硅胶层析柱的填装方法

层析柱装填要点和要求
1. 嘿，一定要注意啊，装填层析柱的时候，颗粒大小可不能马虎呀！就像建房子，砖的大小得合适吧。

比如说用硅胶装填，颗粒太大或太小，效果能好吗？
2. 别忘了均匀装填呀！你想想，要是填得乱七八糟的，那不就像走在坑坑洼洼的路上，能顺顺畅畅吗？比如说填的时候东一块西一块的，那怎么行！
3. 要把气泡赶跑啊！气泡在里面就像个捣蛋鬼，会坏事的呀！就好比你吃饭的时候有颗沙子，多难受啊。

比如装的时候不小心混进了气泡，得想办法弄出去呀。

4. 压实也很关键呀！松松垮垮的可不行，这就好像搭积木不压实会倒一样。

比如说随便弄弄，那后续分离还能靠谱吗？
5. 速度不能太快也不能太慢啊！快了容易出问题，慢了又耽误时间。

就像开车，太快危险，太慢也急人。

比如填充的时候没把握好速度，那不就糟糕了。

6. 注意柱子的垂直哦！歪歪扭扭的可不像话，就跟站没站相一样。

比如说没放垂直，那后续操作能顺利吗？
7. 清洗干净也超级重要！脏兮兮的怎么用啊，就像你穿脏衣服出门一样。

比如装填前不认真清洗，那不是给自己找麻烦嘛。

8. 还有啊，多检查几遍呀！不检查怎么能放心呢，就像考试不检查会丢分一样。

比如说填完了就不管了，万一有问题呢！总之啊，装填层析柱这些要点和要求一定得认真对待，这样才能得到好的结果呀！。

层析柱装柱流程层析柱（Column Chromatography）是一种常见的色谱技术，用于分离和纯化化合物混合物。

它利用样品成分在固定相和流动相之间的差异迁移速率来实现分离。

在这篇文章中，我们将介绍层析柱装柱的基本步骤和相关参考内容，帮助读者了解层析柱技术的应用与操作。

1. 准备工作在进行层析柱装柱前，我们需要准备以下材料和设备：- 色谱柱：选择合适的柱径和柱高，以容纳样品和分离剂。

不同的应用需要不同类型的色谱柱，如硅胶柱、石墨化炭柱、反相柱等。

- 流动相：确定合适的流动相溶剂体系，用于样品的迁移和分离。

通常选择非极性溶剂（如石油醚、丙酮、甲醇等）或极性溶剂（如乙酸乙酯、二甲醚等）。

- 固定相：将合适的固定相装填到色谱柱中，用于分离和吸附样品成分。

选择合适的固定相类型，如硅胶、氧化铝、石墨化炭等。

- 样品：准备需要分离和纯化的混合物样品。

- 旋转蒸发仪：用于去除样品中的溶剂。

2. 装填色谱柱- 将色谱柱固定在柱座上，并根据柱径和柱高的大小调整砂轮，使得柱床均匀。

- 用适当的溶剂湿润色谱柱，避免流动相在柱床中出现间隙和假相。

3. 样品预处理- 将样品溶解在适当的溶剂中，以便在层析柱中迁移。

- 如果样品中有大量杂质，可以使用旋转蒸发仪去除溶剂。

4. 层析柱操作- 使用毛细管或注射器将样品注入色谱柱顶部。

确保样品不超过柱床高度。

- 将流动相逐步加入色谱柱，使其通过柱床。

可以根据实验需要调整流速和溶剂比例。

- 样品成分会根据其在固定相和流动相之间的亲疏水性质而分离。

在柱床中具有更大亲和力的成分会被滞留，而亲和力较小的成分会更快地通过柱床。

- 根据成分的迁移速度和柱床的色谱裂分能力，监测和采集分离后的组分。

常见的监测方法包括紫外可见光谱、红外光谱、荧光检测等。

5. 分离和纯化产物- 根据监测结果，确定目标化合物的峰位置和纯度。

- 通过收集色谱峰和进一步的实验操作，如再层析、结晶、后处理等，将目标化合物从样品中分离和纯化。

硅胶柱层析硅胶柱层析原理硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。

硅胶柱层析流动相极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统；极性较大的用甲醇：氯仿系统；极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸硅胶柱层析惯用方法1.称量。

200-300 目硅胶，称30-70 倍于上样量；如果极难分，也可以用100 倍量的硅胶H。

干硅胶的视密度在0.4 左右，所以要称40g 硅胶，用烧杯量100ml 也可以。

2.搅成匀浆。

加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。

如果洗脱剂是石油醚/ 乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。

如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/ 丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。

氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1% 的醇。

如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。

3.装柱。

将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3 体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。

随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。

4.压实。

沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。

柱床约被压缩至9/10 体积。

无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

5.上样。

干法湿法都可以。

海沙是没必要的。

上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。

然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。

6.过柱和收集。

柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。

太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。

收集的例子：10mg 上样量，1g 硅胶H，0.5ml 收一馏分；1- 2g 上样量，50g 硅胶（200-300 目），20-50ml 收一馏分。

实验室硅胶柱操作规范1、操作步骤1.1 硅胶准备柱硅胶一般选用200-300目，拌样硅胶一般选用100-140目。

拌样硅胶用量为样品量的1-8倍，柱硅胶用量为样品量的8-100倍，对于极难分离的样品，还可以使用硅胶H作为柱硅胶。

1.2 实验仪器准备一支玻璃色谱柱，一个铁架台，烧杯，锥形瓶，径口直径较大的玻璃漏斗，一支玻璃棒，硅胶管，螺旋夹，夹子等。

1.3 装柱1.3.1 将硅胶管与色谱柱下端相连(若色谱柱带活塞则不用)，往硅胶管上加上螺旋夹，取与色谱柱口径相应的棉花，厚薄适中(太厚流速慢，太薄易漏硅胶)，置入色谱柱底部，将色谱柱固定于铁架台上。

1.3.2 吸附剂的加入①干法：将吸附剂一次加入色谱管，振动管壁使其均匀下沉，然后沿管壁缓缓加入开始层析时使用的流动相；或将色谱管下端出口加活塞，加入适量的流动相，旋开活塞使流动相缓缓滴出，然后自管顶缓缓加入吸附剂，使其均匀地润湿下沉，在管内形成松紧适度的吸附层。

操作过程中应保持有充分的流动相留在吸附层的上面。

②湿法：将吸附剂与流动相混合，搅拌以除去空气泡，徐徐倾入色谱管中，然后再加入流动相，将附着于管壁的吸附剂洗下，使色谱柱表面平整。

装完柱后需等硅胶沉降压实后再上样，通常需要半天到一天时间。

1.3.3试样的加入①湿法：将试样溶于层析时使用的流动相中，过滤，待填装吸附剂所用流动相从色谱柱自然流下，液面将与柱表面相平时，再沿色谱管壁缓缓加入滤液。

注意勿使吸附剂翻起。

②干法：选择适当溶剂使样品刚好完全溶解，过滤后取100-140目硅胶适量，将样品溶液缓慢加入到拌样硅胶中，边加入边搅拌，再使溶剂挥发去尽后使呈松散状（一般需放入通风橱中挥干过夜）；将混有试样的吸附剂加在已制备好的色谱柱上面。

如试样在常用溶剂中不溶解，可将试样与适量的吸附剂在乳钵中研磨混匀后加入。

上完样后可在拌样硅胶上面加入少量100-140目的保护硅胶，在保护硅胶之上还可以加入脱脂棉以防止加流动相时破坏硅胶保护层。

层析柱（色谱柱）填料介质的装载及洗脱操作规程工业制备层析柱（色谱柱）的填料装载充填和洗脱操作的规范直接影响色谱分离纯化工艺过程的效率，迈思通公司经过多年的实践经验和该行业专家的指导，编写了关于《层析柱（色谱柱）吸附介质的充填及洗脱规程》的方法，供广大用户和科研者参考。

一、柱头安装是否合适及是否严密的检查1、检查下柱头是否按图纸要求安装?（要求按图纸要求安装）2、检查下柱头内，是否安装了防止吸附剂（例如硅胶）漏出的滤布（或滤网）。

3、所用滤布（滤网）的材质要求能耐所用溶剂的腐蚀，而且孔径很小，一般要求使用500目以上孔径大小的滤布（网）。

4、下柱头安好，紧固后，从柱上端（开口）加入所用洗脱剂中极性较小的一种溶剂（例如已烷、石油醚、甲苯等），使溶剂液面比下柱头上部分离出20-30厘米，仔细观察下柱头是否漏溶剂。

如果漏，则必须坚固（或重装），直至不漏为止。

5、检查确实不漏后，放出柱内溶剂，准备装吸附剂（例如硅胶等）。

二、充填吸附剂以充填（或称装填）硅胶为例，作如下说明：1、干法装柱①、取吸附剂（例如硅胶）记下硅胶的量，（等装完柱后，检查剩余硅胶量，就可以知道装入柱中的硅胶量了）。

②、工作人员戴上口罩，准备好木槌，有人从柱上端倒入一定时的硅胶，柱下边有人用木槌敲击柱外壁，振实硅胶；一边加硅胶，一边敲击柱；最好硅胶加到什么高度，就在此高度敲击；且向上下移动敲击。

如此，直至硅胶装满时为止；再上下移动敲击一阵子；至硅胶上平面不再下沉，而且硅胶面很实时为止。

③、如果体系中没有设预柱，层析柱中上端硅胶不把装满，留出空间待“上样”用。

④、如果有预柱的体系，层析柱应装满硅胶。

⑤、干法装柱，粉尘大，且敲击声大，柱外表易变成不光亮，但不耗溶剂。

2、湿法装柱①、同上，准备一定时的硅胶，且记录下硅胶量。

②、准备一只30-50升的耐溶剂腐蚀的塑料桶，例入极性小的且配洗脱剂时需用的溶剂（例如已烷，石油醚、甲苯等），再例入硅胶，搅拌混合。

一、装柱装柱子（添硅胶）时，常用得有两种方法：即湿法装柱与干法装柱，二者各有优劣。

不论干法还就是湿法，硅胶（称为固定相更为广义）得上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）得高度一般为15cm左右（长度没有绝对之说，根据自身情况而定，制备得大柱可以长达一米），太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。

湿法装柱就是先把硅胶用适当得溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压（土方法可以用养鱼得氧气泵加压或就是用氮气，当然不加压也可以）用淋洗剂"走柱子"，本法最大得优点就是一般柱子装得比较结实，没有气泡。

（我一般都用湿法装柱）干法装柱则就是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧（湿法也要敲得，效果好点），至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装得很结实（一般柱子不敢用油泵抽，怕把柱子抽裂了）。

接着就是用淋洗剂"走柱子"，一般淋洗剂就是采用TLC分析得到得展开剂得比例再稀释一倍后得溶剂。

通常上面加压，下面再用油泵抽，这样可以加快速度。

干法装柱较方便，但最大得缺陷在于"走柱子"时，由于溶剂与硅胶之间得吸附放热（可以用手摸柱子明显感觉到）（梯度洗脱时，湿法装柱也会出现该情况，比较不好处理，可以缓慢改变溶剂，且置于通风处），容易产生气泡，这一点在使用低沸点得淋洗剂时如乙醚（用乙醚最最明显），二氯甲烷更为明显。

虽然产生得气泡在加压得情况下不易察觉，但就是，一旦撤去压力，如在上样、加溶剂等操作得时候，气泡就会释放出来，严重时，整个柱子变花，样品不可能平整地通过，当然也就谈不上分离了。

解决得办法就是：第一、硅胶一定要压结实；第二、一定要用较多得溶剂"走柱子"，一定要到柱子得下端不再发烫，恢复到室温后再撤去压力。

也有介绍在硅胶得最上层填上一小层石英砂(我一般垫张滤纸，撒上石英砂，再放些棉花)，防止添加溶剂得时候，使得样品层不再整齐。

硅胶柱层析技术中样品制备与填充优化策略硅胶柱层析技术是一种常用的分离纯化方法，广泛应用于化学、生物、制药等领域。

在进行硅胶柱层析前，样品制备和填充优化策略是非常重要的环节。

本文将就这两个方面进行讨论。

一、样品制备样品制备在硅胶柱层析中起着决定性的作用。

合理的样品制备可以提高分离效果，加快分离速度，获得更高的纯度和产量。

以下是一些常用的样品制备策略：1.溶液浓缩：如果样品的溶液浓度过低，可能导致在填充硅胶柱时样品无法完全被吸附。

因此，将样品浓缩到一定程度，使溶液浓度适中，可提高吸附效率。

2.去除杂质：样品中的杂质可能干扰目标化合物的吸附和洗脱。

因此，在进行硅胶柱层析前，需要通过适当的手段去除样品中的杂质。

例如，可以通过过滤、沉淀、萃取等方法去除悬浮颗粒、溶解物等杂质。

3.酸碱调整：对于酸性或碱性化合物，可以通过调整样品的酸碱性来改变其离子态，从而影响化合物在硅胶柱上的吸附特性。

这种方法可以增加分离效果，提高纯度。

二、填充优化策略填充是硅胶柱层析中另一个重要的环节。

一个均匀、紧密且稳定的填充能够保证柱层析的分离效率和重复性。

以下是一些常用的填充优化策略：1.填充剂的选择：硅胶柱层析的填充剂主要有多孔硅胶和非极性硅胶。

在选择填充剂时，需要根据目标化合物的性质来确定合适的填充剂。

例如，对于极性化合物，可以选择非极性硅胶填充剂。

2.填充工艺控制：填充柱时需要严格控制填充速度、填充压力和填充剂的均匀性。

填充速度过快或过慢都会导致填充不均匀，影响分离效果。

填充剂的均匀性可以通过振实和压实等方法进行调整。

3.填充剂保护：为了保护填充剂，避免在填充过程中因外界因素导致填充剂破碎或磨损，可以在柱床的顶部和底部分别放置一层玻璃纤维棉或亚麻绒。

总结：在硅胶柱层析技术中，样品制备和填充优化是至关重要的。

合理的样品制备可以提高分离效果和产量，填充优化可以保证分离的重复性和稳定性。

同时，在进行硅胶柱层析时还应注意选择合适的液相色谱柱、操作条件的设定等因素。

一、装柱装柱子(添硅胶）时，常用的有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。

不论干法还是湿法，硅胶（称为固定相更为广义)的上表面一定要平整,并且硅胶（固定相)的高度一般为15cm左右(长度没有绝对之说，根据自身情况而定,制备的大柱可以长达一米）,太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。

湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压（土方法可以用养鱼的氧气泵加压或是用氮气,当然不加压也可以）用淋洗剂”走柱子"，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。

（我一般都用湿法装柱)干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧(湿法也要敲的，效果好点），至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装的很结实（一般柱子不敢用油泵抽，怕把柱子抽裂了）。

接着是用淋洗剂"走柱子”，一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂.通常上面加压,下面再用油泵抽，这样可以加快速度。

干法装柱较方便，但最大的缺陷在于”走柱子”时，由于溶剂和硅胶之间的吸附放热（可以用手摸柱子明显感觉到）（梯度洗脱时，湿法装柱也会出现该情况,比较不好处理,可以缓慢改变溶剂，且置于通风处)，容易产生气泡，这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚（用乙醚最最明显)，二氯甲烷更为明显.虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉,但是，一旦撤去压力，如在上样、加溶剂等操作的时候,气泡就会释放出来，严重时，整个柱子变花，样品不可能平整地通过，当然也就谈不上分离了。

解决的办法是：第一、硅胶一定要压结实；第二、一定要用较多的溶剂”走柱子"，一定要到柱子的下端不再发烫，恢复到室温后再撤去压力。

也有介绍在硅胶的最上层填上一小层石英砂（我一般垫张滤纸,撒上石英砂，再放些棉花），防止添加溶剂的时候，使得样品层不再整齐。

但我的感觉是如果小心上样，添加溶剂，则没有这个必要。

凝胶层析柱装填方法
宝子，今天来给你唠唠凝胶层析柱的装填方法呀。

凝胶层析柱装填可是个有点小讲究的事儿呢。

咱得先准备好材料，凝胶那肯定是必不可少的啦。

这凝胶就像小魔法粒子一样，在层析柱里发挥大作用。

那开始装填之前，要把层析柱好好清洗一下哦。

就像给它洗个澡，让它干干净净地迎接凝胶的到来。

把柱子垂直固定好，这可重要啦，如果柱子歪歪扭扭的，那后面的实验可就不好搞喽。

接着呢，把适量的凝胶悬浮在合适的溶剂里。

这个溶剂就像是凝胶的小泳池，让凝胶舒舒服服地待在里面。

然后慢慢把凝胶悬液沿着柱子的壁倒入柱子里。

可不能倒得太猛啦，不然凝胶在柱子里就会分布不均匀，就像小朋友排队排得乱七八糟一样可不行。

在倒的过程中呢，可以用个小玻璃棒啥的，沿着柱子壁轻轻搅动一下，这样能让凝胶更好地沉降。

不过要小心哦，别太用力把凝胶都搅坏啦。

凝胶在柱子里慢慢沉降的时候，就像小雪花慢慢飘落堆积起来一样，很是美妙呢。

要是发现凝胶沉降得不太均匀，有一些地方高一些地方低，别慌。

可以小心地再加点凝胶悬液到低的地方，让它慢慢补平。

装填完凝胶之后，可不能马上就用哦。

要让柱子静置一会儿，就像让刚做好的蛋糕放一会儿定型一样。

这样凝胶在柱子里就会更加稳定，在后面进行层析实验的时候就能更好地发挥作用啦。

宝子，凝胶层析柱装填虽然有点小麻烦，但只要按照这些小窍门来做，就不会有太大问题啦。

希望你在做相关实验或者操作的时候顺顺利利的哦。

。

大小型层析柱的装填实践介绍层析柱是一种常用的分离技术仪器，广泛应用于生化、药学、环境分析等领域。

其原理是利用样品在固定相和移动相间的相互作用下，通过各自不同的迁移速率，从而实现混合物各组分的分离。

一般情况下，层析柱包括大型和小型两种。

下面将讨论这两种层析柱的装填实践介绍。

首先是大型层析柱的装填实践。

大型层析柱一般适用于样品量较大的情况，例如工业生产中的在线层析分离。

其装填实践主要包括以下几个步骤。

第一步是选择合适的填料。

选择填料是大型层析柱装填实践中的关键步骤。

一般情况下，需要根据样品的性质和分离要求来选择合适的填料。

常见的填料有硅胶、Sephadex、糖果胶等。

填料的选择应该考虑到颗粒大小、比表面积、孔隙结构等因素。

第二步是准备填料。

填料在装填前一般需要经过一系列处理，以提高其分离效果。

常见的处理方法包括洗涤、干燥和激活等。

洗涤可以去除填料表面的杂质，干燥可以除去填料中的水分，而激活可以增加填料的活性。

第三步是装填填料。

在装填填料之前，需要将填料与层析柱的内壁润湿。

一般使用的方法是将填料悬浮在适量的移动相中，然后缓慢注入到层析柱中。

装填填料时应注意层析柱的填料层高度和均匀度，以保证分离效果。

第四步是压实填料。

压实填料是装填实践中的重要步骤，可以提高填料层的均一性和稳定性。

压实填料时，可以利用酒精、氮气或专用的装填仪器进行。

压实填料时应注意避免填料的堵塞和破碎。

第五步是检查填料层的质量。

填料层质量的检查可以通过观察填料层的均匀性、密实度和干燥程度来进行。

如果发现填料层存在问题，可以进行调整或更换。

以上是大型层析柱的装填实践介绍，下面我们将介绍小型层析柱的装填实践。

小型层析柱一般适用于实验室规模的研究或分析。

其装填实践与大型层析柱的装填实践相似，但由于样品量较小，操作上相对简单。

其装填实践主要包括以下几个步骤。

第一步是选择合适的填料。

填料的选择原则与大型层析柱相同，根据样品的性质和分离要求来选择合适的填料。

硅胶（Silicon dioxide）别名：硅橡胶是一种高活性吸附材料，属非晶态物质，其化学分子式为mSiO2·nH2O。

不溶于水和任何溶剂，无毒无味，化学性质稳定，除强碱、氢氟酸外不与任何物质发生反应。

各种型号的硅胶因其制造方法不同而形成不同的微孔结构。

硅胶的化学组份和物理结构，决定了它具有许多其他同类材料难以取代得特点：吸附性能高、热稳定性好、化学性质稳定、有较高的机械强度等。

硅胶根据其孔径的大小分为：大孔硅胶、粗孔硅胶、B型硅胶、细孔硅胶。

硅胶层析性状：该产品为白色均匀颗粒，主要成分为二氧化硅，由优质硅胶为原料加工制成。

其主要特点是能通过对混合物质中的不同成分吸附保留时间的差异，达到分离提纯的目的。

依其纯度又分为工业级粗孔柱层析硅胶、试剂级柱层析硅胶。

用途：主要用于石油产品的精制，脱除芳烃物质或用于中草药有效成分的分离提纯，高纯度物质的制备等。

规格：国际惯例：63-212μm（70-230目）；38-63μm（230-400目）国内常规：150-250μm （60-100目）；75-150μm （100-200目）；45-75μm （200-300目）（也可按用户需求加工成其他规格）薄层层析是将吸附剂或者支持剂（有时加入固化剂）均匀地铺在一块玻璃上，形成薄层。

把欲分离的样品点在薄层上，然后用适宜的溶剂展开，使混合物得以分离的方法。

由于层析在薄层上进行故而得名。

薄层层析是一种微量、快速的层析方法。

它不仅可以用于纯物质的鉴定，也可用于混合物的分离、提纯及含量的测定。

还可以通过薄层层析来摸索和确定柱层析时的洗脱条件。

根据分离的原理不同，薄层层析可以分为两类：用吸附剂铺成的薄层所进行的层析为吸附薄层层析；用纤维素粉、硅胶、硅藻土为支持剂铺成的薄层，属于分配薄层层析。

薄层层析中以吸附薄层为多用，吸附薄层中常用的吸附剂为氧化铝和硅胶。

吸附TLC→固定相为吸附剂→氧化铝、硅胶。

（较多用）TLC→｛分配T LC→固定相为液态（水）→固定相吸苷在支持剂上。

湿法装柱步骤及注意事项1、除特殊规定要求用干法装柱外，一般选用湿法装柱。

2、湿法装柱的步骤：第一，塞棉花。

取一小块棉花铺平，弄成和层析柱直径一样的圆形，放入层析柱底部，用一根较长的玻璃棒压着棉花，关闭层析柱活塞，加一点洗脱液浸润棉花，赶走棉花中的空气。

第二，拌硅胶。

将硅胶倒入烧杯中，加入适量洗脱液，用玻棒搅拌均匀，多搅一会，确保硅胶全部溶解，赶走硅胶里的气泡。

硅胶用量根据层析柱的大小确定。

拌硅胶时洗脱液可以加多些，可以避免产生气泡。

第三，倒硅胶。

将上述拌好的硅胶沿着玻璃棒倒入层析柱。

倒完后缓慢抽出玻璃棒。

第四，敲柱子。

用橡皮管敲击柱子，赶走层析柱硅胶中的气泡，然后打开活塞，流出洗脱液，让硅胶自然沉降，等到柱子快干时关闭活塞，就可以加样了。

通常如果拌硅胶时加的洗脱液较多，是不会有气泡的。

注意事项：1、棉花不能太大和太厚，置入前要展开至适宜的均匀厚度2、倒入固相（硅胶）时，要缓慢，速度过快会使棉花浮起，且易产生气泡3、打开活塞不要过大，开至流出的液体呈滴状即可4、柱子内部固相最上端一定要保持有洗脱液5、加样前，最好关闭活塞且保持固相最上端有5mm左右洗脱液在缓慢加样6、如果固相为大孔树脂（比如黄芪前处理）时，树脂则需要用95%乙醇浸泡7-10天，将大孔树脂活化装柱看起来很麻烦，其实很简单，只要在操作的时候注意细节就没问题了哈。

以上装柱的步骤是在网上荡的资料，和我在药检所学习的时候，跟老师装柱的步骤方法一样，注意事项也是老师边做边总结出来的，现在终于有机会卖了哈~！@如果你要做桔梗含测，那要注意用的是蒸发光散射检测器哦~！@计算的方法则是用外标二点对数方程法，我将我们这边做的巴戟天含测的检测和计算方法也发给你，帮我看哈子对不对啊~！@巴戟天的含量测定（高校液相色谱法）-----2013年5月15日实际操作培训色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(3：97)为流动相；蒸发光散射检测器检测。

柱层层析硅胶cas柱层层析硅胶（Column Chromatography Silica Gel，简称CC硅胶）是一种用于化学分离和纯化的常见技术。

它是在硅酸盐基础上制备的，具有多孔结构和大的比表面积，因此在分离纯化过程中具有良好的吸附能力和选择性。

本文将介绍柱层层析硅胶的原理、操作步骤以及它在化学实验中的应用。

柱层层析硅胶的原理是基于物质在固定相（硅胶）和流动相（溶剂）之间的相互作用力差异实现分离。

固定相是填充在柱中的硅胶，它的粒径和孔径大小可以根据需要选择。

流动相是溶剂，可以通过改变溶剂的组成和性质来调节吸附和洗脱的效果。

在柱层层析过程中，样品溶液首先被加载到柱上，然后通过溶剂的流动，溶液中的不同组分会以不同的速度在固定相上移动，从而实现分离。

柱层层析硅胶的操作步骤如下：1. 准备柱子：选择合适大小的柱子，装入硅胶并均匀填充。

2. 预处理硅胶：用适当的溶剂进行洗涤，去除杂质和水分。

3. 样品加载：将待分离的混合物溶液加载到柱子上，可以使用注射器或滴管缓慢加入。

4. 溶剂流动：选择适当的流动相，缓慢地通过柱子，使样品分离。

5. 分馏收集：通过收集不同时间或体积的洗脱液，分别收集不同组分的纯化产物。

柱层层析硅胶在化学实验中有着广泛的应用。

例如，在有机合成中，它可以用于分离、纯化和提取目标化合物。

柱层层析硅胶的分离效果受到多种因素的影响，如硅胶的粒径和孔径大小、溶剂的选择和流速、样品的性质等。

根据需要，可以调整这些因素以达到更好的分离效果。

柱层层析硅胶还可以用于生物化学实验中的蛋白质纯化和寡核苷酸分离。

在这些应用中，硅胶通常需要经过修饰以增加特异性吸附。

此外，柱层层析硅胶还被广泛应用于药物分析、环境监测和食品检测等领域。

总结起来，柱层层析硅胶是一种常用的化学分离和纯化技术。

它通过固定相（硅胶）和流动相（溶剂）之间的相互作用力差异实现样品的分离。

在化学实验中，柱层层析硅胶被广泛应用于有机合成、生物化学和药物分析等领域。