化学反应鉴别法(皂苷类成分案例分析).
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1 三萜皂苷三萜皂苷主要分布在植物界的石竹科、桔梗科、五加科、豆科中。
桔梗、南沙参、党参、人参、三七、瞿麦、甘草、远志、紫菀、地榆等许多中草药都含有此类皂苷。
不同的中草药其三萜皂苷的皂苷元或活性成分不同,比如人参皂苷的皂苷元为人参皂苷Rg1、Re 和Rb[9];女贞子中三萜皂苷的皂苷元为齐墩果酸[10]。
三萜皂苷的定量测定方法主要有比色法、薄层色谱法、高效液相色谱-紫外检测器法、高效液相色谱-二极管阵列检测器法。
1.1 比色法比色法的原理是:三萜皂苷分子中缺少发色团和助色基,需要某种试剂与其反应形成发色基团后显色,在某个波长下测定其吸光度,再根据吸光度与浓度的关系(标准曲线),计算出样品的浓度,从而计算出样品中总皂苷的含量。
常见的显色剂有香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸体系或浓硫酸。
比如徐睿庸等人利用分光光度法测定青钱柳叶中总三萜皂苷的含量,所采用的显色剂就是0.3mL的50g/L 香草醛一冰醋酸与0.6mL 的高氯酸。
在显色剂与样品中的三萜皂苷反应后,80℃水浴10min,在波长550nm 处测定青钱柳叶中总三萜皂苷的吸光度,从而计算出含量。
其化学反应原理是:强酸使羟基脱水而使其双键数目增加,又经双键位移后与显色剂缩合等反应形成共轭结构,最后在酸作用下形成碳正离子盐而显色[11]。
而杨文志等人则认为显色机理是因为皂苷元中C3 和C12上的羟基与香草醛上的醛基发生反应,形成缩醛,成为新的共轭体系而显色[12]。
孔燕君则采用浓硫酸作为显色剂,分别测定了人参、三七和男壮胶囊中三萜皂苷的含量。
他认为人参皂苷分子上的糖基能被浓硫酸氧化脱水成糠醛衍生物,在60℃水浴2h 后在322nm 处有紫外吸收,测其吸光度,进而计算出人参、三七和男壮胶囊中的三萜皂苷含量[13] [14]。
1.2 薄层扫描法傅强等人依据五加科植物人参三萜皂苷中人参皂苷Rg1 在薄层板上分离效果较好和荧光分光光度法高灵敏度的特点,建立了薄层色谱-荧光分光光度法测定人参中人参皂苷Rg1 薄层色谱法。
实验五、柴胡中皂苷类成分的提取、分离和鉴定一、实验目的1.掌握柴胡中总皂苷的提取分离方法及操作2.熟悉三萜皂苷类化合物的检识及鉴定方法二、实验原理柴胡是伞形科柴胡属植物柴胡干燥的根,是我国传统中药中重要和常用的药材。
我国药典规定北柴胡(Bupleurum chinenseDC.)和狭叶柴胡(Bupleurumscorzonerifolium Willd.)为正品供药用。
我国柴胡资源极其丰富,主要分布于我国的陕西、内蒙古、甘肃、青海、宁夏、河北等地。
柴胡是柴胡滴丸,小柴胡汤等中药产品的主要成分。
研究发现柴胡皂苷具有解表和里疏肝解郁、升举阳气之功效。
一、柴胡化学成分柴胡的化学成分比较复杂,除含皂苷、挥发油,尚含有黄酮、多元醇、植物甾醇、香豆素、脂肪酸成分1等有效成分,尤其以柴胡皂苷为主。
迄今为止,从柴胡根、种子的不同部位中已分离到50多种单体皂苷成分。
这些皂苷成分有a、c、d、b1、b2、b3、b4等,其中以皂苷a、d的生物活性最为显著。
(柴胡中主要含有柴胡皂苷a、c、d)1.皂苷a(C42H68O13)物理性质:本品为结晶粉末,易溶于水,稀醇,特别是热水和热醇,在丁醇和戊醇中溶解性大,难溶或不溶于苯,乙醚,氯仿等溶剂。
化学反应:Molish 反应阳性,Lieberman-Burchard 反应产生紫色。
2.皂苷c(C48H78O17 )物理性质:易溶于水,稀醇,特别是热水和热醇,在丁醇和戊醇中溶解性大,难溶或不溶于苯,乙醚,氯仿等溶剂。
化学性质:Molish 反应阳性,Lieberman-Burchard 反应产生紫色。
3.皂苷d(C42H68O13 )物理性质:白色粉末,易溶于热水、稀醇、热甲醇和热乙醇。
化学性质:Molish 反应阳性,Lieberman-Burchard 反应产生紫色三萜皂苷类,由于糖分子的引入,使极性增大,可溶于水,易溶于热水、稀醇、热甲醇和热乙醇中,几乎不溶于或难溶于丙酮、乙醚以及石油醚等极性小的有机溶剂。