原起专一的反应。在 免疫球蛋白中，免疫球蛋白G（IgG）含量最高 （约占70％），是免疫分析中最常用的抗体。

免疫分析法


1. 双抗夹心法测抗原
适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定 半抗原及低于二价的小分子单价抗原，因其不能形成两位点
夹心
2. 间接法测抗体
3. 竞争法测定抗原
（1）将Ab吸附在固相载体表面;
（2）加入酶标Ag和待测Ag，竞争结合Ab； 对照只加入酶 标 Ag； （3）加底物。对照孔与样品孔底物降解量的差＝未知 Ag量。
• 中和毒素
• 促进吞噬功能
7
结合抗原和中和毒素
© 2002 by Bruce Alberts, Alexander Johnson, Julian Lewis, Martin Raff, Keith Roberts, and Peter Walter.
8
促进吞噬功能
9
三、抗原与抗体反应的特点
1. 液相沉淀反应
（1） 絮状沉淀试验 操作步骤：
（a） 将可溶性抗原作一系列倍比稀释。
（b） 各管加入一定浓度的适量抗血清。
（c） 振摇使抗原、抗体充分混匀，臵37℃孵育。
（d） 产生沉淀量随抗原量而不同，以出现沉淀物最多的 管为最适比例管。 絮状沉淀试验方法简单，设备要求低，敏感度较低， 目前多用以测定抗原抗体反应的最适比。
原，用于抗体的定量检测（如诊断伤寒病的肥达试验）。
2. 间接凝集
将可溶性抗原包被在与免疫无关的载体颗粒表面，再
与相应抗体反应，出现颗粒物凝集现象。常用载体为人O型 血红细胞、聚苯乙烯乳胶颗粒等。
3. 间接凝集抑制试验
其原理是：将待测抗原（或抗体）与特异性抗体（或抗
原）先行混合并作用一定时间，再加入相应致敏载体悬液；
1、免疫动物的选择： ①抗原来源与动物种属的关系（越近越差）
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

全抗原： 指同时具有免疫原性和抗原特异性的
物质。 作为全抗原的物质其分子量必须足够
大（分子量>1000），且要求化学结构较 复杂，如蛋白质、多肽等。
半抗原（Hapten）：指只能与特异抗体作用
但不引起机体免疫应答的物质。
人工抗原 ：药物(半抗原) 本身不具免疫原性，
只有当它们与某些大分子的载体物质(如蛋白质 或多肽)共价结合后，才具有免疫原性。这种小 分子半抗原和大分子载体物质结合后所形成的全 抗原。人工抗原直接免疫动物可产生特异抗体。
2. 可逆性
抗原与抗体的特异性结合是由于两者 的分子结构及立体构型相互吻合，它仅发 生在分子的表面，并依靠抗原-抗体分子 间的静电力作用、疏水作用、氢键作用及 范德华引力等而存在。这种结合具有相对 稳定性，但仍为可逆反应。
3. 最适比例性
抗原抗体的结合反 应具有一定的量比关 系。只有当抗原抗体 两者的分子比例合适 时，才能发生最强的 结合反应。
抗体： (antibody ， Ab)
机体是在抗原物质的刺激下形成的一类能与 抗原特异性结合的活性球蛋白，又称免疫球蛋白 (immunoglobin ， Ig) ，由细胞合成并分泌。抗体 是机体对抗原物质产生免疫应答的重要产物，具 有各种免疫功能，主要存在于动物的血清、淋巴 液、组织液及其它外分泌液中。
免疫分析基于抗体与药物结合时所具有的 专一性和可饱和性，利用被测药物同标记药物 之间竞争抗体结合原理，建立药物浓度和响应 值（如RIA中的放射性强度）之间的函数关系， 用于体内药物分析。
抗体（Ab）、标记抗原（标记药物， Ag*）和非标记抗原（非标记药物，Ag） 三种试剂是所有免疫分析必需的基本试 剂，也是任何免疫分析试剂盒应提供的 试剂。
抗原和对应抗体在一定条件下特异结合形 成可逆性抗原-抗体复合物的过程。抗原-抗体 是免疫球蛋白分子上的抗原结合簇与抗原分子 上的抗原决定簇相互吸引以及多种分子间的引 力参与发生的。
抗原抗体反应的基本类型
反应类型
实验技术
检测方法
敏感度
免疫标记技术
荧光免疫技术 放射免疫技术 酶标免疫技术 发光免疫技术
免疫分析法
第一节 概 述
免疫分析法（Immunoassay，IA） 是指以特异性抗原-抗体反应为基础的分 析方法。
一、基本概念
抗原(antigen, Ag) 是一类能诱导免疫系统发生免疫应答，
并能与免疫应答的产物(抗体或效应细胞)发 生特异性结合的物质。抗原具有免疫原性 和反应原性两种性质。
标记抗原一抗体的结合率（B％） 随着未标记抗原量（待测物）的增加 而减少（呈负相关）。这种现象称作 竞争抑制作用，即未标记抗原量的增 加抑制了标记抗原与抗体的竞争性结 合。
显然，在抗原抗体反应中，标记抗 原-抗体结合物减少的程度取决于未标记 抗原（被测物）的量，被测物的量越大， 标记抗原与抗体的结合率就越小。这种 竞争性抑制的数量关系就成为免疫分析 的定量基础。
以沉淀免疫反应 为例：
三、免疫分析方法产生的背景
1959年，由美国Yallow和Berson等人 将放射性同位素示踪技术的高灵敏性和免 疫反应的高特异性结合起来，首先测定了 糖尿病人血浆中的胰岛素含量，从而创立 了放射免疫分析方法(Radioimmunoassay， RIA)。
四、基本原理
（一）竞争抑制原理
B% B 100% B 100%
BF
T
三、基本条件
（一）抗原及其制备 1. 全抗原与半抗原 抗原（Antigen）是指能在机体中引
起特异性免疫应答反应的物质。
免疫原性（Immunogenicity）是指 抗原注入动物体内后能促使动物产生特 异抗体。
抗原特异性（Antigenic specificty） 是指抗原能与特异抗体相作用的性质。
+ K2
Ag*
K
' 2
K1'
Ag *Ab
根据质量定律，当反应达到平衡时， 反应可表示为：
K

K1 K2

K1' K2'

Ag Ab AgAb

Ag* Ab
Ag* Ab
抗原-抗体反应时，须满足以下条件： 1. Ag*与Ag（待测物）必须是相同的生物 活性物质； 2. 所加入Ag*和Ab的量应是固定的； 3. Ag*与Ag的量之和应大于Ab的结合位点； 4. Ag*、Ag及Ab须处在同一反应底物显色 测定发光强度
++++ ++++ ++++ ++++
二、抗原-抗体反应的特点
1. 特异性 抗原与抗体的结合具有高度特异性，
即一种抗原分子只能与由它刺激产生 的抗体发生特异性结合反应。
在实验条件下，抗原-抗体的反应常会 受到结构相近似的其它药物或化合物的干 扰，影响待测药物（抗原）与抗体的结合。 这种干扰物与抗体的结合称为交叉反应 （cross reaction）。交叉反应进行的程度 越大，则免疫分析产生的误差也越大。
IgG分子由四条以二硫键相连的多肽链构成，有三个功能区。 抗体在Fab区结合抗原分子，同时通过hi区的转动以适应不 同距离的抗原决定簇。与抗原结合后，IgG分子构象改变， 暴露出Fc上的活性位点，从而表现出固定和激活补体以及粘 结单核细胞等亲细胞反应的功能。
抗原-抗体反应 (antigen-antibody reaction)
三种试剂的作用分别是： 1. 抗体是作为标记药物和非标记药物竞争结合 的蛋白； 2. 标记药物提供可检测的信号（响应值）； 3. 非标记药物在标准曲线制备时是药物标准品， 在样品中则为被测药物。它用于建立被测药物 量（浓度）与响应值之间的函数关系，是样品 中药物浓度计算的依据。
Ag Ab K1 Ag Ab
（二）竞争抑制曲线 （或称剂量反应曲线）
样品定量测定时，先用待测物的标准 品配置一系列已知浓度的标准溶液．再加 入一定量的标记抗原和抗体，待抗原抗体 反应达到平衡后，测定系列标准溶液的 Ag*-Ab的结合率。
以标准抗原Ag的浓度为横坐标，以结 合率（B％）等为纵坐标绘制标准竞争曲 线。然后取一定量样品，按同法操作，根 据样品中标记抗原-抗体结合率，即可从标 准曲线上查出相应的待测物的含量。