水电医院凝血常规检查操作程序
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凝血四项操作规程1.目的规范凝血四项(PT、APTT、TT、FIB)的测定。
2.实验原理凝固法原理:在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入试剂后,采用波长为660nm的光照射样本。
凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。
从散射光光强度的测定,可以做出凝血曲线,通过Percentage Detection Method法求得血液凝固时间。
3.标本要求3.1.标本准备:采用塑料采血管或硅化玻璃注射器静脉采血,针头必须为21号以上,儿童可用23号。
采血技术熟练,采血时止血带不可束缚过紧,并且以1分钟完成为宜,最多不宜超过3分钟以免某些凝血因子及纤溶因子活化。
3.2.抗凝剂选择:以109mmol/L枸椽酸钠溶液为佳,血与抗凝剂按9:1混合。
建议用已加有抗凝剂的硅化真空采血管。
也可用带盖塑料管或硅化玻璃管,但应保证血与抗凝剂的比例正确。
3.3.收到血标本后应尽快离心分离血浆,并尽快测量,全血储存在4-8℃不应超过2小时,室温下富含血小板血浆可存放3小时,去血小板血浆可存放2小时;4小时内不能测定的血浆应冷藏;不要把血浆置于37℃条件下超过10分钟。
应了解不同存放温度和时间对各种凝血因子活性检测的影响。
4.材料4.1.试剂的选择一方面要根据所用检测仪器,例如:光电检测法的凝血仪不宜用透光度差的试剂;另一方面要根据实验试剂对疾病的敏感性,例如APTT试剂中所用活化剂不同(可用白陶土、硅藻土和鞣花酸),该试剂对肝素、凝血因子Ⅷ和因子Ⅸ缺乏及狼疮样抗凝物敏感性不同,所以需根据检测项目来选择不同活化剂。
(例如常用的APTT试剂的活化剂,以白陶土对凝血因子敏感,硅土对因子及肝素均敏感,鞣花酸对狼疮样抗凝物敏感性较强.PT试剂的选择也一样,例如对口服抗凝药物(华法令)检测应选择ISI与1.0接近的PT试剂。
)血栓与止血检验应尽可能选用仪器生产厂家推荐的配套试剂,并选择使用与仪器原理相匹配的试剂。
血凝项目标准操作规程1.一般注意事项1.1样品采集●静脉抽血;●穿刺要一针见血,避免淤血,气泡,溶血和组织液污染;●如果使用真空采集管,以第二或第三管样品为佳;如果从导管取样,则需用生理盐水冲洗管道,前面5ml血不能使用;●采血后立即与抗凝剂充分混合,尽快送往实验室;●采血量必须准确,如果少于计划量的90%,则不能使用;●不能在静脉穿刺部位或附近部位采样。
1.2样品处理●使用3.8%或3.2%(W/V)枸橼酸钠溶液作为抗凝剂;●血样与抗凝剂的比例为9:1,如果血球压积﹤20%或﹥55%,则需调整这个比例,方法是:0.00815X血液毫升数X(100-压积)=抗凝剂毫升数;●血浆分离(如果不能立即测试,应尽快分离血浆);——采样后60分钟内进行;——离心速度为1000g/10分钟●盛血浆容器应加塞,防止PH改变;●血浆应保存在2-8℃;●血浆存放时间不能太久;●低温保存的样品,要在37℃迅速解冻,减低凝血因子的消耗,并立即测试。
●与样品接触的所有器材(注射剂,样品管,检测杯等)必须采用塑料袋或硅化玻璃材质。
●全部器材均不得含去污剂或清洗液。
1.3影响测定结果的几种因素●抗凝剂:草酸钠、EDTA、肝素不适于作抗凝剂;●黄疸,脂血,重度溶血和冰冻血浆影响测定结果不准;●使用纤溶药物,如双香豆素,链激酶,尿酶等可使凝固时间延长;●超过治疗试剂量的肝素使凝固时间延长;●FDP增加使凝固时间延长;●某些药物,如口服避孕药,雌激素,天门冬酰胺酶,钠络酮等影响测试结果;●样本采集和处理不当,都会使凝固时间缩短或延长;●妊娠和急性炎症会影响某些测试结果。
1.4干粉试剂及血浆溶解●保证干粉完全溶解;●溶解时,轻轻转动容器,避免剧烈震荡;●确认溶剂种类,一般溶解液包括:蒸馏水/生理盐水/缓冲液/厂家特定溶解液,按说明书选择;复溶后,室温放置5-10分钟后方可使用二.具体项目操作注意事项1.PT凝血酶原时间I. 概述凝血酶原时间(Prothrombin Time)测定用来作为外科手术前对某一凝血因子的评价,以及用于监视抗凝治疗,当进行凝血酶原时间测试时,对于正常结果需有2、3级所有因子。
凝血试验的质量控制流程凝血试验在临床起着非常关键的作用,特别是血栓与止血检测的特性,因此规范凝血项目检测过程,为临床提供及时,可靠,准确的检验结果是至关重要的。
具体的质量控制流程如下:试剂凝血活酶含钙试剂(ThromborelS)、激活剂、氯化钙溶液、凝血酶试剂D-DimerPlus试剂盒、缓冲液、乏因子血浆、SysmexClean I清洁控血浆(Control)、蒸馏水、其他消耗品二、方法仪器法:全自动血凝仪,严格按作业指导书进行操作。
三、标本的采集、制备、保存等注意事项1.采血时,首先应该确认病人姓名,并且将姓名和编号写在真空采血管的标签处。
2.尽可能保证每次采血都在同样的条件下进行,即病人处于休息状态,并且在早前采血。
3.凝血实验标本最好不与其它实验一起采集,否则由于标本的分配、分装等而液停留在针管的时间延长。
4.取血时,病人应松弛,环境温暖,防止静脉痉挛,止血带的压力应尽可能小血速度平稳顺利,防止产生气泡。
5.用定量为2毫升的一次性枸橼酸钠(109mmol/L)真空采血管采血至指定刻度,取血完毕立即轻轻颠倒混匀,不要剧烈震荡,并避免产生气泡。
6.及时离心,3000转/分离心标本10分钟,以除去血小板。
7.务必于采血后2小时内测定完毕,如不能完成试验,冷冻贮存少量血浆(0.5—1ml)(最好在-70℃,或者当贮存时间较短时,可以置于-20℃条件下),在实验前将血浆于37℃下快速融化。
血浆用塑料试管存放并用塑料吸管移取标本。
四、质量控制(一)室内质控1制品平行进行测定室内质控靶值及标准差设定1.1靶值设定:当要更换新批号的控制品时,应在“旧”批号控制品结束前,将新批号控制品与旧批号控,20d内检测完20或更多独立批获得20次控制测定结果,剔除超过3SD的数据进行统计,计算出平均数作为值。
1.2标准差设定:根据20或更多独立批获得的至少20次质控测定结果出标准差,并作为暂定标准差。
以此暂定标准差作为下1个月室内质控图的标准差进行室内质控;1个月结束后,将该月的在控结果与前20次质控测定结果汇集在一起,计算累积标准差(第1个月)以此累积的标准差作为下一个月质控图的标准差。
凝血分析仪检测流程如下:
1.将全自动凝血分析仪放置于平稳的工作台上,并确保连接稳定
的电源。
2.使用无菌注射器采集待测血液样本,并将其转移到凝血分析仪
的样本槽中。
3.通过仪器的触摸屏或按键界面,选择所需的检测参数,如凝血
酶时间、活化部分凝血活酶时间等。
4.在触摸屏上输入样本编号或扫描条码,确保准确的样本识别。
5.点击“开始”按钮,全自动凝血分析仪将运行与所设定的参数相
符的检测过程。
6.仪器将自动分析样本的凝血情况,并生成相应的检测报告,包
括结果数值及参考范围。
7.在每次使用完毕后,及时清洗样本槽及相关零件,保证仪器的
正常运行和准确性。
8.检测完成后,及时关闭仪器电源,并进行必要的后续数据处理
和存档。
凝血检查操作方法
凝血检查是一种常用的临床检查方法,用于评估人体的凝血功能。
下面是凝血检查的一般操作步骤:
1. 采样:首先选择合适的采样部位,常见的有静脉采血和穿刺采血。
静脉采血时,使用无菌技术消毒采血部位,插入一根无菌注射针,将血液抽取到无菌采血管中。
穿刺采血一般用于小儿或特殊情况,也需使用无菌技术进行操作。
2. 反应管准备:将采集的血液倒入干燥、清洁、无菌的试管中,约占容量的2/3。
3. 凝血触发:加入辅助凝血试剂,一般是凝血酶活化剂(如凝血酶或活化红细胞素C)和钙离子。
这些试剂的作用是激活血液中的凝血因子,引起凝血级联反应。
4. 适当颠倒:轻轻颠倒试管,使血液均匀与试剂混合。
5. 凝血时间观察:注视试管中的血液变化,观察血液开始凝结的时间,即凝血时间,通常以秒数表示。
凝血时间的延长可能与凝血因子的缺乏或功能异常有关。
6. 记录结果:凝血时间的测定结果通常以正常范围进行评估。
根据不同的实验室和标准,正常凝血时间可能有所不同。
需要注意的是,在进行凝血检查前应遵循一定的术前准备和操作规范,以确保结果的准确性。
严格的无菌技术和正确的试剂使用方法对于凝血检查来说非常重要。
同时,在操作过程中需要注意安全,避免对自己或他人的伤害。
凝血试验的质量控制流程一、引言凝血试验是临床常用的一种实验室检查方法,用于评估患者的凝血功能和判断出血或者血栓形成的风险。
为了确保凝血试验结果的准确性和可靠性,质量控制流程是必不可少的。
本文将详细介绍凝血试验的质量控制流程。
二、质量控制目标1. 保证试验结果的准确性和可靠性。
2. 确保试验操作的一致性和稳定性。
3. 及时发现和纠正试验误差,提高实验室的凝血试验质量。
三、质量控制流程1. 试剂准备a. 根据试剂说明书准确配制试剂,确保试剂的纯度和稳定性。
b. 每批试剂使用前进行质控检验,确保试剂批次间的一致性。
2. 设备校准与维护a. 定期对凝血分析仪进行校准和验证,确保仪器的准确性和稳定性。
b. 每天使用前进行质控检验,确认仪器正常工作。
3. 质控样本选择a. 选择稳定的质控品作为质控样本,确保其与患者样本的相似性。
b. 不同水平的质控样本应涵盖正常范围和异常范围。
4. 质控样本测试a. 每次试验前,使用质控样本进行质控测试,确保试验结果的准确性。
b. 按照试验方法和标准操作程序进行质控样本的测试。
5. 数据分析与判读a. 将质控样本的测试结果与预设的质控范围进行比较。
b. 根据质控结果判定试验的准确性和可靠性。
6. 质控结果记录与分析a. 记录每次质控样本的测试结果和试验条件。
b. 定期分析质控结果,发现和纠正试验误差。
7. 异常处理与纠正措施a. 当质控结果超出预设范围时,即将进行异常处理。
b. 根据异常情况采取相应的纠正措施,如重新校准仪器、更换试剂等。
8. 质控文件管理a. 建立完整的质控文件,包括质控样本的测试记录、校准和维护记录等。
b. 定期审核质控文件,确保质控流程的有效性和规范性。
四、质量控制评价指标1. 准确性:通过与参考方法或者参考材料进行比较,评估试验结果的准确性。
2. 精密度:通过重复测定同一样本,评估试验结果的一致性和稳定性。
3. 灵敏度:通过测定不同浓度的质控样本,评估试验结果对样本浓度变化的敏感性。
血凝项目标准操作规程1.一般注意事项1.1样品采集●静脉抽血;●穿刺要一针见血,避免淤血,气泡,溶血和组织液污染;●如果使用真空采集管,以第二或第三管样品为佳;如果从导管取样,则需用生理盐水冲洗管道,前面5ml血不能使用;●采血后立即与抗凝剂充分混合,尽快送往实验室;●采血量必须准确,如果少于计划量的90%,则不能使用;●不能在静脉穿刺部位或附近部位采样。
1.2样品处理●使用3.8%或3.2%(W/V)枸橼酸钠溶液作为抗凝剂;●血样与抗凝剂的比例为9:1,如果血球压积﹤20%或﹥55%,则需调整这个比例,方法是:0.00815X血液毫升数X(100-压积)=抗凝剂毫升数;●血浆分离(如果不能立即测试,应尽快分离血浆);——采样后60分钟内进行;——离心速度为1000g/10分钟●盛血浆容器应加塞,防止PH改变;●血浆应保存在2-8℃;●血浆存放时间不能太久;●低温保存的样品,要在37℃迅速解冻,减低凝血因子的消耗,并立即测试。
●与样品接触的所有器材(注射剂,样品管,检测杯等)必须采用塑料袋或硅化玻璃材质。
●全部器材均不得含去污剂或清洗液。
1.3影响测定结果的几种因素●抗凝剂:草酸钠、EDTA、肝素不适于作抗凝剂;●黄疸,脂血,重度溶血和冰冻血浆影响测定结果不准;●使用纤溶药物,如双香豆素,链激酶,尿酶等可使凝固时间延长;●超过治疗试剂量的肝素使凝固时间延长;●FDP增加使凝固时间延长;●某些药物,如口服避孕药,雌激素,天门冬酰胺酶,钠络酮等影响测试结果;●样本采集和处理不当,都会使凝固时间缩短或延长;●妊娠和急性炎症会影响某些测试结果。
1.4干粉试剂及血浆溶解●保证干粉完全溶解;●溶解时,轻轻转动容器,避免剧烈震荡;●确认溶剂种类,一般溶解液包括:蒸馏水/生理盐水/缓冲液/厂家特定溶解液,按说明书选择;复溶后,室温放置5-10分钟后方可使用二.具体项目操作注意事项1.PT凝血酶原时间I. 概述凝血酶原时间(Prothrombin Time)测定用来作为外科手术前对某一凝血因子的评价,以及用于监视抗凝治疗,当进行凝血酶原时间测试时,对于正常结果需有2、3级所有因子。
检验科凝血检测标准操作规程1.【目的】为保障检验科CA-1500血凝分析仪的安全正常运转,特制作本规程。
2.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP,室负责人监督落实。
2.2 本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。
3.【标本类型及实验前准备】1.标本类型1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2~8℃保存不超过4小时,长时间保存需在冰冻条件下,(-70℃不超过6个月),只能冻融1次,在37℃迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。
抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。
2.患者准备早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
3.容器、添加剂类型3.8%枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。
4.仪器设备1. 仪器名称: Sysmex CA-1500全自动血液凝固分析仪2. 仪器厂家:日本Sysmex公司3. 仪器型号:Sysmex CA-15004. 仪器技术参数:4.1 速度: 最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时4.2 试剂位:36个,具冷藏功能。
4.3 样本位:50个,可自动连续添加。
5. 仪器校准程序:5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂批号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。
5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)5.实验试剂德国Dade Behring Marburg 公司的D-Dimer测定试剂(60人份/套),未开封试剂2~8℃贮存到说明书上有效期,开封试剂2~8℃保存不超过5天。
4.【测定原理】1.凝固法(散射光加百分终点法):将血液凝固过程中的混浊度变化转换成散射光的变化后进行检测。
包括PT、APTT、FIB、TT及血浆凝血因子的测定。
2.发色底物法:激活剂激活相应待测标本中的相应酶原,使其转变为相应的酶,后者使相应的底物发生显色反应,显色的程度与被测物浓度成正相关,通过与标准曲线比较,可测出标本中待测物的相对含量,如ATⅢ的测定。
6.3.2 设置测试项目和病人编号:方法同6.1.26.3.3 加血浆30ul于空比色杯内,置于测试通道或预温位预温2分钟。
血浆凝固主要是酶催化的反应。
PH环境和溶液离子强度在实验过程中要严格控制,反应混合物PH必须处于7.2-7.4之间.每次APTT实验时,活化部分凝血活酶试剂和血浆混合物的孵育时间决定了APTT试验中接触活化的量,所以其混合的时间和技术对检测结果影响很大.9.4 实验前应检查血浆是否有溶血、黄疸、脂血和出现凝块。
红细胞膜含有磷脂,溶血标本具有与血小板第3因子(磷脂)相似的凝血活性,能缩短溶血血浆的APTT值。
9.5 标本中如出现凝块,无论多小的凝块均会影响实验结果。
9.6 APTT、TP需去血小板血浆,一般3000r/min离心10min后分离血浆。
10.临床意义:10.1 PT检测的临床意义10.1.1 PT延长a.外源凝血系统的因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ和纤维蛋白原减低,如先天性某因子缺乏症和低(无)纤维蛋白原血症,但均很少见,获得性的见于DIC、原发性纤溶、维生素K缺乏症、肝脏疾病等。
b.血循环中抗凝物质增加,如肝素或FDP增多等。
10.1.2 PT缩短口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病等。
10.1.3 用于香豆素类等口服抗凝剂的监控,或PT R为1.3—1.5(最大不超过2)为宜。
PT%应控制在40%以上,减低到40%有出血倾向。
a.术前两周或术中口服抗凝药,INR为1.5—3.0;b.原发或继发静脉血栓的预防,INR为2—3;c.活动性静脉血栓、肺梗塞、复发性静脉血栓的预防,INR为2—4;d.动脉血栓栓塞的预防,心脏换瓣术后,INR为3—4.5。
10.2 APTT检测的临床意义10.2.2 对内源凝血途径因子(Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ)缺乏较CT敏感(血小板异常不影响APTT)能检出Ⅷ:C小于25%的轻型血友病。
对凝血酶原、纤维蛋白原缺乏则不够敏感,故APTT延长的最常见疾病为血友病。
此时可进一步做纠正试验,即于患者血浆中加入1/4量的正常新鲜血浆、硫酸钡吸附血浆或正常血清(试剂参见凝血酶原消耗试验的纠正试验),再做APTT,如正常血浆和吸附血浆能纠正延长的结果而血清不能纠正,则为因子Ⅷ缺乏;如吸附血浆不能纠正,其余两者都能纠正,则为因子Ⅸ缺乏;如三者都不能纠正,则为病理性循环抗凝物质。